ANALISIS DE MINERALES EN TEJIDOS VEGETALES

I. INTRODUCCION

Dependiendo del órgano vegetativo, edad del cultivo, especie vegetal, variedad,
etc. la composición porcentual de los tejidos vegetales es de 70 80 % de agua, 20
– 30 % de materia orgánica y 1 – 10 % de cenizas en promedio.

Aun cuando el porcentaje correspondiente a las cenizas es bastante bajo en

comparación con los otros componentes, sin embargo, es de gran importancia en
la nutrición de las plantas, desde que en ellas están contenidos los
macroelementos esenciales P, K, Ca, Mg, y S y los microelementos; el N forma
parte de la materia orgánica.

Por otra parte, para la cuantificación de estos elementos, estos necesitan ser
solubilizados mediante la digestión o el ataque con ácidos fuertes para luego ser
cuantificados utilizando diversas metodologías.

Son objetivos de esta práctica proporcionar los lineamientos para la:

1° Preparación del material vegetal para la obtención del extracto de tejidos; y,

2° Obtención del extracto de tejidos vegetales.

II. REVISION DE LITERATURA

Los análisis de tejidos constituyen una herramienta importante para evaluar el

estado nutricional de los suelos así como para determinar las necesidades de
fertilización, siempre como complemento de los análisis de suelos.

Los resultados de los análisis de tejidos pueden ser expresados en términos de

concentración (%, ppm) o de absorción total (kg/ha, g/ha, kg/parcela, g/parcela).

Manejo y preparación de las muestras.- El lavado del material vegetal debe

hacerse cuando este se encuentre fresco; caso contrario, sólo podrán
determinarse macronutrientes previa eliminación de la tierra adherida, mediante un
pincel.

Eliminación o determinación de la humedad.- Los productos que contienen alta

concentración de azúcares y vitaminas pueden descomponerse a temperaturas
mayores de 105 °C; ello puede evitarse calentando los productos a 70 °C en
vacío, así como también usando estufa de circulación de aire, si los productos
están destinados a realizar otros análisis. Caso contrario la humedad se determina
a 105 °C.

Obtención de extractos de plantas.- Los extractos de plantas pueden obtenerse

por vía seca o por vía húmeda. La primera vía es, menos costosa, requiere de
mayor tiempo y menos precisa pero es preferida principalmente por que la
emanación de gases del método por vía húmeda resulta peligroso. El método por
vía seca consiste en el ataque de la muestra de tejido con HCl luego de la
 calcinación de ella en la mufla a 550 °C por 8 horas aproximadamente. En el
método por vía húmeda, la muestra es atacada por mezclas binarias o ternarias de
ácidos fuertes como ácido perclórico, nítrico y sulfúrico o clorhídrico.

Objetivos:
1. Determinar el % de humedad, materia seca, materia orgánica y
cenizas de materiales orgánicos.
2. Determinar la biomasa, materia orgánica y minerales aportados por
una tonelada de material orgánico.

III. MATERIALES Y METODOS

Los reportes de análisis de tejidos deben ser reportados en base seca a 105 –
110°C. Sin embargo, el hecho de secar las muestras de tejidos a tal temperatura
puede traer consigo la pérdida (volatilización) de algunos elementos como N, P y
S, por lo que los análisis se hacen con cierta humedad y luego son transformados
a % en base seca. En algunos casos como los análisis foliares las muestras son
secadas a 60 – 70 °C, molidas y luego analizadas; en el caso de estiércoles y
guano de islas entre otros, es más conveniente analizarlos con su humedad actual
y luego hacer la transformación respectiva, debido a que pudieran perderse varios
elementos por volatilización.

Procedimiento
 Determinación del % de humedad y % de materia seca.
1. Cosechar plantas de maíz; si es necesario determinar la biomasa
debe pesarse la planta entera.
2. Seccionar las plantas y tomar una muestra de tejido de
aproximadamente 100 g (con aproximación de 1 gramo) y llevar a
sequedad en la estufa a una temperatura de 105 – 110 °C durante
24 horas. Determinar su peso seco a la estufa y su porcentaje de
humedad y materia seca.

