Manual de Biossegurana

2002 NDICE I. Introduo II. Princpios da Biossegurana III. Caractersticas das Infeces de Origem Laboratorial IV. Nveis de Biossegurana Classificao dos Laboratrios V. Conteno Primria V.1. Tcnicas Microbiolgicas Seguras V.2. Equipamentos de Segurana Luvas Aventais Visores ou culos Protetores auriculares Pipetadores manuais ou automticos Fluxos Laminares Centrfugas VI. Conteno secundria VI.1. rea fsica dos laboratrios VI.2. Transporte seguro das amostras VI.3. Descarte dos resduos slidos VI.4. Limpeza e desinfeco VII. Referncias bibliogrficas VIII. Anexos I. INTRODUO Profissionais da rea de sade e outros trabalhadores que exercem suas atividades em laboratrios, esto sob risco de desenvolver doena profissional por exposio a agentes infecciosos, radiao, produtos qumicos txicos e inflamveis, entre outros. Atualmente, com a sofisticao das novas tcnicas de diagnstico, observamos profissionais de outras reas, tais como fsicos, qumicos, analistas de sistemas, etc, envolvidos em atividades com exposio a agentes infecciosos e por outro lado, microbiologistas manipulando substncias qumicas ou materiais radioativos. Tornou-se imperativo conscientizar o profissional da importncia da sua adeso s tcnicas microbiolgicas seguras e da incorporao das normas de biossegurana ao seu trabalho dirio. II. PRINCPIOS DA BIOSSEGURANA 02 03 04 07 09 09 11 11 11 11 12 12 13 16 18 18 19 21 22 23 24

O objetivo principal da biossegurana criar um ambiente de trabalho onde se promova a conteno do risco de exposio a agentes potencialmente nocivos ao trabalhador, pacientes e meio ambiente, de modo que este risco seja minimizado ou eliminado. Os mtodos utilizados para se obter esta conteno representam as bases da biossegurana e so ditos primrios ou secundrios. A conteno primria, ou seja, a proteo do trabalhador e do ambiente de trabalho contra a exposio a agentes infecciosos, obtida atravs das prticas microbiolgicas seguras e pelo uso adequado dos equipamentos de segurana. O uso de vacinas, como a vacina contra a hepatite B, incrementa a segurana do trabalhador e faz parte das estratgias de conteno primria. A conteno secundria compreende a proteo do ambiente externo contra a contaminao proveniente do laboratrio e/ou setores que manipulam agentes nocivos. Esta forma de conteno alcanada tanto pela adequada estrutura fsica do local como tambm pelas rotinas de trabalho, tais como descarte de resduos slidos, limpeza e desinfeco de artigos e reas, etc. Os mtodos de conteno primria e secundria sero discutidos detalhadamente a seguir. III. CARACTERSTICAS DAS INFECES DE ORIGEM LABORATORIAL A real incidncia dos acidentes com exposio profissional e ambiental subestimada uma vez que grande parte das ocorrncias no notificada. Apenas o registro dos acidentes graves ou que trouxeram conseqncias sade do trabalhador conhecido. Com relao exposio aos agentes biolgicos sabe-se que cerca de 59% das infeces de origem laboratorial ocorrem em laboratrios de pesquisa e 17% em laboratrios clnicos [1]. Em geral, a aquisio da infeco decorrente da manipulao profissional de agentes infecciosos (40%) e em segundo lugar pela ocorrncia de acidentes no laboratrio. Estima-se que 18% dos acidentes sejam decorrentes de descuido por parte do funcionrio ou de erro humano. Da a importncia da formao do profissional para a prtica das tcnicas microbiolgicas seguras e de um programa de notificao dos acidentes, para que as solues especficas para cada setor possam ser implementadas. Dos acidentes em laboratrio, 25% so associados ao uso e descarte incorreto de agulhas, 27% por materiais que espirram durante sua manipulao, 16% por ferimentos com materiais cortantes (tubos e vidraria), 13% pela pipetagem com a boca, entre outros (19%). A fonte de exposio est relacionada a procedimentos com risco de ingesto, de inoculao, de contaminao da pele e/ou mucosas e de inalao de aerossis. Numerosos procedimentos em laboratrios geram aerossis que podem causar infeces quando inalados. As gotculas menores de 0,05mm de dimetro se evaporam em 0,4 segundos e os microorganismos veiculadas a estas se mantm em suspenso no ar onde se movem entre os setores, de acordo com as correntes de ar [2]. De modo geral, os funcionrios do sexo masculino e jovens (entre 17 e 24 anos) se acidentam mais que os funcionrios de maior idade ( 45 a 64 anos) e que as mulheres. As pessoas que menos se acidentam tem como caractersticas pessoais a aderncia aos regulamentos de BIOSSEGURANA, hbitos defensivos no trabalho e a habilidade em reconhecer situaes de risco. Contrariamente, pessoas envolvidas em grande nmero de acidentes tm pouca opinio formada sobre os programas de Biossegurana, se expem a riscos excessivos, trabalham rpido demais e tm pouco conhecimento sobre os materiais que esto manipulando. Estes dados evidenciam a grande importncia dos programas de educao continuada em biossegurana, na formao de trabalhadores conscientes [3]. A infeco pelo vrus da hepatite B a mais freqente das infeces adquiridas em laboratrios. A incidncia estimada em profissionais de sade de 3,5 a 4,6 infeces por 1000 trabalhadores, que representa o dobro ou at o qudruplo da observada na populao em geral. Especificamente para profissionais de sade que trabalham em laboratrio, o risco de adquirir Hepatite B 3 vezes maior que o de outros profissionais de sade e pode ser at 10 vezes maior que o da populao em geral. Estes dados deixam clara a importncia da vacinao contra a hepatite B em todos os profissionais de sade. A melhor abordagem dos problemas relativos a biossegurana a elaborao de um plano de trabalho que identifique os riscos potenciais setorialmente e possa desta forma, controlar e minimizar as exposies profissionais e os acidentes.

