GUIA DE CALIDAD CÓDIGO:

GC-01-00
MANUAL DE BIOSEGURIDAD EN EL
Laboratorio LABORATORIO
Página 1 hasta 19
Biotecnología
Industrial Vigente desde:

1. OBJETIVO

INCULCAR A LOS ESTUDIANTES UNA MENTALIDAD PREVENTIVA QUE

MINIMICE LA PROBABILIDAD DE QUE OCURRAN ACCIDENTES EN EL
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA INDUSTRIAL.

2. RESPONSABLE

Docente a cargo de la práctica, auxiliar de laboratorio, estudiantes de

biotecnologia y areas afines, o cualquier otra persona que ejecute prácticas en
el laboratorio de biotecnologia industrial.

3. ALCANCE

Esta guía establece las pautas y recomendaciones necesarias para tener un

ambiente controlado y libre de peligros en el momento de realizar las practicas
de laboratorio

4. DEFINICIONES

Bioseguridad: conjunto de medidas preventivas, destinadas a mantener el

control de factores de riesgo laborales procedentes de agentes biológicos,
físicos o químicos, logrando la prevención de impactos nocivos, asegurando
que el desarrollo o producto final de dichos procedimientos no atenten contra la
salud y seguridad de los estudiantes y todo el personal que realice practicas en
el laboratorio.
Riesgo: es la contingencia o probabilidad de que ocurra un daño.

Peligro: es el riesgo o contingencia inminente de que ocurra un mal. En el caso

que nos interesa (el de la Inocuidad de los Alimentos), el daño o el mal está
vinculado con el perjuicio que pueda ocurrirle al consumidor (en su salud o aún
en su vida).

Riesgos físicos: se refiere a aquellos factores ambientales que dependen de

las propiedades físicas de los cuerpos, tales como carga física, ruido,
iluminación, radiación ionizante, radiación no ionizante, temperatura elevada y
vibración que actúan sobre los órganos y tejidos del cuerpo del trabajador y
que pueden producir efectos nocivos.

Riesgos Biológicos: consiste en la presencia de un organismo, o la sustancia

derivada de un organismo, que plantea (sobre todo) una amenaza a la salud
humana. Esto puede incluir los residuos sanitarios, muestras de un
microorganismo, virus o toxina que puede resultar patógena.

Riesgos Químicos: es aquel riesgo susceptible de ser producido por una

exposición no controlada a agentes químicos la cual puede producir efectos
agudos o crónicos y la aparición de enfermedades.

“TODA MUESTRA, REACTIVO O MATERIAL QUE ESTE EN CONTACTO

DIRECTO CON ESTOS DEBEN SER CONSIDERADOS COMO
POTENCIALMENTE INFECTANTES Y NOCIVOS Y SE DEBE TOMAR LAS
PRECAUCIONES NECESARIAS PARA PREVENIR QUE OCURRA ALGÚN
TIPO DE ACCIDENTE.”

5. INSTRUCCIONES AL PERSONAL.

5.1 El auxiliar de laboratorio en cuestiones de bioseguridad es su jefe

inmediato, por lo tanto debe estar atento a sus sugerencias e indicaciones.

5.2 Informe al auxiliar de laboratorio o al docente cualquier riesgo, incidente o

accidente que usted detecte, a fin de que se tomen las medidas preventivas
correctivas necesarias.

6.1 Pasos a seguir después del accidente.

6.1.1 Lavado del área expuesta :

6.1.1.1 Exposición Percútanea: Lave inmediatamente el área expuesta con

agua y jabón germicida; si la herida está sangrando, apriétela o
estimule el sangrado, siempre que el área corporal lo tolere.
Posteriormente, aplique solución desinfectante después de concluido
el lavado.

6.1.1.2 Exposición en Mucosas : Lave profusamente el área con agua o

solución salina.

6.1.1.3 Exposición en Piel No Intacta : Lave el área profusamente con

solución salina y aplique solución antiséptica.

6.1.1.4 Exposición en Piel Intacta : Lave simplemente el área con agua y

jabón profusamente.

6.1.2 Evaluación del accidente :

6.1.2.1 Reportar accidente : Todos los estudiantes y el personal que labore

en el laboratorio deben conocer la importancia de informar
inmediatamente una exposición ocupacional y tener garantías de la
confidencialidad y el respeto con el cual será tratado.

