METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS La necesidad de un aporte constante de energa a la clula se debe a que ella lo requiere para realizar varias funciones,

entre las que destacan: (a) la realizacin de un trabajo mecnico, por ejemplo, la contraccin muscular y movimientos celulares, (b) el transporte activo de iones y molculas y (c) la sntesis de molculas. Para la mayora de los animales, incluyendo al hombre, la energa til para la clula es la energa qumica, la cual se encuentra contenida en los nutrientes (carbohidratos y lpidos, principalmente) que se consumen. A travs de un conjunto procesos enzimticos bien definidos, la clula extrae dicha energa y la hace disponible para que se realicen una gran variedad de procesos celulares, entre los que destacan los encaminados a la sntesis de (anabolismo) y degradacin (catabolsmo) de biomolculas, a la suma de ambos procesos se le identifica como Metabolismo. La clula ha diseado para la glucosa, los cidos grasos y los aminocidos un proceso metablico nico (metabolismo de carbohidratos, de lpidos y de protenas, respectivamente), acompaado cada uno de ellos de un estricto mecanismo de regulacin (control metablico). A continuacin, se har una breve descripcin de los procesos anablico y catablico de la glucosa. Las vas enzimticas relacionadas con el metabolismo de la glucosa son: (1) oxidacin de la glucosa, (2) formacin de lactato (3) metabolismo del glucgeno, (4) gluconeognesis y (6) va de las pentosas fosfato. OXIDACIN DE LA GLUCOSA La oxidacin de la glucosa involucra un conjunto de reacciones enzimticos, ligadas una de la otra y vigiladas por un estricto control metablico, todo con el nico fin, de hacer disponible para clula, la energa qumica contenida en la glucosa. La reaccin global es: Glucosa CO2 + H2O + ATP

La formacin de CO2 + H2O + ATP a partir de la glucosa, se lleva a cabo, porque existe una disponibilidad de O2 y que aunado a la necesidad de energa, se inducen los procesos enzimticos claramente definidos por sustratos y productos, ellos

son: (1) gluclisis, (2) transformacin del piruvato en acetil CoA, (3) ciclo de Krebs y (4) fosforilacin oxidativa.

Gluclisis. La gluclisis se realiza en el citosol y comprende la conversin de glucosa

en piruvato, cuya reaccin global es: Glucosa + 2 Pi + 2 ADP + 2 NAD+ 2 piruvato + 2 ATP + 2 NADH + 2 + + 2 H2O En este proceso participan 10 enzimas diferentes que catalizan diez reacciones secunciales, las cuales podramos dividir en tres etapas: a) formacin de fructosa 1,6bisfosfato a partir de glucosa, b) formacin de triosas fosfato (gliceraldehido 3-fosfato y dihdrixiacetona fosfato) a partir de fructosa 1,6-bisfosfato y c) formacin de piruvato a partir de gliceraldheido 3-fosfato. En la primer etapa se consumen dos ATPs, uno con la enzima hexoquinasa y despus de una reaccin de isomerizacin, se emplea el segundo ATP, con la enzima fosfofructoquinasa , reacciones que dan origen a la fructosa 1,6-bisfosfato, con la que se inicia la segunda etapa, al convertirse la fructosa 1,6-bisfosfato en sustrato de la enzima aldolasa y cuyos productos son las dos triosas fosfato (gliceraldehido 3-fosfato y dihidroxiacetona fosfato), seguidamente se inicia la tercer etapa, la que se caracteriza por la isomerizacin de la dihidroxiacetona fosfato en gliceraldehido 3-fosfato por lo que al finalizar esta etapa, contamos con dos molculas de gliceraldehido 3-fosfato, mismas que servirn de sustrato para la formacin de piruvato, uno por cada una de ellas. Con la sntesis de piruvato, termina la tercer etapa, la que se distingue inicialmente, por el requerimiento de la coenzima NAD + y de un Pi (ortofosfato), para oxidar y fosforilar al gliceraldehido 3-fosfato el cual se transforma en 1,3bisfosfoglicerato mas NADH (coenzima reducida), a partir de este producto recin formado y por accin de la enzima fosfoglicerato quinasa se sintetiza y se libera, la primer molcula de ATP y mas adelante, en la reaccin catalizada por la piruvato quinasa, se forma a nivel de sustrato, la segunda molcula de ATP. Es en este punto, donde finaliza la gluclisis, sin embargo, son los 2 ATPs liberados y los 2 equivalentes reducidos (NADH +) los que no debemos olvidar. Con la importacin del piruvato hacia la mitocondria y su transformacin en acetil-CoA se inicia la siguiente etapa de la oxidacin de la glucosa. Las mitocondrias albergan la enzima piruvato deshidrogenasa, las enzimas del ciclo de Krebs, las enzimas que catalizan la oxidacin de los cidos

