Biosurfactantes

INTRODUCCIN La actividad comercial, industrial y militar, en el siglo XIX y XX, han considerado los problemas de contaminacin medioambiental que pueden amenazar la salud humana y el funcionamiento del ecosistema. El grado al que tales contaminantes estn disponibles a la biota ha sido largamente investigado para ver todas las implicaciones reguladoras, cientficas y toxicolgicas. La biorremediacin, el uso de organismos (especialmente microorganismos o plantas) para eliminar estos problemas de polucin tiene un inmenso potencial para conocer las necesidades del control de la contaminacin. Es importante el conocimiento sobre la relacin entre la disponibilidad de los residuos qumicos y su susceptibilidad a la biorremediacin. Aunque en el laboratorio los sistemas modelo de muestras de medio o cultivos de microorganismos individuales muestran estas relaciones, lo ms importante es el comportamiento de los residuos qumicos y naturales con microorganismos in situ en los lugares reales contaminados. Los residuos qumicos de inters son esos que confronta hoy la sociedad. Entre stos se encuentran compuestos orgnicos (hidrocarburos del petrleo, pesticidas, solventes clorados) e inorgnicos (metales, oxianiones). No hay duda que, bajo condiciones favorables, muchos contaminantes y microorganismos o plantas interaccionan de un modo que permite la biodegradacin y biorremediacin. Lo que se quiere transmitir es cmo la biodisponibilidad influye en el grado en que la biorremediacin tiene xito. Definiciones de inters: biodegradacin y biorremediacin, y las muchas facetas de la biodisponibilidad Biodegradacin Biodegradacin es la parcial simplificacin o la completa destruccin de la estructura molecular de los contaminantes medioambientales por reacciones bioqumicas complejas, genticamente reguladas, catalizadas por microorganismos; y plantas. Muchas de estas reacciones estn basadas en las leyes de la termodinmica aplicadas bajo condiciones geoqumicas del medio ambiente (por.ej., temperatura, presin, y potencial redox) que prevalecen en los habitat terrestre y acutico. Biorremediacin Biorremediacin es el uso intencionado de los procesos de biodegradacin para eliminar los contaminantes medioambientales de los lugares dnde son un problema. Las tecnologas de biorremediacin usan el potencial fisiolgico de microorganismos y plantas, como est documentado en los ensayos de laboratorio, para eliminar o reducir la concentracin de los contaminantes medioambientales hasta los niveles que son aceptados por los propietarios y/o las agencias reguladoras. La biorremediacin puede ser planteada usando la tecnologa in situ (aplicado directamente a los lugares contaminados) o las metodologas de biorreactor ex situ (despus los contaminantes y/o el suelo, sedimentos, o residuos que los acompaan son retirados de los lugares contaminados). Los complejos, pobremente definidos conjuntos dnde la biorremediacin ocurre y la amplia forma de las posibles rutas para la atenuacin de los contaminantes, puede oscurecer los mecanismos precisos que operan durante las operaciones de biorremediacin. La fitorremediacin es una tecnologa que busca usar varios procesos basados en las plantas para eliminar, transferir, estabilizar, o destruir contaminantes en suelo, sedimento, y aguas subterrneas. Los mecanismos de fitorremediacin incluyen la biodegradacin de la rizosfera, fitoextraccin, fitodegradacin, y fitoestabilizacin.

