MHC - PSC Magalhes et al

Complexo Principal de Histocompatibilidade (MHC): codificao gentica, bases estruturais e implicaes clnicas
The Major Histocompatibility Complex (MHC): genetic codification, structural bases and clinical implications

Pedro Silva Correa de Magalhes1 Maristela Bhlke2 Fernando Neubarth3

Resumo As anlises imunogenticas sobre a suscetibilidade a doenas baseadas principalmente no complexo principal de histocompatibilidade (MHC) tm influenciado cada vez mais a prtica clnica. Nesta reviso abordamos a codificao gentica que define o MHC e seu polimorfismo, as bases estruturais das molculas do MHC, assim como seu funcionamento e funes no sistema imunolgico humano. A associao entre a compatibilidade do sistema MHC e a rejeio de rgos e tecidos transplantados tambm so discutidas. Descritores: Complexo principal de histocompatibilidade; sistema imunolgico; MHC e doenas.

Introduo O Complexo Principal de Histocompatibilidade Humano, MHC (Major Histocompatibility Complex), tem grande parte de sua codificao gentica localizada no cromossomo 6. Contendo mais de 200 genes, possui fundamental importncia no sistema imunolgico. Historicamente, o interesse no MHC surgiu a partir de experimentos sobre rejeio de tecidos transplantados entre camundongos. Os genes do MHC esto presentes em todos os vertebrados, sendo que no homem recebem a designao de HLA (Human Leukocyte Antigens), por terem sido inicialmente detectados nos leuccitos. Os genes HLA so os mais polimrficos do genoma humano, possuindo centenas de alelos j descritos. Estas molculas so a chave crtica para numerosas funes imunolgicas, incluindo a seleo das clulas T, induo de tolerncia, produo de anticorpos, imunidade mediada pelas clulas T, respostas inflamatrias e diversos outros fatores ligados ao sistema imune e seu funcionamento. Conseqentemente, o papel do MHC de grande interesse mdico pois est diretamente relacionado com a rejeio de rgos e tecidos, com a suscetibilidade a patgenos, assim como na variabilidade individual na suscetibilidade a desordens de etiologia auto-imune.

Abstract Immunogenetic analysis of disease susceptibility, based on major histocompatibility complex (MHC) has an increased influence on clinical practice. In this review we have covered the genetic codification of MHC and the causes of its polymorphism, the structural bases of MHC molecules as well as its functions in the human immune system. The association between MHC compatibility and graft rejection in transplantation are discussed. Key words: Major histocompatibility complex; immune system; MHC and diseases.

Codificao gentica do MHC Os genes do sistema MHC tm estrutura semelhante e a maioria das seqncias reguladoras esto localizadas no brao curto do cromossomo 6. Pesquisadores identificaram aproximadamente 224 locos genticos com 3.5 megabases de DNA nas regies do MHC. Destes, 180 genes possivelmente so expressos e cerca de 40% deles tem alguma funo no sistema imune. Esta regio foi uma das primeiras multimegabase do genoma humano a ser completamente seqenciada. Alm disso, ela codifica a mais polimrfica das protenas humanas, a classe I e II do MHC, tendo algumas 27 Rev. Med. UCPEL, Pelotas, 2(1): 54-59, Jan.-Jun. 2004

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Acadmico de Medicina da UCPEL Mdica Nefrologista. Professora da Escola de Medicina da Universidade Catlica de Pelotas. Mdico Reumatologista. Presidente da Sociedade de Reumatologia do Rio Grande do Sul. Supervisor de Residncia Mdica no C. S. Murialdo / SSMA Endereo para correspondncia: Pedro Magalhes Rua Baro de Santa Tecla 884, 204B Telefone: 3025 7785 9122 0541 pedroscm@ubbi.com.br

