INTRODUO

Muitos ons metlicos formam complexos estveis, solveis em gua com um grande nmero de aminas tercirias contendo grupos carboxlicos. A formao destes complexos serve como base para a titulao complexomtrica de uma variedade de ons metlicos. Apesar de existir um grande nmero de compostos usados na complexometria, discusso terica que se segue ser limitada a complexos formados com o cido etilenodiaminotetraactico (EDTA), um dos mais comuns.

1. VARIAO DAS ESPCIES DE EDTA EM FUNO DO PH DA SOLUO AQUOSA

O EDTA um cido fraco para o qual o pK1 = 2,00; pK2 = 2,66; pK3 = 6,16 e pK4 = 10,26. Estes valores mostram claramente que os dois primeiros prtons so mais facilmente ionizveis do que os outros dois restantes. Nesta discusso o EDTA ser representado pelo smbolo H4Y, onde o H4 refere-se aos quatro hidrognios ionizveis dos quatro grupos carboxlicos. Os quatro valores de pK dados acima, correspondem s dissociaes:

Em soluo aquosa o EDTA dissocia-se produzindo quatro espcies aninicas; a frao de cada espcie de EDTA em funo do pH mostrada na figura:

Figura 1 Composio de uma soluo de EDTA em funo do pH.

Atravs da figura 1 observa-se que somente para os valores de pH acima de 10 que a maior parte do EDTA em soluo existe na forma de espcie pH abaixo de 10, predominam as outras espcies protonadas Nestes casos pode-se considerar que o on H+ compete com o on metlico pelo EDTA. Ento, a tendncia para formar o quelato metlico num determinado valor de pH no discernvel diretamente a partir do valor da constante de formao absoluta (Kabs) do quelato em questo. . Para valores de .

Onde, Kabs = constante de formao absoluta ou constante de estabilidade absoluta. Pode-se ver na figura 1 que, em pH 4 a espcie predominante em soluo e sua reao com um metal, por exemplo com o zinco, pode ser descrita pela seguinte equao:
.

evidente que medida que o pH diminui, este equilbrio, este equilbrio se desloca no sentido de impedir a formao do quelato e bvio que dever

existir um valor de pH abaixo do qual a titulao do zinco com o EDTA no poder ser realizada. O valor deste pH pode ser calculado e o clculo envolve o valor da constante de estabilidade absoluta (Kabs), bem como os valores apropriados das constantes de dissociao do EDTA. A expresso que d a frao de EDTA na forma de pode ser obtida atravs

da equao que relaciona a relaciona a concentrao total das espcies de EDTA no complexas, Ca, no equilbrio:

Substituindo-se nesta equao as concentraes das vrias espcies em termos das suas constantes de dissociao tem-se:

Onde,

= a frao de EDTA na forma

O valor de

pode ser calculado em qualquer Ph para qualquer ligante cujas

constantes de dissociao sejam conhecidas. Para efeito de clculo possvel efetuar algumas simplificaes; por exemplo, quando se titula uma soluo em pH muito alto claro que o termo ser desprezvel.

Como os valores de se estendem sobre um intervalo muito amplo de magnitude, na prtica pode-se fazer um grfico de mostrado na figura 2 e foi traado dos dados da Tab. 1 . Tal grfico para o EDTA

Figura 2 Variao de log4 com o pH, para o EDTA

Substituindo-se o valor de absoluta, dada por (V), tem-se:

na expresso da constante de estabilidade

Tabela 1 Valores de 4 para EDTA

Onde, K chamada de constante de estabilidade condicional. Ao contrrio da Kabs, K varia com o pH, pois est na dependncia de que varia com que varia com o pH. A vantagem de se trabalhar com K em vez de Kabs, est no fato de que K mostra a tendncia real para ocorrer a formao do quelato metlico num determinado valor de pH. Os valores de K so facilmente obtidos a partir dos valores de Kabs e de Note-se que a medida que o pH diminui o consequentemente o valor de K diminui. Como tambm diminui, e

a frao de EDTA na forma de

, em pH acima de 12, onde o EDTA est completamente dissociado, o valor de aproxima-se da unidade ( tende a zero), e da K se aproxima de Kabs.

