PRACTICA N.

- 9 PRUEBA RAPIDA DE LA TUBERCULOSIS

Objetivo: Detectar y diferenciar la bacteria causante de la tuberculosis (M. Tuberculosis).

Introduccin: La tuberculosis (TB) pulmonar es causada por la bacteria llamada Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis) y se puede adquirir por la inhalacin de gotitas de agua provenientes de la tos o el estornudo de una persona infectada. Esto se denomina tuberculosis primaria. En los Estados Unidos, la mayora de las personas se recupera de la infeccin de tuberculosis primaria sin signos posteriores de la enfermedad. La infeccin puede permanecer dormida o inactiva (latente) por aos; sin embargo, en algunas personas se puede reactivar. La mayora de las personas que presentan sntomas de una infeccin de tuberculosis resultaron primero infectadas en el pasado. Sin embargo, en algunos casos, la enfermedad puede reactivarse en cuestin de semanas despus de la infeccin primaria. Fundamento: La Prueba rpida en sitio IgG/IgM de TV es un inmunoensayo cromatogrfico de flujo lateral. Esta prueba de cassette consiste de: 1) una almohadilla con conjugado de colorante tinto que contiene antgenos recombinantes conjugados con oro coloidal (conjugados de M.TB) y conjugados de conejo IgG-oro, 2) una tira de membrana nitrocelulosa que contiene las 2 bandas de prueba (banda T1 y T2) y una banda de control (banda C). La banda T1 esta previamente rociada con anticuerpo para la deteccin del virus anti-TB IgM, y la banda C esta previamente rociada con cabra anti conejo IgG. Cuando un volumen adecuado de espcimen de prueba se dispensa en la ranura de muestra del cassette de prueba, el espcimen migra por accin capilar a lo largo del cassette. Si el anticuerpo igM anti-M-TB est presente en el espcimen va a empatar a los conjugados M-TB. El inmuno-complejo es entonces capturado por el reactivo rociado en la banda T1, formando una banda T1 color vino tino, indicando un resultado positivo. El anticuerpo anti-M-TB IgG, si se presenta en espcimen, va a empatar a los conjugados de M TB. El inmuno-complejo es entonces capturado por el reactivo previamente rociado en la banda T2, formando una banda T2 color vino tinto, indicando un resultado de prueba positivo al virus IgG. La ausencia de ambas bandas T (T1 y T2) sugiere un resultado negativo.

Material y equipo: Muestra sangunea Test para tuberculosis Micropipeta Puntilla para pipeta Centrifuga

Tcnica: 1. Centrifugar la muestra sangunea para extraer el suero 2. Llena la pipeta con la muestra 3. Tomando el gotero en forma vertical, dispensar 1 gota (aprox. 30-45 l) de la muestra dentro del orificio asegurndose de no haber burbujas de aire. 4. Despus agregar 1 gota (aprox. 35-50 l) del diluyente inmediatamente. 5. resultados pueden ser ledos en 15 minutos.

Interpretacin de los resultados:

RESULTADO NEGATIVO: Si solo la lnea C est presente, la ausencia de cualquier color tino en ambas lneas T (T1 y T2) indica que no hay deteccin de anticuerpos.

RESULTADO POSITIVO: Adems de la presencia de la lnea C, si solo la lnea T1 aparece, se indica la presencia del anticuerpo anti-TB IgG; el resultado es positivo.

Adems de la presencia de la lnea C, si solo la lnea T2 aparece, la prueba indica la presencia IgM anti- M.TB. El resultado es positivo.

Adems de la lnea C, aparece tanto las lneas T1 y T2, se indica la presencia del IgG anti-M.TB y del IgM anti-M.TB. El resultado tambin es positivo.

INVALIDO: Si no se desarrolla la lnea C, el resultado es invlido independientemente de la presencia de cualquier lnea como se indica. Repita el examen.

Resultados: La muestra solo marco en la tira C por lo que esto nos indica que se trataba de un resultado negativo.

