Biosensores

Suas Aplicaes na Industria e na Medicina

Alberto A . R. Drummond

O que um Biosensor ?
Biosensores so sensores analticos baseados em reaes enzimticas que envolvem compostos qumicos muito especficos. Esta especificidade enzimtica apresenta vantagens para a anlise em tempo real de substratos e produtos em meios de fermentao. Combinam o alta
selectividade de um agente biolgico com o poder de processamento da microeletrnica e da opto-eletrnica modernas, oferecendo ferramentas analticas novas e poderosas com multi aplicaes , principalmente na medicina, no controle ambiental e nas indstrias de bioprocessos . Apresentam resposta em tempo real podendo ser utilizados On-Line .

Esquema Simblico de um Biosensor

Como Funciona ?

microtransdutor Com Circuito Integrado

Neste novo campo da bioeletronica , os microrganismos vivos ( ou suas enzimas e organelas ) so fixados a eletrodos. Estes biosensores convertem os efeitos de reaes biolgicas em um sinal ( correntes eltricas ) mensurvel . Uma das aplicaes mas interessantes desta tecnologia e a combinao de magnetita bacteriana com um sistema cromforo para medir a glicose mediante um cambio de colorao, de grande utilidade em anlises clnicas.

Esquema em detalhes do funcionamento de um biosensor

Este dispositivo capaz de interpretar as mudanas qumicas produzidas em presena do composto biolgico, originando um sinal eletrnico capaz de ser interpretado em poucos minutos. O exemplo mais conhecido e mais bem-sucedido de um biosensor a medida da glicose no sangue de pacientes diabticos. Trata-se de um dispositivo menor do que um telefone celular, cujo elemento de reconhecimento a enzima glicose oxidase. O paciente coloca uma gota de seu sangue sobre as tiras descartveis, e em poucos segundos a leitura feita e reconhece qual a glicemia do paciente.

Os mais novos campos de Aplicaes para biosensores

As Aplicaes variam em funo do tipo de transdutor usado e do agente biolgico

Os principais campos de aplicao desta nova tecnologia so :

Industrias de Alimentos , Farmacuticas e Qumicas Industrias Metal-Mecnica e mecatrnica ( Robtica e automao ) Prospeo de Petrleo e gs Controle Ambiental Controle de Qualidade Medicina e Engenharia Biomedica Kits portteis para diagnostico Instrumentao analtica em geral Controle de Pesticidas na agricultura Uso Militar Uso em Pesquisas cientificas diversas ( astrobiologia , farmacos , etc ) Segurana Predial ( incndios , fumaa , agentes txicos , etc. ) Veterinria e agricultura Explorao de recursos Ocenicos ( guas profundas ) Explorao espacial ( sondas para pesquisas em Marte e outras ) Automao industrial Controle antidoping in locus durante olimpadas e desportos . Outras

Biosensores Geomagneticos

As Bactrias Magnticas tambm podem ser utilizadas em biosensores

Aplicaes na medio de campos geomagneticos , em geologia e na explorao espacial

O Agente Biolgico Poder ser :

Clulas viveis integras e imobilizadas Clulas viveis permeabilizadas e imobilizadas Anticorpos Clulas Pancreaticas , enterais ou hepticas Isoladas Tecidos diversos vegetais e animais Enzimas e complexos enzimticos Fungos e leveduras diversas e imobilizadas Clulas viveis confinadas e no imobilizadas Clulas alteradas geneticamente e imobilizadas A grande vantagem de se utilizar enzimas esta no fato de que apresentam um menor tempo de resposta , contudo so bem mais caras e de recuperao mais onerosa . Mesmo assim a maioria dos biosensores atuais utilizam enzimas devido a sua maior praticidade e versatilidade .
Quando uma molcula biolgica interage especificamente e reversivelmente com o substrato gera variaes de um ou mais parmetros fsico-qumicos associados a esta interao. Tal mudana gera ons, alterao de cor ,crescimento de biomassa,eltrons,gases ,luz,precipitao de slidos, etc ,as quais podem ser convertidos em sinal eltrico mensurveis e processveis.

