133

BACTERIAS LITICAS Y SUSTRATOS EN LA FILOSFERA DE BANANO Y PLTANO PARA EL CONTROL DE SIGATOKA NEGRA LYTIC BACTERIA AND SUBSTRATES ON BANANA AND PLANTAIN PHYLLOSPHERE TO BLACK SIGATOKA CONTROL Luis Fernando Patio Hoyos1; Lina Maria Salazar Pelez2; Juan Carlos Collazos Villa3; Ramn Antonio Piedrahita Restrepo3 & Elkin Bustamante Rojas4
1

Politcnico Colombiano Jaime Isaza Cadavid. Carrera 48 N 7-151 Medelln-Colombia; investigador principal en proyecto 2 Filosfera luisferph@gmail.com; Bacteriloga, Inst. Col. de Medicina Tropical. Investigadora para Augura-Cenibanano en 3 proyecto Filosfera. lmsalazar@ces.edu.co; Auxiliar de investigacin, Augura-Cenibanano, jcollazos@augura.com.co; 4 rpiedrahita@augura.com.co ; Consultor para Augura-Cenibanano en proyecto Filosfera. elkinbustamante@gmail.com

RESUMEN El control de la Sigatoka Negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet), se fundamenta en fungicidas qumicos, a los cuales el patgeno ha desarrollado resistencia, aumentndose los costos de control y el impacto negativo sobre el ambiente, sumado a la exigencia de los consumidores por una fruta con menor uso de plaguicidas. La biorregulacin, una alternativa escasamente investigada, podra contribuir eficazmente al manejo de la enfermedad. Debido a esto, se desarroll una estrategia basada en el estudio y manipulacin de algunos de los factores biticos y abiticos que interactan en la filosfera de banano y pltano. La caracterizacin qumica (contenido de nutrimentos) y microbiolgica parcial, revel lo crtico de las necesidades nutricionales para la microflora de inters, lo cual fundament la formulacin de diferentes sustratos foliares que fomentaran las poblaciones naturales de estos agentes biolgicos, y verific la presencia de poblaciones bacterianas quitinolticas y glucanolticas, las cuales tienen potencial de regulacin de M. fijiensis (principalmente, bacilos gram-negativos).. Los sustratos disponan de una solucin mineral base, quitina coloidal [4%], harina de cebada [2,5%] y urea [1%], solos o en combianciones. Posteriormente se evalu el efecto de estos sustratos foliares sobre el control de la enfermedad, en plantas adultas de banano y pltano en condiciones de campo, logrando una reduccin entre un 43 46 % en el nmero de ciclos de fungicidas convencionales, cuando los sustratos fueron aplicados en mezcla y rotacin con los fungicidas. Los resultados de esta investigacin pueden significar altos beneficios econmicos, ambientales y de competitividad para la fruta exportada.
Palabras clave: Filosfera, banano, pltano, Sigatoka Negra, Mycosphaerella fijiensis, biorregulacin, bacterias quitinolticas, bacterias glucanolticas, quitina coloidal, harina de cebada, urea.

SUMMARY The Black Sigatoka (Mycosphaerella fijiensis Morelet) is the disease of greatest economical importance for banana and plantain crops. Its control has been done with synthetic fungicides. Bioregulation could be another strategy of the disease control; however, it has had little research work. This study has explored the possibility of developing a biological regulation alternative, based on the study and manipulation of some biotic and abiotic factors which interact in the infection site of M. fijiensis. A partial chemical and microbiological characterization was done in the phyllosphere of banana and plantain crops The work done identified the nutritional needs of the potential antagonists of the pathogen, and brought forth the development of foliar substrates to increase their natural populations and to know its effect in the evolution of the disease. The substrates included colloidal chitin [4%], barley [2,5%] and urea [1%], individually or in a combination. Application of two foliar substrates, that had a mineral solution plus urea and barley flour or urea plus colloidal chitin known to built-up biocontrol bacteria, allowed decreasing in 43% fungicide applications, when sprayed in rotation with conventional fungicides. Results of this study could mean higher economical, environmental benefits and competitively of traded fruit.
Keywords: disease, treatment, substrates

