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AVANCES DE LA INVESTIGACION EN STEVIA EN COLOMBIA

ALFREDO JARMA OROZCO


I.A. M.Sc. Ph.D. FISIOLOGIA DE CULTIVOS

IV SIMPOSIO INTERNACIONAL DE LA STEVIA Kaa He 12 y 13 de Marzo de 2009 Asuncin, Paraguay

COLOMBIA EN EL MUNDO
1230 LN

413 LS

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COMO LLEG STEVIA AL PAS ???


1995: SAA convenio JAIDO / MORITA COMPANY

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COMO INICIAMOS LA INVESTIGACION ???


1995: SAA (Adaptacin M1 y M2) 2001: UNICORDOBA (Anacre)

AMBIENTE

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LUZ

PRODUCCION VEGETAL
PLAGAS ENFERMEDADES MAMIFEROS

TEMPERATURA AGUA NUTRIENTES CO2

ALTITUD GENETICA HOMBRE LATITUD SUELOS

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PeroComo evaluamos ese efecto del ambiente???

PRODUCCION VEGETAL
Y=QxIxxH

CRECIMIENTO Y DESARROLLO
(TAC, TRC, TAN, IAF, AFE, IC, RA/St...etc)

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PRODUCCION VEGETAL Y=QxIxxH

900 W m-2 s-1

FOTOSINTESIS RESPIRACION - FOTORRESPIRACION

400-500 Wm-2s-1

INDICE COSECHA

2000-3000 mol m-2 s-1

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YANTE LA OFERTA AMBIENTAL DE COLOMBIA..COMO CRECE STEVIA???


TAC = (W2-W1) / (t2-t1)

TRC = (lnW2-lnW1) / (t2-t1)


0.18 0.16 0.14

TRC ( g .g -1 .d a -1 )

0.12 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 - 0.02 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 Semanas

BIOMASA

BIOMASA

Perennes

Ambiente (+)

normal

Anuales

Ambiente (-)

TIEMPO

Semi perenness (Stevia)

TIEMPO

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OFERTA AMBIENTAL DE COLOMBIA


Ener o Febrero Marzo Abril Mayo Junio

BRILLO SOLAR
Julio Agosto Septiembre Octubre Noviembre Diciembre

Enero

Mayo Febrero Marzo Abril

Junio

DISPONIBILIDAD HIDRICA
Julio Agosto Sept. Octubre Noviembre Dic.

Y..SUELOS, TEMPERATURAS, NUTRICION, ETC ???


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INCIDEN ENTONCES LOS FACTORES AMBIENTALES Y EL MANEJO AGRONOMICO, EN LA CALIDAD DE LA HOJA DE LA STEVIA SEMBRADA EN COLOMBIA ??? PODEMOS SER COMPETITIVOS ???
LOCALIDAD INDIA (10 localidades) AUSTRALIA (Tecnologia NIR) BRASIL (cv UEM-320) BRASIL (SFE: 16oC-250 bar ) BRASIL (Merck Cruza III) PARAGUAY (Criolla prom 3 cortes) PARAGUAY (Eirete prom 3 cortes) COLOMBIA (V. del Cauca - M2) COLOMBIA (Meta - M2) COLOMBIA (Huila - M2) COLOMBIA (Antioquia - M2) RA (%) 1,71 St (%) 5,08 RELACION RA / St 0,33 (3,03 St) 0,40 (2,46 St) 0,91 (1,10 St) 0,78 (1,28 St) 1,32 (0,75 St) 0,36 (2,77 St) 1,24 (0,80 St) 2,86 (0,35 St) 5,85 (0,17 St) 5,11 (0,19 St) 2,76 (0,36 St) AUTOR / AO
Vikas, et al., 2008