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mais de 200 variaes allicas. Classes de HLA: A regio do MHC humano pode ser dividida em 4 partes, organizando-se como se segue: 1. Genes da classe II do HLA (HLA-DP, HLA-DQ, HLA-DR). 2. Genes da classe I do HLA (HLA-B, HLA-C e HLA-A). 3. Genes das protenas do choque trmico e de algumas citocinas (TNF, LT e LT-B). 4. Genes do complemento (C4 e C2). A regio da classe I contm trs lcus: HLA-A, HLAB, HLA-C, codificando as cadeias pesadas dos antgenos MHC classe I, estendendo-se a mais de 1,5 milho de pares de bases de DNA. Alm disso, certamente, esta regio possui inmeros outros genes que esto envolvidos na codificao de protenas tambm relacionadas ao sistema imune. Os genes da classe II esto situados na regio HLAD, que codifica pelo menos 6 genes de cadeia a e 10 genes de cadeia b. Os trs locos, DR, DQ e DP, codificam os principais produtos da classe II. Outros genes extras j foram identificados, possuindo, alguns deles, funo na imunidade. A expresso dos produtos do gene do MHC , em grande parte, regulada em nvel de transcrio por fatores celulares especficos, como tambm pelos estmulos inflamatrios e imunes incluindo citocinas como, por exemplo, o IFN-gama. Pode-se dizer que o principal determinante da expresso das molculas de MHC na superfcie celular a taxa de transcrio. De modo geral, os genes da classe I so expressos mais largamente, isto , em tipos celulares mais diversos do que os dos genes da classe II. Uma vez que todos os genes do complexo HLA so herdados como uma unidade isolada no cromossomo 6, chamado hapltipo, a probabilidade de dois irmos serem HLA-idnticos de 25% de acordo com as leis de herana de Mendel. O indivduo herda um hapltipo do pai e outro da me, existindo ento um total de 4 diferentes combinaes dos hapltipos dos pais. Sendo assim, um indivduo tem 25% de chance de herdar os mesmos 2 hapltipos como qualquer outro seu irmo; 25% de chance de no herdar nenhum dos hapltipos de seus irmos e 50% de chance de compartilhar pelo menos 1 hapltipo com seus irmos. O extremo polimorfismo do MHC O polimorfismo do MHC existe como conseqncia

da resposta evolucionria dos vertebrados invaso de microorganismos, assegurando assim a continuidade da espcie mesmo na presena de pandemias. Somente alguns indivduos de uma espcie sobrevivem a uma pandemia pelo efeito protetor do polimorfismo gentico do MHC, entretanto isto garante a perpetuao da espcie mesmo que a maioria dos indivduos sucumba doena. Os diversos genes do MHC humano possuem a peculiar caracterstica de serem extremamente polimrficos (grande variabilidade estrutural), como por exemplo o caso do gene HLA-B que possui mais de 150 alelos descritos at os dias atuais. Entretanto, esse polimorfismo no vlido para todos os genes, visto que alguns apresentam um pequeno polimorfismo, como por exemplo o HLA-DPA1, e outros so monomrficos, como no caso do HLA-DRA. Tanto nas molculas da classe I quanto da classe II, o polimorfismo concentra-se na parte superior da molcula, nos resduos de aminocido do assoalho ou nas proximidades das a-hlices no sulco de ligao ao antgeno. Dessa forma, o polimorfismo possui dois objetivos distintos: Os polimorfismos na fenda de ligao determinam a especificidade de ligao do peptdeo. Isto faz com que uma molcula de MHC se ligue somente com alguns poucos peptdeos dentre os muitos disponveis no microambiente celular. Os polimorfismos nas a-hlices tambm servem como marcadores de self para o qual os receptores das clulas de defesa so selecionados. A variabilidade do sistema MHC evoca uma srie de questes de interesse cientfico, relacionadas aos motivos desse incomum polimorfismo, sua evoluo, s funes biolgicas dos diversos genes e seus resultados no sistema imunolgico. Estrutura das molculas do MHC classe 1 e classe 2 Molculas do MHC Classe I As molculas de MHC da classe I contm duas cadeias polipeptdicas separadas: uma cadeia a (pesada), codificada pelo MHC com aproximadamente 44kD e uma cadeia b sem codificao pelo MHC, com 12 kD. A cadeia a formada por um polipeptdeo central contendo um ou dois oligossacardeos. Cada cadeia a orientada de tal modo que cerca de trs quartos do peptdeo completo, incluindo a regio

Figura 1- Mapa molecular do complexo do histocompatibilidade principal humano. Farreras e Rozman Medicina Interna 13ed.