134

INTRODUCCIN La Sigatoka Negra (SN), causada por el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet, es la enfermedad de mayor impacto econmico para los cultivos de banano y pltano, se ha controlado principalmente mediante la aplicacin de fungicidas sintticos, cuyo costo en Colombia vara entre 700 y 900 dlares/hectrea al ao, cifra que representa el 13,8% de los costos totales de produccin del banano y el 46% del valor total de los agroqumicos (Chica et al., 2004). Sin embargo, la eficacia de esta medida ha disminuido debido a cambios en la incidencia y severidad de la enfermedad, incremento de las poblaciones del hongo resistentes a los fungicidas empleados y condiciones particulares en cada una de las fincas que favorecen el establecimiento y diseminacin del patgeno. Situacin agravada por el nmero reducido de molculas qumicas disponibles actualmente para controlar la enfermedad y la casi nula proyeccin, a corto y mediano plazo, de molculas qumicas con novedosos modos de accin sobre el hongo. El control de la enfermedad podra tener una estrategia alternativa y complementaria de manejo basada en microorganismos quitinolticos y glucanolticos nativos de la filosfera de musceas alimenticias, capaces de degradar la quitina y -(1,3) glucanos presentes en la pared celular de M. fijiensis. La regulacin microbiolgica, alternativa complementaria de manejo, ha sido una estrategia escasamente explorada en el caso de la Sigatoka Negra. Las investigaciones de regulacin biolgica para patgenos foliares, frecuentemente involucran la aplicacin del microorganismo antagonista sobre la superficie de la hoja (Blakeman y Fokkema, 1982). Sin embargo, el xito de dicho antagonista depende de su capacidad para establecerse en la microbiota epfita -especialmente cuando se requiere disminuir el inculo del patgeno- (Blakeman y Fokkema, 1982). Por tal motivo, el uso de antagonistas microbianos aislados de la microbiota epfita debera preferirse al uso de antagonistas aislados de otros ambientes, pues los primeros se encuentran adaptados a las condiciones que determinan el hbitat en la superficie de la hoja (Blakeman y Fokkema, 1982; Andrews, 1992). En el caso de la regulacin biolgica de patgenos biotrficos, la estrategia consiste en el uso de microorganismos antagonistas productores de sustancias antibiticas y/o enzimas lticas que acten sobre sus conidias o tubos germinativos -en su fase epfita de crecimiento (Andrews, 1992). Por ejemplo, el empleo de microorganismos productores de quitinasas y/o glucanasas en la regulacin de hongos basidiomicetos y ascomicetos ha demostrado ser una estrategia de utilidad, pues la pared celular de dichos hongos est constituida principalmente por microfibrillas de quitina y -glucanos, hecho que los hace sensibles al ataque de estas enzimas (Mahadevan y Crawford, 1997; Cohen-Kupiec y Chet, 1998). Por otro lado, se ha demostrado que las poblaciones del microorganismo antagonista y/o la efectividad de su accin biorreguladora pueden ser incrementadas mediante la aplicacin de sustratos foliares que favorezcan nutricionalmente al antagonista (Blakeman y Fokkema, 1982; Ji y Wilson, 2003). Adicionalmente, existe evidencia que indica que bajo condiciones fsicas favorables para el crecimiento bacteriano, la diversidad y concentraciones de las fuentes de carbono disponibles en la superficie de la hoja constituyen el determinante principal de los tamaos de las poblaciones de bacterias epfitas; de tal manera que, dichas poblaciones pueden ser manipuladas por cambios en el estatus de estos nutrimentos (Mercier y Lindow, 2000). La evidencia anteriormente expuesta, permite apuntar al diseo de estrategias de biorregulacin basadas en la aplicacin de enmiendas foliares que favorezcan las poblaciones epfitas naturales de los potenciales antagonistas, en lugar de la aplicacin directa de los mismos, evitando los riesgos potenciales asociados a la aplicacin masiva de biorreguladores en campo. Gonzlez et al., (1996), en ensayo de campo demostraron que sustratos foliares, a base de quitina coloidal y cuatro cepas de bacterias quitinolticas -tres cepas del gnero Serratia y una del gnero Bacillus-, y bajo condiciones de inculo abundante del hongo, tales sustratos lograron reducir la severidad de la enfermedad en un 40%, con respecto al testigo absoluto; mientras que, el testigo qumico lo hizo en un 60 %. Ruz-Silvera et al., (1997), en un rea de cultivo de banano no protegida con fungicidas pero cercana a plantaciones comerciales, no encontraron diferencias estadsticamente significativas entre diversos sustratos foliares -a base de leche, melaza y la cepa R1 de Serratia marcescens- y el testigo absoluto, en relacin a la severidad de la enfermedad; sin embargo, el inculo capturado en el rea fue siempre ms bajo que el de la plantacin aledaa. Las diferencias no observadas entre los sustratos y el testigo, fueron atribuidas al efecto de deriva entre tratamientos del ensayo. Bajo condiciones fsicas favorables para el crecimiento bacteriano, la diversidad y concentraciones de las fuentes de carbono disponibles en la superficie de la hoja constituyen el

