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http://www.gfmer.ch/Educacion_medica_Es/Pdf/Embrion_2005.pdf
http://espanol.pregnancy-info.net/lineas_de_celulas_madre.html
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Los embriones en estado de mórula se obtienen mediante
lavados del útero con amortiguador de fosfato salino de Vuelco
(DPBS), ó con algún medio de cultivo adicionado con 10% o
15% de suero fetal bovino. La zona prelucida se retira de las
mórulas y sus blastómeros se separan realizando un pipeteo.
Cuando se obtienen los blastómeros, se cultivan sobre células
nodrizas que secreten LIF. Después de cinco o seis días
aparecen colonias redondas compactas, que son aisladas y se
disgregan con tripsina, para luego sembrarlas sobre células
nodrizas nuevas; así, cada tres o cuatro días se busc an las
colonias y se realizan subcultivos.
Los blastocitos se obtienen haciendo lavados del útero con
` DPBS o con algún medio de cultivo adicionado con 10% ó
15% de suero fetal bovino. Después ,los blastocito sin tactos se
cultivan sobre células nodrizas que secreten LIF (Figura 5); a
los cuatro o cinco días, los blastocitos se adhieren y las células
del embribaste crecen formando colonias redondas y
compactas, éstas son aisladas y disgregadas con tripsina y
luego se siembran sobre células nodrizas nuevas ;después de
tres o cuatro días, nuevamente se buscan las colonias
redondas compactas y de esta manera se realizan subjuntivos
(Figura 5)
Para obtener sólo las células del embribaste se utilízal a técnica
`! de ³inmunocirugía´, que consiste en la destrucción mediada por
` ` el complemento de las células
Del trofoblasto, mediante un anticuerpo que se una dichas
células; así, el embribaste puede ser separado fácilmente de
los remanentes de las células trof oblásticas, después se
colocan las células sobre células nodrizas. De nueve a 15 días
después, se forman colonias esféricas y compactas que
pueden ser aisladas y
disociadas para la realización de subjuntivos