Organización de plantas

Las plantas almacenan la energía química a partir de dióxido de carbono

Las plantas son organismos sésiles (no se mueven)

Tienen alternancia de fases: tienen una estructura gametofitica (haploide) y

esporofitica (diploide).

Si miramos a partir de un organismo diploide, que es el llamado esporofito que

a través de la meiosis va a generar megaesporas(forma huevos) o
microosporas (forman esperma

CICLO VITAL DE UN HELECHO.

Un helecho común por ejemplo Polypodium vulgare. En el período favorable,

sobre la cara inferior de sus hojas se ven los sosros que contienen los
esporangios, cada uno de los cuales encierra numerosas esporas, que se han
formado a continuación de la división meiótica de numerosas células madres.
Estas células son diploides, como todas las células que forman las hojas, las
raíces, el rizoma en fin todo el cuerpo del helecho. Al madurar el soro se rompe
el indusio o membrana que lo envuelve, salen los esporangios y son liberadas
las esporas que al llegar a un lado apto, con temperatura y humedad
adecuada, germinan y dan origen a una pequeña lámina muy simple, formada
por células haploides, que constituye el prótalo.

En la parte inferior del prótalo se diferencian los anteridios y arquegonios.

Los primeros liberan un gran número de gametos masculinos flagelados que

moviéndose el agua se trasladan hacia los arquegonios atraídos por sustancias
hormonales segregadas por los gametangios femeninos. Una vez alcanzado el
arquegonio penetran en él a través de cuello y fecundan la oosfera que está
situada en la parte basal ensanchada del arquegonio.

Reproducción de las angiospermas

El ciclo de vida de las angiospermas es similar al de las gimnospermas. Aunque

se observan diferencias menores en las diferentes especies de angiospermas,
los rasgos principales del ciclo de vida son comunes a todos. Las flores de las
angiospermas producen microsporas y macrosporas. En la mayoría de las
angiospermas las flores son perfectas, es decir, cada flor lleva tanto
microsporángeos como macrosporángeos y producen, asimismo, ambos tipos
de esporas. Las microsporas se producen en los estambres. Las macrosporas
producen el pistilo. El estambre está compuesto por una estructura lobulada
llamada antera, la cual está sostenida por el filamento, los granos del polen se
forman en la antera. Por meiosis de la célula madre, se producen cuatro
microsporas por cada célula madre, las cuales se desarrollan y dan origen a un
grano de polen. El pistilo se compone del estigma, el estilo y el ovario. El ovario
contiene una cámara en cuyo interior se encuentran las macrosporas u óvulos.
Las dos células más importantes son: la ovocélula y una célula central de
mayor tamaño que contiene a los dos núcleos polares. A partir de este ultimo
se forma el endosperma de la semilla. Las angiospermas se distinguen por la
intervención de los animales en la polinización. La división mitósica del zigoto y
del núcleo llevan a la formación de la semilla por consiguiente la semilla
constituye el embrión del esporofito, provisto de reservas alimenticias y de
cubiertas protectoras. Sus dos funciones principales son dispersión y
mantenimiento

Fotosintesis:

Fotoquimica (membrana del tilacoide):

Cuando se absorbe luz, un electron se exita pero tiene que volver a su estado
basal liberando esa energía. Disipando en forma de luz(remtiendo un foton,
fluorescencia), también disipa energía en forma de calor (decaída no
radioactiva), otra forma de disipar la energía es disipar esa energía en una
molecula vecina (resonancia inductiva) y por ultimo forma de disipar energía
es que el electron sea transferido a otro molecula (fenómeno fotoquimico esa
clorofila fue oxidada)

Fotosistema 2: es un gran complejo que contiene, complejos antenas, que cada

uno tiene de 200-300 clorofila a y b mas carotenoides mas proteínas q ayudan.
Cada uno tendrá su centro de reacción y otros componentes transportadores
de electrones. El P680 es el centro de reacción del PSII , ocurre el “quiebre del
agua” por oxidación del agua.