135

determinante principal de los tamaos de las poblaciones de bacterias epfitas; de tal manera que, dichas poblaciones pueden ser manipuladas por cambios en el status de tales nutrientes (Mercier y Lindow, 2000). Arango (2002), en condiciones de campo, demostr que un sustrato a base de leche, melaza y quitina- y otro a base de glucano, melaza y nitrato de calcio-, alternados con fungicidas convencionales, permitieron reducir en un 40% el nmero de aplicaciones de estos. Esta investigacin, constituy uno de los primeros reportes sobre la eficacia y viabilidad econmica de la aplicacin de sustratos foliares alternados con fungicidas convencionales para el manejo de la SN. Osorio et al., (2004), encontraron que aislamientos de bacterias procedentes de suelo, aguas de pozo y filosfera de banano en el Urab antioqueo (Colombia), lograron causar inhibiciones de la germinacin en un 42% sobre ascosporas de M. fijiensis y alteraciones de los tubos germinales hasta en un 86%, en bioensayo que inclua una hoja de banano, una bacteria quitinoltica y ascosporas del patgeno. Posteriormente, en un ensayo bajo condiciones de inoculacin natural, las bacterias aplicadas en forma sola no ofrecieron reducciones significativas de la severidad; sin embargo, al ser aplicadas en un sistema de rotacin con fungicidas convencionales se observ un control similar al testigo comercial. Salazar (2005), evalu 14 sustratos foliares a base de quitina y harina de cebada como fuentes de carbono, para las bacterias lticas nativas de la filosfera con potencial bioregulador sobre M. fijiensis, encontrando que los sustratos a base de harina de cebada y quitina coloidal lograron incrementos de hasta 4,500 y 5,000 veces para los recuentos de la poblacin de bacterias quitinolticas y glucanolticas, respectivamente; mientras que, los sustratos a base de harina de cebada y urea lograron incrementar hasta 10,000 veces los recuentos de ambas poblaciones lticas. La poblacin testigo, la cual no recibi aplicacin alguna de sustratos foliares, presentaba incrementos slo de hasta 85 veces para el caso de las bacterias quitinolticas y 670 veces para las bacterias glucanolticas, con respecto a la poblacin inicial de bacterias. El objetivo del estudio fue evaluar el control de Sigatoka Negra con sustratos foliares que fomentan la poblacin de bacterias capaces de utilizar fuentes de quitina y glucano, a partir de la caracterizacin de la filosfera de banano y pltano en su componente qumico por contenido de nutrimentos y biolgico por la presencia y cantidad de estos microorganismos. MATERIALES Y MTODOS Caracterizacin de los componentes qumicos y microbiolgicos de la filosfera de musceas alimenticias.Las plantas muestreadas pertenecan a plantaciones comerciales de banano Gran Enano y pltano Hartn con diferentes intensidades de control qumico para la Sigatoka Negra (intensidad normal y alta). Adicionalmente, se muestrearon plantas de materiales de banano y pltano con distintos niveles de resistencia a la enfermedad. Los materiales evaluados fueron: Yangamb, banano altamente resistente a la enfermedad; Fougamou, banano parcialmente resistente; Pelipita, pltano con alta resistencia y FHIA21, pltano con resistencia parcial. Se hicieron muestreos tanto en estacin seca como en estacin lluviosa, as como en dos estados de la planta con respecto al momento de su floracin (antes o despus de la emergencia de la bacota). Para la toma de la muestra, se realizaron lavados del envs de la hoja nmero 4 de la planta seleccionada. La primera mitad, con 50 ml de agua destilada estril para el anlisis del contenido mineral. La segunda mitad, con 50 ml de buffer fosfato sdico a pH 7.0, 0,041M Na2HPO4 y 0,026M KH2PO4, tambin estril, para el anlisis de carbohidratos y protenas totales, adems del anlisis microbiolgico. El potasio, calcio, magnesio y sodio, fueron cuantificados mediante absorcin atmica; el fsforo, amonio y nitratos, por colorimetra; el nitrgeno libre, por el mtodo de Kjeldalh y el azufre por turbidimetra. Los carbohidratos totales, fueron cuantificados mediante frmula matemtica, al restar la humedad, contenido de cenizas y contenido de lpidos del peso de la muestra. Las protenas totales, mediante el mtodo de microKjeldalh. Se formularon dos medios para el aislamiento y recuento de las bacterias quitinolticas y glucanolticas (Salazar, 2005). Para ambos casos, se formul una solucin mineral base que contena los siguientes componentes: 1g/L K2HPO4, 0.5g/L MgSO4 y 1g/L NaCl. Tal composicin, tena como objetivo brindar una solucin de macro y micronutrientes para el crecimiento bacteriano. Para el aislamiento de las bacterias quitinolticas, a dicha solucin mineral se le adicion quitina coloidal (20ml/L), como nica fuente de carbono y nitrgeno y agar-agar (20g/L). A este medio, se le denomin Agar Quitina. Para el aislamiento de los microorganismos glucanolticos, en lugar de la quitina, se adicion harina de cebada (5g/L) como fuente de -1,3 glucanos y NH4NO3 (1g/L) como fuente de nitrgeno. A este medio, se le denomin Agar Cebada. En los medios de