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Biodisponibilidad Definicin Los microorganismos y las plantas son los catalizadores que realizan la biorremediacin. Pero, la biodisponibilidad de los residuos qumicos en el suelo, sedimentos y aguas puede influir en la eficacia de la biorremediacin. El trmino biodisponibilidad significa muchas cosas en muchos contextos. La primera definicin est tomada de una conferencia de 1988, Proceedings of Bioavailability 88: Chemical and Biological Aspects of Nutrient Bioavailability, organizada por the Food Group of Royal Society of Chemistry, The Working Party on Food Chemistry of the Federation of European Chemical Societies, and the Federation of European Nutritional Societies. Hasta hace poco tiempo, era comn asumir que los valores nutricionales de los alimentos y dietas era ms o menos sinnimo a su composicin nutricional determinada por anlisis qumico. Las limitaciones de este esbozo simple obviamente est en la relacin de los elementos traza en la nutricin, pero recientemente muchas lneas de investigacin han enfatizado la necesidad de comprender y cuantificar la absorcin intestinal y el subsecuente metabolismo de la mayora de los nutrientes... La biodisponibilidad ha sido definida como la proporcin de los nutrientes que es digerida, absorbida, y metabolizada a travs de las rutas normales... Esta definicin tiene dos corolarios importantes. Primero (bio) disponibilidad no es una propiedad de la dieta alimenticia per se, pero s de la respuesta del individuo a la dieta o alimentos. Segundo, observando (bio)disponibilidad, representa una integracin de los procesos por los que los nutrientes ingeridos llegan a estar disponibles... Esta definicin fue seleccionada porque los autores estaban relacionados con la nutricin humana- no se preocuparon por las emisiones cientficas y/o polticas sobre el comportamiento de los contaminantes medio ambientales. Ahora, la esencia nutricional de la biodisponibilidad establece temas que se harn eco a lo largo de este informe: (1) Las emisiones qumicas de materiales inorgnicos y orgnicos pueden ser actualmente absorbidas biolgicamente y metabolizadas; y (2) la biodisponibilidad no es una propiedad inherente de las sustancias que se examinan, ms bien la biodisponibilidad refleja la respuesta de los sistemas biolgicos a muchos procesos integrados. La siguiente definicin (Scow and Johnson, 1997): El trmino biodisponibilidad designa el estado de la fraccin de compuestos qumicos que est disponible para la eliminacin y/o transformacin por organismos vivos. Aunque primariamente asociado a la ecotoxicologa, y usualmente en referencia a contaminantes orgnicos y metlicos, el trmino biodisponibilidad es tambin importante para los materiales orgnicos nativos [9]. El grado de biodisponibilidad es, en muchos casos, el que condiciona la eliminacin de contaminantes del medio. Vamos a tratar los bio-surfactantes como una solucin para estos problemas de biodisponibilidad: QUE ES UN BIOSURFACTANTE? Se dice que un soluto es un agente tensoactivo o surfactante cuando da lugar a un descenso significativo de la tensin superficial. El descenso de la tensin facilita la eliminacin de las partculas de la suciedad de las superficies slidas. Son molculas que contienen un segmento liposoluble (soluble en aceite) y otro hidrosoluble (soluble en agua o disolventes polares). La solubilidad parcial tanto en agua como en aceite permite al surfactante ocupar la interfase. As

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pues, reducen la tensin superficial y las tensiones interfaciales entre molculas individuales en la superficie y la interfase, respectivamente. Tienen propiedades emulsionantes. Atendiendo a estos criterios un biosurfactante sera una molcula biolgica (orgnica) con propiedades surfactantes o tensoactivas producidas sobre superficies vivas, mayormente superficies de clulas microbianas, o excretados al medio extracelular. Con excepcin del poder bactericida de ciertos surfactantes, fenmeno del cual no hay una explicacin absolutamente segura, se puede decir que todas las propiedades y usos de los surfactantes provienen de dos propiedades fundamentales de estas sustancias: de una parte, su capacidad de adsorberse a las interfases y de otra parte su tendencia a asociarse para formar estructuras organizadas. Vamos a ver un poco por encima estos dos fenmenos para entender mejor como actuan estos compuestos: 1. Adsorcin

El grupo polar es en general un grupo funcional que contiene heterotomos (O,S,N,P), mientras que el grupo apolar es en la mayora de los casos un hidrocarburo parafnico o alquil-aromtico. En vista de su dualidad polar-apolar, una molcula de surfactante no puede satisfacer su doble afinidad ni en un solvente polar, ni en un solvente orgnico. Cuando una molcula de surfactante se coloca en una interfase agua-aire agua-aceite, ella puede orientarse de manera a que el grupo polar est en el agua, mientras que el grupo apolar se ubica "fuera" del agua, en el aire o en el aceite. Desde un punto de vista energtico, se puede decir que la energa libre de una molcula de surfactante a la interfase es inferior a la de una molcula solubilizada en el seno de una fase acuosa. La transferencia desde el seno de una fase acuosa a la interfase, llamada adsorcin es por lo tanto espontnea. La adsorcin de un surfactante en una superficie gas-lquido o en una interfase lquidolquido, produce en general una reduccin de la tensin superficial o interfacial, de donde el nombre "tensoactivo". La tensin es responsable de la curvatura de las interfases, de la formacin de gotas, de un gran nmero de inestabilidades capilares y de numerosos fenmenos de estabilizacin de interfases. Las fuerzas capilares involucradas pueden ser considerables y se pueden encontrar aplicaciones en la fabricacin de adhesivos, la recuperacin mejorada de petrleo, la colocacin de una monocapa protectora, la contraccin de capas de petrleo flotando, etc. El descenso de la tensin favoriza la deformacin y la ruptura de una interfase, la formacin de sistemas dispersos como las emulsiones o las espumas, la movilizacin del petrleo residual, la limpieza industrial, etc. 2. Asociacin

