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7, 1623-1627, 2007 CARACTERIZAO FSICA, QUMICA E ECOTOXICOLGICA DE EFLUENTE DA INDSTRIA DE FABRICAO DE EXPLOSIVOS Marcio Barreto-Rodrigues* Coordenao de Qumica, Universidade Tecnolgica Federal do Paran, Via do Conhecimento, km 01, 85501-970 Pato Branco PR, Brasil Flavio Teixeira da Silva e Teresa Cristina Brazil de Paiva Escola de Engenharia de Lorena, Universidade de So Paulo, Estrada Municipal do Campinho, s/n, 12602-810 Lorena SP, Brasil Recebido em 21/8/06; aceito em 30/3/07; publicado na web em 6/8/07

PHYSICAL, CHEMICAL AND ECOTOXICOLOGICAL CHARACTERIZATION OF AN EFFLUENT FROM AN EXPLOSIVES INDUSTRY. The production and use of nitroaromatic explosives have resulted in their dissemination into the environment, where their presence in waterways and soil represents an ecological and health hazard. The hazardous characteristics of these compounds need to be carefully studied, so that the impact of their discharge on the environment can be better evaluated. This work presents the characterization of wastewater from Brazilian TNT industry using as analytical techniques mass spectroscopy, chromatography, toxicity assays and other physico-chemical analyses. Keywords: 2,4,6-trinitrotoluene; mass spectroscopy; toxicity.

INTRODUO A produo, o teste e o uso de explosivos, fundamentados quimicamente em compostos nitroaromticos, vm desde o sculo XIX contaminando solos e guas1-3. No comeo do sculo XX, pesquisadores j tinham desenvolvido mais de 60 novos compostos explosivos4, a maioria compostos nitroaromticos, muitas vezes nitroaromticos polissubstitudos, como o 2,4,6 trinitrotolueno (TNT), que h muito tempo vem dominando o mercado mundial de explosivos. A Figura 1 ilustra alguns compostos nitroaromticos mais comuns.

A principal fonte de contaminao por compostos nitroaromticos est associada aos processos industriais. A descarga de rejeitos gerados durante a manufatura e o processamento, bem como o nvel de contaminao causado, variam amplamente, dependendo da intensidade das operaes de manufatura e da eficcia das tecnologias empregadas no tratamento dos resduos3,9,10. Na remediao de efluentes contendo compostos nitroaromticos, a biorecalcitrncia de seus constituintes torna os procedimentos convencionais de tratamento (biolgicos) praticamente inviveis. Desta forma, o procedimento universalmente adotado a incinerao, de utilizao discutvel, devido a sua natureza poluidora, pois emite gases como CO2, SO2 e NOx11,12. Apesar de sua eficincia e rapidez, a incinerao possui outras desvantagens, como alto custo de manuteno e operao, vazamentos, riscos constantes de acidente de trabalho e o no atendimento aos parmetros legais para emisses gasosas, que tm justificado o estudo de novas propostas3,6,7,12. A produo industrial de TNT e seus efluentes A produo, estocagem e disposio de TNT nas instalaes militares iniciou-se antes da I Guerra Mundial, embora a grande maioria destas instalaes tenha aumentado e intensificado suas atividades durante a II Guerra Mundial1-7. Na Alemanha e nos EUA h um grande nmero de locais altamente contaminados por explosivos e munies em geral9. No Brasil, a maior quantidade de explosivos produzida pelo exrcito13. De maneira geral, a produo e/ou o beneficiamento destes materiais est relacionado com os setores de produes de equipamentos militares e munies, o qual contribui com cerca de 1% da produo na indstria da transformao13-15. A Figura 2 ilustra a localizao das principais produes de materiais blicos e compostos nitroaromticos explosivos no Brasil, com destaque para o estado do Paran e o Vale do Paraba em So Paulo, que mantm a nica fbrica produtora de TNT da Amrica Latina14,15. A produo do mais importante explosivo nitroaromtico, o 2,4,6trinitrotolueno (TNT), ocorre atravs da nitrao seqencial do tolueno que, normalmente, ocorre em trs estgios, atravs da mistura de ci-

Figura 1. Estruturas qumicas representativas de explosivos fundamentados em compostos nitroaromticos polissubstitudos

