Métodos Básicos en

el Laboratorio de Micología

Identificación de Hongos Filamentosos

Dra. Gloria M. González G.

Dpto. Microbiología
Fac. Medicina, UANL.
 Secreción heridas
Secreción Biopsias
vías resp. bajas

Sangre ESPECIMENES Orina

CLINICOS

Médula ósea Cutáneas

Exudado mucosas (pelo, piel, uñas)
Diagnóstico Micológico

¾ Toma de muestras
(adecuada y abundante)

¾ Recursos del laboratorio

(reactivos, medios de cultivo, equipo)

¾ Personal con experiencia

Toma de Muestras/Tiñas
Toma de Muestras/Tiñas
Toma de Muestras/Pitiriasis Versicolor
Examen Directo

¾ KOH (10-40%)

¾ KOH-DMSO

¾ KOH-calcofluor

¾ Solución salina
Examen Directo

Hidróxido de potasio:

Hidróxido de potasio..........20 gr
Glicerol..............................20 ml
Agua destilada...................60 ml
Examen Directo

Hidróxido de potasio-dimetilsulfóxido:

Hidróxido de potasio.........10 gr
Dimetilsulfóxido...............40 ml
Agua destilada...................50 ml
Examen Directo

Solución salina:

Cloruro de sodio.......... 0.85 gr

Agua destilada............. 100 ml
Examen Directo
Examen Directo
Examen Directo/Cabello
Examen Directo/Cabello
Examen Directo/Limitaciones

¾ Sitio anatómico afectado

¾ Cantidad de muestra examinada

¾ Número de microorganismos

¾ Tipo de paciente

¾ Calidad del personal del laboratorio

Examen Directo/Artefactos
Cultivo de la Muestra

¾ Medios de cultivo

¾ Tipo de contenedores

¾ Tiempo de incubación

¾ Temperatura de incubación
Medios de Cultivo

¾ Agar Sabouraud

¾ Agar Micosel o Micobiótico

¾ Agar papa dextrosa

¾ BHI + antibióticos

¾ BHI
Medios de Cultivo

¾ Refrigeración (2-8 °C)

¾ Bolsas de plástico

* 2 meses
Tipo de Contenedores
Medios de Cultivo/Técnica de Sembrado
Tiempo de Incubación

¾ Levaduras 24-48 horas

¾ Hongos filamentosos 2-4 días

(no patógenos)

¾ Hongos filamentosos 6-15 días

(patógenos)

* Revisiones diarias
Temperatura de Incubación

¾ 25-30 °C

¾ 37 °C
Identificación de hongos filamentosos

Estudios microbiológicos
Morfología
ƒ Características de la colonia macroscópica

Morfología
ƒ Estructuras asexuales microscópica

ƒ Características fisiológicas
Identificación de hongos filamentosos
Características de las colonias
ƒ Color
ƒ Topografía
ƒ Textura
ƒ Tasa crecimiento
 Examen de un Cultivo

¾ Textura (altura de hifas aéreas):

¾ Algodonosa

¾ Aterciopelada

¾ Granular o polvorienta

¾ Glabrosa
Examen de un Cultivo

¾ Topografía (colinas y valles):

¾ Rugosa
¾ Umbonada
¾ Verrucosa
¾ Aplanada
Examen de un Cultivo

¾ Color
Examen de un Cultivo

¾ Técnica de cardaje

¾ Técnica de cinta adhesiva

¾ Microcultivo
Examen de un Cultivo

Azul de algodón y lactofenol:

Fenol, concentrado...........20 ml
Acido láctico....................20 ml
Glicerol............................40 ml
Azul de algodón...............0.50 gr
Agua destilada.................20 ml
Examen de un Cultivo/Técnica de Cardaje
Examen de un Cultivo/Técnica Cinta Adhesiva
 Examen de un Cultivo/Microcultivo

1 3

4
2
 Examen de un Cultivo/Microcultivo

5 7

8
6
 Examen de un Cultivo

¾ Hifas

¾ Conidias

¾ Célula conidiógena

¾ Estructura de sostén

¾ Cuerpos fructíferos

¾ Otros
Trichophyton rubrum
Trichophyton tonsurans
Trichophyton mentagrophytes
Microsporum canis
Epidermophyton floccosum
Pitiriasis Versicolor
Coccidioides immitis

Fase tisular 37 °C Fase micelial 25-30 °C

Aspergillus spp.
Morfología colonial
Medios de cultivo

- Agar de Sabouraud
- Agar papa dextrosa
- Agar extracto de malta
- Agar Czapek-Dox
Cont.
hifas
conidóforo
vesícula
métula
cabeza conidial
Morfología microscópica fiálides
conidias
esclerotia
células de Hülle
cleistotecios
asca
ascosporas
¾ Estructuras