136

cultivo, fue posible evidenciar un halo de consumo de la fuente de carbono adicionada, para el caso de los microorganismos que poseen actividad ltica (Gonzlez, et al., 1996; Ruz et al., 1997; Arango, 2002; Salazar, 2005). Evaluacin en campo de sustratos foliares para el manejo de la enfermedad. Con base en los resultados anteriores y los del incremento de las poblaciones de bacterias por efecto de sustratos foliares a base de una solucin mineral base, quitina coloidal, harina de cebada y urea, bajo condiciones naturales de campo (Salazar, 2005), se seleccionaron dos sustratos, denominados A y B por su significativo incremento de las poblaciones de las bacterias con potencial regulador de M. fijiensis, para ser evaluados sobre el control de la enfermedad, tambin bajo condiciones de campo. La composicin de dichos sustratos, fue la siguiente: solucin mineral bsica (1 g de K2HPO4, 0,5 g de MgSO4, 1 g de NaCl, 3 g de CaNO3, 0,3 g de aceite de soya), adherente comercial (0,9 mL de Kemkol) y 20g harina de cebada, en 1L de agua destilada. De esta solucin, se tomaron 500 mL y fueron agregados 22 g de urea, lo que constituy el sustrato A. En los otros 500 mL se adicionaron 20 mL de quitina coloidal (Arango, 2002), la cual se convirti en el sustrato B. El pH de los sustratos se ajust a 7,5 +/- 0,2. Los tratamientos, fueron los siguientes: T1: CQE: Control Qumico Estndar; T2: SA: Sustrato A (solucin mineral bsica, adherente, harina de cebada y urea); T3: CQE + SA : CQE en mezcla con SA; T4: CQE - SA : CQE en rotacin con SA; T5: (CQE + SA) - SA : (CQE en mezcla con SA) y en rotacin con SA; T6: SB: Sustrato B (solucin mineral bsica, adherente, harina de cebada y quitina coloidal); T7: CQE + SB : CQE en mezcla con SB; T8: CQE SB : CQE en rotacin con SB; T9: (CQE + SB) SB: (CQE en mezcla con SB) y en rotacin con SB; T10: Testigo sin control. Todos los tratamientos, fueron objeto de prcticas convencionales de reduccin de inculo en las plantaciones comerciales, tales como: despunte, deshoje y deslaminado. En el campo se dispuso de un diseo de tres bloques completos al azar, con parcelas lineales de 16 plantas por tratamiento -ocho de Gran Enano y ocho de Valery-, para banano y 16 plantas de pltano Hartn, y de esta forma evaluar como parcela til las cuatro plantas centrales de cada material. Cada tratamiento tuvo un borde de pasto king-grass, para evitar la deriva entre tratamientos al momento de la aplicacin. Los sustratos se aplicaron semanalmente, mientras que la rotacin de stos con fungicidas se realiz de acuerdo al programa estndar de aplicacin qumica. El testigo absoluto no recibi ningn tratamiento. Se evalu el grado de severidad de la SN cada dos semanas, utilizando la escala de Stover modificada por Gauhl. La informacin obtenida se someti a un anlisis de varianza y se us la prueba de agrupamiento Tukey (p < 0,05) para interpretar la significancia de los tratamientos; estos anlisis se realizaron a travs del programa SAS versin 6.12. RESULTADOS Y DISCUSIN Caracterizacin de los componentes qumicos y microbiolgicos de la filosfera de musceas alimenticias. Los minerales determinados, en orden de mayor a menor concentracin, fueron: Sulfatos -en un rango promedio de 2.8 a 2.9 ppm-, amonio -1.15 a 1.35ppm-, sodio -1.0 a 1.35ppm-, potasio -0.4 a 0.65ppm-, fosfatos -0.3 a 0.55ppm-, magnesio -0.09 a 0.15ppm, calcio -0.02 a 0.2ppm- y nitratos 0.02 a 0.06ppm. Las concentraciones promedio de los sulfatos, fosfatos y nitratos, no fueron afectadas por ninguno de los factores estudiados -poca climtica, zona de aplicacin de fungicidas, especie, variedad estado de floracin-, de manera estadsticamente significativa. En cambio, las concentraciones promedio de sodio, magnesio y amonio, fueron afectadas por la poca climtica, siendo mayores en la poca seca. En lo que concierne a la concentracin promedio de calcio, esta tambin fue afectada por la poca climtica, siendo mayor en la poca lluviosa. Con respecto a las determinaciones de carbohidratos y protenas, su porcentaje total promedio vari de 0.03 a 0.04%, para ambos casos. Sin embargo, la concentracin de carbohidratos no fue afectada por ninguno de los factores estudiados; a diferencia de la concentracin de protenas, la cual fue afectada por la poca climtica, siendo mayor en la poca seca. Andrews et al. (2000), afirman que la microbiota que habita la superficie de las hojas es del tipo oligotrfico, predominantemente. Es decir, crece en un medio con concentraciones disponibles de carbono soluble de 1 a 10mg/L. Arango (2000), determin el contenido de carbohidratos y protenas totales de lavados de hojas de plntulas de banano var. Gran Enano, mantenidas en invernadero. Este anlisis, determin