A maioria txica e mutagnica, sendo seus produtos de degradao (arilaminas, aril-hidroxilaminas, produtos condensados como azoxil e azo-compostos) ainda mais txicos que seus congneres nitroaromticos3,5-7. A Agncia de Proteo Ambiental Americana (EPA) considera estes compostos como poluentes prioritrios, de elevado potencial impactante e atribui limites mximos permissveis de 0,1 g L-1 de TNT em guas e 33 mg kg-1 em solos8.
*e-mail: marciorodrigues@utfpr.edu.br

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trinitrotolueno (TNT) foi cedido pela Indstria de Materiais Blicos do Brasil (IMBEL). Outros reagentes (cidos, bases, sais e solventes) foram de grau analtico (PA). O efluente Neste trabalho foi estudado o efluente denominado gua amarela (AA), gerado na primeira etapa do processo de purificao de trinitrotolueno (TNT). Os efluentes foram cedidos por uma indstria de explosivos situada no Vale do Paraba, estado de So Paulo. Nos ensaios de caracterizao, a correo do pH do efluente foi realizada utilizando-se NaOH 6 mol L-1, cujos volumes adicionados foram considerados para correes em termos de diluio do efluente. Mtodos de caracterizao fsica, qumica e ecotoxicolgica Para dimensionamento do potencial poluente do efluente em estudo, foi realizada sua caracterizao, segundo os seguintes parmetros: Determinao de slidos totais dos ntrico e sulfrico. A Tabela 1 ilustra as propores utilizadas destes cidos pelo processo clssico, desenvolvido na Frana11,16. Tabela 1. Propores de cidos ntrico e sulfrico utilizadas durante a produo de TNT pelo processo clssico 1 Estgio HNO3 (%) H2SO4 (%) H2O (%) 28 56 16 2 Estgio 32 61 7 3 Estgio 49 49 2 Por definio, slidos suspensos so todos os slidos sedimentveis e flutuantes presentes no efluente. Na prtica, os slidos suspensos foram aqueles passveis de serem retidos por filtrao em filtro base de fibra de vidro e posteriormente secos a 103-105 C18 at peso constante17. Determinao de slidos dissolvidos totais Para a determinao do teor de slidos dissolvidos totais, 100 mL do filtrado gerado na determinao de slidos suspensos foram adicionados em um balo de fundo redondo, concentrado a vcuo em rotavapor e seco em estufa at massa constante, 103-105 C17. Determinao de sulfatos A determinao de SO4-2 foi realizada atravs de metodologia turbidimtrica18. O mtodo baseia-se na precipitao seletiva de sulfato na forma de BaSO4, seguida de sua quantificao pela medida da opacidade tica em 420 nm. Determinao de nitratos A determinao foi realizada de acordo com mtodo padro18. Foi utilizado um eletrodo de on seletivo para nitrato, marca Quimis, modelo QA838, com sensibilidade de 0,5 a 1500 mg NO3- L-1. Determinao de nitrognio orgnico Reagentes e solventes utilizados Metanol (Quimex), BaSO 4 (Reagen), K 2Cr 2O 4 (Nuclear), reagente Folin-Ciocalteu (Merck), AgSO4 (Reagen), polietileno glicol (Merck), etileno glicol (Merck) e acetato de etila (Quimex) foram utilizados sem nenhum tratamento prvio. O padro de 2,4,6Utilizou-se o mtodo de Kjeldahl (micro-Kjeldhal) para determinao do nitrognio orgnico presente no efluente AA18. Este mtodo baseia-se na determinao do nitrognio da amostra, atravs da digesto com cido sulfrico concentrado e posterior destilao da amnia, a qual fixada em soluo cida e titulada. Para a determinao do teor de slidos totais, uma amostra de 100 mL do efluente, previamente neutralizada com NaOH 6 mol L-1, foi adicionada em um balo de fundo redondo, concentrada a vcuo em rotavapor e seca em estufa at massa constante, 103-105 oC18. Determinao de slidos suspensos

Figura 2. Principais fontes de produo e beneficiamento de explosivos nitroaromticos no Brasil (localizao aproximada)