6.1.2.2 El reporte se debe hacer dentro de las primeras 24 - 72 horas de

presentado el accidente.

6.1.2.3 Una vez documentado el accidente se debe diligenciar

personalmente el formato establecido para ello (ver anexo I). El
auxiliar de laboratorio debe registrar todos los accidentes laborales
que se presenten en el laboratorio:

Símbolo Leyenda

las superficies pueden calentarse durante su uso.

Esta es capaz de generar corrientes letales. Utilice

las mismas precauciones que con cualquier
dispositivo eléctrico. No opere sin la cubierta en su
lugar. No opere en humedad o ambientes húmedos
en los cuales esta pueda causar daño en los
componentes eléctricos internos, no opere con
cables conectores con alambres sueltos
radiación ultravioleta que puede ser perjudicial para
la piel y los ojos, no se exponga a esta radiación sin
protección de ocular o de piel
 Este aviso alerta de situaciones potencialmente
peligrosas.

8.1 Etiqueta de un producto químico.

El etiquetado reglamentario de las sustancias y los preparados peligrosos

es un medio sencillo para informarle y alertarle sobre los peligros
relacionados con su utilización. Cuando los productos son transvasados a
otros envases, la etiqueta deberá ser sistemáticamente reproducida.

8.1.1 En las etiquetas habrá, entre otras cosas, uno o varios símbolos de
peligro, así como un número restringido de indicaciones sobre los
riesgos y sobre las medidas de prevención a adoptar.

8.1.2 La etiqueta le informa inmediatamente sobre el producto y le permite

evitar las confusiones y los errores a la hora de utilizarlo.

8.1.3 La etiqueta es imprescindible en caso de accidente, le dará las

indicaciones necesarias sobre el comportamiento a seguir en caso de
accidente.
 1 Identificación del producto (nombre químico de la sustancia o nombre
comercial del preparado).

2 Composición (para los preparados relación de sustancias peligrosas

presentes, según concentración y toxicidad).

3 Responsable de la comercialización (Nombre, dirección y teléfono).

4 Identificación de peligros.

5 Descripción del riesgo (Frases R*).

6 Medidas preventivas (Frases S*).

8.2 Pictograma de productos químicos.

Riesgos de incendio o explosión

Medidas
Descripción preventivas
Símbolo Significado
de los riegos
F – Fácilmente Productos de fácil inflamación bajo la
acción de una fuente de energía (llama,
inflamable chispa) a temperatura ambiente.

Productos que pueden inflamarse

F+ – Extremadamente fácilmente
Prohibido fumar.

inflamable bajo la acción de una fuente de energía

(llama, Almacenar los productos
en un lugar bien
ventilado
chispa…) incluso por debajo de los 0º.
Guardar los productos
inflamables

(símbolo F) bien
Productos que pueden favorecer o separados de los
O – Comburente productos comburentes
activar la
(O).

combustión.
No utilizar cerca de una
fuente de calor.

No llevar ropas
sintéticas.
 Prohibido fumar.

Evitar el exceso de calor

E – Explosivo. Productos que pueden explotar por la y proteger contra los
rayos solares.
acción del calor, de un choque o de un
rozamiento
No ponerlos cerca de
fuentes de calor,
lámparas, radiadores,
etc

Riesgos de alteración de la salud

Medidas
Descripción preventivas
Símbolo Significado de los
riegos
cancerígenos o problemas de
esterilidad.
R – Radioactivo
Productos peligrosos en caso de
penetración en el organismo por la
nariz, la boca o a través de la piel.

T – Tóxico Productos que pueden alterar el

conjunto del organismo o lesionar
únicamente, ciertos órganos:
pulmones, hígado, corazón, nervios.

T+ – Muy Tóxico Pueden causar profundas Prohibido fumar

alteraciones en el organismo,
incluso la muerte. Dependiendo del Utilizar Equipos de
grado de toxicidad que presentan, Protección Individual (EPI)
estos productos son calificados de para evitar cualquier
Tóxicos y de Muy Tóxicos o de contacto.
X n – Nocivo Nocivos.
Trabajar en locales bien
Ciertos de estos productos son ventilados.
definidos como cancerígenos, ya
que pueden provocar cáncer. Buena higiene: lavarse las
X I – Irritante manos, no comer durante la
utilización de los productos.
Otros son definidos como
mutágenos, ya que pueden implicar
mutaciones genéticas que pueden Conservar los productos en
el envase de origen.
provocar tumores
Productos que pueden provocar la
destrucción de tejidos vivos.. Tras el uso, lavarse bien la
cara y las manos.
C – Corrosivo
Queman la piel y las mucosas,
Verter siempre el producto
pueden producir lesiones graves en el agua y no al contrario.
que pueden provocar cicatrices.
 Riesgos para el medio ambiente