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deias da molcula da classe II so codificadas por dois diferentes genes MHC e, com poucas excees, ambas as cadeias da classe II so polimrficas. As partes extracelulares das cadeias a e b so subdivididas em dois segmentos chamados a1 e a2 ou b1 e b2. A regio de ligao dos peptdeos na molcula de MHC classe II formada pela interao das duas cadeias, mais especificamente entre os segmentos a1 e b1.

Biossntese e funcionamento do complexo peptdeo-MHC As molculas do MHC ligam apenas um peptdeo de cada vez, e todos os peptdeos que se ligam a uma forma allica especfica da molcula do MHC compartilham motivos estruturais comuns. De um modo geral, a ligao de peptdeos antignicos e de molculas MHC uma interao saturvel de baixa atividade (Kd = 10-6 M) com uma velocidade de associao lenta e uma velocidade de dissociao muito lenta, de modo que os complexos, uma vez formados permanecem por um tempo suficientemente longo para serem reconhecidos pelas clulas T. A fenda da molcula de classe I, onde ocorre a ligao dos peptdeos, fechada nas suas extremidades, limitando a ligao dos peptdeos com resduos de at 11 aminocidos de comprimento; enquanto que a das molculas da classe II aberta, permitindo que peptdeos maiores (de at 20 resduos aminocidos) possam se ligar. Os resduos polimrficos das molculas do MHC so localizados no domnio de ligao dos peptdeos. Alguns resduos de MHC polimrficos determinam as especificidades de ligao aos peptdeos pela formao de estruturas complementares (bolsos) que interagem com as peculiaridades conservadas da ligao peptdica. Outros resduos polimrficos do MHC em alguns resduos dos peptdeos no so envolvidos na ligao peptdeo-molcula de MHC, mas, ao invs disso, formam um determinante antignico reconhecido pelas clulas T (restrio MHC). Tanto na classe I quanto na classe II, o processamento dos antgenos consiste na introduo de antgenos proticos nas clulas apresentadoras de antgenos (APCs), na degradao proteoltica dessas protenas em peptdeos, na ligao dos peptdeos s molculas recm-montadas do MHC, e na exposio dos complexos peptdeo-MHC superfcie das APCs para o reconhecimento potencial pelas clulas T. As vias de processamento do antgeno nas APCs utilizam os mecanismos proteolticos celulares bsicos, que tambm operam in-

Figura 2 - Diagrama esquemtico de uma molcula da classe II do MHC. Os diferentes segmentos no so mostrados em escala. A fenda de ligao dos peptdeos mais aberta permitindo a ligao de peptdeos de maior peso molecular (at 20 aminocidos). Farreras e Rozman Medicina Interna 13ed.

aminoterminal e o(s) grupos(s) oligossacardeos, esto externamente clula, e os 30 resduos de aminocidos da poro carboxiterminal esto localizados no citoplasma. A cadeia b interage no covalentemente com a poro extracelular da cadeia a , no tendo assim uma ligao direta com a clula. Podemos dividir a molcula da classe I em quatro domnios: um domnio extracelular aminoterminal de ligao com peptdeos; um domnio extracelular semelhante imunoglobulina; um domnio trans-membrnico; e um domnio citoplasmtico. A cadeia a dividida em a1, a2 e a3. O stio de ligao est entre a1 e a2. O segmento a3 da cadeia pesada e a cadeia b formam um domnio semelhante ao de imunoglobulina na molcula de classe I. Molculas do MHC Classe II As molculas de MHC classe II so formadas por duas cadeias polipeptdicas ligadas no covalentemente. As duas cadeias da classe II so semelhantes entre si, sendo a cadeia a (32 a 34 kD) um pouco maior do que a cadeia b (29 a 32 kD). Nas molculas da classe II, ambas as cadeias polipeptdicas contm grupos oligossacardeos, ambas as cadeias polipeptdicas tendo aminoterminais extracelulares e carboxiterminais intracelulares, e mais de dois teros de cada cadeia esto localizados no espao extracelular. As duas ca-

Figura 3 - Estrutura quaternria da molcula de MHC. Observa-se como a partir dos domnios a1 e a2 se forma uma cavidade para albergar o peptdeo intramolecular. Farreras e Rozman Medicina Interna 13ed.

