Universidad Veracruzana

Facultad de medicina

Utrera Jimnez Francisco Javier

Seccin 302

El microscopio
En la historia del microscopio se registra por primera vez su uso por parte de Galileo hacia el 1610 como refieren los registros italianos, pero si verificamos los registros holandeses, se le adjudican a Cansen para aproximadamente la misma poca. Sin embargo, son los registros de Academia dei Lincei, sociedad de cientficos a la que perteneca Galileo, los que publican un trabajo sobre la observacin microscpica de una abeja. Es en aos subsiguientes cuando se produce una importante publicacin que fue consecuencia de una observacin de Malpighi, dado que as se llamaba el cientfico que en 1665 realiza este trabajo a travs de un microscopio: la llamada teora de Harvey sobre la circulacin sangunea. Es para esos aos tambin que datan las investigaciones de Hooke las que dan origen a su obra Micrographia. Corren los aos promediando el siglo XVII cuando un comerciante holands ocupado en investigaciones cientficas visualiza con microscopios de fabricacin casera y describe por vez primera protozoos, bacterias, espermatozoides y glbulos rojos. En verdad, distintas excavaciones nos remontan mucho ms atrs en la historia del microscopio: diferentes descubrimientos nos han trado a nuestros tiempos los restos de lentes planos, convexos y biconvexos con registro de antigedad que nos llevan hasta casi 3000 aos antes de Cristo. Un investigador de nombre Beck encuentra en una expedicin de 1928 estas lentes en la Antigua Mesopotamia. Es hacia la primera parte del siglo XIX que el microscopio va adquiriendo formas ms precisas y acercndose al formato que hoy conocemos. Como el modelo Oberhauser de 1835 de tan slo 15 cm. Ya en 1860 Dollond idea un microscopio compuesto de 32 cm con espejo orientable y tornillo de tipo micromtrico con cremallera. Hacia 1880, ya casi a fines de ese siglo, Nachet fabrica un microscopio de tipo monocular que permite adaptarse a los binoculares y mide 28 cm. La precisin de este instrumental va acrecentndose y es en el ao 1900 que Carl Zeiss comienza a fabricar microscopios pensados para diseccin de cuerpos, fuera animales, vegetales y humanos. Tambin, su precisin comenz a alcanzar a microorganismos, bacterias y virus permitiendo descubrimientos que salvaran a la humanidad de expandir pestes y enfermedades letales, y alcanzando un grado de especificidad y precisin en las investigaciones que hubiera sido imposible de otra manera. En el siglo XX el microscopio va a conservar las caractersticas que haba venido trayendo ms las modificaciones que le van a permitir convertirse en un instrumento indispensable para investigadores, estudiosos, curiosos, aficionados y estudiantes. Algunas mejoras del microscopio tienen que ver con la inclusin de un carro en el que se desplaza la muestra sobre la platina, tambin la posibilidad de utilizar para una ptima visualizacin un sistema elctrico incorporado al cuerpo del microscopio. Con el crecimiento de los avances tecnolgicos, se permite contar con microscopios electrnicos de transmisin y tambin los de sistema de barrido. En ambos casos, este instrumental ha permitido obtener imgenes de gran resolucin en materiales ptreos, metlicos, y orgnicos. Partes del microscopio optico

Sistema ptico o OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador. Ampla la imagen del objetivo. o OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparacin. Ampla la imagen de sta. o CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparacin. o DIAFRAGMA: Regula la cantidad de luz que entra en el condensador. o FOCO: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador. Sistema mecnico o SOPORTE: Mantiene la parte ptica. Tiene dos partes: el pie o base y el brazo. o PLATINA: Lugar donde se deposita la preparacin. o CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular, binocular, ..

o o

REVLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos. TORNILLOS DE ENFOQUE: Macromtrico que aproxima el enfoque y micromtrico que consigue el enfoque correcto.

MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO PTICO 1. Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones. 2. Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas. 3. Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparacin es de bacterias. 4. Para realizar el enfoque: a. Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparacin pudindose daar alguno de ellos o ambos. b. Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un enfoque fino. 5. Pasar al siguiente objetivo. La imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un poco el micromtrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdi por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior y repetir la operacin desde el paso 3. El objetivo de 40x enfoca a muy poca distancia de la preparacin y por ello es fcil que ocurran dos tipos de percances: incrustarlo en la preparacin si se descuidan las precauciones anteriores y mancharlo con aceite de inmersin si se observa una preparacin que ya se enfoc con el objetivo de inmersin. 6. Empleo del objetivo de inmersin: . Bajar totalmente la platina. a. Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habr que echar el aceite. b. Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de x40. c. Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz. d. Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin. e. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. f. Enfocar cuidadosamente con el micromtrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersin y la preparacin es mnima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. g. Una vez se haya puesto aceite de inmersin sobre la preparacin, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se manchara de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operacin desde el paso 3. h. Una vez finalizada la observacin de la preparacin se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revlver. En este momento ya se puede retirar la preparacin de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersin en posicin de observacin. i. Limpiar el objetivo de inmersin con cuidado empleando un papel especial para ptica. Comprobar tambin que el objetivo 40x est perfectamente limpio.

MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin, asegurarse de que la parte mecnica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. 2. Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y daen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. 3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de ptica. 4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio. 5. Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso se pasar el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden daar las lentes y su sujecin. 6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macromtrico, micromtrico, platina, revlver y condensador). 7. El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrndolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se est observando a travs del ocular. 8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algn lquido, secarlo con un pao. Si se mancha de aceite, limpiarla con un pao humedecido en xilol. 9. Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesin prctica y, al acabar el curso, encargar a un tcnico un ajuste y revisin general de los mismos.

Tipos de microscopios
Respecto de los tipos conocidos de microscopios podemos mencionar los siguientes: ptico (es el ms sencillo y est formado por dos lentes, es el utilizado por principiantes y con un aceptable poder de resolucin), electrnico (de barrido especfico para observar las superficies de las muestras a partir de un delgado haz electrnico y de transmisin, ilumina la muestra con un haz de electrones y aumenta la imagen con lentes magnticas), digital (utiliza conexin USB y produce imgenes hacia el monitor de la PC) y cuntico (es parte del instrumental llamado nanoscpico dado que con ellos es posible ver elementos medidos en nanmetros y an menores, tambin llamado microscopio de barrido efecto tnel, presentado en 1982, propici el premio Nbel de Fsica para sus creadores Binnig y Rhrer en 1986.

La gonorrea
La gonorrea, enfermedad producida por N. gonorrhoeae, y conocida tambin con los nombres de "blenorragia", "purgaciones" o "gota militar"3, se ha comprobado que es una infeccin persistente desde inicios del siglo XIX, con incrementos y disminuciones peridicas en su epidemiologa, considerndose en la actualidad una de las enfermedades bacterianas ms prevalentes en los seres humanos. Esta entidad que data desde la antigedad, es hoy una de las enfermedades de transmisin sexual que afecta a ms personas anualmente a nivel mundial. Si bien es cierto que N. gonorrhoeae no se encuentra presente en la cavidad bucal de todos los sujetos que padecen de gonorrea genital (slo es posible detectar al microorganismo en boca en aquellos sujetos que presentan manifestaciones bucales de la enfermedad), es importante que el Odontlogo conozca los principales aspectos inherentes a este microorganismo, los cuales se describen a continuacin: 1.- HISTORIA. N. gonorrhoeae es un diplococo intracelular Gram negativoidentificado por primera vez en 1879 por Albert Neisser a partir de exudados de pacientes con uretritis y oftalmia neonatal. Cinco aos despus Hans Gram, bacterilogo dans facilita la identificacin del gonococo a travs de las tinciones que hoy conocemos como coloracin de Gram, y en 1885 Ernest Bum aisla el microorganismo en un medio artificial. Posteriormente, en 1959 Cuaoma Deacon y asociados introducen el test de anticuerpos fluorescentes para la identificacin de esta especie y en 1964, Thayer y Martin desarrollan un medio selectivo con antibiticos, exclusivo para el crecimiento de N. gonorrhoeae, que se emplea actualmente con algunas modificaciones del original.