IV. CLASSIFICAO DOS LABORATRIOS DE ACORDO COM O NVEL DE BIOSSEGURANA As caractersticas fsicas estruturais e de conteno de um laboratrio determinam o tipo de microorganismo que pode ser manipulado em suas dependncias. Os microorganismos so classificados por grupo de risco em: Risco 1: Microorganismo cuja manipulao acarreta risco de exposio profissional e de contaminao ambiental baixo ou nulo. Ex: microorganismos usados na produo de cerveja, vinho, po e queijo. (Lactobacillus casei, Penicillium camembertii, S. cerevisiae, etc). Risco 2: Microorganismo que pode causar doena humana ou animal, existem medidas efetivas de tratamento e/ou de preveno e o risco de disseminao da infeco para a comunidade baixo. Exemplo: Vrus da hepatite B, Salmonella enteriditis, Neisseria meningitidis, Toxoplasma gondii. Risco 3: Microorganismo que geralmente causa doena humana ou animal grave mas com baixo risco de transmisso. Existem medidas teraputicas e preventivas conhecidas e disponveis. Exemplos: HIV, HTLV, Mycobacterium tuberculosis, Brucella suis, Coxiella burnetti. Risco 4: Microorganismo que geralmente causa doena humana ou animal grave, o risco de transmisso de uma pessoa a outra, direta ou indiretamente, alto e medidas efetivas de tratamento ou preveno no esto disponveis. Exemplos: Vrus de febres hemorrgicas, Febre de Lassa, Machupo, bola, arenavrus e certos arbovrus. Desta forma, de acordo com suas caractersticas e capacitao para manipular microorganismos de risco 1, 2, 3 ou 4, os laboratrios so designados como nvel 1 de biossegurana ou proteo bsica (P1), nvel 2 de biossegurana bsica (P2), nvel 3 de biossegurana de conteno (P3) e nvel 4 de biossegurana de conteno mxima (P4), respectivamente [4]. Os laboratrios de anlises clnicas em geral so classificados como Nvel 2 de Biossegurana. V. CONTENO PRIMRIA V.1. TCNICAS MICROBIOLGICAS SEGURAS Embora algumas das precaues descritas neste manual possam parecer desnecessrias a alguns laboratrios, desejvel que sejam implementadas com objetivo de treinamento dos funcionrios, para o desempenho de tcnica microbiolgica segura. A prtica correta destas tcnicas o fundamento da BIOSSEGURANA. Equipamentos de proteo individual complementam a funo da prtica microbiolgica segura, mas nunca a substituem. O cumprimento risca das regras descritas abaixo deve ser estimulado pelas chefias competentes, visando sua incorporao mais gil s rotinas de cada setor. 1. O smbolo internacional de biossegurana deve estar fixado na entrada dos laboratrios que manipulam microrganismos de risco 2 ou maior. 2. Os funcionrios devem lavar suas mos aps manipular material infectante e antes de sair do laboratrio. 3. No pipetar com a boca. 4. No fumar, comer, beber, mascar chicletes, guardar alimentos ou aplicar cosmticos dentro do laboratrio. 5. No lamber etiquetas ou colocar qualquer material na boca (p.ex. canetas). 6. Manter o laboratrio limpo, organizado e livre de materiais no pertinentes ao trabalho ali desempenhado. 7. Desinfeco das bancadas de trabalho sempre que houver contaminao com material infectante e no final do dia, de acordo com as rotinas estabelecidas no manual de limpeza e desinfeco. 8. Todos os procedimentos tcnicos devem ser realizados de modo a minimizar a formao de aerossol e gotculas. 9. Aventais devem ter seu uso restrito ao laboratrio. No devem ser usados em reas no laboratoriais tais como reas administrativas, biblioteca, cantina, etc.