2. EFEITO DE TAMPES E AGENTES MASCARANTES

Algumas substncias presentes em soluo podem formar complexos com os ons metlicos e com isso, competir com a reao bsica da titulao. Estes complexantes so algumas vezes adicionados propositadamente para eliminar interferncias sendo chamados de agentes mascarantes. Como exemplo temos nquel que forma um complexo de alta estabilidade com ons cianeto, enquanto que o chumbo no forma, portanto, o chumbo pode ser titulado com EDTA em presena de cianeto, sem sofrer interferncia do nquel, ainda que as constantes de estabilidade (Kabs) dos ons considerados, com EDTA, sejam muito prximas: NiY2PbY2logKabs = 18,62 logKabs = 18,04

Durante a titulao de certos ons metlicos com EDTA, pode ser necessrio adicionar, al de agentes mascarantes e do tampo, um complexante auxiliar para impedir a precipitao do metal na forma de seu hidrxido. Geralmente este complexante auxiliar e um dos componentes do prprio tampo, colocado em excesso. Por exemplo na titulao de ons Zn2+ com EDTA, a soluo fortemente tamponda com soluo de amnia e cloreto de amnio que, alm de tamponar o meio, evita a precipitao do Zn(OH)2, atravs da formao de complexos amin-zinco. Os ons Zn2+ formam quatro complexos com a amnia: Eq. 10- Zn2+ + NH3 Eq. 11- Zn(NH3)2+ + NH3 Eq. 12- Zn(NH3)2+2 + NH3 Eq. 13- Zn(NH3)2+3 + NH3 -> <-> <-> <-> <Zn2(NH3)2+ Zn2(NH3)2+2 Zn2(NH3)2+3 Zn2(NH3)2+4 K1 = 1,8 x 102 K2 = 2,2 x 102 K2 = 2,5 x 102 K2 = 1,1 x 102

Chamando de CZn a concentrao analtica de todas as espcies contendo o on zinco, tem-se: Eq. 14- CZn = [Zn2+] + [Zn(NH3)2+] + [Zn(NH3)2+2] + [Zn(NH3)2+3] + [Zn(NH3)2+4] substituindo-se em termos das constantes de equilbrio:
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Eq. 15- CZn = [Zn2+]{1+K1[NH3] + K1K2[NH3]2 + K1K2K3[NH3]3 + K1K2K3K4[NH3]4} Chamando-se de 4 a frao de ons Zn2+ no complexados, Eq. 16- 4 = [Zn2+] / CZn :. [Zn2+] = 4CZn

onde 4 est representando o inverso do termo entre chaves na equao 6 e pode ser calculado a partir dos valores das constantes de equilbrio, K1, K2, K3, K4 e da concentrao de NH3. Da reao dos ons Zn2+ com EDTA na presena de amnia, tem-se: Zn2+ + Y4- -> <- ZnY2Kabs = [ZnY2-] / [Zn2+][Y4-] substituindo-se o valor de [Zn2+] da eq. 16 e o valor de [Y4-] na equao 8: [Y4-] = 4Ca, tem-se: Eq.17- Kabs = [ZnY2-] / 4CZn4Ca :. Eq.18- Kabs44 = K = [ZnY2-] / CZnCa Considerando-se como exemplo o clculo da constante de estabilidade condicional (K), na titulao de zinco com EDTA nua soluo contendo amnia e tamponada em pH 9. Para isso devem-se usar os valores de K1, K2, K3, K4 para a reao de Zn2+ com amnia e ainda, o valor da constante de estabilidade absoluta (em tabela especfica o Kabs para a reao de Zn2+ com EDTA 3,2 x1016 e o valor do 4 para pH 9 5,1 x10-2). Supondo-se tambm que a concentrao de amnia livre no tampo de 0,100 mol L-. 4 = 1 / 1+ 18,0 + 396 + 9900 + 109x103 :. 4 = 8,3x10-6 Mas, da Eq.18 KZnY2- = Kabs44 KZnY2- = (3,2x1016)x(5,1x10-2)x(8,3x10-6) KZnY2- = 1,4x1010 A partir deste valor de KZnY2- pode-se construir a curva de titulao terica de 50 mL de uma soluo de ons Zn2+ 0,0010 mol L- com EDTA 0,0010 mol L- em pH 9.

A figura 6.5 mostra duas curvas, obtidas para concentraes diferentes de amnia em soluo.

