Química Biológica Patológica

HIPERLIPOPROTEINEMIA TIPO III

2011

Tema:13 (Bolilla 8)

Dra. Silvia Varas
qbpatologica.unsl@gmail.com
 Clasificación General
 Déficit en LPL (Tipo I)
VIA EXOGENA
 Déficit Apo CII (Tipo Ib)

 Hipertrigliceridemias endógena
Hiper  Hiperlipidemia familiar combinada
 Hipercolesterolemia familiar
VIA ENDOGENA  Apo B100 defectuosa familiar
 Hipercolesterolemia Poligénica
Hipo  Abeta Lipoproteinemia
 Hipobetalipoproteinemia familiar
VIA
 Déficit Lipasa Hepática
EXOGENA y ENDOGENA
 DisbetaLipoproteinemia (Tipo III,Beta ancha)

 Hipo-α-lipoproteinemia familiar
Deficiencia  Deficiencia LCAT (ojo de pez)
HDL
 Enfermedad de Tangier
VIA REVERSA
Alteraciones  Deficiencia Apo AI
Familiares del  Hiper-α-lipoproteinemia
Metabolismo
HDL  Deficiencia CETP
Historia:
 1950. Fue descrito por primera vez por Gofman y col. y lo llamo
originalmente xantoma tuberosum, basado en excesivo numero
de xantomas en tendones extensores y en la superficie de las
manos.
 1967. Fredrickson y col. la establecen como una
hiperlipoproteinemia tipo III. Basó su clasificación de las distintas
dislipoproteinemias usando ultracentrifugación y electroforesis en
papel. Se la denomina también como enfermedad de la banda
ancha, enfermedad de la remoción de remanentes y
disbetalipoproteinemia
 1973. Havel y Kane demuestran en plasma de pacientes con
esta enfermedad, un incremento en los niveles plasmáticos de
Apo E o apoproteína rica en arginina. Apo E es un componente de
VLDL, QM y ciertas subclases de HDL. Apo E fue descubierto
como el mayor ligando del R de LDL y es la apoproteína que
media la captación de los QM y VLDL remanentes. La apo E
mutante no se une normalmente a los receptores de
lipoproteínas, generando la acumulación de β-VLDL.
 1977. Utermann y col. identifican la Apo E2/2.
PATOGENESIS

 No hay depuración
de LPR: defecto en
el ligando

Actividad de Binding del receptor de Apo E-2 (

), Apo E-3 () y apo E-
4(
) seguido como un ensayo de competición in vitro. 125I[LDL] como un
competidor para el binding de complejos apoE-DMPC (di-miristoil-
fosfatidilcolina) a fibroblastos humanos normales.
ApoE2 es desde pacientes HL tipo III.
 = depuración
de LPR: no
hay defecto
en el
receptores

Depuración de Apo E-3 (E3+) y Apo E-2(E3-) simultaneamente inyectada

en pacientes normales (izquierda) y con HL tipo III (derecha).
Introducción

 Apolipoprotein E es un componente ppal

de lipoproteinas en el plasma.
 ApoE fue descripta por primera vez por
Shore & Shore (1973) como un
constituyente de VLDL.
 ApoE tiene un rol importante en el
transporte de lípidos en el plasma como
en el SNC.
Biología Molecular de Apo E

 Gen apoE Humano : cromosoma 19,

localizado en el extremo 5‘ de 50-kb de
una agrupamiento de genes con Apo
C-I y Apo C-II.
 Producido por varios tejidos: hígado,
cerebro, bazo, pulmon, adrenal, ovario,
riñon y musculo. Apo E del plasma es
generalmente producido por el hígado.
Biología Molecular de Apo EII

 La forma normal de ApoE es Apo

E3.
 HLP tipo III al menos 90% de los
individuos con HLP tipo III son
homocigotos para Apo E2
 APOPROTEÍNA E:
ESTRUCTURA Y FUNCIÓN

Alelos E2/2 E3/3 E4/4

Residuo nº 112 Cys Cys Arg

Residuo nº 158 Cys Arg Arg

 Alelo E3- Alelo E4

 Algunas variantes raras de Apo E estan

asociadas con hiperlipoproteinemia Tipo
III dominante; tales como apoE3
Leiden, ApoE2 (lys146→Gln), apoE3
(Cys112→Arg, Arg142→Cys),
 El alelo E4 relacionado a gran riesgo de
enfermedades cardiovasculares
(fumadores)
 ApoE4 es el mayor riesgo para la
enfermedad de Alzheimer y también se
asocia con la baja de la edad de inicio.
 El alelo E4 tiene contribución a la
patogénesis de la enfermedad
aterosclerótica.
 Gen Apo E
• La isoforma menos comun es E4 (Cys112Arg).