Medidas
Descripción preventivas
Símbolo Significado
de los riegos
Tratar el producto y sus
Se trata de sustancias contaminantes y
N – Peligro para el Medio tóxicas para la fauna, para el aire, la desechos (separe,
recicle, elimine), de
Ambiente capa de ozono. acuerdo con la
legislación.

6 ALMACENAMIENTO DE SUSTANCIAS TERATOGÉNAS,

MUTÁGENICAS Y CANCERÍGENAS.

· Son aquellas sustancias que están clasificadas como carcinógenos a los

humanos o razonablemente sospechoso como cancerigenos a los
humanos; teratógenos o mutagénicas en las monografías de la Agencia
Internacional del Cáncer (IARC) o estén catalogadas como tal por el
proveedor de la sustancia.

· Almacene las sustancias carcinógenas, mutagénicas y teratógenas

separadas de otras sustancias. Identifique en un croquis o un plano de
laboratorio la localización de estas sustancias. Limita la cantidad
almacenada de estas sustancias a lo estrictamente necesario para una
semana de trabajo. Mantenga un inventario de las sustancias carcinógenas
en el laboratorio.

· Mantenga al personal femenino en estado de gestación totalmente aislado

de las áreas donde se utilicen estas sustancias.
10. INSTRUCCIONES PARA EL TRATAMIENTO DE ACCIDENTES.

En caso de accidente, avisa inmediatamente al profesor. En caso de gravedad

llama 119 (bombero) , o al teléfono de la cruz roja colombiana al 132 .
Recuerda que no debes llevar a cabo actuaciones inseguras, si vas a realizar
los primeros auxilios tienes que estar seguro de que no vas a empeorar el
estado del accidentado (protección) y asegúrate que tú no sufres riesgo
(autoprotección).

11. NORMAS DE SEGURIDAD EN LA UTILIZACIÓN DE EQUIPOS

11.1Normas generales.

11.1.1 Los equipos y aparatos nunca deben colocarse en zonas de paso, en

particular en los pasillos del laboratorio.

11.1.2 Todos los aparatos con toma eléctrica deberán cumplir las normativas
de seguridad correspondientes. Nunca deben utilizarse en zonas mal
aisladas y expuestas a la humedad.

11.1.3 Las fuentes de calor (calentadores, termobloques, etc.), sobre todo si se

alcanzan temperaturas elevadas, deberán estar debidamente
señalizadas para evitar quemaduras accidentales.

11.1.4 Todos los procedimientos de utilización de aparatos deberían contar

obligatoriamente con apartados relativos a su utilización segura.

11.2Nevera

Un adecuado mantenimiento, limpieza y desinfección sistemáticos de los

aparatos reduce considerablemente los riesgos asociados a su utilización.
Sin embargo, aun en estas condiciones, hay que tener en cuenta lo
siguiente:

11.2.1 No deben almacenarse cultivos de microorganismos patógenos por

inhalación en recipientes que no estén convenientemente cerrados,
especialmente si la cámara tiene un sistema de circulación de aire.
11.2.2 No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos volátiles
inflamables (éter etílico, por ejemplo) en neveras que no posean un
sistema de protección antideflagración. En los aparatos de tipo
doméstico que se utilizan en el laboratorio debe anularse la lámpara de
la luz.

11.3Congelador

La congelación es un proceso que mantiene la viabilidad de muchos

muestras de ADN, de ahí un potencial riesgo y las siguientes
recomendaciones:

11.3.1 Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo

almacenado y sus riesgos potenciales.

11.3.2 El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos,

recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarán completamente, para
evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la
congelación.

11.3.3 Descongelar periódicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente.

11.3.4 Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja

(por ejemplo -70ºC o inferior), los guantes representan una protección
adicional.

11.4Incubadoras

La limpieza y la desinfección, periódicas y sistemáticas, son el método

recomendable para reducir los riesgos derivados de la contaminación
accidental del personal del laboratorio.