Aps o 3 estgio, que corresponde produo do composto trinitrado, h a formao de uma variedade de subprodutos, como cinzas ou resduos minerais, proveniente dos cidos sulfrico e ntrico; ismeros assimtricos 2,3,4 (); 2,4,5 () e 2,3,6 (); produtos de oxidao lateral como nitrofenis, cido trinitrobenzico e tetranitrometano; produtos de oxidao do benzeno e xileno, os quais normalmente so impurezas encontradas no tolueno16,17. A maior parte das impurezas removida por processos de lavagem realizado com gua e, posteriormente, com soluo de sulfito de sdio, gerando dois tipos de efluentes denominados gua amarela (AA) e gua vermelha (AV), yellow water, red water ou pink water, respectivamente3,8. Os antecedentes bibliogrficos e outras informaes referentes a estes efluentes so escassos e muitas vezes limitados pelas prprias instituies que os produzem ou fiscalizam, o que tem dificultado as pesquisas de monitoramento ambiental e o desenvolvimento de tecnologias apropriadas para a remediao destes efluentes. Neste trabalho, foram analisados parmetros de relevncia ambiental em um efluente industrial oriundo de uma indstria de produo de 2,4,6-trinitrotolueno. PARTE EXPERIMENTAL

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Determinao de fenis totais A concentrao de fenis totais foi determinada colorimetricamente conforme o procedimento padro de FolinCiocalteus18. O princpio do mtodo a reao entre o reagente de Folin-Ciocalteus e fenis, com subseqente oxidao dos fenis e formao de um complexo azul. Determinao da demanda qumica de oxignio (DQO) As determinaes foram feitas de acordo com o procedimento padro adaptado18. Em ampolas de vidro (volume de 20 mL; dimetro 2,3 cm) foram adicionados 2,5 mL de amostra, 1,5 mL de soluo digestora (preparada com 10,12 g de dicromato de potssio; 33,3 g de sulfato de mercrio II; 167 mL de H2SO4, completados para 1000 mL com gua destilada) e 3,5 mL de soluo cataltica (preparada na proporo de 5,5 g de AgSO4 kg-1de H2SO4 concentrado). Em seguida, as ampolas foram seladas com maarico e acondicionadas em estufa a 150 oC por 2 h. Aps esfriar, com a amostra ainda na ampola selada, foi realizada leitura de absortividade, no comprimento de onda de 600 nm, em um espectrofotmetro U-2000 Hitachi adaptado. A concentrao da demanda de O2 da amostra, em mg L-1, foi obtida pela interpolao dos dados obtidos de uma curva de calibrao que utilizou biftalato de potssio como padro. Determinao de demanda bioqumica de oxignio (DBO) A quantidade de matria orgnica biodegradvel na amostra foi determinada pela diferena de concentrao de oxignio dissolvido, antes (ODi) e aps a incubao por 5 dias (ODf) das amostras a 20 1 C, ao abrigo da luz. As determinaes foram feitas de acordo com o procedimento descrito na NBR 12614/199219. Determinao da distribuio de massa molar por CETAE A distribuio da massa molar dos compostos presentes no efluente foi determinada por cromatografia de excluso por tamanho de alta eficincia (CETAE), usando-se uma coluna Ohpak SB803 HQ. O volume da amostra (20 mL) foi eludo com gua a uma vazo de 1,0 mL min-1 por 20 min. Os padres para calibrao da coluna foram etilenoglicol (62 g mol-1) e polmeros de polietilenoglicol de massas molares conhecidas (300, 4000 e 35000 g mol-1). Os padres foram aplicados na coluna nas mesmas condies da amostra. Os compostos foram detectados no detector UV Shimadzu RID-6A (x = 254 e 290 nm). A determinao das massas molares dos componentes do efluente em estudo foi realizada atravs de interpolao dos tempos de reteno dos picos obtidos em curva de calibrao convenientemente preparada. Cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas O procedimento experimental foi efetuado de acordo com modificao da metodologia descrita por Keum e Li20. Os compostos foram extrados de uma alquota de 100 mL de efluente com 3x25 mL de acetato de etila, em 3 extraes sucessivas. Os compostos foram analisados em cromatgrafo gasoso Varian CP-3800 acoplado a um detector de massa Saturno 2000 ion trap MS, faixa de aquisio: 50-250 u; energia de ionizao: 70 eV; modo de aquisio normal (impacto de eltrons; transferline coluna/MS a 200 C; on trap 170 C. A programao de temperatura foi: 50 C, 1 min, 10 C/min at 120 C; 3 C/ min at 200 C, temperatura do injetor de 250 C, split 1:25. A coluna utilizada foi a capilar Chrompack WCOT CP-Sil 8 LB/MS, dimenses: 30 m x 0,25 mm; espessura de filme: 0,25 m.