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dependentemente do sistema imune. Tanto as protenas exgenas como as endgenas so selecionadas por essas vias de processamento do antgeno, e os peptdeos derivados tanto das protenas prprias como das estranhas so exibidos s molculas do MHC para a vigilncia pelos linfcitos T. Basicamente existem 2 vias pelas quais o antgeno pode se ligar molcula do MHC: Pelo MHC de classe I para antgenos endgenos e pelo MHC de classe II para protenas exgenas. Funcionamento das molculas do MHC classe I Antgenos endgenos (protenas virais ou tumorais) iro se ligar ao MHC classe I da seguinte maneira: O proteossomo um complexo multiprotico citoplasmtico que degrada proteoliticamente algumas protenas citoplasmticas. Quando uma protena antignica detectada no interior da clula, os proteossomos iro lisar esta protena gerando peptdeos antignicos que sero liberados no citoplasma e posteriormente transportados para o retculo endoplasmtico (RE). No RE estes peptdeos antignicos iro se associar e se ligar aos dmeros recm-formados da classe I do MHC. A ligao aos peptdeos estabiliza as molculas da classe I do MHC, permitindo que se forme uma vescula que deixar o RE e migrar pelo complexo de Golgi at a membrana celular. Parte do complexo peptdeo-MHC ento exteriorizado permitindo o seu reconhecimento pelas clulas T CD8+ citotxicas. A associao de um antgeno com uma protena MHC I indica que a clula sucumbiu a um patgeno e ser destruda. Funcionamento das molculas do MHC classe II As APCs especializadas, incluindo macrfagos, linfcitos B e clulas dendrticas, interiorizam as protenas extracelulares nos endossomas para processamento pela via da classe II do MHC. Antgenos derivados de patgenos extracelulares, protenas internalizadas por fagocitose e protenas aderidas superfcie imunoglobulnica nas clulas B internalizadas por endocitose so armazenados em um endossomo citoplasmtico. Este endossomo torna-se cido e comea a clivar proteoliticamente as protenas exgenas. Neste momento, no retculo endoplasmtico, os heterodmeros recm-sintetizados da classe II do MHC associam-se cadeia invariante, sendo liberados no interior de um endossomo especializado que transportado pelo complexo de Golgi at a vescula contendo as partculas antignicas. Ocorre ento a fuso dos dois endossomos, a cadeia invariante clivada proteoliticamente e um pequeno remanescente peptdico da cadeia invariante removido da fenda de ligao peptdica das molculas do MHC II. Os peptdeos antignicos se associam molcula do MHC formando o complexo peptdeo-MHC, que migra at a superfcie celular, permitindo seu reconhecimento pelas clulas T CD4+ helper. A associao de um peptdio exgeno com uma protena MHC classe II indica que uma clula encontrou um patgeno e serve como pedido de

