2 o semestre/2011 CENTRO UNIVERSITRIO DO PLANALTO DE ARAX INSTITUTO DE CINCIAS EXATAS E HUMANAS CURSO DE ENGENHARIA DE PRODUO Av. Ministro Olavo Drummond, 5 Bairro So Geraldo CEP 38180-084 Araxa - MG Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 1
Observaes Principais
1. Antes do incio da aula, o aluno deve ler atentamente as instrues para cada exerccio. Deve procurar trabalhar com iniciativa prpria.
2. No fim de cada exerccio h sempre perguntas s quais o aluno dever responder, aps discuti-las com os colegas do grupo ou de acordo com consultas aos textos das aulas tericas;
3. O aluno responsvel pelo material que lhe fornecido: microscpio, lminas, pinas, vidraria, etc. Deve zelar pela boa manuteno dos mesmos, lembrando-se de que os colegas de outras turmas faro uso desses mesmos materiais.
4. Sempre que solicitado, o aluno dever entregar um relatrio de aula prtica que ser avaliado pelo professor.
PRTICA 01 RECONHECIMENTO E UTILIZAO DO MICROSCPIO DE LUZ
1. Conceitos abordados O microscpio de luz um aparelho utilizado para observao de objetos muito pequenos, impossveis de serem examinados, em detalhes, a olho nu. O tipo de microscpio mais utilizado nos estudos citolgicos o composto, que constitudo basicamente por duas lentes convergentes. Neste microscpio a luz atravessa o objeto observado e o conjunto de lentes, antes de atingir o olho, formando uma imagem bidimensional. Assim, o objeto deve ser delgado o suficiente para que a luz atravesse-o. 1.1. Descrio dos componentes do microscpio O microscpio composto, basicamente por dois sistemas: o ptico, formado pelas lentes e o mecnico que as sustenta. A seguir, encontram-se descritas cada uma das partes desses sistemas. A. P ou Base: o suporte do microscpio, pea que sustenta todas as outras. B. Corpo ou Brao: a pea que liga a base parte superior do microscpio. Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 2 . PIatina ou Mesa: uma pea de formato retangular, ou arredondada, disposta paralelamente direo da base do microscpio. Esta pea se destina recepo da lmina contendo o material para estudo. No centro da platina existe uma abertura para a passagem de luz. Associada platina, normalmente, encontra-se uma pea denominada "charriot cuja funo movimentar a lmina no plano horizontal. Os dois parafusos dispostos lateralmente platina, um sobre o outro, promovem a movimentao do "charriot. O parafuso mais externo (de menor dimetro) permite o deslizamento da lmina da esquerda para direita e vice-versa. O parafuso de dimetro maior responsvel pelo movimento da lmina para frente e para trs. Acoplada ao "charriot, h uma presilha que permite o encaixe e fixao da lmina. D. Fonte de Iuz: h uma fonte de luz apoiada sobre o p do microscpio. Alguns microscpios possuem apenas um espelho para refletir a luz de uma fonte externa. E. FiItro: uma placa de vidro colorida (azul, verde, etc.) fixada a um receptculo, que torna a luz mais apropriada observao do material. O filtro azul usado em microscpio de rotina para transformar a luz amarelada da lmpada em luz branca tipo luz solar. F. Condensador: um conjunto de lentes situado abaixo da platina, que concentra e torna paralelo o feixe luminoso, fornecendo a luz necessria iluminao uniforme do objeto em estudo. O "parafuso do condensador, localizado lateralmente no brao do microscpio, permite a movimentao das lentes condensadoras que devem ser mantidas na posio mais elevada para obteno de uma iluminao uniforme. G. Diafragma ou ris: uma pea associada ao condensador, regulvel mediante uma alavanca, que controla a quantidade de luz que atinge o orifcio da platina. A regulagem adequada deste diafragma oferece uma imagem com melhor contraste. H. Canho: a parte superior do microscpio, dotada de movimento de rotao constituda por uma pea semi-esfrica, ligado a um tubo em cuja extremidade encontra-se a lente ocular. . RevIver: localizado abaixo do canho. O revlver uma pea circular dotada de movimento de rotao, no qual se