Cuando a una solucin (acuosa por ejemplo) se le aade cada vez ms surfactante, este comienza por adsorberse a las interfases disponibles, luego su concentracin en forma monomolecular aumenta hasta que se forman las primeras micelas. La micela es un polmero de asociacin en el cual el surfactante alcanza una posicin favorable. En solucin acuosa la fuerza motriz principal que favorece la formacin de micelas es el efecto hidrfobo, es decir, la sustraccin de la parte apolar del surfactante del contacto con las molculas del agua y la formacin un contacto ms favorable desde el punto de vista energtico con las partes apolares de otras molculas de surfactante. El fenmeno de la micelizacin se produce como un compromiso entre dos tipos de efectos: los efectos que tienden a favorizar la formacin de una micela, particularmente el efecto hidrfobo, que aumenta con el tamao de la cadena hidrocarbonada del

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surfactante. De otra parte, los efectos que tienden a oponerse a la formacin de una micela, tal como la repulsin entre los grupos hidroflicos, particularmente importante en el caso de surfactantes inicos. La presencia de un alcohol que se intercala entre las molculas de surfactante en la interfase, o la adicin de electrlitos que produce un efecto de pantalla que reduce el campo elctrico intermolecular, reduce las fuerzas repulsivas y por este efecto favorece la micelizacin. Los efectos que favorecen la micelizacin producen un descenso de la CMC y viceversa. Se ha hablado slo de micelas en medio acuoso, pero se puede considerar que los mismos fenmenos se producen en medios apolares, bien que en forma diferente. Las micelas son responsables de una propiedad fundamental de las soluciones de surfactantes: su poder solubilizante. La figura muestra la variacin de la concentracin de hidrocarburo solubilizado en una solucin de surfactante en funcin de la concentracin de este ltimo. A partir de la CMC, la solubilizacin aumenta considerablemente, ya que el hidrocarburo penetra dentro del corazn de las micelas.

FIG.- Solubilizacn micelar Se pueden dar asi diferentes asociaciones con los surfactantes:

FIG.- Diferentes estructuras producidas por la asociacin de surfactantes

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CMO SE CLASIFICAN LOS BIOSURFACTANTES? Los surfactantes microbianos son molculas complejas que cubren un amplio rango de estructuras qumicas incluyendo pptidos, cidos grasos, fosfolpidos, glicolpidos, antibiticos, lipopptidos, etc Los microorganismos tambin producen en algunos casos, surfactantes que son combinaciones de muchas estructuras qumicas como los surfactantes microbianos polimricos. Muchos surfactantes microbianos han sido purificados y sus estructuras qumicas son conocidas. Mientras que los de alto peso molecular son generalmente heteropolisacridos polianinicos que contienen tanto polisacridos como protenas, los de bajo peso molecular suelen ser glicolpidos Podemos clasificar los biosurfactantes atendiendo a tres criterios: naturaleza qumica, peso molecular y carga inica de la parte superficialmente activa de la molcula. 1. Naturaleza qumica a) b) c) d) e) Lpidos Hidrtos de carbono Aminocidos Glucolpidos Lipopptidos

En la siguiente tabla tenemos una clasificacin de los biosurfactantes segn sus estructuras y algunos ejemplos:

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2. Peso molecular a) Bajo peso molecular: Suelen ser glicolpidos. El ms estudiado es el rhamnolpido, producido por diversas especies como Pseudomonas. La funcin principal de estos biosurfactantes es reducir la tensin superficial entre fases (agua-roca por ejemplo). b) Alto peso molecular: Suelen ser polisacridos, protenas, lipoprotenas, lipopolisacridos o mezclas de estos polmeros. Estos biosurfactantes no son tan eficaces en cuanto a la reduccin de la tensin superficial entre fases, pero si son bueno emulsionantes. Adems se ha demostrado que son muy eficaces a bajas concentraciones y poseen una considerable afinidad por el sustrato. Un ejemplo sera Alasan producido por Acinetobacter radioresistens. 3. Carga inica a) Agentes aninicos: Contiene generalmente uno de cuatro grupos polares solubles-carboxilato, sulfonato, sulfato o fosfato- combinado con una cadena hidrocarbonada hidrfoba. Si esa cadena es corta son muy hidrosolubles y en el caso contrario tendrn baja hidrosolubilidad y actuaran en sistemas no acuosos como aceites lubricantes. Se usan principalmente en la industria de jabones y detergentes. b) Agentes catinicos: Estn compuestos por una molcula lipoflica y otra hidroflica, consistente de uno o varios grupos amonio terciarios o cuaternarios. Son utilizados comnmente en detergentes, agentes limpiadores, lquido de lavaplatos, tratamiento de textiles, como sustancias activas antimicrobianas y en cosmtica. c) Agentes no inicos: No se disocian en iones hidratados en medio acuoso. Las propiedades hidroflicas son provistas por hidratacin de grupos amido, amino, eter o hidroxilo.

d) Otros tipos de surfactantes: La combinacin en la misma molcula de un grupo con tendencia aninica y de un grupo con tendencia catinica produce un surfactante anfotrico, como por ejemplo los aminocidos, las betainas o los fosfolpidos. Segn el pH del medio una de las dos disociaciones prevalece. Este tipo de surfactante se usa slo en casos particulares debido a su alto costo.