auxlio para as clulas T helper. Compatibilidade MHC: transplantes e respostas imunes As tentativas de transplantes remontam antiguidade, porm um grande impulso foi dado a partir da Segunda Guerra Mundial, quando foram realizados vrios transplantes, porm sem sucesso. Isto levou muitos pesquisadores ao estudo do transplante em modelos animais. Pesquisas sobre rejeio de tecidos transplantados entre camundongos de uma mesma linhagem gentica (isognicos) e entre camundongos geneticamente diferentes (alognicos) permitiram aos cientistas a identificao do sistema MHC, e conseqente expanso das tcnicas de preveno a rejeio de tecidos e rgos, revolucionando esta rea da medicina. Os aloantgenos so molculas reconhecidas como estranhas ao organismo derivadas de um rgo ou tecido proveniente de um indivduo geneticamente diferente. A resposta imune para aloantgenos pode ser humoral ou celular, sendo a ltima mais importante para rejeio de rgos transplantados, apesar da contribuio de anticorpos. O reconhecimento de clulas transplantadas como prprias ou estranhas determinado por uma herana de genes co-dominantes. Sabese que o sistema MHC o responsvel por quase todas as rpidas reaes de rejeio ao enxerto. At 2% dos linfcitos T de um hospedeiro so capazes do reconhecimento e resposta a uma nica molcula de MHC estranha. Esse reconhecimento de molculas de MHC estranho uma reao cruzada de um receptor de linfcito T (TCR) normal que foi selecionado com vistas ao reconhecimento do MHC prprio acrescido de um peptdeo estranho. Uma molcula de MHC alognica ligada a um peptdeo pode imitar o reconhecimento de uma molcula de MHC prpria, porm ela reconhecida por muitos tipos de TCRs, cada um selecionado para peptdeos estranhos diferentes. Verifica-se que, provavelmente pela seleo negativa ao nvel do timo, apenas entram na circulao linfcitos T capazes de reconhecer os tipos MHC do prprio (self), dado que as molculas que vo apresentar os antgenos so do mesmo indivduo; por isso a restrio MHC primordialmente ao MHC self. A rejeio hiperaguda caracterizada por uma ocluso trombosante da vasculatura do enxerto. Ela mediada por anticorpos pr-existentes (freqentemente IgM) que se ligam ao endotlio e ativam o complemento. Na clnica mais recente ela foi virtualmente eliminada atravs da utilizao de um teste chamado crossmatch antes do implante do rgo transplantado. A rejeio humoral aguda caracterizada por necrose das clulas individuais dos vasos sangneos do enxerto mediada freqentemente por anticorpos IgG contra aloantgenos das clulas endoteliais e envolve ativao do complemento. A rejeio celular aguda caracterizada por necrose das clulas parenquimatosas, usualmente acompanhada de infiltrado de macrfagos e linfcitos. Os mecanismos efetores podem ser de lise mediada por linfcitos T, macrfagos ativados e clulas NK, sendo mais importante o reconhecimento e a lise por

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Tabela 1: Associao entre MHC e doenas. Relao entre MHC e doenas

Doena Narcolepsia espordica Hemocromatose hereditria Espondilite anquilosante Sndrome de Reiter Doena celaca Alelo do HLA DR2, DQ6 A3 , B14 B27 B27 DR3 DQ2 Sndrome de Goodpasture Pnfigo vulgar DR2 DR4 DR8 Dermatite herpetiforme Deficincia de 21- hidroxilase Uvete anterior aguda Diabetes insulino-dependente DR3 BW47 B27 DR3 / DR4 DR3, DQ8 Hepatite crnica ativa Sndrome de Sjgren primria Artrite reumatide Miastenia gravis Lpus eritematoso sistmico Esclerose mltipla DR3 DR3 DR4 B8 DR3 DR2 Risco Relativo 130 90 87,4 40,1 10 13 > 250 19,8 14 - 21 5-8 18,2 15,0 14,6 14,3 35 - 100 13,9 9,7 5,8 3,3 2,7 2,8 Referncias Bibliogrficas 1. Goldman L, Bennett JC, eds. Cecil Tratado de Medicina Interna 21ed, Rio de Janeiro: Guanabara Koogan S.A, 2001: 1623-1630. 2. Wilson, Braunwald, Isselbacher, Root, eds. Harrison Princpios de Medicina Interna 14ed, Rio de Janeiro: McGraw Hill, 2002: 1939-1949. 3. Roitt IM, Brostoff J, Male D. Imunologia 5ed, So Paulo: Manole, 1999: 8392. 4. Mandel, Douglas, Bennetts. Principles and Practice of Infeccious Disease. 5th ed. Philadelphia: Churchill Livingstone, 2000: 39-49. 5. Parkin J, Cohen B. An overview of the immune system. Lancet 2001;357:17771789. 6. Delves PJ, Roitt IM. The immune system. Part 1. N Engl J Med 2000; 343: 3 49. 7. Adrian V S Hill. Immunogenetics and genomics. Lancet 2001; 357: 20372041. 8. Delves PJ, Roitt IM. The immune system. Part 2. N Engl J Med 2000; 343: 10817. 9. MacKay I, Rosen F. Innate immunity. New Engl J Med 2000; 343:33844. 10. Cyster JG. Chemokines and cell migration in secondary lymphoid tissue. Science 1999; 286: 2098102. 11. Sallusto F, Lenig D, Forster R, Lipp M, Lanzavecchia A. Two subsets of memory T lymphocytes with instinct homing potentials and effector functions. Nature 1999; 401: 70812. 12. Risch NJ. Searching for genetic determinants in the new millennium. Nature Rev. Med. UCPEL, Pelotas, 2(1): 54-59, Jan.-Jun. 2004 31