10. No usar sandlias. 11. No guardar aventais em armrios onde so guardadas roupas de rua. 12. Usar culos de segurana, visores ou outros equipamentos de proteo sempre que houver risco de espirrar material infectante ou de contuso com algum objeto. 13. No permitir a entrada de pessoas que desconheam riscos potenciais de exposio, crianas e animais. Manter as portas do laboratrio fechadas durante o trabalho. 14. O uso de seringas e agulhas deve ser restrito s injees parenterais e coleta de sangue. No usar para aspirar fluido de frascos. Pipetas devem estar disponveis para tal fim. 15. Usar luvas em todos os procedimentos com risco de exposio a material infectante. No descartar luvas em lixeiras de reas administrativas, banheiros, etc. No atender ao telefone com luvas. 16. Os acidentes com exposio do funcionrio ou do ambiente a material infectante deve ser imediatamente comunicado chefia. Esta, por sua vez, dever encaminhar a notificao de acidente ao Grupo de Controle de Infeco (impresso disponvel nas reas) para as providncias cabveis. V.2. EQUIPAMENTOS DE SEGURANA Genericamente, podem ser considerados equipamentos de proteo individual todos os objetos cuja funo prevenir ou limitar o contato entre o operador e o material infectante. Desta forma, oferecem segurana ao funcionrio desde objetos simples como as luvas descartveis, at equipamentos mais elaborados como os fluxos laminares. Porm, fundamental que o funcionrio tenha conscincia de que os equipamentos de proteo individual (EPIs) no substituem a prtica das tcnicas microbiolgicas seguras. Entre elas, esto o conhecimento preciso do funcionamento e o uso correto e apropriado destes equipamentos de proteo. A maioria dos EPIs, se usados adequadamente promovem tambm uma conteno da disperso de agentes infecciosos no ambiente, facilitando a preservao da limpeza do laboratrio. Por exemplo, no atender telefone de luvas; no abrir as centrfugas antes da parada completa da mesma, no abrir o visor frontal do fluxo durante procedimento, entre outros. O uso de determinados EPI est condicionado a conscientizao e adeso do funcionrio s normas de biossegurana, uma vez que o funcionrio deve vesti-los. So eles: luvas, mscaras, aventais, visores, culos de proteo, protetores auriculares, etc. LUVAS. Devem ser usadas em todos os procedimentos com exposio a sangue, hemoderivados e fluidos orgnicos. Luvas apropriadas para manipulao de objetos em temperaturas altas ou baixas devem estar disponveis nos locais onde tais procedimentos so realizados. Em casos de acidente, luvas grossas de borracha devem ser usadas nos procedimentos de limpeza e na retirada de fragmentos cortantes do cho ou de equipamentos, com auxlio de p e escova. AVENTAIS. Seu uso deve ser obrigatrio e restrito aos laboratrios. Os aventais de tecido devem ser SEMPRE de mangas compridas, comprimento pelo menos at a altura dos joelhos e devem ser usados abotoados. Deve ser dada preferncia s fibras naturais (100% algodo) uma vez que as fibras sintticas se inflamam com facilidade. Quando retirado do laboratrio para ser lavado, o avental dever ser acondicionado em saco plstico. Os aventais descartveis tambm devem ter as mangas compridas com punhos e serem fechados dorsalmente. A gramatura da fibra deve ser tal que o torne impermevel a fluidos espirrados com alguma presso. VISORES OU CULOS. Devem ser usados em todos os procedimentos com risco de impacto ou de espirrar sangue, hemoderivados, fluidos orgnicos ou produtos qumicos. PROTETORES AURICULARES. Esto indicados em setores onde a medio de rudo mostra ndices insalubres para os funcionrios. recomendvel que sejam usados durante o funcionamento do sonicador. Outros equipamentos de proteo merecem referncia especial. So eles: os pipetadores manuais ou automticos, os fluxos laminares e as centrfugas. PIPETADORES MANUAIS OU AUTOMTICOS