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ESTUDIO DE LA PRODUCCIN DE BIOSURFACTANTES El estudio de la produccin de biosurfactantes es un punto a tomar en cuenta. Principalmente se usan tres mtodos para estudiar la produccin de estas sustancias por diversos microorganismos. Estos tres mtodos son: drop collapse, oil spreading y blood agar lysis. El estudio comparativo de dichos mtodos se bas en la capacidad de los mismos de detectar la actividad tensoactiva de las sustancias estudiadas y aplicabilidad. Estos 3 mtodos se usaron para testar la produccin de biosurfactantes en 205 estirpes medio ambintales con diferentes afiliaciones filogenticas. El 60% de las estirpes que dieron positivo con el mtodo blood agar lysis, dieron negativo con los otros dos mtodos, para la produccin de biosurfactantes. El 38% de las estirpes que dieron negativo con el mtodo del blood agar lysis resultaron positivas con los otros dos mtodos. As pues se pudo observar que exista una correlacin lineal negativa muy pronunciada entre el dimetro de la zona clara obtenida con el mtodo del oil spreading y la tensin superficial (rs=-0.959) y una leve correlacin entre el drop collapse y la tensin superficial (rs=-0.82) debido a la gran cantidad de falsos positivos y negativos obtenidos por la tcnica blood agar lysis y su pobre correlacin con la tensin superficial (rs=-0.15), no se utiliza como mtodo para detectar la produccin de biosurfactantes.. Esto nos sugiere que el mtodo del oil spreasing es ms preciso y ms fiable que el drop collapse. Visto los resultados se opta por usar como mtodo primario para la deteccin de biosurfactantes el mtodo drop collapse, seguido de una determinacin de las concentraciones de los mismos por medio del mtodo oil spreasing. Esto constituye un protocolo rpido y sencillo para escudriar y cuantificar la produccin de biosurfactantes [3]. PARA QU SIRVEN LOS BIOSURFACTANTES? Los contaminantes hidrofbicos presentes en los hidrocarburos del petrleo, suelos y aguas del medio ambiente requieren su solubilizacin antes de ser degradados por la clula microbiana. La mineralizacin est gobernada por la desorcin de los hidrocarburos del suelo. Los surfactantes pueden aumentar el rea de los materiales hidrofbicos, como pesticidas en suelos y agua del medio, aumentndose as su solubilidad en agua. Por tanto, la presencia de biosurfactantes puede aumentar la degradacin microbiana de los contaminantes. Se le ha dado una atencin considerable a la produccin de molculas tensoactivas de origen biolgico por sus aplicaciones en el procesado de alimentos, aromatizacin de bebidas alcohlicas, reciclaje de papel, fabricacin de pulpa de papel, en farmacologa, y la industria del aceite. En relacin a esa ltima aplicacin, los accidentes que llevan a vertidos de aceite han llegado a ser numerosos y han causado catstrofes tanto sociales como ecolgicas. La habilidad de los biosurfactantes para emulsionar hidrocarburos mezclados con agua ha sido ampliamente divulgado. Estas propiedades emulsionantes tambin se ha demostrado que favorecen la degradacin de los hidrocarburos en el medio ambiente, por tanto los hacen muy tiles para el control de la contaminacin por vertidos de aceites. El procedimiento mostrado en la figura es la flotacin por aire disuelto. En este procedimiento se introduce por el fondo de la celda de flotacin una solucin acuosa saturada de aire bajo presin. Al suceder la expansin se forman burbujas de aire minsculas, las cuales colectan las gotas de aceite. Con surfactantes apropiados este mtodo se puede utilizar para separar una gran variedad de coloides.

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FIG.- Mtodos de separacin no convencionales de pequeas gotas de aceite en medio acuoso Desde el punto de vista de las cantidades producidas, la utilizacin principal de los surfactantes es la formulacin de jabones, detergentes y otros productos para el lavado y la limpieza. La figura muestra el caso de la accin detergente sobre un sucio slido. Las molculas de detergente deben poder adsorberse sobre el sucio y sobre el sustrato, y en partcular situarse entre ellos para poder separarlos.

FIG.- Fenmenos puestos en juego en la accin detergente En la biorremediacin en vertidos de petrleo, estudios recientes han mostrado que se puede utilizar el poder solubilizante de las micelas para extraer ciertas sustancias contaminantes an cuando su concentracin sea extremadamente baja.