Pode-se ver que o salto na inflexo da curva no ponto de equivalncia menor na presena da maior concentrao de amnia. Isto mostra que durante a titulao devese evitar um quantidade muito grande de tampo, o que levaria a uma maior dificuldade na determinao do ponto final. Da forma mencionada, a outra razo para se empregar um agente complexante auxiliar para mascarar o efeito de uma espcie interferente. Assim, tanto zinco quanto magnsio formam complexos estveis com EDTA em pH 10 e podem ser titulados em solues tamponadas neste pH. Se ambos estiverem presentes numa ttulo em que interessasse apenas o magnsio, o zinco e muitos outros metais pesados vo interferir. Porm, os metais pesados em geral formam complexos estveis com cianeto (K4 1020), de tal modo que a adio de cianeto de sdio ou de potssio soluo que est sendo titulada vai competir com a reao de complexao com o EDTA, fazendo com que os ions metlicos no reajam com o EDTA numa extenso significativa. Entretanto, o magnsio forma um complexo mioto fraco com cianeto e pode, ento ser titulado sem interferncias. Por exemplo no caso do zinco, as constantes de formaoes parciais dos complexos com cianeto so: K1 = 3x105; K2 = 1,3x105; K3 = 4,3x104; K4 = 13,5x103, donde, usando-se uma expresso similar equao 15 e 4 10-19 quando [CN-] = 0,100 mol L-1, calcula-se da o valor da constante de estabilidade condicional K, para o complexo ZnY2-, obtendo-se 1,1x10-3. Isto indica que a presena do cianeto efetivamente evita a formao do complexo de zinco com o EDTA. O desmacaramento numa etapa subsequente, a fim de que o zinco possa ser tmbm determinado, pode ser
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efetuado pela adio de uma mistura formaldedo-cido actico, causando a seguinte reao: Zn(CN)2-4 + 4H+ + 4HCOH -> <- Zn2+ + 4HOCH2CN O hidrato de cloral (Cl3CCHO) pode tambm ser usado em reaes de desmascaramento. No caso de complexos com fluoereto, o on metlico pode ser liberado mediante adio de um sal de borato: 4F- + BO-33 + 3H+ -> BF-4 + 3OHConsidere a seguir um exemplo de um clculo envolvendo equilbrio de complexos fundamentados no que foi estudado at agora:

EXERCCIO Calcular a concentrao de ons Zn2+ numa soluo contendo Zn(NO3)2 1,0x10-3 mol L-1 e NH3 livre (no complexada) 0,030 mol L-1, num pH 9,0. Considerar os valores das constantes de formao parciais dos complexos de Zn - NH3 como sendo: log de K1 = 2,25; log de K2 = 2,34; log de K3 = 2,40; log de K4 = 2,04; pKa(NH+4) = 9,26. Soluo: [Zn2+] = 4CM; 1 = Ka / Ka + [H+], logo: 1 = 10-9,26 / 10-9,26 + 10-9,0 = 0,36; 4 = [Zn2+] / CZn2+; 4 = 1 / 1+K1[NH3] + K1K2[NH3]2 + K1K2K3[NH3]3 + K1K2K3K4[NH3]4 4 = 1 / [1+102,25(0,36x0,030)+102,25x102,34(0,36x0,030)2+102,25x102,34 x102,40 (0,36x0,030)3+102,25x102,34 x102,40x102,04 (0,36x0,030)4] 4 = 1 / 34,35 = 2,91x10-2; d

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3.

INDICADORES METALOCRMICOS

Os indicadores metalocrmicos, basicamente, so compostos orgnicos coloridos que formam quelatos com os ons metlicos. O quelato tem uma cor diferente daquela do indicador livre. Para se conseguir uma boa deteco do ponto final da titulao, deve-se evitar a adio de grandes quantidades do indicador. No processo, o indicador libera o on metlico, que ser complexado pelo EDTA num valor de pM mais prximo possvel do ponto de equivalncia. Tais indicadores tm comportamento um tanto complicado pelo fato de que a sua cor depende do pH da soluo. Eles podem reagir com ons H+, assim como o fazem com o ction, apresentando um comportamento anlogo ao de um indicador cido-base. O Negro de Eriocromo T e o Calcon so dois indicadores metalocrmicos tpicos usados em laboratrio. Suas estruturas so:

Na formao do quelato metlico, o rio T liga-se ao metal pelos dois tomos de oxignio dos grupos fenlicos que perdem os hidrognios e pelo grupo azo. A molcula do rio T geralmente representada tambm de modo abreviado como um cido triprtico, H3In. O pKa para a ionizao do HIn2- formando In3- de 11,6. A espcie In3- de cor laranja-amarelada. O rio T forma com os ons metlicos, complexos estveis de estequiometria 1:1, de cor vermelho-vinho. Geralmente as titulaes com EDTA, tendo o rio T como indicador, so realizadas num intervalo de pH de 8 a 10, no qual predomina a forma azul o indicador, HIn2-. A reao que resulta na mudana de cor descrita: H2InHIn2In3-

vermelho pH6-7 azul pH11-12 laranja

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Alm destes dois indicadores, rio T e Calcon, existem um nmero muito grande de outros compostos orgnicos recomendados para diferentes elementos ao serem titulados com EDTA ou complexantes similares. A murexida em meio fortemente alcalino mostra uma cor violeta-azulada que muda para vermelho-violeta num pH abaixo de 9. Pela adio de ons clcio soluo alcalina contendo a murexida forma-se uma cor salmo-rsea, devido presena do complexo clcio-murexida. Quando o EDTA adicionado a uma soluo alcalina contendo murexida, os ons de clcio livres so complexados primeiro, a seguir, no ponto de equivalncia, o clcio removido do complexo Ca-murexida ocasionando a mudana de cor: [Ca-murexida]+ + Y4Rosa

CaY2- + [murexida]violeta-azulado

Outros metalocrmicos de interesse analtico: Calmagita Berilon II Glioxal bis-(2-hidroxianil) Calcicromo Naftil-azonia Vermelho de eriocromo B Zincon Thoron Arsenazo Tiron Violeta de pirocatecol Vermelho de pirogalol Alizarina S Eriocromo cianina Cromo azurol S Hematoxilina Alaranjado de xilenol
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4. ESCOLHA DO TITULANTE

Titulao (ou Volumetria) uma tcnica comum de laboratrio em anlise qumica quantitativa, usado para determinar a concentrao de um reagente conhecido. O mtodo consiste em reagir completamente um volume conhecido de uma amostra com um volume determinado de um reagente de natureza e concentrao conhecida (soluo padro). A substncia de interesse em qualquer determinao recebe o nome de analito. A espcie qumica com concentrao definida recebe o nome de titulante, que , em geral, uma soluo obtida a partir de um padro primrio, podendo ser um sal ou uma substncia gerada na soluo que se deseja valorar. A soluo a ter sua concentrao determinada recebe o nome de titulado. O objetivo da titulao a determinao da concentrao ou da massa da frmula mnima do material qumico titulado compondo um lquido puro ou uma soluo. O material qumico titulante, compondo um outro lquido ou soluo utilizado para atingir o objetivo acima, mediante uma reao qumica que apresente pelo menos uma mudana observvel. Geralmente o titulante preenche a bureta, enquanto o outro encontra-se no erlenmeyer. A seguir adiciona-se sob agitao o titulante abrindose cuidadosamente a torneira da bureta. A reao qumica entre o titulante e o titulado permitir a titulao. A cada adio do titulante, a reao consome parte do titulado. Se todo o titulado for consumido pela ltima adio do titulante, sem que sobre excesso de titulante atinge-se o ponto de equivalncia. muito fcil atingir o ponto de equivalncia no simulador, porm no to fcil no experimento com os reagentes qumicos. Experimentalmente so aceitveis aproximaes que dependem da preciso da balana analtica utilizada no preparo das solues, dos aparelhos volumtricos, e da estabilidade da temperatura no ambiente. Atinge-se resultado de melhor qualidade quando o valor das energias qumicas de atrao entre o componente do titulante e o do titulado que formam o produto da reao forem elevadas e quando as energias qumicas de atrao entre o titulante e o solvente e entre o titulado e o solvente no competirem para a reverso do produto nos reagentes. Alm destes fatores, as impurezas dos materiais e do ambiente, partculas em suspenso no ar, evaporao dos lquidos, a estabilidade qumica dos componentes, a velocidade da reao e o desempenho tcnico do operador tambm influem sobre a qualidade dos resultados.

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6. APLICAO NO CAMPO FARMACUTICO