2.- TAXONOMIA. Taxonmicamente, N. gonorrhoeae est clasificada de la siguiente manera:

Reino: Protista.

Grupo I: De acuerdo a las caractersticas fenotpicas se incluyen bacterias Gram negativas que presentan pared celular.

Orden: Neisseriales.

Familia: Neisseriaceae. Bacterias Gram negativas, esfricas y sin motilidad, aerobias y/o anaerobias facultativas, hetertrofas ya que utilizan carbono orgnico y carbohidratos como requerimientos metablicos. Las clulas se presentan en pares o masas con sus lados adyacentes aplanados. Son parsitos obligados de las membranas mucosas en humanos. Gnero: Neisseria (por A. Neisser). Bacterias aerobias y/o anaerobias facultativas que se presentan en pares con sus uniones aplanadas.

Especie: Neisseria gonorrhoeae.

3.- MORFOLOGA. N. gonorrhoeae es un diplococo Gram negativo cuyo tamao oscila entre 0,6 a 1 m de dimetro, siendo su tamao promedio de aproximadamente 0,8 m de dimetro (FIGURA 1). Los cocos individuales tienen aspecto de rin o de grano de caf; cuando los microorganismos se presentan en pares los lados planos o cncavos estn adyacentes. Los microorganismos se visualizan al microscopio de luz como diplococos intracelulares, dentro de los polimorfonucleares neutrfilos, a veces en gran nmero. Esta apariencia contribuye a la identificacin de una verdadera infeccin gonocccica. Cuando se aslan inicialmente, los gonococos crecen como colonias diminutas dentro de un borde circunscrito y al ser coloreados con Gram, se visualizan como diplococos Gram negativos tpicos, agrupados y con los lados aplanados. En ocasiones se pueden presentar en ttradas, en especial cuando las colonias son jvenes. Los extendidos preparados de cultivos ms viejos pueden mostrar clulas hinchadas con una amplia variacin en la intensidad de la contracoloracin de safranina. 4.- ULTRAESTRUCTURA. N. gonorrhoeae carece de cpsula, la superficie ms externa de su estructura est compuesta por fimbrias, largos pelos de protenas compuestos de subunidades de pptidos (pilis), con un peso molecular de aproximadamente 20.000 daltons. Estas subunidades estn compuestas por 165 aminocidos y estn considerados como factores de virulencia presentes slo en las cepas virulentas. En la membrana externa trilaminar estn presentes las protenas I, II y III y polisacridos. Es poca la importancia que tiene la protena III, la protena II es la responsable de la adherencia de esta especie a las clulas epiteliales, en tanto que la protena I se extiende a travs de la membrana celular de los gonococos y constituye la base de la clasificacin sexolgica de los mismos. La protena I se presenta en trmeros para formar poros en la superficie a travs de los cuales penetran algunos nutrientes a la clula. N. gonorrhoeae contiene en su citoplasma varios plsmidos; 95% de las cepas poseen un plsmido pequeo, "crptico" (PM 2,4 x 1066) de funcin desconocida: Otros dos plsmidos (PM 3,4 x 106 y 4,7 x 106) contienen genes que codifican para la produccin de lactamasa causante de resistencia a la penicilina. Estos plsmidos son transmisibles de un gonococo a otro por conjugacin. Cabe destacar adems que entre 5 y 20% de los gonococos contienen un plsmido (PM 24,5 x 106) con los genes que codifican para la conjugacin. 5.- FISIOLOGIA. Como cualquier bacteria, N. gonorrhoeae se reproduce asexualmente por divisin binaria, originndose dos clulas hijas aproximadamente del mismo tamao a partir de una clula madre. Esta divisin no es completa ya que no se separan los tabiques o septos de cada una de las clulas que se originan, y de all que se dispongan en pares. Este diplococo es inmvil, aerobio y/o anaerobio facultativo y crece mejor a una temperatura que oscila entre 35 C y 37 C, en una atmsfera entre 3% y 5% de CO2 y con un pH entre 7,2 y 7,6. Los gonococos experimentan autlisis rpida cuando se exponen al aire del ambiente, a la desecacin, luz ultravioleta, sales de plata, fenol y calor hmedo a 55 C. Se diferencian de otras especies de Neisseria por su capacidad de