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FIG.- Casos de asociacin entre una micela y un contaminante Las funciones que haran estos biosurfactantes a la hora de aumentar la biodisponibilidad seran: Dispersar el petrleo aumentando la superficie de contacto Aumenta la biodisponibilidad de compuestos hidrofbicos. Seran en este caso sobre todo los de bajo peso molecular. Poseen tambin funciones evolutivas para los propios microorganismos. Pueden ayudar a los microorganismos productores a desprenderse de las gotas de petrleo una vez se ha agotado la fuente de hidrocarburo que utilizaba. Hay que tener en cuenta que un microorganismos suele utilizar un solo tipo de hidrocarburo entre la mezcla que existe. Por eso les sera til poderse desprender de estas interacciones hidrofbicas que mantiene la membrana con la gota de petrleo, para as ir en busca de nuevas fuentes de carbono. Adems deja una microcpsula alrededor de la gota para marcarla como usada, favoreciendo as a toda la poblacin.

Una propiedad de los biosurfactantes curiosa es su actividad bactericida. Dicha actividad se debe a su capacidad detergente. As pues, existen diferentes tipos de desinfectantes (Se suelen clasificar de acuerdo con su mecanismo de accin): A) Agentes que daan la membrana 1) Detergentes a) catinicos b) aninicos c) no inicos 2) Compuestos fenlicos a) fenol b) cresoles c) difenilos halogenados d) alquilsteres del para-hidroxibenzoico e) aceites esenciales de plantas 3) Alcoholes a) etanol b) isopropanol

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B) Agentes desnaturalizantes de protenas 1) cidos y bases fuertes 2) cidos orgnicos no disociables C) Agentes modificadores de grupos funcionales 1Metales pesados a) mercuriales b) compuestos de plata c) compuestos de cobre 2) Agentes oxidantes a) halgenos b) agua oxigenada c) permanganato potsico d) cido peractico 3) Colorantes a) derivados de la anilina b) derivados de la acridina (flavinas) 4) Agentes alquilantes a) formaldehido b) glutaraldehido c) xido de etileno d) -propionil-lactona En nuestro caso nos detendremos en los agentes que daan la membrana. Los solventes orgnicos (fenoles, alcoholes) y los desinfectantes tensoactivos (detergentes) daan la integridad estructural de la membrana (es decir, la disposicin ordenada de lpidos y protenas), de modo que interfieren con su funcin, ejerciendo un efecto neto de interferencia con procesos de transporte y metabolismo energtico; salida de pequeas molculas de la clula. Los detergentes, al igual que los jabones, contienen una porcin hidrofbica (normalmente una larga cadena lipfila) y una porcin hidrfila (un grupo polar), lo cual les permite formar micelas en solucin acuosa, as como formar capas que cubren y solubilizan molculas hidrfobas. Segn sea la porcin hidrfila, los detergentes se pueden clasificar en: -detergentes inicos: - detergentes catinicos (grupo activo con carga positiva): Son los detergentes ms potentes en cuanto a su actividad desinfectante, siendo activos contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas. Los principales son los llamados compuestos de amonio cuaternario: Sales de amonio cuaternario, sobre todo aquellas que van como cloruros o bromuros. Su frmula general se puede representar as: Los cuatro sustituyentes (R1 a R4) del N son cadenas de hidrocarburos variados. Las sales de amonio cuaternario ms activas son aquellas que tienen tres grupos alqulicos cortos y un grupo alqulico largo: cloruro de cetilpiridinio, cloruro de benzalconio Mecanismo de accin: La porcin hidrfoba penetra en las membranas, mientras que el grupo polar catinico se asocia con los fosfatos de los fosfolpidos, provocando alteraciones en dichas membranas, reflejadas en la prdida de su semipermeabilidad, con salida de metabolitos de N y P desde el citosol. Es entonces cuando el detergente puede entrar al interior celular, con un efecto secundario de desnaturalizacin de protenas. Su actividad se mejora a pH alcalino.

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Son rpidamente bactericidas a concentraciones muy bajas (del orden de una parte por milln, 1 ppm), siempre que en el material a tratar no exista materia orgnica. Usos, ventajas e inconvenientes: Tienen baja toxicidad, por lo que se pueden emplear como desinfectantes y antispticos de la piel. Se emplean igualmente en la desinfeccin de material de industrias alimentarias. Su actividad se ve neutralizada por jabones y fosfolpidos, precipitando en su presencia. - detergentes aninicos (grupo activo con carga negativa): Con grupos carboxilo como porcin hidrfila: jabones, saponinas, sales biliares, cidos grasos disociables... Con grupos sulfato como porcin hidrfila: dodecilsulfato sdico (SDS), tambin llamado laurilsulfato sdico sulfonato de alquilbenceno Mecanismo: Provocan una gran disrupcin de membranas, con efectos de lisis. Son activos sobre todo a pH cido, preferentemente sobre bacterias Grampositivas, pero poco sobre Gram-negativas, ya que stas quedan ms protegidas por la barrera del lipopolisacrido de la membrana externa. Usos: Cuando los detergentes aninicos se combinan con cidos, se logran desinfectantes sanitarios muy potentes (debido al efecto sinrgico de ambos componentes) y de rpida actuacin (unos 30 segundos). -detergentes no inicos (no suelen tener actividad antimicrobiana)