137

que no existan carbohidratos a nivel de la filosfera de dichas plntulas y que el porcentaje total promedio de protenas era del 4.55%. La caracterizacin qumica realizada en esta investigacin, tambin evidencia que en la poca lluviosa puede existir menos macronutrientes para la microbiota epfita. Por lo tanto, la aplicacin de un sustrato foliar rico en minerales, especialmente durante dicha poca, podra estimular el crecimiento de esta microbiota idealmente, la fraccin antagonista para M. fijiensis. Lo anterior es importante, si se tiene en cuenta adems que es en la poca lluviosa cuando se agudiza el proceso de infeccin con este patgeno. Se seleccionaron 95 aislados de bacterias lticas, de los cuales 17 demostraron tanto actividad quitinoltica como glucanoltica, presentando morfologa de bacilos gram negativos, a excepcin de un aislado con morfologa de cocos gram positivos. Los aislados ms eficientes en los procesos de hidrlisis de la quitina y -(1,3) glucanos, evidenciaron el halo de degradacin antes de las 24 horas de incubacin. Dentro de la totalidad de aislados obtenidos, solamente dos presentaron la morfologa de bacilos gram positivos, los cuales fueron esporulados y evidenciaron actividad glucanoltica, pero no quitinoltica. La importancia de la actividad ltica antes de las 48 horas, radica en que esta les puede permitir a los aislados actuar sobre la quitina y/o -(1,3) glucanos presentes en la pared celular de las ascosporas de M. fijiensis, antes de que estas penetren en el estoma; pues se ha observado que trascurren al menos 48 horas entre la llegada de la ascospora a la hoja y el inicio del proceso de penetracin en el estoma (Beveraggi, 1992; Stover, 1980. Citados por Marn et al, 2003). Evaluacin en campo de sustratos foliares para el manejo de la enfermedad. Al hacer el anlisis del rea bajo la curva del desarrollo de la enfermedad, producto de la evaluacin de los tratamientos durante 24 semanas, con el inicio de las aplicaciones en el momento de mayor presin de enfermedad para la zona del Urab antioqueo -entre diciembre y enero, seguido por un perodo de relativa baja de presin de enfermedad (febrero-marzo) y finalizando por un perodo de alta presin que corresponde a los meses de abril, mayo y junio; se observa que en el caso de banano todos los tratamientos presentaron un rea siempre menor que el testigo absoluto, donde el tratamiento que inclua la mezcla del sustrato foliar A con fungicidas convencionales en rotacin con este mismo sustrato, tratamiento T5, se acerca ms al control ofrecido por el tratamiento estndar de control, tratamiento T1, siendo ambos tratamientos estadsticamente iguales (Figura 1); con una reduccin en nmero de ciclos de fungicidas convencionales de 46,15 %, representada en 6 ciclos menos (Cuadro 1), para un control similar de la enfermedad. La frecuencia semanal