inserem as lentes objetivas. O disco do revlver possui ranhuras para que o observador possa gira-lo para as mudanas de objetivas. J. OcuIar: a lente superior do microscpio que se encaixa no tubo. Toda ocular traz indicado o aumento que proporciona imagem do objeto observado. K. Objetivas: o microscpio possui, geralmente, quatro lentes objetivas. Toda objetiva traz gravado o aumento que proporciona do objeto observado. Este aumento indicado pelo nmero gravado com caracteres maiores. O nmero gravado com caracteres menores refere- se a abertura numrica da lente, um detalhe da ptica. L. Parafuso macromtrico: na lateral do brao existem dois parafusos, geralmente, encaixados um no outro. O de maior dimetro o parafuso macromtrico, que permite grandes avanos ou recuos da platina em relao objetiva. Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 3 . Parafuso micromtrico: esse parafuso permite pequenos avanos ou recuos da platina. Apresenta um menor dimetro, podendo estar prximo ou associado ao macromtrico. N. Trava: junto ao brao do microscpio pode existir uma alavanca que trava o movimento do parafuso macromtrico em uma determinada posio, impedindo a movimentao da platina e protegendo as objetivas contra possveis choques.
2. Objetivos O dentificar e citar as funes de cada componente do microscpio de luz. O Relacionar a imagem formada e os aumentos obtidos com o funcionamento do sistema ptico. O anusear corretamente o microscpio.
. Procedimentos corretos para a focaIizao - Abaixe a mesa totalmente usando o parafuso macromtrico. Gire o revlver, encaixando a objetiva de menor aumento (4X). Verifique pelo rudo caracterstico do encaixe se a objetiva est realmente encaixada. - Pegue a lmina, segurando-a apenas pelas bordas. Verifique se a lamnula est voltada para cima. - Abra a presilha e coloque a lmina sobre a platina, encaixando-a ao "charriot. Solte a presilha e verifique se a lmina est bem encaixada. entralize o material no orifcio da platina, utilizando os parafusos do "charriot. - Acenda a luz do microscpio. - Verifique se o diafragma est aberto, olhando lateralmente se h passagem de luz atravs do orifcio da platina. aso seja necessrio, abra o diafragma, movimentando a alavanca correspondente. - ertifique-se se o condensador encontra-se em posio mais elevada. - Levante a platina at o seu ponto mximo movimentando o parafuso macromtrico, at o seu ponto mximo (at que a objetiva de menor capacidade se aproxime da lmina). - Agora, olhando atravs da ocular, com os dois oIhos abertos e utilizando o parafuso macromtrico, abaixe lentamente a platina, at que o material a ser observado seja visto. Assim que isto ocorrer, corrija a focalizao utilizando o parafuso micromtrico. - Explore o material, movimentando os parafusos do "charriot com uma das mos e o parafuso micromtrico com a outra. oloque sempre o material a ser analisado no centro do campo de observao, antes de passar para a objetiva de aumento imediatamente superior. - Encaixe a objetiva de 10X e faa o ajuste da focalizao, utilizando apenas o parafuso micromtrico. Observe o campo atentamente. Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 4 - Selecione uma determinada rea do material, centralize-a e encaixe a objetiva de 40X. Faa o ajuste da focalizao, utilizando somente o parafuso micromtrico. - Terminando a observao, desligue a luz, gire o revlver para encaixar a objetiva de menor aumento (passando pela objetiva de 10X) e retire a lmina. Obs. Nunca movimente a platina do microscpio com a objetiva de maior aumento encaixada.
4. Recomendaes O O microscpio ptico deve ser transportado cuidadosamente com as duas mos, pelo brao e pela base. O Aps o uso, o microscpio deve ser guardado livre de poeira e/ou leo. Sempre com a objetiva menor.
. Procedimento O Reconhea cada pea do microscpio, colocando o nome em suas parte. O Utilize uma lmina fornecida pelo professor para ter mecanismo de focalizao em 40X, 100X e 400X. No precisa esquematizar.