PRACTICA N.-10 PRUEBA RAPIDA DE LA TIFOIDEA

Objetivo: Detectar y diferenciar la bacteria causante de la fiebre tifoidea (S. typhi).

Introduccin: La fiebre tifoidea es una infeccin que causa diarrea y una erupcin cutnea, que se debe ms comnmente a un tipo de bacteria llamada Salmonella typhi (S. typhi). La bacteria que causa la fiebre tifoidea, Salmonella typhi, se propaga a travs de alimentos, agua o bebidas contaminadas. Si usted come o bebe algo que est contaminado, las bacterias ingresan al cuerpo, viajan hacia el intestino y luego hacia al torrente sanguneo, de donde puede llegar hasta los ganglios linfticos, la vescula, el hgado, el bazo y otras partes del cuerpo. Algunas personas pueden convertirse en portadores de la bacteria Salmonella typhi y Mecanismo de transmisin continuar expulsando la bacteria en sus heces por aos, diseminando la enfermedad. Los sntomas iniciales incluyen fiebre, indisposicin general y dolor abdominal. A medida que empeora la enfermedad, se presenta una fiebre alta (tpicamente por encima de 39.5 C/103 F) y diarrea profusa. Fundamento: Cuando un volumen adecuado de muestra de la prueba se distribuye en la muestra y de la casete de prueba, el muestra migra por accin capilar a travs de la cinta. Anti-S.typhi IgM si est presente en la muestra se unen a los conjugados de la fiebre tifoidea. Los inmunocomplejos son capturados en la membrana de lapre cubiertos de anticuerpos IgM, formando una banda borgoaT1 de color, lo que indica una S. typhi positivo IgM resultado de la prueba. Anti-S. typhi IgG si est presente en la muestra se unir a los conjugados de la fiebre tifoidea. Los inmunocomplejos se luego capturado por los reactivos pre-cubierto en la membrana, formando una banda borgoa T2 de color, lo que indica un S. typhi resultado IgG positivo. Ausencia de las bandas T (T1 y T2) sugiere un resultado negativo. La prueba contiene un control interno (Banda C), que debe exhibir una banda de color burdeos de los inmunocomplejos de cabra anti conejo IgG / IgG de conejo conjugado de oro, independientemente de la evolucin del color en cualquiera de las bandas T. De lo contrario, el resultado de la prueba no es vlida y la muestra debe ser analizado de nuevo con otro dispositivo.

Material y equipo: Muestra sangunea Test para tuberculosis Micropipeta Puntilla para pipeta Centrifuga

Tcnica: 1. centrifugar la muestra sangunea para extraer el suero 2. llenar la pipeta con la muestra 3. Tomando el gotero en forma vertical, dispensar 1 gota (aprox. 30-45 l) de la muestra dentro del orificio asegurndose de no haber burbujas de aire. 4. Despus agregar 1 gota (aprox. 35-50 l) del diluyente inmediatamente. 5. Los resultados pueden ser ledos en 15 minutos.

Interpretacin de los resultados: RESULTADO NEGATIVO: Si slo la banda C est presente, la ausencia de color burdeos en ambas bandas T (T1 y T2) indica que no se detecta anticuerpos antiS. typhi. El resultado es negativo.

RESULTADO POSITIVO: Adems de la presencia de la banda C, aunque slo sea la banda T1 que desarrolla, la prueba indica que para la presencia de anticuerpos antiIgM S. typhi. El resultado es positivo.

Adems de la presencia de la banda C, aunque slo sea de banda T2 que desarrolla, la prueba indica la presencia de anti-IgG S. typhi. El resultado es positivo.

Adems de la presencia de la banda C, las dos bandas T1 y T2 se desarrollan, la prueba indica la presencia de anti-S. typhi IgG e IgM. El resultado tambin es positivo.

INVALIDO: si no se desarrolla la banda C la prueba no es vlida, independientemente de cualquier color burdeos en la T bandas, como se indica a continuacin. Repita el ensayo con un nuevo dispositivo.

Resultados: la prueba desarrollo en la tira c y en la tira T1 por lo que nos indica la presencia de anticuerpos IgM. Resultado positivo.