de aplicacin de ste sustrato foliar puede aumentar la disponibilidad de sus componentes para la microflora reguladora de M. fijiensis, y por lo tanto un mejor control que el observado para aquellos tratamientos cuya frecuencia de aplicacin del sustrato foliar era de cada 2 semanas, tratamientos T4 y T8 (Figura 1). Se espera que una formulacin ms eficaz en trminos de adherencia de los sustratos a las hojas y estabilidad de sus componentes para su disposicin por parte de la microflora reguladora, mejore el control de la enfermedad y reduzca la frecuencia de aplicacin de los sustratos y los costos del tratamiento. Para el caso de pltano todos los tratamientos a excepcin de la aplicacin semanal de los sustratos solos, tratamientos T2 y T6, mostraron un control estadsticamente similar al ofrecido por el sistema convencional de control mediante fungicidas (Figura 2), al igual que en banano los tratamientos que incluan un sistema de rotacin de fungicidas con los sustratos foliares, permitieron una reduccin del nmero de ciclos de fungicidas convencionales en un 43,75 %, cifra que representa 7 ciclos menos (Cuadro 1); inclusive para aquellos tratamientos donde la frecuencia de aplicacin de los sustratos era de cada 2 semanas, tratamientos T4 y T8 (Figura 1). El mayor nivel de tolerancia a la Sigatoka Negra en pltano con relacin a banano, parece haber favorecido la accin reguladora de los sustratos foliares. Con base en los resultados del incremento de la poblacin de bacterias lticas (Salazar, 2005), se espera que este haya sido el efecto principal del sustrato foliar, sin descartar la accin txica reportada para la rea, la cual puede inhibir la produccin de pseudotecios y la formacin de ascosporas como se reporta para Mycosphaerella citri (Mondal y Timmer, 2003).

138

140 120 100 rea 80 60 40 20 0 1 2 3 4 5

c abc abc abc bc

a ab

abc

abc

abc

10

Tratam iento
Figura 1. rea bajo la curva del desarrollo de Sigatoka Negra en banano. diferencia significativa segn prueba de Tukey ( p < 0,05)

Letras diferentes indican

250 200
abc ab

rea

150
cd bcd d d cd

bcd

bcd

100 50 0
1 2 3 4 5

10

Tratamiento
Figura 2. rea bajo la curva de desarrollo de la enfermedad en pltano. Letras diferentes indican diferencia significativa segn prueba de Tukey ( p < 0,05)

El bajo control de los sustratos solos, que en la investigacin de Gonzlez et al. (1996), reportaron un 40% de eficacia en campo, puede deberse a la falta de eficacia de la solucin adherente, especialmente en poca lluviosa. Otra razn que puede explicar el bajo efecto de los sustratos solos, se relaciona con la no presencia registrada en la zona bananera del estudio, de bacterias de gran adherencia al filoplano como Serratia spp (resultados sin publicar), o a que ciertos hongos pueden aprovechar el sustrato y as disminuir la poblacin de las bacterias.