Bioensaio com Escherichia coli O mtodo estabelece a toxicidade aguda do efluente para Escherichia coli atravs da inibio do crescimento celular da bactria, medido pela opacidade tica em 600 nm. O procedimento experimental foi efetuado de acordo com modificao da metodologia descrita por Jardim et al.21. Bioensaio com Selenastrum capricornutum O mtodo estabelece a toxicidade crnica do efluente para Selenastrum capricornutum atravs da inibio do crescimento das algas, medida via absorbncia a 680 nm. O procedimento experimental foi efetuado de acordo com a metodologia descrita por Reginatto22. RESULTADOS E DISCUSSO A caracterizao do efluente foi realizada seguindo duas frentes: a primeira para elucidar o perfil qumico preponderante e a segunda para relacionar seus aspectos gerais e complementares. Na primeira etapa, foram realizados os ensaios espectroscpicos e na segunda os ensaios fsico, qumicos e ecotoxicolgicos. A distribuio de massa molar dos componentes do efluente AA foi determinada atravs de cromatografia de excluso, com deteco UV em 254 nm. O cromatograma obtido est apresentado na Figura 3.

Figura 3. Cromatograma de distribuio molar do efluente oriundo do processo de beneficiamento de TNT (Efluente AA)

Pode-se observar, na Figura 3, um pico com tempo de reteno de 10,3 min, o qual, aps interpolao com curva padro, resultou em uma massa molar 220 g mol-1, cuja frao molar corresponde a 98% da rea total do cromatograma. importante salientar que esta massa molar corrobora com a do composto trinitrado, provavelmente o TNT simtrico, uma vez que as formas assimtricas possuem menor solubilidade em gua4. Observou-se, ainda, uma contribuio relativamente menor (<2%) para um composto de alta massa molar (4630 g mol-1) em tempo de reteno de 7,9 min. Com o intuito de caracterizar a frao molar monodispersa, observada no cromatograma de distribuio dos componentes presentes no efluente AA, e confirmar a presena de TNT e/ou ismeros assimtricos, realizaram-se ensaios de cromatografia gasosa acoplada espectrometria de massas. O espectro de massas e o cromatograma relativo a esta anlise esto ilustrados na Figura 4. Observa-se claramente no cromatograma (Figura 4), em um tempo de reteno de 24 min, a presena de um agrupamento de trs picos caractersticos. Dentre estes, o pico central foi atribudo ao TNT, pela observao do pico do on molecular (relao massa/

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Tabela 2. Composio fsica e qumica do efluente AA Slidos totais Slidos suspensos totais Slidos dissolvidos totais SO4-2 NO3TNT (solvel) Nitrognio orgnico Kjheldal Fenis totais pH DQO (solvel) DBO (solvel) 14314 60 mg L-1 1110 60 mg L-1 13260 60 mg L-1 5,9 0,5 g L-1 7,17 0,5 g L-1 156 10 mg L-1 83,9 0,9 mgN L-1 9,8 0,44 mg L-1 1,0 0,03 638 12 mg O L-1 11 mg O L-1

Figura 4. Cromatograma obtido por cromatografia gasosa do efluente AA e espectro de massas relativo ao composto identificado (Tr=24 min)

carga = 210), e pela observao de fragmentos inicos comuns e alguns fragmentos eliminados (Figura 5).

Figura 5. Fragmentos inicos tpicos e algumas eliminaes propostas para o TNT identificado no efluente AA por CG/MS

Os picos adjacentes foram associados a hidrocarbonetos alifticos (ftalatos), sendo suas presenas atribudas ao fato do efluente ter sido armazenado em frascos de polietileno. Os parmetros fsicos e qumicos da Tabela 2 ilustram o aspecto geral e complementar do efluente. Observou-se que o efluente AA foi constitudo de uma quantidade significativa de slidos totais (14314 60 mg L-1), em cuja composio os componentes caracterizados que mais contriburam foram: os sais dissolvidos dos cidos utilizados (SO4-2 e NO3-) durante o processo (91%); o material sedimentvel (cristais de TNT) (8%) e o material orgnico nitrogenado (1%), o qual foi atribudo ao prprio TNT e possveis ismeros presentes no efluente. Considerando a solubilidade do TNT a temperatura ambiente (25 C) de 130 mg L-1 e a constante precipitao do composto com a reduo de temperatura16, podemos concluir que o efluente se trata de uma soluo saturada do composto, uma vez que foi quantificado, via anlise cromatogrfica, 156 10 mg L-1. Atribumos a este TNT