A telassamia e a terapia por quelao No sistema circulatrio humano, o oxignio transportado pela hemoglobina, uma protena que contm ferro. A hemoglobina consiste em dois pares de subunidades, usualmente simbolizados pelas letras gregas e . A -talassemia uma doena gentica, em que as subunidades da hemoglobina no so sintetizadas em quantidades adequadas pelo organismo. Crianas acometidas por esta doena conseguem sobreviver somente por meio de freqentes transfuses de hemcias normais. A maior dificuldades que este tratamento apresenta que o paciente acumula em seu organismo de 4 a 8g de ferro por ano, provenientes da hemoglobina das clulas transfundidas. O organismo humano no dispe de um mecanismo eficaz para eliminar estas grandes quantidades de ferro, e muitos pacientes morrem em torno dos 20 anos de idades, devido aos efeitos txicos desta sobrecarga do metal. Para facilitar a excreo de ferro, usa-se uma terapia intensiva por quelao. A substncia que produz melhores efeitos e a desferrioxamina B, um poderoso quelante para o Fe, produzido pelo microorganismo Streptomyces pilosus. A constante de formao para o complexo de Fe (III), chamado ferrioxamina B, 10. Usada conjuntamente com o cido ascrbico (vitamina C), um agente redutor que reduz o Fe forma mais solvel Fe a desferrioxamina consegue retirar, por ano, vrios gramas de ferro de um paciente em estado de sobrecarga. O complexo ferrioxamina eliminado pela urina. Em pacientes com talassemia, a desferrioxamina reduz a incidncia de doenas de corao e de fgado e consegue controlar favoravelmente o metabolismo de ferro. Nestas condies, 91% dos pacientes conseguem sobreviver sem complicaes cardacas aps 15 anos de terapias por quelao. Infelizmente, o tratamento com altas doses de desferrioxamina pode causar distrbios de crescimento em crianas. A desferrioxamina um medicamento caro e deve ser administrado continuamente, por meio de injees. A sua principal vantagem no ser absorvida pelo intestino. Vrios quelantes de ferro foram testados durantes mais de ativo que pudesse ser administrado aos pacientes por via oral. Entretanto, nenhum dos compostos
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estudados mostrou ser to eficiente, ou livre de efeitos colaterais, como a desferrioxamina. Em longo prazo, os transplantes de medula ssea ou a terapia gentica podem ser um caminho para a cura definitiva desta doena.

Anticoagulante e contineres O anticoagulante preferido para hemograma um dos sais do EDTA. Tm sido usados o K2EDTA, o K3EDTA e o Na2EDTA. O recomendado pelo International Committee (agora Counsil) (ICSH) o K2EDTA, tanto em forma seca como em soluo, em concentrao final entre 1,5 e 2,2 mg/mL. A soluo tem a vantagem de permitir uma mistura mais rpida e uma menor freqncia de coagulao indesejada; em tubos a vcuo, a parede coberta pelo EDTA, e a mistura lenta no problema. Ao usar-se o EDTA em soluo, algumas determinaes so afetadas pela diluio, principalmente se for coletado um volume escasso de sangue. O excesso de EDTA tem efeito prejudicial na morfologia dos eritrcitos em distenses coradas. O Na2EDTA menos solvel do que os sais potssicos; o K3EDTA causa desidratao dos eritrcitos e baixa o micro-hematcrito. Muitos laboratrios usam instrumentos de contagem de glbulos com um dispositivo aspirador das amostras, que perfura as tampas de borracha e reduz a indesejvel manipulao do sangue. Para us-los, h necessidade de escolha de tubos com rolha de borracha apropriada, que no vaze pelo pertuito.

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CONCLUSO

A discusso que se seguiu foi limitada a complexos formados com o cido etilenodiaminotetraactico (EDTA), um dos comuns complexantes mais empregados. Na complexao de ons metlicos com EDTA, a sua espcie ativa o on y-4, cuja concentrao depende do pH. Pois, somente em soluo nitidamente alcalina o EDTA se encontra presente predominantemente na forma de on y-4, com o aumento da concentrao de on de hidrognio, cai a concentrao da espcie y-4 ou seja, a concentrao do on y-4 diminui com o decrscimo do pH. Alm do titulante (EDTA), certas substncias presentes em soluo podem formar complexos com ons metlicos e, como consequncia, competir com a reao bsica da titulao. Se, na titulao de um cido forte, o pH for plotado contra o volume de soluo da base forte adicionada, h, no ponto de equivalncia um ponto de inflexo da curva. Analogamente, na titulao pelo EDTA, de o pH (negativo do logartmo decimal da concentrao do on metlico livre) for plotado contra o volume de soluo de EDTA adicionado, h um ponto de inflexo no ponto de equivalncia. Na titulao pelo EDTA usa-se um indicador sensvel ao on metlico para detectar as modificaes do pH.

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REFERNCIA BIBLIOGRFICA

BACCAN, N.; ANDRADE, J. C. de; GODINHO, O. E.S.; e BARONE, J.S. Qumica Analtica Quantitativa Elementar. So Paulo: Edgard Blcher; Campinas: Universidade de Estadual de Campinas, 1979.

BARBARA, J. B. Clulas Sanguneas, Um Guia Prtico. 4 Ed. Porto Alegre: Artmed, 2007.

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