grasos y las enzimas y protenas involucradas en el transporte de electrones y sntesis de ATP, por lo que las hace ser, los centros del metabolismo oxidativo en eucariontes.

Transformacin del piruvato en acetil CoA. Una ves formado el piruvato,

este se transloca hacia el interior de la mitocondria, en donde ser transformado por accin del complejo enzimtico piruvato deshidrogenasa ( piruvato dehisrogenasa, dihidrolipoil deshidrogenasa y dihidrolipoil transacetilasa) en Acetil CoA, va un reaccin de tipo descarboxilacin oxidativa. Piruvato + CoA + NAD+ acetil-CoA + CO2 + NADH

Las coenzimas y grupos protticos requeridos en esta reaccin son pirofosfato de tiamina (TPP), dinucletido de flavina y adenina (FAD), dinculetido de niacina y adenina (NAD+) y lipoamida (cido lipico). La descarboxilacin oxidativa del piruvato, dirige a los tomos de carbono de la glucosa a su liberacin como CO2 en el ciclo de Krebs (ciclo del cido ctrico) y por consiguiente, la produccin de energa.

El ciclo de Krebs. Este proceso, se inicia con la condensacin irreversible de las

molculas de Acetil-CoA y oxaloacetato, esta reaccin es catalizada por la enzima citrato sintasa y su producto es el citrato. A partir de citrato, se despliega una serie de reacciones irreversibles, que culminan con la generacin de otra molcula de oxaloacetato, pasando por la formacin de -cetoglutarato y su tranformacin en succinil CoA + NADH + CO2, reaccin catalizada por un complejo enzimtico denominado complejo del -cetoglutarato deshidrogenasa que requiere como coenzimas y grupos prostticos a TPP, FAD, NAD+ y lipoamida, igual a los requeridos por el complejo de la piruvato deshidrogenasa. Otros intermediarios son: la formacin de succinato y liberacin de un GTP a partir de succinil CoA y por consiguiente la sntesis de fumarato a partir de succinato, reaccin el la cual se libera un FADH2, existe tambin en el ciclo de Krebs un sitio mas de descarboxilacin oxidativa, en donde se forma NADH + CO2 y otro donde nicamente se libera NADH. La estiquiometra del ciclo de Krebs es: Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O 2CO2 + 3NADH + FADH2 + GTP + 2H+ + CoA

El ciclo de Krebs es la va comn para la oxidacin aerbica de los sustratos energticos, condicin que convierte a este proceso enzimtico en la va degradativa ms importante para la generacin de ATP. Los 3NADH y el FADH2 liberados en el ciclo de Krebs, son reoxidados por el sistema enzimtico transportador de electrones (Figura 1), estableciendo as un flujo de electrones, los cuales son dirigidos hacia el O2 como aceptor final, los productos de este proceso son una molcula de agua y una gran cantidad de energa liberada, energa que es utilizada para sintetizar ATP. Al acoplamiento entre la oxidacin de los equivalentes reductores (NADH, FADH2) y la sntesis de ATP (ATP sintetasa) se les conoce como fosforilacin oxidativa.

Figura 1. Cadena respiratoria y ATP sintasa.

Cadena transportadora de electrones. La cadena transportadora de electrones

es una serie de cuatro complejos (I, II, III, IV) a travs de los cuales pasan los electrones. Los electrones son llevados del Complejo I y II al Complejo III por la coenzima Q (CoQ o ubiquinona) y del Complejo III al Complejo IV por la protena citocromo c.