dissolvido a colorao amarelada apresentada pelo efluente. importante ressaltar que as legislaes brasileira (CONAMA 357/2005) e europia (74/440/CEE) no estabelecem restries para TNT ou compostos nitroaromticos especificamente. Por outro lado, a Agncia de Proteo Ambiental Americana (EPA) admite nveis mximos de 0,06 mg L-1 de TNT em guas para fins potveis8,24,25. A presena de fenis totais foi atribuda a possveis contaminantes presentes na matria-prima e/ou oxidaes do material de partida. O pH fortemente cido do efluente foi atribudo solubilizao, durante a lavagem, de resduos de cidos minerais de H2SO4 e HNO3 adsorvidos ao produto. Esta caracterstica um fator preocupante, uma vez que poderia causar inmeros prejuzos a qualquer tipo de corpo receptor, alm de necessitar de grandes quantidades de lcali para a neutralidade necessria para muitos tipos de processos de remediao, o que elevaria significativamente os custos destes processos. Observou-se, ainda, que o efluente apresentou uma carga orgnica degradvel quimicamente considervel (638 12 mg O2 L-1) e uma frao orgnica biodegradvel reduzida (11 mg O2 L-1). Neste contexto, apesar da DBO apresentada estar dentro dos limites permitidos pela legislao vigente24,25, a qual estabelece 60 mg O2 L-1, consideramos um fator preocupante, por poder estar relacionado com a toxicidade e/ou biorecalcitrncia do efluente em questo. Por outro lado, para este tipo especfico de efluente, a metodologia de determinao de DBO5 tem a sua utilizao discutida, por no ser um mtodo aplicvel a qualquer tipo de efluente. No caso do efluente AA, por exemplo, a concentrao de inculo (bactrias) e o tempo para estabilizao da matria orgnica, prevista pelo mtodo, podem ser absolutamente insuficientes para a verificao de todos os processos degradativos possveis de ocorrer (aclimatao, adaptao e biodegradao). Do ponto de vista ecotoxicolgico, observou-se que o efluente bruto apresentou significativa toxicidade (Tabela 3), comparvel a outros efluentes industriais de elevado potencial poluidor. Tabela 3. Resultados dos testes de toxicidade obtidos a partir do efluente AA Bioindicador Escherichia coli Selenastrum Capricornutum Mecanismo Indicador Inibio de crescimento celular Concentrao efetiva (CE50) para inibio de 50% de taxa de crescimento celular Resposta 89 2% 8,5 0,6%

A medida da toxicidade aguda com E. coli, por exemplo, resultou em inibies de crescimento celular de 89,2%, enquanto que a CE50

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com Selenastrum capricornutum foi de 8,5 0,6%. Utilizando este mesmo bioindicador, Souza et al.26 observaram uma CE50 de 1,59 % em efluente de polpao da indstria de nitrocelulose. Enquanto Kunz27, ao estudar um efluente industrial txtil, observou 38,5% de inibio de E. coli. Estas caractersticas ecotoxicolgicas indicaram que o efluente AA possui elevado potencial impactante e pode causar inmeros prejuzos biota de qualquer corpo receptor. CONCLUSES De maneira geral, a caracterizao do efluente industrial gua amarela revelou que alguns parmetros fsico-qumicos como slidos totais, nitrognio orgnico, DQO e sulfatos, se apresentaram em nveis acima daqueles permitidos pelos critrios de lanamento em corpo receptor. Entretanto, o parmetro que reflete maior preocupao foi o composto 2,4,6-trinitrotolueno, cuja presena e elevada concentrao explica a recalcitrncia do efluente aos processos de remediao convencionais de natureza qumica e biolgica. importante observar que, apesar das legislaes brasileira (CONAMA 357/2005) e europia (74/440/CEE) no estabelecerem restries para TNT ou compostos nitroaromticos especificamente, a Agncia de Proteo Ambiental Americana (EPA) admite nveis mximos de 0,06 mg L-1 de TNT em guas para fins potveis. O perfil ecotoxicolgico tambm mostrou-se preocupante e foi atribudo ao TNT e/ou elevada fora inica do efluente, resultante das elevadas concentraes de sais (NO3- e SO4-2). Uma vez reconhecido o potencial poluente do efluente, bem como as dificuldades apresentadas para sua remediao, considera-se essencial a realizao de estudos de viabilidade de emprego de tecnologias limpas que envolvam modificao e otimizao de processos, recuperao de produto e reuso de guas residurias da indstria de nitroaromticos. AGRADECIMENTOS Indstria de Material Blico (IMBEL) do Brasil e CAPES pelo apoio financeiro.

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