11.5Termociclador Y Baño Termorregulado (ver IC-03-00 y IC-04-00)

11.5.1 Los termocicladores constituyen una nueva fuente de accidentes, entre

los más frecuentes son las explosiones cuando se usan para calentar las
muestras, ya que la diferencia de velocidad de calentamiento produce
burbujas que pueden estallar.
11.5.2 Las botellas o matraces deben tener el tapón aflojado, ya que si está
cerrado estallan fácilmente.

11.5.3 Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y

controlar la intensidad del aparato, que sólo puede ser la máxima con
agua y la mínima si se usa con gel de agarosa.

11.5.4 Deberá existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posición del
potenciómetro y de las cantidades a emplear.

11.6Centrífuga

Los mayores riesgos derivan, sobre todo, de la contaminación por los

aerosoles generados durante la centrifugación de materiales biológicos y,
en menor medida, de los traumatismos accidentales. Se recomienda:

11.6.1 Cuando se centrifugue material biológico potencialmente infeccioso

deben utilizarse tubos cerrados; la centrífuga debe disponer de rotores o
cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles
aerosoles.

11.6.2 La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una

incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al
auxiliar de laboratorio o al docente responsable de la practica, de forma
que se proceda a la desinfección segura del aparato.

EQUIPOS
Los equipos necesarios en el procesamiento de una muestra para
estudio infeccioso son:
- Estufas.
- Neveras.
- Congeladores.
- Centrífugas.

De manera periódica debe controlarse la temperatura, humedad/presión

de CO2 de cada estufa/nevera/congelador al inicio de la jornada de
trabajo con un termómetro situado permanentemente en el centro de
cada equipo.

El termómetro debe permitir la medida de la temperatura máxima y

mínima alcanzadas. Se anotará en la hoja de registro de temperatura de
cada aparato. De una manera genérica se sugieren los siguientes
intervalos de aceptación:
Estufas
- estufas de 35-37°C se acepta una mínima superior o igual a 34°C y
máxima inferior o igual a 37,5°C
- estufas de 42°C se aceptan variaciones entre 40-43°C
- estufas de 30°C se aceptan variaciones entre 28-32ºC Para las neveras
el intervalo de tolerancia que se acepta es generalmente de 2º-8°C,
aunque puede variar en función de los reactivos que contengan.

Todos los termómetros utilizados en la medida de temperaturas de los

aparatos se han de verificar mediante un termómetro de referencia
calibrado. Se introducirá el termómetro utilizado para la medición de la
temperatura y el termómetro calibrado en el equipo correspondiente
(nevera, congelador o estufa) durante un mínimo de 15 minutos.

Existen sistemas automáticos para el control de la temperatura,

humedad, presión de CO2, etc., que controlan de una manera
permanente (en intervalos de 15-20 minutos) los anteriores parámetros
con gran fiabilidad y que utilizan sondas de referencia verificadas por
organismos certificados.
Centrífugas
Cuando se centrifugue material biológico potencialmente infeccioso
deben utilizarse tubos cerrados; la centrífuga debe disponer de rotores o
cestillos de seguridad que protejan al operador de los posibles aerosoles.

La rotura accidental de un tubo y su vertido en la cubeta representa una

incidencia importante que debe ser comunicada inmediatamente al
supervisor o responsable, de forma que se proceda a la desinfección
segura del aparato.

No se deben utilizar centrífugas antiguas que no posean sistema de

cierre de seguridad, del que disponen todos los aparatos actuales, ni
manipular éstas de forma que permitan su apertura mientras están en
funcionamiento.

Si el laboratorio dispone de ultracentrífugas, el equilibrado cuidadoso del

rotor es fundamental.
Dentro de este apartado, hay que puntualizar que su uso es distinto
dependiendo de cómo sean las muestras. Así:

- Hay que centrifugar todos los líquidos en volumen superior a 1ml a

2.500 rpm durante 15 minutos
- Centrifugar sangre a 3.500 rpm durante 3-5 minutos para detección de
antígenos y/o anticuerpos
- Otras técnicas de concentración específicas: precipitación en etanol,
ultracentrifugación selectiva, etc.
Incubadoras

Temperatura (varía según el tipo de cultivos, por ejemplo)

- La mayoría de los cultivos bacterianos se incuban a 35-37ºC
- El aislamiento de Campylobacter spp. de heces requiere una
temperatura de incubación de 42ºC
- La mayoría de los cultivos para hongos se incuban a 30°C

Atmósferas de incubación
- Aerobiosis
- Atmósfera enriquecida con 5-7% de CO2
- Atmósfera microaerofílica para el aislamiento de Campylobacter spp. :
5% de O2, 10% CO2 y 85% de N2.
- Atmósfera de anaerobiosis

BARRERAS PRIMARIAS
Las barreras primarias son la primera línea de defensa cuando se
manipulan materiales biológicos que puedan contener agentes
patógenos. El ejemplo más claro de contención primaria lo constituyen
las cabinas de seguridad biológica.