139 Cuadro 1. Nmero de ciclos de fungicidas convencionales y sustratos foliares

CICLOS DE APLICACIN DURANTE FASE DE CAMPO AL EVALUAR LOS DOS MEJORES SUTRATOS FOLIARES PARA EL CONTROL DE LA SIGATOKA NEGRA Nmero de ciclos Tratamiento 1. Qumico 2. Sustrato A 3. Qco + SA 4. Qco - SA 5. Qco + SA - SA 6. Sustrato B 7. Qco + SB 8. Qco - SB 9. Qco + SB - SB 10. Testigo sin control Forma de aplicacin Solo Solo mezcla Rotacin Rotacin Solo Mezcla Rotacin Rotacin Banano 13 22 13 7 SA - 7 Qco 7 (Qco + SA) - 7 SA 22 13 7 Qco - 7 SB 7 (Qco + SB) - 7 SB 0.00 46.15 46.15 0.00 46.15 46.15 Porcentaje de Reduccin * Pltano 16 27 16 9 SA - 9 Qco 9 (Qco + SA) 9 SA 27 16 9 Qco - 9 SB 9 (Qco + SB) - 9SB 0.00 43.75 43.75 0.00 43.75 43.75 Porcentaje de Reduccin *

* Reduccin en ciclos de fungicidas convencionales, con respecto al tratamiento de control qumico estndar

Resultados similares a los encontrados en este estudio, han sido reportados en Costa Rica (Arango, 2002), donde se logr una reduccin del 40% en el uso de fungicidas sintticos, luego de la rotacin de fungicidas convencionales con sustratos a base de quitina, levadura de cerveza, leche y melaza. No obstante, en la presente investigacin es importante resaltar que los componentes principales del sustrato A (urea agrcola y harina de cebada), son insumos de fcil disponibilidad y bajo costo para los productores de banano y pltano. Estos resultados sobre la biorregulacin del agente causal de la Sigatoka Negra, deben verse como una estrategia ms en el manejo integrado de la enfermedad, donde su alcance pudiera ser de mayor impacto, si se estudia su integracin con otras prcticas alternativas de manejo como la induccin de resistencia (Corrales et al., 2002; Patio 2002), y la remocin de inculo, como la poda temprana, evaluada en Urab desde el ao 2003, donde se elimina tejido foliar que an no manifiesta visualmente los sntomas de la enfermedad (Chica et al. 2004), y de esta forma las bacterias pueden ver facilitada su accin al ejercer regulacin sobre una menor concentracin de inculo del hongo. La investigacin prioritaria a seguir sera ajustar una formulacin, equipo y volumen de aplicacin, que aseguren la adherencia, cobertura y funcionalidad de los sustratos foliares en campo, en especial en pocas de alta precipitacin, y de esta manera potenciar an ms los resultados de esta investigacin, al propender por la reduccin de los costos de control de la enfermedad, del impacto ambiental del sistema convencional de control y el incremento de la competitividad de la fruta comercializada.
RECONOCIMIENTOS. Esta investigacin se realiz mediante cofinanciacin del Instituto Colombiano para el Desarrollo de la Ciencia y la Tecnologa Francisco Jos de Caldas -COLCIENCIAS- y la Asociacin de Bananeros de Colombia AUGURA y su Centro de Investigaciones del Banano -CENIBANANO a travs del proyecto: Componentes qumicos y microbiolgicos de la filosfera de musceas y su aplicacin en el manejo de la Sigatoka Negra cdigo 842-12-11569-. Igualmente, agradecemos el apoyo prestado por la Universidad Nacional de Colombia, Sede Medelln. BIBLIOGRAFA 1. Andrews, J. H. 1992. Biological control in the phyllosphere. Annual Review Phytopathology; 30: 603-635. 2. Arango, M.E. 2002. Alternativas de manejo para el control biolgico de Sigatoka Negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet) en el cultivo del banano (Musa AAA). p. 130-134. In Memorias XV Reunin Internacional ACORBAT, Cartagena de Indias, Colombia.Oct 27-Nov 02 de 2002. 3. Blakeman, J. P. and Fokkema, N. J. 1982. Potential for biological control of plant diseases on the phylloplane. Annual Review Phytopathology; 20: 167-192 4. Cohen-Kupiec, R. and Chet I. 1998. The molecular biology of chitin digestion. Current Biology, 9: 270-277. 5. Corrales, O; Knight, S; Madrigal, A. 2002. Manejo de Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis Morelet) y el nematodo barrenador (Radopholus similis Cobb) en banano, usando el activador de resistencia boost 50 SC dentro de un programa de fotoproteccin basado en menos uso de agroqumicos. P. 143 147. In Memorias XV Reunin Internacional ACORBAT, Cartagena de Indias, Colombia.Oct 27-Nov 02 de 2002.