transformar la glucosa, pero no la maltosa, sacarosa, lactosa, fructosa y manosa en cido a travs de la prueba de agar con tripticasa de cistina (CTA) y por su respuesta positiva en las pruebas de oxidasa y catalasa.

6.- CULTIVO. Los gonococos son bacterias frgiles, de crecimiento lento y con requerimientos nutricionales muy estrictos. Dado que con frecuencia deben ser aislados de reas que contienen un gran nmero de microorganismos de la flora normal como el tracto genital e incluso de localizaciones que pueden albergar otras especies de Neisseria como la orofaringe, se han desarrollado medios especiales para aislar N. gonorrhoeae. Las tcnicas de cultivo poseen un mayor grado de sensibilidad respecto a los anlisis microscpicos. La mayora de los medios para el cultivo de N. gonorrhoeae contienen sangre o hemoglobina calentadas (conocido como medio de agar chocolate debido a su apariencia marrn oscura), siendo el calentamiento la causa de la formacin de un material precipitado que es bastante eficaz para absorber productos txicos presentes en el agar y en otros constituyentes del medio. Uno de los medios de cultivo selectivo ms frecuentemente empleado para el aislamiento primario de N. gonorrhoeae es el ideado en 1964 por Thayer y Martin (medio TM), suplementado con agar chocolate y el cual contena en un principio los antibiticos ristocetina y polimixina B. Luego surgi una versin modificada de la frmula original, que contena vancomicina (3 g/ml), colistina (7,5 g/ml), y nistatina (12,5 g/ml). Estas sustancias antimicrobianas fueron agregadas para inhibir an ms los microorganismos que pudiesen crecer como contaminantes del medio. Posteriormente, Seth agreg lactato de trimetropima (5 g/ml) para inhibir la invasin de especies de Proteus presentes en ocasiones en muestras crvicovaginales y rectales. Este medio se conoce ahora como Agar Thayer Martin modificado. En 1973, Faur y col., introdujeron en los laboratorios de Salud Pblica de Nueva York otro medio selectivo llamado Agar NYC, el cual contiene agar base protectora-pepetona-almidn, suplementado con eritrocitos lisados de caballo y plasma citratado de caballo en lugar de hemoglobina. Para incrementar la recuperacin de cepas de N. gonorrhoeae se agrega dializado de levadura y dextrosa. Por su parte, Granato y col., demostraron que la hemoglobina de los eritrocitos lisados de caballo no era un componente necesario para el crecimiento de estos microorganismos. Las muestras orofarngeas y rectales deben inocularse en medios selectivos porque la flora en estos sitios, muy numerosa y de crecimiento rpido, encubrir cualquier gonococo que pueda estar presente en un medio no selectivo. Por otra parte, los hisopos con las muestras deben hacerse rodar con firmeza sobre el medio selectivo en forma de "Z" y luego pasar un asa o aguja sobre las lneas de siembra, para de esta manera, facilitar la deteccin de colonias de N. gonorrhoeae en la periferia de la superficie del medio, lejos del rea de inoculacin primaria de la muestra.