Cuando no es posible el aislamiento del foco de contaminación, la

actuación va encaminada a la protección del trabajador mediante el
empleo de prendas de protección personal. En la mayoría de las
ocasiones se practica la combinación de ambos tipos de medidas, tal
como puede ser el empleo de la cabina junto con guantes y mascarilla.
Todo ello sin olvidar que la máxima contención del riesgo biológico sólo
se da cuando, además, se emplean las técnicas de trabajo correctas
unidas a un diseño del laboratorio

A) CABINAS DE SEGURIDAD BIOLÓGICA (CSB)

Son cámaras de circulación forzada que, según sus especificaciones y
diseño, proporcionan diferentes niveles de protección. Son
fundamentales en un Laboratorio de Infecciosas y se clasifican según el
nivel y tipo de protección.

En principio es necesario distinguir entre las campanas de extracción de

gases, las cabinas de flujo laminar y las cabinas de Seguridad Biológica.

La campana de gases (o vitrina extractora de gases) es un recinto

ventilado que captura los humos y vapores procedentes de la
manipulación de los productos químicos en el laboratorio. Si bien
constituye un equipo muy útil en la contención del riesgo químico, no
ofrece protección alguna frente a riesgos biológicos.
Las cabinas de flujo laminar son recintos que emplean un ventilador para
forzar el paso del aire a través de un filtro HEPA barriendo la superficie
de trabajo. El flujo de aire puede ser vertical u horizontal. Estas cabinas
ofrecen protección únicamente al material que se maneja en su interior,
pero nunca al operador, por lo que no son recomendables. Son, sin
embargo, un instrumento de trabajo imprescindible en las denominadas
"zonas limpias".

Las Cabinas de Seguridad Biológica (CSB) son recintos ventilados

diseñados para limitar al máximo el riesgo del personal de laboratorio
expuesto a agentes infecciosos. Ello es especialmente importante si se
tiene en cuenta que muchas de las operaciones realizadas en un
laboratorio implican la formación de aerosoles. Estos equipos tienen
como objetivo principal proporcionar una zona de trabajo que minimice la
probabilidad que una partícula transportada por el aire tiene de escapar
hacia el exterior de la cabina y contaminar así al operario y a la zona que
le rodea. Además, algunas de ellas, ofrecen protección al material que se
manipula.

Las CSB disponen de dos sistemas que impiden la salida de

contaminación: las barreras de aire y los filtros. Las barreras de aire se
crean permitiendo que éste fluya en una sola dirección y a una velocidad
constante dando lugar a una verdadera "cortina" de aire que se conoce
como flujo de aire laminar. Es, por definición, un flujo con ausencia de
turbulencias. Los filtros tienen como finalidad atrapar las partículas
contenidas en este flujo de aire y los empleados habitualmente son los
HEPA, que retienen con una eficacia del 99,97% partículas de hasta 0,3
micras de diámetro.

Las CSB se dividen en tres categorías: clases I, II y III.

Cabinas de clase I. Son cámaras cerradas con una abertura al frente
para permitir el acceso de los brazos del operador. El aire penetra por
este frontal, atraviesa la zona de trabajo y todo él sale al exterior a través
de un filtro HEPA. La velocidad del flujo de aire es de unos 0,40 m/s (75
pies/m). Son apropiadas para manipular agentes biológicos de los grupos
1, 2 ó 3. La mayor desventaja que presentan es que no proporcionan
protección al material con el que se trabaja, no evitando por lo tanto que
éste se pueda contaminar.

Cabinas de clase II. Se diferencian principalmente de las de clase I en

que, además de al operario y su entorno, ofrecen protección al producto
frente a la contaminación. La superficie de trabajo está bañada por aire
limpio que ha atravesado un filtro HEPA. La salida del aire se produce a
través de otro filtro HEPA. Son equipos válidos para el manejo de
agentes biológicos de los grupos 1, 2 ó 3. Existen varios tipos de cabinas
de clase II, A, B1, B2 y B3, según sus características de construcción,
flujo de aire y sistema de extracción.