140

6. Chica, R.; Herrera, M.; Jimnez, I.; Lizcano, S.; Montoya, J. A.; Patio, L. F.; Rodrguez, P. A. y Ruz, L. H. 2004. Impacto y manejo de la Sigatoka Negra en el cultivo del banano de exportacin en Colombia. CD. OXACA Mxico, XVI Reunin Internacional ACORBAT. 7. Gonzlez, R; Bustamante, E.; Shannon, P.; Okumoto, S. y Leandro, G. 1996. Evaluacin de microorganismos quitinolticos antagonistas a Mycosphaerella fijiensis en casa de mallas y en campo. Manejo Integrado de Plagas (Costa Rica) N40: 12-16. 8. Ji, P. and Wilson, M. 2003. Enhancement of population size of a biological control agent and efficacy in control of bacteria speck of tomato through salicylate and ammonium sulfate amendments. Applied and Environmental Microbiology, 69(2):1290-1294. 9. Leveau, J. HJ. and Lindow, S. E. 2001. Appetite of an epiphyte: Quantitative monitoring of bacterial sugar consumption in the phyllosphere. PNAS, 98(6): 3446-3453. 10. Lindow, S. E and Brandl, M. T. 2003. Microbiology of the phyllosphere. Applied and Environmental Microbiology, 69(4): 1875-1883. 11. Mahadevan, B. and Crawford, D. L. 1997. Properties of the chitinase of the antifungal biocontrol agent Streptomyces lydicus WYEC108. Enzyme and Microbial Technology, 20: 489-493. 12. Marin, D. H.; Romero, R. A.; Guzmn, M. and Sutton, T. B. 2003. Black Sigatoka: An increasing threat to banana cultivation. Plant Disease, 87(3): 208-223. 13. Mercier, J. and Lindow, S. E. 2000. Role of leaf surface sugars in colonization of plants by bacterial epiphytes. Applied and Environmental Microbiology, 66(1):369-374. 14. Mondal, S. N. and Timmer, L. W. 2003. Effect of urea, CaCO3, and dolomite on pseudothecial development and ascospore production of Mycosphaerella citri. Plant Disease, 87(5):478-482. 15. Osorio, I.; Patio, L. F.; Bustamante, E. y Rodrguez, P. 2004. Seleccin y evaluacin de bacterias quitinolticas provenientes de la zona de Urab, para el control de la Sigatoka Negra. Boletn Tcnico de Cenibabano, N6: 8-13. 16. Patio, L. F. 2002. Efecto de una fuente de energa, tres inductores de resistencia y un sustrato foliar sobre Sigatoka Negra en banano. p. 135-142. In Memorias XV Reunin Internacional ACORBAT, Cartagena de Indias, Colombia. Oct 27-Nov 02 de 2002. 17. Ruz-Silvera, C; Bustamante, E.; Jimnez, F.; Saunders, J.; Okumoto, S. y Gonzlez, R. 1997b. Sustratos y bacterias antagonistas para el manejo de Mycosphaerella fijiensis en banano. Manejo Integrado de Plagas (Costa Rica) N45: 9-17. 18. Salazar, L.M. 2005. Estudio de la Filosfera de Musceas alimenticias en el Urab antioqueo. Tesis de Maestra en Biotecnologa. 103p. Universidad Nacional de Colombia, Medelln, Colombia.