Los cultivos se incuban a 35 C en una atmsfera de 3-5% de CO2. El nivel de CO2 es importante porque concentraciones menores pueden no permitir el crecimiento del microorganismo, en tanto que concentraciones mayores inhiben el crecimiento de lneas de siembra, para de esta manera, facilitar la deteccin de colonias de N. gonorrhoeae y de Neisseria meningitidis. Los frascos de extincin (mtodo de la vela) son satisfactorios para la incubacin de los medios de cultivo, ya que el nivel de CO2 en estos frascos es de aproximadamente 3%. Si se emplea este sistema, las velas deben ser blancas o de cera de abejas. La atmsfera de incubacin debe ser hmeda y en los frascos de extincin, la evaporacin del medio durante la incubacin provee bastante humedad. Los medios de cultivo para el aislamiento de N. gonorrhoeae as como de otras especies de Neisseria, deben incubarse durante 72 horas e inspeccionarse cada 24 horas. Sobre medio enriquecido (por ejemplo, Mueller-Hinton, Thayer-Martin modificado), N. gonorrhoeae forma colonias convexas, brillantes, prominentes, mucoides, de 1 a 5 mm de dimetro en 48 horas. Las colonias son transparentes u opacas, no pigmentadas y no hemolticas. En general, los gonococos producen colonias ms pequeas que las de otras neisserias. Los gonococos que requieren arginina, hipoxantina y uracilo tienden a crecer ms lentamente en el cultivo primario. Los gonococos aislados de muestras clnicas o conservados por subcultivo selectivo muestran colonias tpicamente pequeas que contienen bacterias con pelos (fimbrias). En subcultivo no selectivo tambin se forman colonias de mayor tamao que contienen microorganismos desprovistos de pelos. Tambin se presentan las variantes opaca y transparente de las colonias de tipo pequeo y grande; las colonias opacas se vinculan con la presencia de la protena expuesta en la superficie, Opa (Protena II). 7.- ECOLOGIA. N. gonorrhoeae no forma parte nunca de la microbiota normal de la boca. Su presencia en ella se debe, casi siempre, a prcticas sexuales genitoorales y, excepcionalmente, a una diseminacin hematgena, razn por la que se considera un microorganismo transitorio o transente de la cavidad bucal. Esta especie se asla en raros casos de gonococcia oral a partir de las lesiones de paladar, lengua, enca y mucosa yugal11, y se puede encontrar en la saliva de los pacientes afectados. 8.- MECANISMOS DE PATOGENICIDAD. Los primeros estudios acerca de la patogenicidad de N. gonorrhoeae no lograron reconocer cambios en los tipos de colonias. A finales de los aos 60, Douglas Kellogg descubri que los gonococos experimentan variacin de fase durante el subcultivo. Despus demostr que los gonococos de colonias pequeas tenan pili y eran virulentos, en tanto que los gonococos de colonias grandes subcultivados no tenan pili y eran avirulentos. Di el nombre de colonia T1 y T2 a los tipos de colonias pequeas, brillantes y densas, tpicas de los aislamientos recientes de casos de gonorrea y a las colonias grandes las llam T3, T4 y T5, las cuales se caracterizaban por ser aplanadas, granulosas y sin el brillo de los otros tipos de colonias observadas en los subcultivos. Es importante sealar que, puede lograrse por medio de los subcultivos la propagacin de los tipos T1 y T2, si se seleccionan a travs de la observacin microscpica colonias individuales de stos tipos.

En la actualidad, los cientficos saben que la variacin de la fase gonocccica ocurre como resultado del reordenamiento cromosmico de las cepas de N. gonorrhoeae. Cabe destacar que los gonococos son patgenos de las mucosas que invaden. Como tales deben persistir en un medio donde corren el riesgo de ser eliminados por la descamacin de las clulas epiteliales (vaginales, bucales) y el flujo de los lquidos (flujo vaginal, secrecin salival), se encuentran a merced de la accin de los anticuerpos y deben resistir a la destruccin de los leucocitos polimorfonucleares. Adems, los gonococos se desplazan del lumen de la mucosa a la submucosa en el curso de la infeccin y algunas cepas invaden la sangre. Para realizar esto, se requiere la participacin simultnea de lo que se considera la estructura antignica. Tratamiento Penicilinas (penicilina G, ampicilina) Ceftriaxona o cefotaxima. Cloranfenicol.