Os pipetadores existem para abolir a pipetagem com a boca. Grande parte dos acidentes em laboratrios decorrente da ingesto de material infectante ou de substncias txicas por esta exposio, muitas vezes deliberada, do funcionrio. Por outro lado, o uso incorreto dos pipetadores pode favorecer a formao de aerossis, que contaminando o ambiente de trabalho, expe no s o funcionrio que usa inadequadamente o equipamento, mas tambm todos os outros que trabalham ou circulam na rea. As seguintes regras devem ser obedecidas com relao s tcnicas adequadas para uso das pipetas: 1. O uso de pipetadores manuais ou automticos obrigatrio. A pipetagem com a boca terminantemente proibida em todos os laboratrios. 2. Todas as pipetas devem ter plug de algodo na extremidade para minimizar o risco de contaminao dos pipetadores. 3. No soprar ar com o pipetador, dentro de lquido contendo material infectante. 4. No homogeneizar o material infectante aspirando e expulsando o mesmo das pipetas. 5. No expelir o contedo das pipetas com fora. 6. Preferir pipetas graduadas marca a marca para evitar a expulso da ltima gota. 7. O recipiente para descarte das pipetas deve ficar dentro do fluxo laminar durante o procedimento e no do lado de fora. 8. No usar seringas e agulhas para aspirar lquido de frascos. 9. No usar pipetas Pasteur de vidro. OS FLUXOS LAMINARES Os fluxos laminares so os principais equipamentos na conteno fsica de agentes infecciosos. H trs tipos de fluxos designados como classe I, classe II e classe III. Os fluxos classe I tm entrada frontal de ar que circula dentro da rea de trabalho e aspirado atravs de filtro HEPA, protegendo o meio ambiente da contaminao com microrganismos. Como no geram cortina de ar, protegem o operador da contaminao, mas no o material que est sendo processado (Figura 1). Os fluxos laminares classe II tm abertura frontal, fonte de ar com filtro HEPA e exausto tambm com filtro HEPA. H duas variaes do fluxo classe II, designadas como A e B. O fluxo laminar classe II tipo A recircula 70% do ar e pode ser usado com microrganismos de risco 2 e 3, substncias qumicas em pequena quantidade e substncias com traos de material radioativo. O fluxo laminar classe II tipo B recircula 30% do ar e so adequados para quantidades maiores de substncias txicas, volteis e radioativas por possurem duplo filtro HEPA na exausto do ar (Figuras 2 e 3). A durabilidade deste precioso equipamento est relacionada ao uso adequado de seus recursos. Os fluxos devem ser limpos com lcool 70o (com exceo do visor acrlico) antes do incio das atividades e ao final de cada dia de trabalho. Evitar ligar e desligar o sistema; quanto mais tempo ligado maior a segurana oferecida e maior a durabilidade dos filtros. recomendvel que todos os frascos de solues, reagentes e outros materiais que entraro no fluxo sejam previamente limpos com lcool 70o. Os coletores de prfurocortantes e as cubas para descarte de pipetas devem ficar dentro do fluxo para evitar a entrada e retirada das mos durante a operao. Entretanto, devem ser retirados ao final de cada procedimento, deixando novamente limpa a rea de trabalho. Alm do exposto, outras regras bsicas devem ser respeitadas para o bom funcionamento e durabilidade do equipamento: 1 No usar antes de instalado pelos fornecedores e funcionando adequadamente. 2. Nunca abrir o visor frontal durante o uso do fluxo. 3. Reduzir ao mnimo os materiais que ficaro dentro do fluxo durante o procedimento. Tais objetos devem ficar no fundo do fluxo sem obstruir as sadas de exausto (grades na mesa).