SURFACTANTES MICROBIANOS El inters por los surfactantes microbianos ha estado en aumento en los ltimos aos debido a sus diversas caractersticas deseables tales como una efectiva selectividad, respetuosos para la naturaleza, su estabilidad a elevadas temperaturas, a pH y concentracin de sales. Hay que aadir que los biosurfactantes han aumentado la versatilidad en comparacin a muchos surfactantes sintticos y tienen la ventaja de poder producirse por fermentacin. Hay clulas microbianas intactas con una superficie celular altamente hidrofbica que son ellas mismas surfactantes. En algunos casos, los propios surfactantes juegan un papel natural en el crecimiento de las clulas microbianas sobre sustratos insolubles en agua. Los surfactantes extracelulares estn implicados en la adhesin celular, emulsin, dispersin, floculacin, agregacin celular y fenmenos de desorcin. Aunque el tipo y cantidad de surfactante microbiana producido depende primeramente del organismo productor, factores como el carbono y el nitrgeno, elementos traza, temperatura, y aireacin, tambin afectan a su produccin por el organismo. Varios biosurfactantes producidos por bacterias: Microorganism Arthrobacter RAG-1 Arthrobacter MIS38 Arthrobacter sp. Bacillus licheniformis JF-2 Bacillus licheniformis 86 Biosurfactant hetropolisacridos lipopptidos trehalosa, sacarosa fructosa lpidos lipopptidos lipopptidos y

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Bacillus subtilis Bacillus pumilus A1 Bacillus sp. AB-2 Bacillus sp. C 14 Candida antarctica Candida bombicola Candida tropicalis Candida lipolytica Y-917 Clostridium pasteurianum Corynebacterium hydrocarbolastus Corynebacterium insidiosum Corynebacterium lepus Strain MM1 Nocardia erythropolis Ochrobactrum anthropii Penicillium spiculisporum Pseudomonas aeruginosa Pseudomonas fluorescens Phaffia rhodozyma Rhodococcus erythropolis Rhodococcus sp. ST-5 Rhodococcus sp. H13-A Rhodococcus sp. 33 Torulopsis bombicola surfactina surfactina ramnolpidos hidrocarbono-lpidoproteina manosilertritol lpidos soforolpidos Manan-cido graso sophorolpidos Lpidos neutros proteina-lpidocarbohidrato. fosfolpidos cidos grasos glucosa, lpidos y cidos hidroxidecanoicos Lpidos neutros proteinas cido espiculosprico ramnolpidos lipopptidos carbohidrato-lpido trehalosa dicorinomicolato glicolpidos glicolpidos polisacridos soforolpidos

TABLA.- ejemplos de biosurfactantes y las bacterias que los producen.

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TABLA.- estructuras qumicas de algunos surfactantes con las especies que los producen. Aqu tenemos algunos ejemplos de la produccin de biosurfactantes: 1. Bacillus pumilus (estirpe 28-11) produce biosurfactantes con una gran capacidad de emulsionar y eliminar compuestos hidrocarbonatos. Esto hace que se considere esta estirpe como prometedora en el campo de la tecnologa medio ambiental[1]. Candida ishiwade (Tailandia) es una levadura termotolerante que produce monoacilgliceroles y glicolpidos[4]. Pseudomonas sp. Pueden reducir la tensin superficial, estabilizar emulsiones, y promover la formacin de espumas y generalmente son no txicos, no peligrosos y biodegradables. Debido a su diversidad, inocuidad para el medio ambiente, posibilidad de produccin a gran escala, selectividad, efectividad bajo condiciones extremas en pequeas cantidades, produccin sobre recursos renovables, y sus aplicaciones potenciales para la proteccin del medio ambiente, los biosurfactantes han ganado importancia frente a los surfactantes qumicos. Hay q aadir el valor del carbohidrato presente, la ramnosa de los ramnolpidos biosurfactantes, es usada para el transporte de drogas insolubles en humanos y acta como precursor de componentes de saborizantes de alta calidad. Los biosurfactantes potencian la emulsin de hidrocarburos y por eso tienen el poder de solubilizar contaminantes hidrocarbonados y aumentar su disponibilidad para la degradacin microbiolgica. As los microorganismos productores de biosurfactantes pueden jugar un importante papel en la biorremediacin acelerada de lugares contaminados con hidrocarburos. Debido al alto costo de los procesos de remediacin y otras aplicaciones potenciales, la necesidad de aumentar la produccin de biosurfactantes es determinada por la gentica del microorganismo, otros factores tales como las condiciones ambientales y la naturaleza del sustrato tambin influyen en el nivel de expresin. As, la optimizacin de esas condiciones puede llevar a una produccin elevada y segura de biosurfactantes. Existen estudios para el desarrollo de mtodos econmicos para aumentar la produccin de biosurfactantes usando materias primas de bajo costo. Dos cepas degradadoras de aceites, Pseudomonas aeruginosa