La plastocianina navega por el lumen llevando el electron del PSII al PSI

El fotosistema 1 recibe el electron de la plastocianina que luego es pasado a la

ferredoxina la cual se la pasa a una molecula de NADP que es reducido NADPH.

Cuanto mas negativo es mas energético tendrá menos afinidad por el electron.

Fijacion y reducción del CO2 es reducido a azucares en el estroma:

Ciclode calvin:

1- Carboxilacion de la ribulosa-1,5-bibosfato

2- 2 moleculas de fosofoglicerato (3 C) catalizada por la enzima rubisco

3- Fosfoglicerato se reduce necesitando ATP y NADPH

4- Se forma el gliceraldehido 3-fosfato

Para tener una glucosa (6C) se necesitan 2 Gliceraldehido, y para que sobren 2
Gliceraldehido tienen que entrar 6 ribulosas 1,5-bifosfato entonces al final
para tener 1 glucosa son necesarias 3 ribulosas 1,5-bifosfato.

Micro propagación

Totipotenciales: la capacidad de la celula vegetal para regenerarse y formar

una planta completa.

Organogénesis directa: se parte de un explante proveniente de una yema

preformada, formando un brote que va a ser igual a la planta madre.

Organogénesis indirecta: Se toma una parte trozo de la planta pero se

desdiferencia para que forme un callo, (desdiferenciación celular acompañada
de un crecimiento tumoral). De esto a través de reguladores de crecimiento
podemos obtener brotes o embriones somáticos y posteriormente regenerar
una planta completa igual que la planta madre.

En el caso de la embriogénesis: se CONVIERTEN EMBRIONES desde un

explante, mediante reguladores de crecimientos se empiezan a producirse
diferentes estados de los embriones hasta que toda la masa sea embriogénica,
cada embrión pasa de un estado globular, corazón/torpedo hasta formar una
planta completa.

Las auxinas se conservan en el apice del tallo y se mueve hacia abajo

inhibiendo los brotes laterales.

Citoquininas se encuentran en los meristemas radiculares y de ahí sube,

estimulando la brotacion natural.

Si se quiere estimular raíces la presencia sola de auxinas lo genera, y la

presencia sola de citoquininas tambien genera raíces, en el caso de callos se
requieren ambas, en mayor proporción auxinas y menor proporción de
citoquininas.

Citoquininas para los brotes.

Para estimular raíces adventicias se usa mas la auxina menos citoquinina

Cultivo de tejidos
Bredding clásico: es tomar el polen o ovulo de una variedad e inocularla en
otra y generar un hobrido y buscar dentro de ese hibrido las características que
se quieren.

El tejido meristematico es mas probable tener variación somaclonal.

Protoplasto: celula vegetal que se digiere la pared celulas (solo con la

membrana plasmática sin pared)

A partir de monocotiledonea es ams difícil formar protoplastos

Manitol baja la presión osmótica en el medio

Los protoplasto pueden ser de cualquier especie para fusionarse.

Las plantas se dejan en cultivo para regenerar la pared celular

Embrión somático: Son aquellos que provienen de una celula somatica.

❤❥♡♥ღɞ

Transformación 1:

5’atgaaatgccttgaatgaaatgcctatgaaatgccttg atgaaatgccttga 3’

Primer foward: atgaaatgccttga

Primer reverse : tcaaggcatttcat

Vector de clonamiento: tiene su propio origen de replicación, un gen de

resistencia o marcador de selección y un sitio de multiple clonamiento.

Sistema Gateway:

Funciona por recombinación sitio-específica para el mecanismo de

clonamiento. Se tiene un vector de entrada que tiene el gen de interés y un
vector de destino que tiene un gen de selección letal.

pENTR: vector lineal q viene abierto y en sus extremos tiene una

topoisomerasa

La transferencia requiere de:

• De los bordes LB y RB secuencias repetidas de 25pb que flankean el

tDNA

• De los genes vir en un plasmido

Vectores de cointegracion (Sit cis): Se clona el propio T-DNA en e.coli
(plasmido PBR322) y el T-Dna del plasmido aislado se abre con enzima de
restricción lo q va a permitir que nosotros clonemos el dna de interés y por lo
tanto el q se va tranferir al genoma de la planta, y los recombinantes se
vuelven a clonar en coli. Luego estos plasmidios son introducidos por
conjugación en una cepa de agrobacterium portadora del plasmido Ti silvestre
generándose una recombinación homologa entre los dos plasmidos y eso va ha
producir la transferencia a la planta.

