FUNDACIÓN UNIVERSITARIA MONSERRATE 

2011 
 
 
GUIA DE LABORATORIO DE QUÍMICA No. 5 
 
INTEGRANTES:________________________       
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DOCENTE: MSc. Harvey Andrés Milquez Sanabria                      FECHA DE ENTREGA: _______________ 
 
TEMA: MICROSCOPIA 
 
Objetivos 

 
El alumno reconocerá el microscopio compuesto, identificará cada una de sus partes y lo manejará 
correctamente  observando la presencia de microorganismos en muestras biológicas 

MATERIAL.                                MATERIAL BILÓGICO                         SUSTANCIAS 

Microscopio compuesto            Sarro dental*                              Sol. Salina. NaCl al 0.85%   

Porta y cubre objetos                  Muestra de orina*                   

Palillo                                               Muestra de  Excremento* 

Hisopo       Cebolla cabezona * 

INTRODUCCIÓN. 

          El microscopio  es el instrumento más frecuentemente utilizado y el más útil en un laboratorio 
de microbiología, proporciona la amplificación o agrandamiento que nos permite ver organismos y 
estructuras  invisibles  a  simple  vista.  Los  microscopios    permiten  una  amplia  gama  de 
amplificaciones, desde cien veces a cientos miles de veces. 

                 Las  dos  categorías  de  microscopios  disponibles  son  los  microscopios  ópticos  y  los 
microscopios  electrónicos.  Los  microscopios  ópticos  utilizan  un  sistema  de  lentes  ópticas  y 
comprenden los microscopios de  campo claro, campo oscuro, fluorescencia y contraste de fases. Los 
microscopios  electrónicos emplean haces de electrones en lugar de ondas de luz para producir una 
imagen ampliada. 

• * Material suministrado por el alumno 

 
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  MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO 

1. Colocar  el  objetivo  de  menor  aumento  en  posición  de  empleo  y  bajar  la  platina 
completamente.  Si  el  microscopio  se  recogió  correctamente  en  el  uso  anterior,  ya  debería 
estar en esas condiciones.  
2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.  
3. Comenzar  la  observación  con  el  objetivo  de  4x  (ya  está  en  posición)  o  colocar  el  de  10 
aumentos (10x) si la preparación es de bacterias.  
4. Para realizar el enfoque:  
a. Acercar  al  máximo  la  lente  del  objetivo  a  la  preparación,  empleando  el  tornillo 
macrométrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya 
que  se  corre  el  riesgo  de  incrustar  el  objetivo  en  la  preparación  pudiéndose  dañar 
alguno de ellos o ambos.  
b. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la 
preparación con el macrométrico y, cuando se observe algo nítida la muestra, girar el 
micrométrico hasta obtener un enfoque fino.  

5.‐  Pasar  al  siguiente  objetivo.  La  imagen  debería  estar  ya  casi  enfocada  y  suele  ser  suficiente  con 
mover un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por 
completo  la  imagen,  es  preferible  volver  a  enfocar  con  el  objetivo  anterior  y  repetir  la  operación 
desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparación y por ello es fácil 
que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparación si se descuidan las precauciones 
anteriores y mancharlo con aceite de inmersión si se observa una preparación que ya se enfocó con 
el objetivo de inmersión.  

PROCEDIMIENTO 
 

TÉCNICAS DE MONTAJE HÚMEDO  

La  gota  pendiente  o  las  preparaciones  húmedas  permiten  examinar  organismos  vivos 
suspendidos en  un fluido. Las preparaciones  húmedas  se hacen colocando una  gota  del  fluido  que 
contiene  el  organismo  sobre  una  lámina  de  vidrio  y  cubriéndola  con  una  fina  pieza  de  vidrio 
(cubreobjetos): para reducir la tasa de evaporación y eliminar  corrientes de aire, generalmente se 
rodea la gota con vaselina. 

Cuando  se  examinan  las  preparaciones  húmedas  por  microscopía  de  campo  claro,  es 
importante ajustar la fuente de luz de forma adecuada. Es posible disminuir la intensidad de la luz 
mediante la utilización de filtros especiales. 

MONTAJE EN SOLUCIÓN SALINA FISIOLÓGICA  (NaCl 0.85%) O  AGUA 
Utilizada para estudiar la movilidad de las bacterias 
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A) 

 1.‐ En el centro de  un portaobjetos coloca una gota de solución salina  

 2.‐  Con  un  hisopo  toma  muestra  de    sarro  dental  de  un  compañero  que  no  se  haya  lavado  los 
dientes y  colócala en la solución salina mezclando  cuidadosamente 

  3.‐ Examinar con objetivos de 40X y 60 X.  

B)  

1.‐ Centrífuga  aproximadamente 10 ml de orina a 2,500 rpm durante 5 minutos. 

2.‐ Desecha el líquido sobrenadante y  procede a mezclar el sedimento urinario 

3.‐ Coloca una gota del  sedimento mezclado en el centro de un portaobjetos limpio y seco 

4.‐ Sobre el  sedimento pon   un  cubreobjetos y observa con el objetivo de 40X y 60X 

C) 

1.‐ En un tubo de 13 X 100mm coloca las tres cuartas partes de solución salina fisiológica 

2.‐  Con  un  aplicador  de  madera  toma  muestra  de  excremento  de  varias  partes    de  la  muestra  y 
deposítalo dentro del tubo con la solución salina, agita uniformemente.  

3.‐ En un portaobjetos limpio y seco, coloca una gota de muestra preparada en los pasos anteriores 

4.‐Coloca un cubreobjeto sobre la preparación y observa en el microscopio con objetivo 40X y 60X 

CUESTIONARIO: 

1.‐ ¿Que es poder de  resolución? 

2.‐ ¿Qué finalidad te proporciona el utilizar microscopio compuesto: ________________________‐
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3.‐ ¿Cuál es la importancia que tiene el diafragma en el microscopio? 

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4.‐ ¿Qué tipo de bacterias pudiste observar en las muestras que se estudiaron 
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5.‐  ¿Qué  importancia tiene  el  estudiar y observar los microorganismos en muestras biológicas? 

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6.‐  Escribe el nombre  de cada una de las partes del microscopio compuesto