FUENTE
Validated high-performance thin-layer chromatography method for steviol glycosides in Stevia rebaudiana. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 47: 790794. Determining levels of steviol glycosides in the leaves of Stevia rebaudiana by near infrared reflectance spectroscopy. Journal of Food Composition and Analysis. doi:10.1016/j.jfca.2008.10.008 Sweet diterpenic glycosides balance of a new cultivar of Stevia rebaudiana (Bert.) Bertoni: Isolation and quantitative distribution by chromatographic, spectroscopic, and electrophoretic methods. Process Biochemistry 40: 3587 3594 Supercritical fluid extraction from Stevia rebaudiana Bertoni using CO2 and CO2 + water: extraction kinetics and identification of extracted components. Journal of Food Engineering 57: 125134 III Simposio Internacional de la Stevia. Asuncin Paraguay. 15 y 16 de Noviembre de 2007 Recomendaciones tcnicas para la produccin sustentable del Kaa Hee (Stevia rebaudiana) Bertoni en el Paraguay. Manual No. 8. MAG-DIA-IAN-NL STEVIA. p. 43. Recomendaciones tcnicas para la produccin sustentable del Kaa Hee (Stevia rebaudiana) Bertoni en el Paraguay. Manual No. 8. MAG-DIA-IAN-NL STEVIA. p. 43. Datos sin publicar. Agroindustrias de la Stevia.

2,08

5,12

Hearn y Subedi, 2008

8,59

9,50

Dacome, et al., 2005

14,20

18,20

Yoda, et al., 2003

4,32 2,30 6,66 10,98 13,81 12,63 9,91

3,26 6,33 5,33 3,83 2,36 2,47 3,58

Campos, R. 2007

Casaccia y lvarez, 2008

Casaccia y lvarez, 2008

Guerrero, 2008

Caicedo, 2008

Datos sin publicar. Agro Stevia International Ltda.

2008

Datos sin publicar. Huila.

2008

Datos sin publicar. Antioquia.

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COMPARATIVO (%) DEL CONTENIDO DE STEVISIDOS Y REBAUDISIDO A EN TRES PAISES DE SURAMERICA

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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia
PROPAGACION Semilla sexual Semilla asexual Propagacin in vitro MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula

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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia
(Caraballo y Jarma, 2006)

PROPAGACION Semilla sexual Semilla asexual Propagacin in vitro


(Caraballo y Jarma, 2006)

Experimento: [ 3 AUXINA ] + To Altura (cm) Nmero hojas rea foliar (cm2) Masa seca hojas, tallos , races (g) TAC, TRC, TAN RAF
Biomasa hojas
0,20 0,15 0,10 0,05 0,00 18 24 30

Experimentos [GA3 ] Temperaturas (oC) Luz (longitud onda) Estratificacin (frio)

Nmero de races a
Nmero de races 20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 a a a a b a

0,25

g/pl

a a b

a b

18

24

30

Ddt Morita 1 Morita 2

Ddt

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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

PROPAGACION Semilla sexual Semilla asexual Propagacin in vitro


1. Induccin y multiplicacin de callos
(Surez y Salgado, 2008) (Surez y Salgado, 2008)

Hormonas Auxinas (ANA) Citoquininas (BAP)


CALLOS

Mg.l-1 0, 0.5 y 1.0 0, 0.5, 1.0, 2.0 y 4.0


RAICES

TALLOS

MEDIO CULTIVO: MS SUPLEMENTADO (mg.l-1): sacarosa (30,000) myo-inositol (100) tiamina HCl (0.4) TC-agar (Sigma). pH: 5.7-5.8 (previo a adicin del agar) ESTERILIZADO: 121 y 1.1 kg.cm -2 (15 min) C
(Caro, 2008)

MEDIO CULTIVO: MS SUPLEMENTADO: Vitaminas Morel Vitaminas Tiamina


Formacin callos (%)

ml 50 50 50 50 5000 0,5

cido nicotnico (cido pyridin 3-carboxlico) Pyridoxina D-Pantotenato de Ca Myo-Inositol D-Biotina


BAP (mg.l-1)

2. Regeneracin de plantas
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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF

(Vergara y Jarma, 2005)

