PROTEÍNA C-REATIVA (PCR)

“A Proteína C Reativa é membro da família pentraxina das proteínas

plasmáticas que está envolvido nas respostas imunes inatas às infecções
bacterianas. PCR é um agente de fase aguda e se liga a capsula de diversas
bactérias. PCR liga-se também ao C1q e por isso pode ativar o complemento ou agir
como uma opsonina por interação com os receptores C1q dos fagócitos” (ABBAS,
2003). A PCR também exibe aumentos intensos de concentração após o infarto do
miocárdio, trauma, infecções, cirurgias ou proliferação neoplásica.
O princípio do método PCR-Látex é o da aglutinação do látex, sendo incluídos
no teste, reagentes partículas de látex estabilizadas e sensibilizadas com anti-PCR
humana, formando aglutinação macroscopicamente quando a PCR está presente na
amostra em concentração mínima de 6,0mg/L. A técnica aplicada pode ser
conduzida de forma a fornecer determinação qualitativa e semi-quantitativa.

Procedimento

Teste Qualitativo:
Inicialmente deve-se agitar o conteúdo do reagente, após isso, seguir os passos
descritos abaixo:
1 - Colocar uma gota do PCR Reagente Látex em divisões separadas da placa
contida no kit para cada amostra a ser testa, assim uma gota para o controle
negativo e outra para o controle positivo
2 - Adicionar 0,04 mL (40 μL) de cada amostra não diluída ao lado de cada gota do
reagente, porém não muito próximo. O mesmo deve ser feito com uma gota de cada
controle (positivo e negativo) não diluído.
3 - Misturar com auxílio do bastão descartável, estendendo o líquido igualmente
sobre cada divisão da placa. Utilizar bastões diferentes para cada amostra a fim de
evitar resultados errôneos.
4 - Agitar a placa com suave movimento de rotação manualmente ou em agitador
automático a 100 rpm durante 2 minutos, ao final da agitação observar a aglutinação
sob luz incidente para melhor visualização .
Obs.: O limite de sensibilidade do método é de 6mg/L de PCR presente no soro do
paciente.
Teste Semi-Quantitativo:

1 - Caso o resultado seja positivo no teste qualitativo, proceder da seguinte forma:

diluir o soro em tubos, conforme esquema que será apresentado a seguir.

Separar 6 tubos e adicionar 0,2mL (200μL) de NaCl a 0,85% em cada tubo.

Transferir para o 1º tubo 0,2mL (200μL) da amostra. Misturar, transferir 0,2mL do 1º
tubo para o 2º tubo, misturar e transferir 0,2mL do 2º para o 3º tubo e assim
sucessivamente até o 6º tubo desprezando 0,2mL restantes. Os valores da diluição
e do resultado positivo para cada tubo estão representados abaixo:

2 - Pipetar 40 μl de cada tubo e adicionar nas divisões da placa.

3 - Adicionar uma gota do Reagente sobre cada uma das divisões onde estão
contidas as amostras, da mesma forma que o realizado no teste qualitativo, porém
sem a necessidade de fazer novamente o controle negativo e o controle positivo.
4 - Misturar com o bastão descartável, estendendo o líquido igualmente sobre cada
divisão da placa.
5 - Agitar a placa com suave movimento de rotação manualmente ou em agitador
automático a 100 rpm durante 2 minutos e observar a aglutinação sob luz incidente
para melhor visualização.

O resultado será aproximadamente o valor da diluição mais alta em que

ocorreu a aglutinação multiplicado pelo limite de sensibilidade do método que é de
6mg/L. Esses valores podem ser observados na tabela exposta acima.

Obs.: Diluições adicionais podem ser preparadas caso o resultado apresente

positividade até a diluição 1/64.