PF - PSE
% H° = --- ---------x 100
PF

% M.S. = 100 - % H°

 Obtención del extracto de tejidos

1. Secar en la estufa a 60 – 70 °C durante 24 horas, porciones de tejido de
órganos de las plantas de maíz.
2. Pesar 1 a 2 g de muestra seca a 60 – 70 °C y colocar en un crisol limpio y
previamente identificado y tarado.
3. Llevar a calcinación en la mufla a 500 °C durante 8 horas.
4. Retirar el crisol cuando la mufla alcance una temperatura máxima de 200
°C.
5. Humedecer con unas gotas de agua destilada.
 6. Añadir 10 ml de HCl 50% y calentar en la plancha hasta consumir el ácido.
No debe dejarse secar completamente.
7. Añadir 15 de HCl 10% y calentar en la plancha igual que en el caso
anterior.
8. Añadir 10 ml de agua destilada y calentar.
9. Filtrar con agua destilada hervida y caliente utilizando papel Whatman # 42.
10. Enrasar en frío en fiolas de 50 ml con agua destilada. Guardar en frascos
limpios en refrigeración.

OBTENCIÓN DEL EXTRACTO DE PLANTAS (Curso de Análisis de UNA La Molina)

Métodos : A) Por vía seca o Calcinación.- Tiene la ventaja de que se produce una
mejor separación de los elementos con respecto al Si que puede interferir en la
determinación colorimétrica. Es más preciso y más laborioso.

B) Vía húmeda por ataque con Ácido sulfúrico o Peróxido de hidrógeno y

Perclórico/Nítrico (1:4).- Tiene la ventaja sobre la vía seca en el sentido de que se puede
hacer una mayor cantidad de muestras en menor tiempo y no se realizan transvases.

POR VÍA SECA

Materiales
 Mufla de temperatura graduable (0 – 600 ªC).- La calcinación debe ser
graduada para evitar la volatilización de ciertos elementos como por
ejemplo el boro.
 Crisoles de porcelana
 Lápiz carbón
 Balanza analítica
 Piseta (hervidor de agua)
 Pipeta
 Bureta
Reactivos
 HCl químicamente puro
 Agua destilada
Procedimiento
 Pesar 2 g de la muestra molida.
 Poner en los crisoles limpios previamente identificados.
 Poner los crisoles en la mufla. La mufla tarda unas 6 horas en llegar a la
temperatura deseada y 8 horas para la calcinación a 450 ªC. Mayor
tiempo puede producir volatilización de elementos. Si después de 8 horas
se ven puntos negros (carbón) se deja por 2 horas más. La
sobrecalcinación puede producirse y se detecta por la presencia de un
color verde. Como la calcinación demora mucho puede adelantarse la
operación: se añade a la muestra alcohol para humedecer y se quema
eliminando el C en forma de CO2. Se ahorra 6 horas de trabajo.
  Dejar enfriar dentro de la mufla. Si no se va a trabajar inmediatamente, se
coloca la muestra en un desecador.
 Para trabajar se saca el crisol y se humedece con agua para evitar que al
trabajar con ácidos se produzcan salpicaduras.
 Adicionar 2 mL/2 g de muestra de HCl químicamente puro. Se hace a
temperatura moderada.
 Llevar a una campana de extracción de gases para evaporar el Hcl a
sequedad a temperatura lenta (1 hora más o menos) hasta que aparezca
un color amarillento.
 Repetir la adición de HCl y luego evaporación total.
 Añadir 1 mL agua y 1 mL de HCl.
 Echar agua hervida hasta la mitad del crisol y remover la costra con un
“policía”.
 Vaciar el contenido a un vaso de precipitado de 100 mL. Puede
adicionarse más agua hervida hasta vaciar todo el contenido.
 Trasladar a una fiola de 100 mL y enrasar con agua destilada.
 Filtrar con filtro Nª 40. En el filtro queda el Si que no es soluble en medio
ácido.

IV. RESULTADOS Y DISCUSION

Muestra Material Peso Peso Peso Peso Peso Peso

Orgànico Crisol muestra Crisol + crisol + cenizas materia
(g) hùmeda MH M Seca orgánica

MUESTR Peso Pes Hume Materi Peso Materi Ceni Total Total
A Fresc o - a seca Ceniza a orgá- -zas materi materi
o Sec dad (%) s (550 nica (%) a seca a org.
o (%) °C (%) (kg/ha) (kg/ha)
(110
°C)
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFIA
VII. ANEXO