4. No usar bico de Bunsen no fluxo, pois o ar quente distorce a cortina de ar que o fluxo gera e pode ainda danificar os filtros. 5. Trabalhar usando o meio e a parte de trs do fluxo, de modo visvel atravs do visor frontal. 6. O trnsito atrs do operador deve ser minimizado. O local onde o fluxo ser instalado deve ser previsto antes que reformas intempestivas sejam efetuadas. 7. O operador no deve atrapalhar o fluxo de ar gerado com movimentos repetidos de retirada e introduo das mos dentro do fluxo. 8. Manter o fluxo funcionando por pelo menos mais 5 minutos aps o trmino do procedimento, antes de deslig-lo. 9. Cumprir os prazos estipulados pela assistncia tcnica para as visitas de reviso e de trocas de filtros. AS CENTRFUGAS. Os acidentes com centrfugas raramente causam infeces laboratoriais. Entretanto, um nico acidente geralmente expe um nmero grande de funcionrios. Todo procedimento de centrifugao gera aerossol e as centrfugas so equipamentos que impedem a disperso destas partculas no ar. Para tal, necessrio que operem fechadas e cumprindo-se os prazos previstos para sua abertura aps o procedimento de centrifugao. Felizmente, hoje em dia a maioria das centrfugas tem dispositivo que impede seu funcionamento caso no estejam adequadamente travadas. Para garantir a segurana da centrifugao necessrio: 1. As centrfugas devem estar calibradas, funcionando adequadamente e operando e acordo com as orientaes do fabricante. 2. Devem ser colocadas em locais que permitam que mesmo funcionrios de baixa estatura, consigam inspecionar seu interior todos os dias e colocar as caapas corretamente. A centrfuga que deixa resduos no rotor e fica suja no final do dia no est funcionando mecanicamente de forma satisfatria. Nestes casos, rever os protocolos de uso e chamar a assistncia tcnica. 3. As caapas e rotores devem ser inspecionados diariamente tambm com relao a rachaduras e corroso. 4. O balanceamento dos tubos deve ser feito com lcool 70o e no com soro fisiolgico que corrosivo para metais. 5. Aps o uso, ao final do trabalho, as caapas devem ser limpas e estocadas invertidas para escoar qualquer resduo de seu interior. 6. Os tubos devem ser colocados tampados no interior da centrfuga. 7. Dar preferncia s centrfugas com caapas seladas que promovem maior segurana contra a disperso de aerossis. 8. Ocorrendo quebra de tubos durante a centrifugao, parar o procedimento e proceder de acordo com as rotinas estabelecidas no manual de limpeza e desinfeco.

VI. CONTENO SECUNDRIA VI.1. REA FSICA DOS LABORATRIOS Embora as exigncias de cada setor sejam diversas, existem certos aspectos que em geral so vlidos para todos os laboratrios. 1. O laboratrio deve ser amplo para permitir o trabalho com segurana e facilitar a limpeza e manuteno.

2. Paredes, tetos e cho devem ser fceis de limpar, impermeveis a lquidos e resistentes aos agentes qumicos propostos para sua limpeza e desinfeco. O cho no deve ser escorregadio. 3. Tubulao exposta deve estar afastada das paredes. 4. Iluminao deve ser adequada para todas as atividades. 5. As bancadas devem ser fixas s paredes, impermeveis gua e resistentes aos desinfetantes, cidos, solventes orgnicos e calor moderado. 6. O mobilirio deve ser de fcil limpeza. O espao entre os equipamentos deve permitir a limpeza de toda a rea, com o mnimo de deslocamento de equipamentos de grande porte. 7. Os materiais de uso dirio podem ficar em estoque pequeno dentro do laboratrio, porm nunca sobre as bancadas. O restante do material de consumo deve ser estocado em rea prpria, fora das dependncias do laboratrio. 8. As portas devem ser mantidas fechadas. 9. Autoclave deve estar disponvel no mesmo prdio dos laboratrios. 10. A rea destinada guarda de objetos pessoais e ao armazenamento de alimentos para consumo dirio, deve estar fora do laboratrio. 11. Em caso de falta de energia eltrica, setores que dispem de freezer, cmaras frias e fluxos laminares que necessitam ficar continuamente ligados, devem ter geradores que se ligam automaticamente. VI.2. O TRANSPORTE SEGURO DAS AMOSTRAS Para que haja segurana no transporte das amostras entre os laboratrios e dentro do complexo hospitalar, algumas observaes devem ser feitas: 1. Certificar-se de que os recipientes esto bem fechados e que no h vazamento do contedo. 2. As requisies dos exames no devem ser enroladas aos tubos, mas sim acondicionadas em sacos plsticos durante o transporte. 3. Tubos em pequena quantidade podem ser encaminhadas em sacos plsticos fechados. Se a quantidade for grande, estantes de metal, acrlico ou plstico devem estar disponveis para que as amostras sejam encaminhadas sem inclinao. No usar estantes de madeira. 4. Para o transporte de grandes quantidades de bolsas de sangue, recipiente plstico lavvel para acomodao das bolsas deve estar disponvel, bem como carrinho para transporte destes recipientes. 5. O funcionrio do setor que recebe o material deve usar luvas para retirar as bolsas ou os tubos de seus recipientes. Deve ainda inspecionar os materiais antes de retir-los dos recipientes para garantir que no houve vazamento do material durante o transporte. Tais ocorrncias devem ser notificadas Comisso de Biossegurana para que sua freqncia seja estimada e as medidas para correo sejam implementadas. VI.3. O DESCARTE DOS RESIDUOS SLIDOS