Figura 1 - O icroscpio ptico
Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 5 PRTICA 02 UTILIZAO DO MICROSCPIO DE LUZ MICROSCPIO PTICO COMUM (M.O.C)
1. Objetivo Exercitar o uso do .O. bem como provar o que foi dito no roteiro anterior sobre as objetivas. Se voc enxergar a imagem invertida, desenhe-a como v.
2. MateriaI - .O. - lminas - gua - lamnulas - Letras recortadas - papel filtro de revista
. Procedimento O Limpe bem a lmina, coloque a letra, duas gotas de gua e a lamnula por cima O Observaes: O Para evitar a formao de bolhas de ar, coloque a lamnula com o polegar e indicador da mo direita de maneira a formar um ngulo entre a lamnula de 45 O Deixe a lamnula cair sobre a letra de uma s vez. O Enxugue o excesso de gua com papel filtro O Esquematize a letra em aumento 40x, 100x e 400x. Atente para as sensveis diferenas de detalhes.
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PRTICA 0 ESTUDOS DAS ESTRUTURAS PROCARIONTES E EUCARIONTES Parte 1
1. Objetivo Observar as estruturas celulares procariontes e eucariontes e diferenci- las.
2. Materiais e Reagentes: - Esptula - Lmina - Lamnula - Azul de metileno 0,1% - icroscpio ptico - Bquer - Papel absorvente - lulas do tecido epitelial da boca - onta gotas
. MetodoIogia: 1- om uma esptula raspa-se levemente a mucosa bucal 2- Limpa-se a lmina com papel absorvente 3- Espalha-se sobre a lmina o material colhido (esfregao de clulas da mucosa bucal) 4- oloca-se uma gota do corante azul de metileno 5- obre-se sobre o esfregao uma lamnula com um ngulo de 45 6- Retira-se o excesso de corante com papel absorvente 7- Observa-se ao microscpio com as objetivas 40x, 100x e 400x, respectivamente. 8- Anotam-se os resultados obtidos 9- Retira-se a lamnula e descarta em um bquer com gua 10- Descarta-se a lmina em outro bquer com gua.
4. ResuItado Esquematize o que voc observou na objetiva de 400x e d nome s estruturas da clula do tecido epitelial da boca.
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Desenho da clula epitelial da mucosa da boca (aumento de 400x)
PRTICA 04 ESTUDOS DAS ESTRUTURAS PROCARIONTES E EUCARIONTES Parte 2
1. Objetivo Observar as estruturas celulares procariontes e eucariontes e diferenci- las.
2. Materiais e Reagentes: - Esptula - Lmina - Lamnula - Azul de metileno 0,1% - icroscpio ptico - Bquer - Papel absorvente - lulas do bulbo da cebola - onta gotas - Pina Anatmica
. MetodoIogia: 1- Retira-se com uma pina, a parte interna de uma escama, uma pelcula delicada que a recobre: a epiderme. Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 8 2- Limpa-se a lmina com papel absorvente 2- oloca-se essa pelcula na lmina 3- oloca-se uma gota do corante azul de metileno 4- obre-se a pelcula com a lamnula com um ngulo de 45 5- Retira-se o excesso de corante com papel absorvente 6- Observa-se ao microscpio com as objetivas 40x, 100x e 400x, respectivamente. 7- Anotam-se os resultados obtidos 10- Retira-se a lamnula e descarta em um bquer com gua 11- Descarta-se a lmina em outro bquer com gua.
4. ResuItado
Esquematize o que voc observou na objetiva de 400x e d nome s estruturas da clula do bulbo da cebola.
Desenho da clula do bulbo da cebola (aumento de 400x)
1) Qual a funo do corante azul de metileno? ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________
Disciplina Biologia Ambiental I/2011 Roteiro de aulas praticas Centro Universitario do Planalto de Araxa - Curso de Engenharia Ambiental e Sanitaria 9 2) Quais as principais diferenas observveis entre as clulas da bochecha e da cebola? ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________
3) Quais as principais diferenas internas que no puderam ser observadas ao O? ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________ ____________________________________________________________________________