Micosis endmica
Las enfermedades endmicas son aquellas enfermedades infecciosas que afectan de forma permanente, o en determinados perodos a una regin. Se entiende por endmica una enfermedad que persiste durante un tiempo determinado en un lugar concreto y que afecta o puede afectar a un nmero importante de personas. La mayora de las micosis diagnosticadas en Mxico estn producidas por hongos existentes en este pas; el resto tienen como agente causal hongos endmicos en otras zonas concretas del mundo. Las micosis importadas ms caractersticas incluyen: Blastomicosis (producida por Blastomyces dermatitidis) Coccidioidomicosis (por Coccidioides posadasi y Coccidioides immitis) Histoplasmosis (por Histoplasma capsulatum var capsulatum e H capsulatum var duboisii) Paracoccidioidomicosis (por Paracoccidioides brasiliensis) Peniciliosis marneffei (por Penicillium marneffei) Caractersticas Son producidas por hongos dimrficos trmicos: la forma micelial se observa a 30C y la levaduriforme o esfrula a 37C, y en medios adecuados. Estas condiciones pueden variar segn la especie. As, B. dermatitidis y P. brasiliensis pueden hacerlo slo con la respuesta a la temperatura.

 El trmino dimrfico trmico incluye tambin a otra especie, Sporothrix schencki, que por tener distribucin mundial no consideramos importada. Los agentes causales de estas micosis estn catalogados como agentes biolgicos tipo 3, excepto P. marneffei que es tipo 2, por lo que su manejo en el laboratorio lleva consigo riesgos para el manipulador. Para su identificacin, se requiere la conversin a fase levaduriforme, o la deteccin de exoantgeno, o la de cidos nucleicos especficos de especie. Son consideradas micosis endmicas, ya que se encuentran confinadas a ciertas zonas geogrficas donde el hongo se encuentra en la naturaleza. Zonas endmicas Sureste y sur de EEUU; algn caso en Amrica Central; tambin en frica, India y Oriente Medio. El serotipo que carece de antgeno A, slo en frica. Va de Tejido infeccin Area, alguna vez por inoculaci n Levaduras de pared gruesa, gema de base amplia de unin; 8-15 m de dimetro. La levadura hija alcanza el tamao de la madre a menudo. Esfrulas, 2060 m, conteniendo endosporas de 2-4 m. Prueba confirmatoria rgano diana

Micosis

Forma micelial

Blastomicosis

Hifas y Deteccin de Pulmn, conidias exoantgeno A, piel y terminales y deteccin de hueso laterales cido nucleico ovales, o conversin piriformes a en levadura globosas, 4-5 (agar infusin corazn y m. cerebro) a 37C, puede requerir varios pases. Hifas y artroconidias, 3-6 m tpicas en forma de barril. Exoantgeno o Pulmn, piel y DNA. meninges Conversin esfrula, rara vez, requiere cambios de temperatura y CO2

Coccidioidomic ois

Suroeste de Area EEUU; Mxico, Amrica central y del sur. Puede producir infecciones mixtas con Emmonsia parva.

Histoplasmosis capsulati

Focos localizados de amplias zonas de Amrica, frica, el este de Asia y Australia; son raras en Europa.

Area

Levaduras ovales pequeas, 2-4m. Intracelulares, raramente extracelular

Hifas, conidias ssiles directamente de la hifa o pedculos cortos o largos. microconidias globosas, 3-5 m, macroconidias tuberculadas o no de 8-17 m con protuberancias de 2-6x0,5-2 m. Similar a la var capsulatum

Deteccin de exoantgeno A, deteccin de cido nucleico o conversin en levadura en extracto corazn cerebro corazn o agar sangre con cisteina.

Pulmn, hgado, bazo meninges

Histoplasmosis duboisii

frica Central y Madagascar

Se presume area, pero la cutnea es posible

Levadura extracelulares, pared gruesa, 12-15 m con una sola gema, ocasionalmente pequeas cadenas.

