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Universidade Federal da Grande Dourados. Faculdade de Cincias Biolgicas e Ambientais. Prof.Dr. Cristiano Raminelli.(Faculdade de Cincias Exatas e Tecnolgicas)
INTRODUO: Cromatografia um mtodo que abrange um conjunto de vrias tcnicas, e que tem como principal objetivo a separao de substancias de uma mistura, com fins analticos ou preparativos, muito utilizado em laboratrios industriais e de pesquisa. Todas as tcnicas cromatogrficas utilizam uma fase estacionria e uma fase mvel. A fase estacionria formada de um material escolhido para reter de forma diferenciada os componentes da amostra que se deseja separar. A fase mvel o material que se desloca pela fase estacionria, arrastando os componentes da amostra. Aps transitar pela fase estacionria, por um percurso de distncia adequadamente escolhida, os componentes da amostra se separam e so assinalados pelo sistema detector na seqncia: do primeiro componente menos retido, ao ltimo componente mais retido pela fase estacionria.Ento calcula-se o fator de reteno. Neste relatrio realizou-se cromatografia com os corantes: Azul de metileno e Alaranjado de metila, nos quais as frmulas estruturais so: Azul de metileno: Alaranjado de metila:
OBJETIVOS Os objetivos desta aula prtica consistem em analisar a separao de corantes por cromatografia em papel, analisando tambm os fatores de reteno dos compostos: azul de metileno, alaranjado de metila, e uma mistura de azul de metileno e alaranjado de metila. MATERIAIS Papel filtro, lpis de grafite, grampeador, Bquer, Placa de Petri. PROCEDIMENTOS 1. Recortar um pedao de papel de filtro em formato retangular medindo 15 cm x 9 cm; 2. Marcar com lpis de grafite uma linha a 1 cm de uma das extremidade ao longo do comprimento do papel (15 cm); 3. Sobre a linha marcar pontos com o lpis de grafite a 2,5 cm de distncia um do outro; 4. Aplicar nos trs pontos centrais, fazendo uso de capilares de vidro, amostras de soluo de alaranjado de metila puro (23 mg em 25 ml de etanol 95%), de soluo contendo alaranjado de metila e azul de metileno(23 mg de cada substncia em 50mL de etanol 95%) e de soluo de azul de metileno puro(23mg em 25mL de etanol 95%); 5. Enrolar o papel filtro em forma de tubo com 9 cm de altura e grampear as duas extremidades sem sobrep-las; 6. Adicionar uma mistura de etanol 95% e gua destilada na proporo de 1:1 (mistura eluente) a um bquer de 500 mL (cmara cromatogrfica), recobrindo uma altura mxima de 0,5 cm;
7. Colocar o tubo de papel de filtro em p na cmara cromatogrfica; 8. Cobrir a cmara cromatogrfica com um vidro de relgio ou uma placa de Petri; 9. Deixar a mistura eluente subir por capilaridade (eluir) at aproximadamente 1 cm da extremidade do tubo de papel de filtro; 10. Retirar o tubo de papel de filtro da cmara cromatogrfica e marcar com lpis de grafite o ponto extremo que a mistura eluente alcanou; 11. Deixar o tubo de papel de filtro secar; 12. Retirar os grampos do tubo de papel de filtro; 13. Calcular os valores de Rf de todas as substncias DISCUSSO Calculando fatores de reteno : Rf = Distncia percorrida pelo soluto Distncia percorrida pelo eluente AZUL DE METILENO Rf = 1,9 cm 5,2 cm Rf = 0,36 cm ALARANJADO DE METILA Rf = 3,7 cm Rf = 0,71 cm 5,2 cm
MISTURA DE AZUL DE METILENO E ALARANJADO DE METILA AZUL DE METILENO Rf = 1 cm Rf = 0,19 cm 5,2 cm ALARANJADO DE METILA Rf = 4,3 cm Rf = 0,82 cm 5,2 cm
CONCLUSO: Considerando que o papel de filtro composto por celulose, verifica- se o fator de reteno atravs do quanto o corante percorreu em relao ao ponto mximo que percorreu o eluente. Os corantes que percorreram menos o papel de filtro, interagiam mais com a celulose do papel de filtro, fazendo com que se fixassem mais nelas, e no percorressem o restante do papel. Os corantes que percorreram mais o papel, porque suas molculas interagem menos com a celulose do papel, fazendo com que percorressem o papel de filtro por uma distncia maior.