Biomasa hoja / planta 20 15 10 5 0 L F Tipo suelo P


g

M1 M2

(Jarma, 2008)
2000 1800 1600 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 M1 250000 M2 M1 125000 M2 M1 62500 M2

1400 Kg HS / ha (prim er corte) 1350 1300 1250 1200 1150 M1 GENOTIPOS M2

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Kg HS / ha (prim er corte)

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MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF
VARIABLES DIRECTAS / INDIRECTAS
rea foliar (cm2) Masa seca de hojas (g) Masa seca de tallo (g) Masa seca Total (g) Altura de planta (cm) Numero de hojas Numero de ramas Longitud de la hoja (cm) Ancho de la hoja (cm) TAC (g.dia-1) TRC (g.g-1.dia-1) TAN (g.cm-2.dia-1) AFE (cm2.g-1) RAF (cm2.g-1) IC
(Rengifo y Jarma, 2005)

19% 56% 24%

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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos


g/planta
30 25 20 15 10 5 0 30 45 60 75 90 105120 135 150 165180195 210 225240255
3000 2500

TASA ABSOLUTA DE CRECIMIENTO

Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas

AREA FOLIAR

cm2 /planta

Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF

2000 1500 1000 500 0 30 45 60 75 90 105 120 135 150 165 180 195 210 225 240 255

30 25 20

BIOMASA HOJAS

g./planta
1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 30 45 60 90 120

15 10 5 0

ndice de Cosecha

30

45

60

75

90

105

120

135

150

165

180

195

210

225

240

255

Das Despes del Transplante M1-19% M1-56% M2-19% M2-56% M1-24% M1-100% M2-24% M2-100%

Das Despus del transplante IV SIMPOSIO INTERNACIONAL DE LA STEVIA Kaa He


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135 150 180 DE LA INVESTIGACION AVANCES 195 210 225 240 255

EN STEVIA EN COLOMBIA

Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF
(Borda y Pardo, 2008)

(Galvn y Guzmn, 2005)

Masa seca plantas (g.pl-1)

BIOFERTILIZANTES
Masa seca hojas (g.pl-1)

Control T1: 15 ton T2: 30 ton

T3: 15 ton + Azotobacter T4: 30 ton + Azotobacter T5: Azotobacter


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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF
FUSARIUM

(Campo, 2008)

SCLEROTIUM

CURVULARIA

CHOANEPHORA

(Mercado, 2006)

SEPTORIA

PHOMA

219,5 mm (65 das)

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MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF

(Guerrero, 2008)

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MANEJO AGRONMICO Fsica de suelos Poblaciones Radiacin Nutricin (Quim/Org) Riego Enfermedades fngicas Uso de coberturas Requerimientos UC Coeficiente AF
1 + | | | 0.9 + | | | 0.8 + | | | 0.7 + | | | 0.6 + | | | 0.5 + | | | 0.4 + | | | 0.3 + | | | 0.2 + | | | 0.1 + Radiacion

(Montoya, 2008)

FC Morita 1: 0.8273 FC Morita 2: 0.5976


(Rengifo y Jarma, 2005)

| | | | | | +-----+ | | | | | | | + | *-----* | | +-----+ | | | | |

| | | | | | | | | +-----+ | | | | | + | *-----* | | +-----+ | | | | |

| | | | | | +-----+ | | | | *--+--* | | +-----+ | | | | |

0 0 | | | | | | | +-----+ | | | + | *-----* | | +-----+ | | | |

0 0 0

------------+-----------+-----------+-----------+----------19 24 56 100

Factor de Correccin estimado (FC) C.V.