Los electrones del NADH mitocondrial son transferidos al FMN uno de los grupos prostticos de la NADH-Q oxidorreductasa (Complejo I), posteriormente los electrones se transfieren a un segundo tipo de grupo prosttico el de las protenas hierro-azufre y de aqu pasarn a la coenzima Q (QH2 o ubiquinol), quien tambin recibe electrones de la succinato-Q reductasa (Coplejo II) a este complejo pertenece la enzima del ciclo de Krebs succinato deshidrogenasa la que genera FADH2, quien cede sus electrones a protenas hierro-azufre y de aqu a la coenzima Q para formar QH2 . La funcin del Complejo III identificado como Q-citocromo c oxidorreductasa es catalizar la transferencia de electrones desde QH2 al citocromo c oxidado (cyt c). La etapa final de la cadena transportadora de electrones consiste en la oxidacin del cyt c reducido generado por el Complejo III y la consiguiente reduccin del O2 a dos molculas de H2O. Esta reaccin es catalizada por la citocromo c oxidasa (Complejo IV). Durante el flujo de electrones por la cadena respiratoria se realiza una transferencia de protones (H+) va los Complejos I, III y IV que va desde la matriz de la mitocondria hacia la zona localizada entre la mambrana mitocondrial interna y externa (espacio intermembranal).

Figura 2. Complejos de la cadena respiratoria.

La coincidencia de un flujo de electrones y de protones a travs de una membrana lipdica ocasiona la generacin de un gradiente de pH y un potencial de membrana, ambas condiciones constituyen una fuerza protn-motriz que se utiliza para dirigir la sntesis de ATP va la enzima ATP sintasa (Figuras 1 y 2). ADP3 + HPO42 + H+ ATP4 + H2O

Un flujo de H+ a travs de la ATP sintasa ocasiona la liberacin del ATP hacia la matriz mitocondrial. La fuente inmediata de estos protones es el espacio intermembranal, en donde se localizan los protones que fueron translocados a travs de los Complejos I, III y IV de la cadena transportadora de electrones. Hasta ahora se ha considerado la oxidacin del NADH y FADH2 formados en la mitocondria (transformacin del piruvato en acetil CoA y ciclo de Krebs), sin embargo, NADH citoslico liberado durante la reaccin catalizada por la gliceraldehido-3-fosfato deshidrogenasa debe ser reoxidado para que contine la gluclisis, por lo que deber ser transferido a la mitocondria para su oxidacin a nivel de la cadena transportadora de electrones, pero debido a que este equivalente reductor no puede atravesar por s mismo la membrana mitocondrial, la clula contempl la reduccin de un sustrato por el NADH en el citoplasma, una vez reducido este sustrato, es transportado hacia la matriz mitocondrial por un acarreador especfico , ya dentro de la mitocondria, el sustrato reducido ser oxidado y devuelto al citoplasma para experimentar de nuevo el mismo ciclo. A este sistema de transporte especfico, se le conoce con el nombre de lanzadera, para el NADH de citoplasma son dos las lanzaderas reportadas, uno es el de la dihidroxiacetona fosfato/glicerol-3-fosfato que genera dentro de la mitocondria FADH2 y que es especialmente activa en el cerebro, y el otro sistema de transporte es el de la lanzadera malato/aspartato principalmente activa en hgado y corazn, y que produce NADH. FORMACIN DE LACTATO. Cuando la cantidad de oxgeno disponible para la clula es limitada, como ocurre en el msculo durante la actividad intensa, el NADH generado durante la gluclisis no puede reoxidarse a tasas comparables en las mitocondrias y con la finalidad de mantener la homeostasis, el piruvato es entonces reducido por el NADH para formar lactato,

reaccin catalizada por la lactato deshidrogenasa esta desviacin metablica del piruvato mantiene a la gluclisis operativa bajo condiciones anaerbicas. La reaccin global de la conversin de glucosa a lactato es: Glucosa + 2Pi + 2ADP METABOLISMO DEL GLUCGENO El glucgeno es un polisacrido donde se almacenan glucosas, es una estructura de un elevado peso molecular, altamente ramificado. Los residuos de glucosa estn unidos mediante enlaces glucosdicos (1-4) y (1-6), los principales depsitos de glucgeno en los vertebrados se encuentran en el msculo esqueltico y en el hgado. La degradacin de estas reservas de glucosa o movilizacin del glucgeno tiene como finalidad suministrar glucosa 6-fosfato, la enzima clave en la ruptura del glucgeno es la glucgeno fosforilasa quien escinde mediante la adicin de ortofosfato (Pi) los enlaces de tipo (1-4) para producir glucosa 1-fosfato. La ruptura de un enlace por la adicin de un ortofosfato se reconoce como fosforolisis. Glucgeno + Pi (n residuos) glucosa 1-fosfato + glucogeno (n -1 residuos) 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O