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GS29-119 y DS10-129, fueron usadas para optimizar un sustrato para la mxima produccin de rhamnolpidos. Entre las dos cepas, la ltima produjo un mximo de 4.31, 2.98, y 1.77 g/L de rhamnolpido biosurfactante usando aceite de soja, aceite de crtamo, y glicerol, respectivamente. La produccin de biosurfactantes aument considerablemente cuando el cultivo bacteriano alcanz la fase estacionaria de crecimiento. La caracterizacin de los ramnolpidos biosurfactantes usando espectrometra de masas revel la presencia de ramnolpidos (Rha-Rha-C10-C10) . La actividad emulsionante de los rhamnolpidos biosurfactantes producidos por P. aeruginosa DS10-129 fue mayor del 70% con todos los hidrocarburos probados, incluidos xileno, benceno, hexano, crudo, queroseno, gasolina, y diesel. P. aeruginosa GS9-119 emulsion slo hexano y queroseno a ese nivel [8]. 4. Pseudomonas aeruginosa LBI es un ejemplo claro de estructura qumica, propiedades superficiales y actividad biolgica en la produccin de biosurfactantes. La naturaleza qumica de los biosurfactantes producidos sera en este caso ramnolpidica, cuya estructura de ramnosa contiene propiedades biosurfactantes. En este caso se sintetizan diferentes homlogos que poseen caractersticas similares con respecto a sus propiedades superficiales. Recientemente se han podido analizar 28 homlogos nuevos de este grupo (ramnolpidos). Pseudomonas aeruginosa es capaz de producir estos ramnolpidos cuando crece sobre carbohidratos (cosa que no es muy comn). Estos homlogos biosurfactantes poseen propiedades tanto referentes a la reduccin de las tensiones superficiales e interfaciales, entre lquidos, slidos y gases como una actividad antimicrobiana. Centrndonos en esta nueva faceta de los ramnolpidos, podemos hacer una breve resea de esta nueva propiedad. Como ya sabemos los ramnolpidos son sustancias no txicas producidas por algunas cepas, se podra pensar que este compuesto no tiene porque tener ningn tipo de actividad bacteriecida. En diversos estudios se ha visto que existe una actividad bacteriecida bastante acusada con respecto a bacterias Gram positiva. As pues podemos observar en la siguiente tabla el ndice MIC (concentracin mnima inhibitoria) para diferente tipos de microorganismos (Gram positiva, Gram negativa y hongos) [6].

Microorganismos

MIC (g/ml)

Bordetella bronchiseptica ATCC 4617 Enterobacter aerogenes CECT 689 Escherichia coli ATCC 10536 Proteus mirabilis CECT 170 Pseudomonas aeruginosa ATCC9721 Salmonella thyphimurium ATCC 16028 Bacillus cereus v. mycoide ATCC 11778 Bacillus subtilis ATCC 6633 Micrococcus luteus ATCC 9341 Staphylococcus aureus ATCC 6538 Staphylococcus epidermis ATCC 12228 Streptococcus faecalis ATCC 10541 Alternaria alternate Aerobasidium pullulans ATCC 9348 Aspergillus niger ATCC 14604 Chaetonium globusum ATCC 6205 Gliocadium virens ATCC 9645 Penicillum crysogenum CECT 2914

128 4 250 8 32 16 4 8 128 8 250 4 4 32 64 32 32 32

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Penicillum funiculosum CETC 2914 Candida albicans ATCC 10231 Rhodotonda rubia CECT 1158 Sacharomyces cerevisae ATCC 9763
TABLA.- ndice MIC de diferentes microorganismos 5. Pseudomona putida PCL1445 produce biosurfactantes interesantes a nivel industrial. En este caso se caracterizo dos lipopptidos con actividad biosurfactante: putisolvin I y putisolvin II; los cuales inhiben la formacin de biopelculas o provoca la destruccin de las mismas. Esta estirpe PCL1445 fue aislada de la raz de una planta, crecida en una zona contaminada con PAHs (hidrocarburos aromticos poli cclicos). Se vio que la estirpe PCL1445 produce actividad biosurfactante hasta el final de la fase de crecimiento [6].