Una primera diferencia entre tipo A y tipo B es que las de clase II tipo A
están diseñadas para que el aire extraído desemboque en el mismo
laboratorio o fuera de éste vía una conexión de tipo “Canopo” y las de
tipo B deben disponer de un conducto hermético de salida, exclusivo
para ellas, con un extractor y un sistema de alarma apropiado. Las IIA y
las IIB3 mantienen ambas una velocidad de 0,40-0,50 m/s (75-100 p/m) y
en ambas también se recircula un 70% del aire. Cuando la IIB3 se
conecta al exterior mediante conducto hermético, entonces se puede
emplear para manipulaciones que impliquen muy pequeñas cantidades
de productos tóxicos y radionucleidos.

Las restantes cabinas del tipo B, es decir IIB1 y IIB2, se diferencian

principalmente en la velocidad del flujo y la proporción de aire que se
recircula. En estos dos tipos, la velocidad mínima es de 0,50 m/s (100
p/m), siendo la cantidad recirculada del 30-50% en las de clase II tipo B1
y del 0% en las de tipo B2. Tanto unas como otras son adecuadas para
el trabajo con pequeñas cantidades de tóxicos y radionucleidos.

Cabinas de clase III. Constituyen el máximo nivel de seguridad. Son

recintos herméticos en presión negativa y, por ello, su interior está
completamente aislado del entorno. Se opera en ellas por medio de unos
guantes, con trampa para introducir el producto, el aire entra a través de
un filtro HEPA y se expulsa al exterior a través de dos filtros HEPA. Se
recomiendan para el manejo de agentes de los grupos 1, 2, 3 ó 4.

BARRERAS SECUNDARIAS
El diseño y construcción de un laboratorio (lo que en Seguridad Biológica
se conoce como "barreras secundarias") contribuye a la protección del
propio personal del laboratorio, proporciona una barrera para proteger a
las personas que se localizan fuera del laboratorio.

Localización. Es aconsejable que el Laboratorio de Infecciosas se

localice fuera del tráfico del hospital o facultad de veterinaria, y que no
sea un lugar de paso para otras dependencias en las que no exista
restricción para su acceso (cafeterías, almacenes, bibliotecas,
aparcamientos).

Acceso de personal. En general, debe ser restringido a las personas

formadas para el manejo de agentes infecciosos. Para un nivel 2 de
contención es suficiente que la puerta del laboratorio pueda cerrarse con
llave, mientras que para el nivel 3 la puerta ha de ser doble además de
recomendarse un cambio de ropa.
Lavabo. Debe existir uno en el mismo laboratorio. Estará dotado de grifos
que puedan accionarse sin utilizar las manos y situado preferiblemente
cerca de la puerta de salida.

Lavaojos. Se recomienda que exista uno dentro del laboratorio como

equipo de emergencia.

Superficies interiores. Los suelos, paredes y techos deben ser

impermeables al agua y resistentes a diferentes productos químicos, de
forma que permitan una limpieza a fondo y una posterior
descontaminación. En el nivel 3 de contención, además, todas las
penetraciones deben ir selladas.
Superficies de trabajo. Las mesas y bancos de trabajo deben ser
resistentes al calor moderado, a disolventes orgánicos, ácidos y álcalis.

Señalización. Siempre que el trabajo esté en marcha, debe colocarse en

la puerta del laboratorio la señal reglamentaria de peligro biológico.

Presión negativa. Se recomienda que el laboratorio se mantenga a una

presión negativa con respecto al exterior del mismo, es decir, con
respecto a los pasillos u otras zonas del edificio, de manera que exista un
flujo de aire desde las zonas menos contaminadas hacia las de mayor
riesgo de contaminación. Las puertas y ventanas del laboratorio han de
permanecer cerradas si se quiere mantener esa presión negativa. No es
aconsejable la recirculación de aire.

Filtros HEPA. No existe legislación en España en cuanto a sistema y

frecuencia para su comprobación pero, siguiendo directrices de otros
países, parece aconsejable hacerla cada 6 meses o, al menos, no dejar
pasar más de 14 meses. Deberá realizarla siempre una empresa
especializada.