Conversin a levadura en medio enriquecio a 37C. Se diferencia de H. capsulatum var capsulatum por el tamao de las levaduras.

Piel, huesos, tejido subcutneo y en menor proporcin pulmn

Piedra blanca y piedra negra

Las piedras son micosis superficiales crnicas que afectan el pelo; sus agentes causales son Trichosporum beigelii, de la piedra blanca, y Piedraia hortai, de la piedra negra. Las dos piedras se han reportado en diferentes regiones, son ms frecuentes en Amrica Central y Amrica del Sur, en reas de clima tropical con alta pluviosidad.

Piedra blanca
La piedra blanca afecta al pelo presente en cualquier rea anatmica. Se caracteriza por la formacin de ndulos alrededor del pelo de color claro y consistencia blanda.

Etiologa
Trichosporum beigelii es un hongo levaduriforme con artrosporas y blastosporas de alrededor de 4 micras, e hifas de 4 a 8 micras de dimetro con tabiques.

Epidemiologa
Es una enfermedad que est relacionada con las condiciones de higiene deficiente.

Manifestaciones clnicas
Se presenta en axilas, pubis y cabeza, como nodulaciones en el pelo, transparentes, verdosas, o blanquecinas, poco adheridas. Su principal manifestacin clnica es la formacin de un ndulo de color claro, beige o crema, de consistencia blanda, alrededor del pelo en cuero cabelludo, barba, axila, pubis, etc.

Diagnostico
Para el diagnstico se observa el ndulo al microscopio ptico, se puede agregar Hidrxido de sodio o Potasio al 10 o 20 %, y se van a observar las estructuras fngicas caractersticas como son hifas fragmentadas. Tambin se puede cultivar en los medios habituales para hongos como son el medio de Agar Sabouraud, y Lactrimel, ambos con antibitico, los cuales se dejan en el laboratorio a condiciones ambientales ( 25 a 30C) y se va a observar el crecimiento en colonias blanquecinas de consistencia pastosa, que progresivamente se van tornando amarillas, y al microscopio se observan hifas tabicadas que se fragmentan con rapidez formando artroconidios.

Piedra negra
Se trata de una micosis superficial no dermatofitica producida por un agente etiolgico denominado Piedraia hortai (hongo dematiceo), el cual afecta al cabello.

Caracterizada por un ndulo alrededor del mismo, que al examinar al microscopio se van a observar las ascas con sus ascosporas en el interior. Se puede cultivar en los medios habituales Sabouraud, Casero o Lactrimel, en los cuales se va a observar despus la formacin de colonias mohosas pardas.

Etiologa
Piedraia hortai es un hongo que presenta hifas ramificadas, septadas, paredes gruesas, ascas y ascosporas.

Epidemiologia, similar a piedra blanca Manifestacin clnica:

Piedra negra: se presenta en cabeza, axilas, y pubis, como nodulaciones negras, pardas, fuertemente adheridas. Se manifiesta como un ndulo duro, de color oscuro que afecta al cabello, y que refiere el paciente al momento de peinarse.

Diagnstico
Se observa el ndulo al microscopio se van a evidenciar las estructuras fngicas propias de este agente como son las ascas con sus ascosporas. Se puede cultivar en medio de Agar Sabouraud, Lactrimel, ambos con antibitico, y se puede observar su crecimiento.

Tratamiento:
Corte de pelo, Aplicacin de bicloruro de mercurio, miconazol, o ketoconazol.

Prevencin
Evitar los factores predisponentes como la sudoracin. Se debe cambiar de ropa frecuentemente, lavarnos frecuentemente, utilizar ropa absorbente y no sinttica (porque sta mantiene la humedad) Higiene adecuada Control diabetes Para un control se puede tener un tratamiento de control cada mes o dos veces al mes con Ketoconazol. Esto con el fin de tener un tratamiento de sostn y evitar recadas.