Variantes Raras de Apo E

From Walden & Heagle (1994) Apoprotein E in lipidemia, Annals of Internal Medicine, Vol.120, 12, 1026-1036
Elementos estructurales de Apo E:
El dominio N-terminal contiene 4-
hélices; el sitio de unión RLDL de
alta afinidad también requiere
Arg172 en la región bisagra que
conecta los dominios N- y C-
terminal y dos sitios polimorficos
en posición 112 y 158 que distingue
las tres isoformas de Apo E
C-terminal: la región de unión a
lípidos (LP); un sitio de union a
heparina (residuos 243-272)
Isoformas de Apo E
Parcial estructura de
Apolipoproteina E y el R LDL

Dominio de Unión al
Receptor de Apo-E

Apo-E, es la proteína mayoritaria en

LDL, presenta tres alelos comunes:
Apo-E3 es la forma más común
Apo-E4 ha sido relacionado a la enfermedad
de Alzheimer y elevado riesgo de Porción de binding
enfermedad cardíaca. de LP del R LDL
Apo-E2 se une pobremente a R LDL y está
asociada con hiperlipidemia tipo III
• Las mutaciones en apoE en
hiperlipoproteinemia tipo III causan la
LP con propiedades de binding
anormal entre los residuos 136 to 146

• Resulta en la remoción en un aa
cargado positivamente en el
dominio de unión From Walden & Heagle (1994) Apoprotein E in lipidemia,
Annals of Internal Medicine, Vol.120, 12, 1026-1036
Enfoque Isoeléctrico
 Isoelectroenfocado

Disminuye el pH
 Conformado por 5 unidades estructurales:

LRP1

Low density lipoprotein receptor-

related protein 1 (LRP1), = α-2-
macroglobulin receptor (A2MR)
=apolipoprotein E receptor (APOER)
= cluster of differentiation 91 (CD91)
Pasos involucrados en la depuración y
captación hepática de QM y VLDLr:
 a- Secuestro
 b- Procesamiento
 c- Captación (Internalización)
Causas que contribuyen a la
expresión de HLP tipo III:
(1) Sobreproducción de LP
(2) Lipólisis defectuosa de LP
(3) Captación hepática defectuosa
de remanentes
“Cofactores”:
 Insulino resistencia, hipotiroidismo,
alcoholismo, falla renal, estrógenos,
obesidad están asociados a su
expresión.
Tabla VI: Hiperlipoproteinemia Tipo III
Número pacientes 185
Hombre/ Mujeres 131/54
Rango de edad, Años 16 a 95
Colesterol (mg/dl) 450
Triglicéridos(mg/dl) 570- 1800

Hallazgos Clínicos % de Pacientes

Xantomas: Palmar 55
Tendon 13
Tuberoso y tuberoeruptivo 64
Xanthelasma 7
Arco Corneal 11
Enfermedad coronaria 28
Enfermedad Vascular periférica 21
Enfermedad cerebro vascular 4
Gota 4
Diabetes mellitus 4
Hipotiroidismo 4
 Courtesy of Professor PN Durrington

Striate palmer xanthomas: yellow-orange discolouration in creases of the skin on the

palms of hands, or seed-like lesions in the palms, fingers and flexor surfaces of the
wrist

Tuberoeruptive xanthomas: raised yellow lesions usually on the elbows and knees.
Tuberoeruptive Xanthomas
 HLP Tipo III
• Causa un incremento de tanto las concentraciones
séricas de colesterol y trigliceridos en ayunas.
• 270-470mg/dl para Colesterol Total
• 450 – 1800 mg/dl para Triglicéridos

• Condición Autosomica Recesiva con Penetrancia

Variable

• Mas comun en el hombres, con una definitiva incidencia

en la adultez temprana.

• Rara en niños.
 Diagnóstico basado en el Laboratorio

• Lipidograma Electroforético

• Estudios de ADN para detectar los homocigotos

• Ultracentrifugación para identificar partículas β-VLDL

ricas en colesterol

• Historia Familiar
 Diagnóstico Bioquímico:
Métodos Cuantitativos
(1) Métodos electroforéticos de Wikinski, Schreier y
Rosental consiste en la electroforesis en gel de
agarosa de suero entero, que separa
quilomicrones en el origen, una banda ancha que
comprende la zona entre el origen y la beta,
donde también quedan las beta lipoproteínas
(LDL). La zona alfa es ocupada por las HDL.
Para separar los RLPs de la LDL, se realiza una
incubación con la solución de Wieland y Seidel (2 h
con una solución de MgCl2 0.1 mol/l, heparina 1.5 g/l, y
NaCl 10 g/l), que inmoviliza los remanentes porque
neutraliza su carga eléctrica, y en una segunda
electroforesis se separan las LDL que conservaron
su carga negativa. La banda de RLPs se visualiza,
se recupera y se usa para extraer y medir el
colesterol con reactivo férrico.
 α-LP: HDL
β-LP: LDL
Pre β-LP: VLDL
 Incubación 2h- con MgCl2 0.1 mol/l, heparina
1.5 g/l, y NaCl 10 g/l
 2º Electroforesis se separa las LDLs
 Se separan los Remanentes y se cuantifica
Colesterol
Valores de Colesterol
(Rvo ferrico)
 Normales de Referencia:
5.7 ± 7.0 mg/dl
 Pacientes con HL Tipo III:
162 ± 345 mg/dl
 Cual es el riesgo del desarrollo de aterosclerosis?