64 32 >250 >250

CONCLUSION Una vez estudiado este tipo de compuestos y sus muchas aplicaciones; podras preguntarnos porque es mejor usar biosurfactantes en vez de surfactantes. La produccin mundial de jabones, detergentes y otros surfactantes se estim en 25 millones de toneladas (25 Mt) en 1980, 40% en aumento sobre la cifra de 1970 (18 Mt). Los nicos datos disponibles con cierta confiabilidad son aquellos del mercado estadounidense (20% de la produccin mundial). Algunos de estos datos no son muy recientes, pero sin embargo dan una idea cualitativa. La evolucin del mercado en los ltimos 50 aos se debe a dos factores principales. El primero es el avance tecnolgico, es decir el descubrimiento de nuevas sustancias y el desarrollo tcnico-econmico subsiguiente. Pero en el campo de los surfactantes hay tambin un segundo factor esencial, que es la disponibilidad de materia prima; en efecto la industria de surfactantes usa las materias primas que otras industrias y por lo tanto existe una demanda para la oferta. La tabla indica que la industria de surfactantes usa solo una pequea proporcin en benceno, etileno, o aceites y grasas producidos anualmente. En estas condiciones, el costo de la materia prima puede variar independientemente del mercado de los surfactantes y producir cambios drsticos: por ejemplo el precio del aceite de coco en US$/tonelada fue de 200, 1400, 500 respectivamente en 1972, 1974 y 1976. En la dcada de los 60 los precios del petrleo crudo cambiaron tambin considerablemente.

TABLA.- Uso de la materia prima por la industria de surfactantes En los aos 40 se desarrollaron los procesos de fabricacin de los alquilbencenos sulfonatos. Estos toleraban ms el agua dura y adems permitan utilizar los olefinas de craqueo, particularmente el propileno. Por lo tanto desplazaron los jabones.

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TABLA.- Produccin de detergentes y jabones sintticos en EE.UU En 1965, las nuevas leyes de proteccin del ambiente en EUA y Norte Amrica, hicieron desaparecer el alquilato de polipropileno, el cual fue sustituido por un alquilato lineal. La produccin de olefinas lineales permiti tambin desarrollar nuevos surfactantes, los alfaolefina sulfonatos, que no dependen de la produccin de benceno y que por otra parte tienen excelentespropiedades. En los aos 50 tambin se empezaron a fabricar surfactantes no inicos con grupos xido de etileno. Esto fue una consecuencia del desarrollo del vapocraqueo y de la disponibilidad de etileno sobre el mercado. Sin embargo solo una pequea fraccin del etileno se destina a los surfactantes(vase Tabla I.1.). La figura III.3. muestra la evolucin porcentual de los diferentes tipos de surfactantes durante los aos 1940-1980 en los EUA. Los cambios se deben a los dos factores mencionados (innovacin, mercado de la materia prima). Se observa claramente el desplazamiento de los jabones por los surfactantes sintticos, y la aparicin de nuevos surfactantes (noinicos, alfaolefina sulfonatos). Actualmente el mercado de los jabones y de los alquil benceno sulfonatos lineales permanece estable y el aumento de produccin interanual corresponde a las dems categoras.

TABLA.- Produccin total de surfactantes en EE.UU Un 50% de los jabones se destinan al uso domstico (cidos grasos), mientras que los jabones de aceite de madera (ligno sulfonatos y derivados) representan un 35% destinados a usos industriales como dispersantes, emulsionantes o inhibidores de corrosin. Ms del 50% de los detergentes sintticos tienen un uso domstico (polvo de lavar, lavaplatos lquido, champes, etc.), 17% se usa en la industria petrolera, 78% en aditivos de concreto, 4% en la industria textil, 4% en la industria agro-alimenticia, 3% en cosmticos y frmacos, 1% en lavaseco, etc. Segn todo esto, la produccin de surfactantes qumicos es una industria que actualmente esta en auge y aparentemente muy prospera. Si esto es as; qu ventajas tienen los biosurfactantes frente a los surfactantes?.

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Concretamente las ventajas de los biosurfactantes frente a los emulsionantes qumicos son: Son ms selectivos. Poseen mayor eficiencia para aumentar la biodisponibilidad de compuestos hidrofbicos. Son menos estables, por lo tanto ms ecolgicos. Adems se ha visto que los surfactantes no biolgicos pueden tener un efecto positivo o negativo en la degradacin segn el sustrato y el tipo de microorganismo.

En conclusin, aunque la industria de la produccin de surfactantes est en auge, se ha observado que sustancias biosurfactantes pueden suplantar a sustancias surfactantes con un mejor rendimiento, una menor contaminacin y un coste ms bajo.

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Bibliografa
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