Residuos. Además de la normativa general que la facultad establezca, en

función de la legislación vigente, en materia de residuos biosanitarios, en
un nivel 3 se recomienda que en el mismo laboratorio exista algún
sistema para el tratamiento de los residuos producidos. De no ser así, el
transporte de estos residuos ha de realizarse en envases sellados (ver
más adelante el apartado específico).

Nivel 4 de contención. Las características de diseño enumeradas se

hacen obligatorias en el caso del nivel 4 de contención, además de otras,
como el empleo de cabinas de clase III (o equipo de protección similar
para los operarios), filtro HEPA a la entrada del aire, doble filtro HEPA a
la salida del aire, etc.
NEVERAS, HABITACIONES FRIGORÍFICAS Y MICROONDAS
Hay que tener en cuenta lo siguiente:

No deben almacenarse cultivos de microorganismos patógenos por

inhalación en recipientes que no estén convenientemente cerrados,
especialmente si la cámara tiene un sistema de circulación de aire.

No deben almacenarse reactivos que contengan compuestos volátiles

inflamables (éter etílico, por ejemplo) en neveras que no posean un
sistema de protección antideflagración. En los aparatos de tipo doméstico
que se utilizan en el laboratorio debe anularse la lámpara de la luz.

A) CONGELADORES
La congelación es un proceso que mantiene la viabilidad de muchos
agentes infecciosos, de ahí un potencial riesgo y las siguientes
recomendaciones:

Tratar de identificar en ficheros, listas, etc. el contenido de lo almacenado

y sus riesgos potenciales.

El material potencialmente infeccioso debe colocarse en tubos,

recipientes, etc. bien cerrados. No se llenarán completamente, para
evitar que rebosen por efecto del aumento de volumen tras la
congelación.

Descongelar periódicamente, limpiar y desinfectar si fuese procedente.

Utilizar guantes para manipular el contenido. Si la temperatura es baja

(por ejemplo -70ºC o inferior), los guantes representan una protección
adicional.

B) MICROONDAS
Los microondas cada vez son más populares en el Laboratorio de
Infecciosas y constituyen una nueva fuente de accidentes, entre los más
frecuentes las explosiones cuando se usan para calentar medios con
agar, ya que la diferencia de velocidad de calentamiento produce
burbujas que pueden estallar.

Las botellas o matraces deben tener el tapón aflojado, ya que si está

cerrado estallan fácilmente.
Estar siempre presente, con la ropa y pantalla facial adecuadas, y
controlar la intensidad del aparato, que sólo puede ser la máxima con
agua y la mínima si se usa con agar.

Deberá existir una tabla bien visible de los tiempos en cada posición del
potenciómetro y de las cantidades a emplear.
Los microondas interfieren con los marcapasos. No deben ser colocados
a una distancia inferior a 2 m de las personas que sean portadoras de
uno de estos dispositivos.

C) AUTOCLAVES
Los autoclaves deben poseer manómetro y termostato, así como válvula
de seguridad, sistema de desconexión rápido y la purga del vapor ha de
realizarse a un recipiente estanco y con agua, jamás directamente al
exterior.

No deben usarse si no se conocen perfectamente todos los mandos y su

fundamento.

Usar guantes especiales para protegerse del calor.

No abrir jamás si el manómetro no está a "0" y la purga no ha sido

abierta.

Controlar una vez al mes su capacidad de desinfección mediante

esporas, no siendo suficiente el método químico. El uso de registros de
presión y temperatura de cada proceso y la instauración de un programa
de mantenimiento también puede ser una alternativa válida al control
mediante esporas. El agua debe ser cambiada regularmente.

Aparte de todos estos elementos, en un Laboratorio de Enfermedades

Infecciosas son necesarios otros instrumentos tales como microscopios y
todo lo relacionado con ellos y con el procedimiento de preparación de
muestras (portas, cubreobjetos, placas de Petri, colorantes para
tinciones, parafina,…), otros indispensables en cualquier laboratorio
(pipetas de todo tipo, matraces, pinzas, tijeras, lupas,…), y no podemos
olvidarnos de las cámaras frigoríficas (a -10º C, a 4º C,… para poder
guardar los tanques de Nitrógeno Líquido, medios TSA, TSF,…), y otros
almacenes para sustancias peligrosas o explosivas, siempre con la
debida identificación en la puerta.