Seleo dos componentes Biolgicos e reativos :

Os produtos formados pela catalise enzimtica so de grande importncia ,pois sero estes detectados pelo transdutor resultando no sinal eltrico processvel e comparvel a concentrao da espcie de interesse no meio reacional , existe um fator de proporcionalidade .

=> As enzimas devem ser selecionadas criteriosamente em funo das substancias que desejamos mensurar .
Exemplo : para dosar lcool um biosensor acoplado a um sistema de analise por injeo de fluxo pode ser utilizado a partir das enzimas lcool Oxidase ( AOD ) e peroxidade ( POD ) com fenol e 4 -aminofenasona como reativos analticos , que na presena de as enzimas e do etanol geram produtos coloridos detectados colorimetricamente .

A segunda reao forma um produto colorido , esta cor proporcional a quantidade de lcool e pode ser mensurada por detector colorimtrico ( transdutor ) , que por sua vez pode estar acoplado a um microcomputador.

Tecnicas de Imobilizao de Enzimas

Uso de um suporte inerte tratado com um agente de ligao covalente ou agentes de reticulao ( bifuncionais ) . Tipos de imobilizao enzimtica : Covalente Encapsulamento ligaes cruzadas Adsoro Os mtodos de encapsulamento e ligao covalente so os que levam a melhor performance do biosensor . No caso do encapsulamento usam-se membranas polimricas tal como Polmero Perfluorinatado Sulfonado ( Naflon TM ) que pode suprimir interferncias de acido Ascrbico e acetaminofen . O glutaraldedo em meio tamponado um tpico agente de ligao covalente . Membranas e filmes eletropolimericos semicondutores e diversos polmeros condutores com excelentes propriedades eltricas e pticas so atualmente utilizados. Sendo membranas ultra finas fornecem respostas rpidas com alta sensibilidade.

E fi 100

[Pt 0 Ptf
Pt 0

Tcnicas de Imobilizao Enzimtica

Uso de Enzimas : Vantagens & desvantagens Enzimas - Vantagem : Menor Tempo de resposta Alta seletividade ,sensibilidade e estereoespecificidade Facilidade para imobilizao No sugeitas a alteraes por mutao . Enzimas - Desvantagem : Alto custo Sensibilidade Termica Sensibilidade a variaoes de PH Dificuldades de Regenerao Necessidade de Cofatores

Microrganismos : Vantagens & Desvantagens Vantagem : Menor Custo Alta seletividade e especificidade No necessita de co-fatores Os complexos enzimticos esto protegidos Facilidade de Regenerao e no to onerosa. Podem ser engenheradas geneticamente para maior estabilidade trmica e de PH Desvantagem : Maior sensibilidade Trmica Sensibilidade Mutacional Maior Tempo de Resposta Variaes nas culturas alteram a resposta do biosensor Menor tempo de prateleira

Bioprocessos Necessitam de Esterilidade microbiologica biosensores On-line sem matar o agente biologico ?

Ento como usar

Utilizando-se Enzimas termoestveis ou clulas alteradas geneticamente para garantir estabilidade trmica e maior tempo de validade. Biosensor acoplado ao Sistema FIA

O advento dos Biosensores Certamente levara a uma nova conduta comportamental visto que :
- Mercados podero ter biosensores acoplados aos seus produtos para garantir a qualidade aos seus consumidores. - Diagnsticos podero ser realizados on-line por telemetria e as funes fisiolgicas do paciente monitoradas em tempo real a distancia. - Biosensores podem mostrar diretamente se a gua est prpria para o consumo humano - Biosensores ultraminiaturizados podem ser utilizados para monitorar o crescimento de biomassa enteral ( bifidobacterias ) em bovinos e em humanos de modo a mensurar os efeitos nocivos de antibioticoterapia. - A nanotecnologia associada aos biosensores abre um campo inusitado de aplicaes em futuro prximo.