0.5401 23.94

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Algunos resultados de la investigacin cientfica en aspectos de cultivo de Stevia rebaudiana Bert. en Colombia

COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula
(De Paula, 2003)

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Estamos trabajando duro para identificar esos factores

COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula
CH OPP 2 Acetil CoA Acetoacetil CoA

(Jarma, 2008)

cido mevalnico (MVA) Fosforila ATP y Mg+ Descarboxila

Dimetilalil Pirofosfato (DMAPP) Isomerizacin reversible CH OPP 2 Isopentenil Pirofosfato (IPP) Condensacin Geranil Pirofosfato (GPP)

Geranilgeranil Pirofosfato (GGPP)

Farsenil Pirofosfato (FPP) Dimerizacin

Sesquiterpenos (C15) Dimerizacin Tetraterpenos (carotenoides) (C40)


PPi

Triterpenos (C30) (Esteroles / brasinoesteroides)

Monoterpenos (C10)

COFACTORES GPP sintasa FPP sintasa GGPP sintasa Mg2+ o Mn2+ Mg2+ Mn2+

Intermediario dcclico

Copalil pirofosfato (CPP)

H Dipertenos cclicos (Kaurenoides) (C20) ent-kaurenol H ent - kaureno


Diterpeno tetracclico

Dipertenos lineales (C20)

ent-kaurenal

CPP sintasa (Brandle, 2005) Kaureno sintetasa

Acido ent - 7 --hidroxi - kaurenoico

Acido ent - kaurenoico

kaurenlidos H

Esteviol

CHO COOH GA - aldehdo


12

Giberelinas

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COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula
GLUCOLISIS

SINTESIS GIB:

LUZ FOTOPERIODO TEMPERATURAS AUXINAS

Modelo de la ruta de biosntesis de los glucsidos de steviol. Se muestra la ubicacin sub-celular de los componentes en la ruta. Brandle, 2007
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COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula SINTESIS GIB: LUZ FOTOPERIODO TEMPERATURAS AUXINAS

Distribucin del promedio anual de la irradiacin solar global diaria sobre un plano horizontal en Amrica del Sur (MJ/m2 da) basada en determinaciones de superficie. (Grossi, 2008) AVANCES DE LA INVESTIGACION EN STEVIA EN COLOMBIA
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COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula
DIAS LARGOS: > Longitud entrenudos, AF, MS < intervalo aparicin pares hojas > [azcares solubles abs y rel], prot y St > 45% aglicona presente estevisidos
Metiver y Viana. 1979. The Effect of Long and Short Day Length upon the Growth of Whole Plants and the Level of Soluble Proteins, Sugars, and Stevioside in Leaves of Stevia rebaudiana Bert. Journals of Exprimental Botany. Vol 30. No. 6. p. 1211-1222

SINTESIS GIB:

LUZ FOTOPERIODO (RFA: molesCO2.m-2.s-1) TEMPERATURAS AUXINAS

IPP: La emisin de isopreno depende fuertemente de la PAR. Se ha observado que a bajos niveles de luz la emisin de isopreno es baja
Guenther A., Zimmerman P. y Wildermuth M. 1994. Natural Volatile Organic Compound Emission Rate Estimates for U.S. Woodland Landscapes. Atmospheric Environment, 28, 6, 11971210 AVANCES DE LA INVESTIGACION EN STEVIA EN COLOMBIA
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COSECHA Y POSCOSECHA Podas de formacin Podas de cosecha Tcnicas de secado Nctares y mermeladas Biosntesis molcula SINTESIS GIB: LUZ FOTOPERIODO TEMPERATURAS AUXINAS

Temperatura alta

Temperatura baja

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PERO..EL AMBIENTE EST CAMBIANDO VERDADERAMENTE ???

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VENTAJAS No estacionalidad Cultivo todo el ao Oferta ambiental Luz Suelos Agua Rendimientos Calidad RA Gremio (cadenas) Compromiso DISPOSICION

DESVENTAJAS Iniciando conocimiento Plagas Enfermedades Req. Hdricos Base gentica Apoyo investigaciones Decisiones empricas

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Esto es lo que Somos los Colombianos: la gente es nuestro mayor patrimonio.

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PRIMER CONGRESO COLOMBIANO Y FERIA AGROINDUSTRIAL DE LA STEVIA


CALI COLOMBIA, OCTUBRE 22 Y 23 DE 2009

INVITA:

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GRACIAS
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