La glucgeno fosforilasa no es capaz de romper enlaces ms all de los puntos de ramificacin, ya que los enlaces glucosdicos (1-6) no son susceptibles de escisin por la fosforilasa, de hecho, la ruptura se detiene a los cuatro residuos de glucosa de un punto de ramificacin. Para eliminar la ramificacin se requiere de una segunda enzima, la (1-4 1-4) glucantransferasa que cataliza dos reacciones. En primer lugar, tiene la actividad de transferasa, en la que la enzima elimina tres residuos de glucosa restantes y transfiere este trisacrido intacto al extremo de alguna otra ramificacin externa. Esta trasnferencia deja expuesto un solo residuo de glucosa unido por un enlace glucosdico (1-6), este residuo se libera por la actividad (1 6)-glucosidasa que posee la misma enzima glucantransferasa, lo que da lugar a una molcula de glucosa libre y una estructura no ramificada de residuos de glucosa susceptible de ser fraccionado por la fosforilasa. La glucosa 1-fosfato producida por la fosforilasa, debe convertirse a glucosa 6-fosfato para metabolizarse mediante la gluclisis, esta reaccin es catabolizada por la enzima fosfoglucomutasa. El hgado libera glucosas a sangre durante la actividad muscular y los intervalos entre comidas para que puedan consumirla principalmente el

cerebro y msculo esqueltico. Sin embargo, la glucosa fosforilada, producida por la degradacin del glucgeno no se transporta con facilidad fuera de las clulas, para esto, el hgado contiene una enzima hidroltica, la glucosa 6-fosfatasa, que escinde el grupo fosforilo y produce glucosa libre y ortofosfato. La degradacin del glucgeno esta regulada por las hormonas adrenalina (msculo) y glucagn (hgado). La sntesis de glucgeno la realiza la clula de una manera totalmente diferente al mecanismo de su degradacin: Sntesis: Degradacin: Glucgeno + UDP-glucosa Glucgenon+1 + Pi glucgeno n +1 + UDP glucgeno n + glucosa 1-fosfato

La UDP-glucosa es una forma activada de la glucosa y se sintetiza a partir de glucosa 1fosfato y UTP en una reaccin caltalizada por la UDP-glucosa pirofosforilasa. Para la sntesis de glucgeno es necesaria la presencia de un oligosacrido de glucosas (este oligosacrido se encuentra unido a una protena identificada como glucogenina) unidas por enlaces (1-4) y la enzima glucgeno sintetasa que es la enzima reguladora del proceso. La enzima glucgeno sintetasa enlaza mediante la formacin un enlace (1-4) glucosdico a la glucosa del UDP-glucosa con una de las glucosas del oligosacrido, lo que desplaza al UDP, repetidas participaciones de la glucgeno sintetasa hacen posible el crecimiento del glucgeno. La glucgeno sintetasa cataliza solamente la sntesis de enlaces (1-4), por lo que es necesaria la participacin de otra enzima para formar enlaces (1-6), que hagan del glucgeno un polmero ramificado. La ramificacin tiene lugar despus de que un cierto nmero de residuos de glucosa se hayan unido mediante enlaces (1-4) por la glucogeno sintetasa. La enzima ramificante o mejor dicho, la amilo-(1,4 1,6)-transglucosilasa, esta enzima transfiere un fragmento terminal de 6 7 residuos de longitud, desde un extremo de al menos 11 residuos de longitud a un grupo hidroxilo situado en posicin 6 de un residuo de glucosa del interior del polmero, esta reaccin crea dos extremos para que continu la accin de la glucgeno sintetasa. Las ramificaciones son importantes porque aumentan la solubilidad del glucgeno y el nmero de extremos a partir de los que se puede obtener glucosa 1-fosfato. La hormona encargada de regular la sntesis de glucgeno es la insulina.