De acordo com a NBR 12808 da ABNT (Associao Brasileira de Normas Tcnicas), os resduos de servio de sade so classificados como resduos infectantes classe A tipo A.1. - biolgico; ou tipo A.2. - sangue e hemoderivados [5]. A recomendao para o manuseio deste tipo de resduo o tratamento pela esterilizao na unidade geradora antes de serem descartados ou encaminhados para incinerao ( ABNT, NBR 12809) [6]. A resoluo CONAMA no. 5 de 5/8/93 recomenda a autoclavagem OU a incinerao para o tratamento este tipo de resduo [7]. O resduo perfurante ou cortante (lminas, tubos, seringas, pipetas Pasteur de vidro, bisturis, etc) deve ser descartado em coletor rgido, disponvel em todos os laboratrios. O coletor deve ser colocado prximo ao local onde o procedimento realizado para evitar que o funcionrio circule com os prfuro-cortantes nas mos ou em bandejas.

Os tubos, pipetas e outros materiais no descartveis, devem ser desprezados em coletores plsticos que so recolhidos periodicamente das reas, por funcionrios do laboratrio responsveis pela limpeza e esterilizao. Estes coletores tm tampa e devem permanecer tampados no setor. A legislao brasileira no permite o despejamento de sangue ou cogulos nas pias. Os resduos biolgicos dos laboratrios devem ser descartados em lixeiras com sacos plsticos brancos leitosos, com espessura respeitando as exigncias legais (ABNT, NBR 9091) e com smbolo de substncia infectante. O recolhimento deste material deve ser realizado pelos funcionrios da Limpeza e Esterilizao, em carrinhos fechados e lavveis, uma vez ao dia ou sempre que se fizer necessrio. Todo material biolgico ser autoclavado na Central de Esterilizao antes do descarte. VI.4. LIMPEZA E DESINFECO de extrema importncia a elaborao de rotinas gerais e especficas para os procedimentos de limpeza e desinfeco de artigos e reas. Devido extenso do tema e da diversidade dos setores no Laboratrio de Virologia do IMTSP foi elaborado um manual especfico sobre este tema cuja leitura encorajamos a todos os funcionrios.

VII. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1. PIKE R.M. Laboratory-associated infections. Summary and analysis of 3921 cases. Health Lab. Sci., 13: 105114, 1976. 2. SEWELL D.L. - Laboratory-associated infections and biosafety. Clin. Micribiol. Rev., 8: 389-405, 1995. 3. GERSHON R.M. and Zirkin B.G. - Behavioral factors in safety training. In D.O. Fleming, J.H. Richardson, J.I. Tulis, and D. Vesley (ed.),Laboratory Safety: principles and practices, 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C., 269-277p. 1995. 4. FLEMING D.O. 1995. Laboratory biosafety practices, p.203- 218. In D.O. Fleming, J.H. Richardson, J.I. Tulis, and D. Vesley (ed.),Laboratory Safety:principles and practices, 2nd ed. American Society for Microbiology, Washington, D.C. 5. NBR 12808 - Resduos de Servio de Sade. Classificao. ABNT - Associao Brasileira de Normas Tcnicas, Janeiro de 1993. 6. NBR 12809 - Manuseio de Resduos de Servio de Sade. ABNT - Associao Brasileira de Normas Tcnicas, Fevereiro de 1993. 7. Ministrio do Meio Ambiente - Conselho Nacional do Meio Ambiente - Resoluo nmero 5, de 5/8/93. D.O.U. Executivo de 31/8/93. 8. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. Centers for Disease Control and Prevention and National Institutes of Health. 4th edition, 1999.

VIII. ANEXOS

Figura 1. Fluxo laminar classe I. Retirado da referncia [8].

Figura 2. Fluxo laminar classe II A. Retirado da referncia [8].

Figura 3. Fluxo laminar classe II B. Retirado da referncia [8].