Em diversos casos, fica claro que variaes nas seqncias proticas do MHC esto ligadas suscetibilidade a doenas. Podemos dividir estas doenas nas seguintes categorias: (1) doenas inflamatrias, tais como a espondilite anquilosante e vrias outras artropatias ps-infecciosas, todas associadas ao HLA-B27; (2) erros inatos do metabolismo, como a deficincia de 21-hidroxilase; e (3) doenas de etiologia auto-imune como a Diabetes Mellitus insulino-dependente, esclerose mltipla, lupus eritematoso sistmico, miastenia gravis e artrite reumatide. O sistema MHC possui ainda diversos genes que contribuem para muitas outras doenas de carter hereditrio em que o mecanismo da auto-imunidade ainda incerto.

Concluso A medicina uma cincia em constante evoluo e renovao. Novas pesquisas relacionadas gentica, aliadas a crescente experincia clinica, expandem continuamente os horizontes do conhecimento sobre o sistema imunolgico. A publicao de revises auxilia na atualizao dos profissionais da sade, aprimorando o seu conhecimento sobre a fisiopatologia de diversas doenas e com isso otimizando os esforos teraputicos. O presente artigo certamente no busca esgotar o assunto, em funo de sua alta complexidade e contedo extenso, mas pretende propiciar uma viso geral do funcionamento do sistema MHC e de suas implicaes atuais e futuras no reconhecimento, tratamento e prognstico de um nmero crescente de patologias relacionadas ao sistema imunolgico.

Obs: O risco relativo refere-se a quantas vezes maior a chance de um indivduo portador do gene de desenvolver uma doena em relao queles que no possuem a codificao gentica.

linfcitos T CD8+ alorreativos. A rejeio crnica caracterizada por fibrose com perda das estruturas normais do rgo. A fibrose pode apresentar a cicatrizao da ferida, que segue com morte celular da rejeio aguda. Duas outras explicaes possveis da fibrose so: a rejeio crnica ativa macrfagos que secretam fatores de crescimento de clulas mesenquimatosas ou a rejeio crnica uma resposta isquemia crnica causada pela injria dos vasos sangneos. Se o receptor possui um sistema imune completamente funcional, quase que invariavelmente a transplantao resultar em alguma forma de rejeio. Para se evitar ou retardla podemos tornar o enxerto menos imunognico, diminuindo as diferenas aloantignicas entre o doador e receptor por seleo. Outra forma suprimir o sistema imune atravs de exposio de aloantgenos por transfuso sangnea.

MHC - PSC Magalhes et al 2000 13. Thursz M, Yallop R, Goldin R, Trepo C, Thomas HC. Influence of MHC class II genotype on outcome of infection with hepatitis C virus. Lancet 1999; 354: 211924. 14. Farreras e Rozman. Medicina interna. 14th ed. St. Louis: Mosby, 2000: 27052710. 15. Bradbury J. Human major histocompatibility complex sequenced. Lancet 1999; 354:1531.

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