Riesgo aumenta 5 veces

con niveles de colesterol
300 mg/dL comparado
con 200 mg/dL.

HLP acelera el inicio de la

aterosclerosis.

From Klippel JH, Reynolds HY, Stein JH et al. Internal Medicine, 5th Edition. St Louis: Mosby; 1998.
 Variantes Raras de ApoE
 ApoE1 (Gly127→→Asp, Arg158→→Cys) - ApoE1Harrisburg
(LyS146→→Glu)
 ApoE1Hammersmith (LyS146→ →Asn, Arg147→
→Trp) - ApoE1Baden
(Arg180→→Cys)
 ApoE1 (Leu252→ →Glu) - ApoE2 (Arg136→ →Cys)
 ApoE2Christchurch (Arg136→ →Ser) - ApoE2Heidelberg
(Arg136→→Cys)
 ApoE2 (Arg142→ →Leu) - ApoE2 (Arg142→ →Cys)
 ApoE2 (Arg145→→Cys) - ApoE2Sendai (Arg145→ →Pro)
 ApoE2 (Lys146→→GIn) - ApoE2Dunedin (Arg228→ →Cys)
 ApoE2 (Val236→→Glu) - ApoE3 (Ala99→ →Thr,
→Pro)
Ala152→
 ApoE3-Leiden (Cys112→→Arg; residues 121–127a) - ApoE3 (Cys112→ →Arg,
Arg142→→Cys)
 ApoE3 (Cys112→→Arg, Arg142→→Gly) - ApoE3 (Arg136→→Ser)
 ApoE3 (Arg145→→His) - ApoE3 (Arg251→ →Gly)
 ApoE3′′(Arg136→
→His) - ApoE4Philadelphia
→Lys,
(Glu13→
Arg145→ →Cys)
 ApoE4Freiburg (Leu28→ →Pro) →Lys)
- ApoE5 (Glu3→
 ApoE5 (Glu13→→Lys) - ApoE5 (Pro84→→Arg,
→Arg)
Cys112→
 ApoE5 (GIn204→ →Lys, Cys112→
→Arg) →Lys)
- ApoE5 (Glu212→
 ApoE7 Suita (Glu244, 245→→Lys)
 Resumen:

• Causa de aterosclerosis.

• Es rara e incluye distintas variantes de alelos apo E.

• Niveles de Colesterol e IDL se encuentran elevados por arriba de lo

normal.

• Multi-factorial. Factores tanto geneticos como ambientales

contribuyen a la expresion de su fenotipo

• Aterosclerosis es evitable! Importancia del diagnostico precoz.

 TRATAMIENTO:
 Disminuir Ingesta de Grasas
 Inhibidores HMGCoA
Reductasa(cervistatina, fluvastatina,
lovastatina,pravastatina,simvastatina)
 Fibratos
Referente en el país:
Bibliografía:
 JOHN D. BRUNZELL. Chapter 59: Familial Lipoprotein Lipase
Deficiency, Apo C-II Deficiency, and Hepatic Lipase Deficiency. The
Metabolic and Molecular Bases of Inherited Diseases. Volume II.
Charles R. Scriver, Arthur L. Beaudet, William S. Sly and David Valle,
EDITORS. McGraw-Hill. Seventh Edition (p.1913-1932).
 STANLEY C. RALL, JR, ROBERT W. MABLEY. Chapter 61: Type
III Hyperlipoproteinemia (Dysbetalipoproteinemia): The Role of
Apolipoprotein E in Normal and Abnormal Lipoprotein Metabolism.
The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Diseases. Volume II.
Charles R. Scriver, Arthur L. Beaudet, William S. Sly and David Valle,
EDITORS. McGraw-Hill. Seventh Edition. (p.1953-1980).
 ALDAMIZ-ECHEVARRÍA AZUARA L; SANJURJO CRESPO P;
DALMAU SERRA J; BALDELLOU VÁZQUEZ A: Dislipemias
primarias en la infancia: Protocolo de diagnóstico y tratamiento de
dislipemias primarias en la infancia.
 REGINA WIKINSKI, LAURA E. SCHREIER, GABRIELA A. BERG,
FERNANDO D. BRITES, GRACIELA LOPEZ, ANA I. GONZALEZ,
VALERIA ZAGO LIPOPROTEINAS REMANENTES ATEROGENICAS
EN HUMANOS. MEDICINA (Buenos Aires) 2010; 70: 375-380
 Greenow K, Pearce JP, Ramji DP. The key role of apolipoprotein
E in atherosclerosis. J Mol Med 2005; 83: 329-342
 Hatters DM, Peters-libeu CA, Weisgraber KH. Apolipoprotein E
structure:insights into function. Biochem Scien 2006; 31: 443-454
 Alguna pregunta de esta
parte?

Muchas gracias por su atención