Para la transformación con agro se deben tener:

Los órganos florales cerrados (los gametos aun no fecundados) para poder
transformar los gametos femeninos y luego sumergir la planta en un medio con
agro.

Hemicigotas: todas tienen la mitad de la dotación con el T-dna inserto (T0)

Los cotiledones blancos se mueren no son resistentes al antibiótico.

Mutantes insersionales

Región codificante: puede llevar a la inactivación del gen, donde va a producir

mas impacto será en el sitio activo de un gen

Región promotora: puede llevara a completa inactivación ocurre cuando la

inserción en la región basal d eese promotor, a reducir la expresión, cuando la
inserción ocurre en el promotor distal o aumentar la expresión ocurre cuando
la inserción ocurre en una región represora.

En el banco de mutantes: entregan T2, es decir las que son resistentes al

antibiótico y que además han sido secuenciadas.

Se ha visto por:

Southern blot la insersion,

Análisis de segregación de la inserción

Secuenciar la inserción

Homocigodad de la inserción
*Cuando la expresión del gen en una mutante insercional homocigota tiende a
0 o menos que el 10% se habla de un knock-out, y cuando esa baja es entre un
20-60% es un Knock-down .

2 Mutantes insercionales o 2 mutantes alelicas : tiene la inserción en dos

lugares distintos.

Since no morphological or developmental changes were observed, we

investigated whether the incorporation of UDP-glucose was altered in both
mutants. The UDP- glucose uptake was compromised in ER and Golgi vesicles
extracted from homozygous atutr3-1 and atutr3-2 plants. The uptake of UDP-
glucose was reduced by almost 50% in both the ER and Golgi fractions from
both allelic mutants (Figure 4d). On the other hand the same functional
analysis for AtUTr1 mutant plants showed that UDP-glucose uptake was
affected only in ER vesicles (Figure 4c). These results confirmed our findings
that AtUTr1 is located only in ER membranes while AtUTr3 is located in both
the ER and Golgi. Furthermore, these findings corroborate that both AtUTr1 and
AtUTr3 are involved in the transport of UDP-glucose into the ER.

Porque se tienen que tener dos mutantes y no solo una??? Tenemos que tener
dos mutantes alelicas, porque la segunda mutante alelica, donde la inserción
es en otra posición, debe tener el mismo efecto que la primera mutante alelica,
porque si no se ve el mismo efecto puede ser algo posicional y no que se esté
sileciando el gen.

Después lo que se quería ver era que no hubiese otro transportador

involucrado por lo tanto hicieron dobles mutantes, donde cruzaron el polen de
una mutante con el ovulo de la otra mutante y después viceversa (para saber
si no esta ligado al sexo). Cuando hicieron la doble mutante encontraron
plantas que no tenían semillas, ya que no eran viables porque son los únicos
dos transportadores de UDP-glucosa en RE por lo tanto sin estos
transportadores la planta se hace infértil (inviable).

La planta tiene su propio mecanismo de silenciamiento de genes como el de

miRNA, el cual tiene en su secuencia un sense y un antisense , lo que
posteriormente va a generar un harping, una horquilla, posteriomente la
enzima DcL1 con HYL 1 van a cortar este pri-miRNA inmaduro lo que va a
generar un miRNA dúplex, donde una hebra (la antisense de la hebra blanco)
se va a metilar por una enzima llamada HEN 1 y la otra hebra se va a
degradar. Posteriormente la hebra metilada antisense se va a unir a la
secuencia blanco que se quiere silenciar, esta se va a degradar o se va a
detener la transcripción.

En la t3 puede que ya no haya expresion del gen de resistencia ya que la

planta al tener su propio mecanismo de sileciamiento, como forma de defensa
también a patógenos silencia el gen .