Pasteur. Fuente de Luz y Centrífuga. Tubos de Kahn. Baño María .
REACTIVOS Sueros Clasificadores comerciales ABO y
Rh. GR. testigos A, B y O. Suero de Coombs LISS PROCEDIMIENTO 1. En una gradilla colocar en sentido vertical 2. Dejar incubar por una hora a Tº ambiente o centrifugar a 2000 rpm x 15’’ según sean las posibilidades. 3. Observar si existe aglutinación macroscópica en cada tubo frente a una fuente de luz. 4. Según los resultados debe continuar la técnica como corresponda en cada caso e interpretar de acuerdo a cada técnica según lo descrito anteriormente. INTERPRETACIÓN Los tubos 1, 2, 3, 5 y 6 se usan para clasificar el sistema ABO. El tubo 4 se usa para clasificar el Ag D del sistema Rh. El tubo 7 se usa para detectar anticuerpos irregulares, puede agregar más tubos si dispone de 2 o 3 pools distintos. El tubo 8 representa la prueba autóloga.
Nota: Si los tubos 7 y 8 (salinos) son positivos en incubación a
temperatura ambiente, se deben incubar por 15 min a 37°C, si continúan positivos se informan como IgM, si son negativos correspondería a la acción de una crioaglutinina. INTERPRETACION
MUESTRA ANTI-A ANTI-B ANTI-AB ANTI-D A1 B PA POOL POOL
I II 1 2 3 4 ANÁLISIS DE SUBGRUPOS SANGUÍNEOS Las posibles causas de discrepancias en la clasificación se pueden deber a diversos factores, entre los cuales los más comunes son: Los subgrupos sanguíneos Doble población Presencia de gelatina de Wharton en las muestras de recién nacidos Incompatibilidad materno-fetal, que en el momento de la clasificación se hace evidente. “Dolichos biflous” Al utilizar lectinas se definen los subgrupos: A1 y A2: con el extracto de Dolichos biflorus se aglutinan los eritrocitos A1, pero no los de A2.
Los eritrocitos de recién nacidos que son
genéticamente A1 reaccionan de forma relativamente débil con el anti-A1 humano. El anti-H, proveniente de la semilla Ulex europeus, aglutina los eritrocitos que tienen antígeno H. La lectina Ulex europeaus tiene la propiedad de aglutinar las células que expongan el antígeno H en su superficie. Existe un fenotipo eritrocitario relativo a la ausencia del antígeno H en la superficie llamado “Fenotipo Bombay”, en el cual el paciente que necesitase recibir transfusión de glóbulos rojos, necesita exclusivamente eritrocitos con la ausencia del antígeno H, ya que puede poseer anticuerpos anti-H; antígeno presente en la mayor parte de la población. DISCREPANCIAS ANÁLISIS DE CAUSAS DE DISCREPANCIAS EN LA CLASIFICACIÓN ABO