GLUCONEOGNESIS

La mayora de los rganos animales pueden metabolizar diversas fuentes de carbono para generar energa. Sin embargo el cerebro y sistema nervioso central, as como la mdula renal, los testculos y los eritrocitos, necesitan glucosa como nica o principal fuente de energa. Por consiguiente, las clulas animales deben ser capaces de sintetizar glucosa a partir de otros precursores y tambin de mantener las concentraciones sanguneas de glucosa dentro de los lmites estrechos, tanto para el funcionamiento adecuado de estos tejidos como para proporcionar los precursores para la sntesis de glucgeno. Cuando las reservas de glucosa sufren una rpida disminucin se inicia la sntesis de glucosa a partir de precursores como no carbohidratados Los (sustratos sustratos gluconeognicos), proceso conocido gluconeognesis.

gluconeognicos son: lactato, aminocidos, glicerol, propionato, la gluconeognesis tiene lugar principalmente en el citosol, aunque algunos precursores se generen en las mitocondrias y deben ser transportados al citosol para utilizarse. El principal rgano gluconeognico es el hgado, con una contribucin menor, aunque an significativa, de la corteza renal, los principales destinos de la glucosa formada en la gluconeognesis son el tejido nervioso y el msculo esqueltico. En la gluclisis la glucosa se convierte a piruvato y en la gluconeognesis el piruvato se convierte a glucosa. Sin embargo, la gluconeognesis no es el proceso inverso de la gluclisis. En la gluclisis las reacciones irreversibles catalizadas por la hexoquinasa, fosfofructoquinasa y la piruvato quinasa, son salvadas en la gluconeognesis por las enzimas: Piruvato carboxilasa y fosfoenolpiruvato carboxiquinasa: Piruvato + CO2 + ATP + H2O Oxaloacetato + GTP Fructosa 1,6-bisfosfatasa: Fructosa 1.6-bisfosfato Glucosa 6-fosfatasa: Glucosa 6-fosfato glucosa + Pi La estequiometra de la gluconeognesis es: 2 Piruvatos + 4 ATPA + 2 NADH + 6 H2O glucosa + 4 ADP + 2 GDP + 6 Pi +2 NADH + 2 H+ Como se puede observar, el costo energtico para la gluconeognesis es mayor que el de la gluclisis. El lactato se incorpora a la gluconeognesis va su conversin a piruvato y el glicerol entra a nivel de las triosas fosfato. fructosa 6-fosfato oxaloacetato + ADP + Pi + 2 H+ fosfoenolpiruvato + GDP + CO2

VIA DE LAS PENTOSAS FOSFATO Este proceso enzimtico est diseado para satisfacer las necesidades celulares de NADPH, el cual es empleado en la sntesis reductora de cidos grasos, colesterol, nucletidos y glutatin, entre otras molculas. La va de las pentosas fosfato se inicia con la oxidacin de tres molculas de glucosa 6-fosfato y por lo tanto, tres de 6fosfogluconato por las enzimas glucosa 6-fosfato deshidorgenasa y 6-fosfogluconato deshidrogenasa respectivamente, para generar el nmero correspondiente de NADPH y ribosa 5-fosfato. La ribosa 5-fosfato, es utilizada por la clula para la sntesis de RNA, DNA, ATP, NADH, FAD y coenzima A. Con la finalidad de convertir el exceso de monosacrido de cinco tomos de carbono fosforilados producidos en este proceso y los que provienen de la digestin de los cidos nucleicos, se cataliza en la misma va la interconversin de monosacridos de tres, cuatro, cinco, seis y siete carbonos en intermediarios de la gluclisis, lo que en su momento podra generar energa. En cuanto al control metablico se refiere, esta va depende de los niveles de NADP+ . Por otro lado, la distribucin de las molculas de glucosa 6-fosfato hacia la va de las pentosas, est en funcin de las necesidades de NADPH, ribosa 5-fosfato y ATP. BIBLIOGRAFA. 1. Mathews K.C., van Holde E.K., Aher G.K. Bioqumica. 3th Edicin. Pearson Addison Wesley, Espaa 2004. 2. Stryer L., Berg, M.J., Tymoczko L.J. Bioqumica. 5th Edicin. Revert, S.A. Barcelona, Espaa 2002. 3. Voet D., Voet G.J. Biochemistry. 2th Edicin. John Wilwy & Sons, INC. E.U. 1995.