Justificacin Marco Terico

Antecedentes histricos y origen de las sustancias hmicas Las sustancias hmicas son probablemente los materiales de carcter orgnico ms ampliamente distribuidos en la naturaleza, representando aproximadamente el 50% de la materia orgnica total del suelo (Tonelli y col., 1997). Han sido objeto de estudio desde muy antiguo siendo el primer intento de aislarlas del suelo el realizado por Achard (1786), quien extrajo turba con lcali y obtuvo un precipitado oscuro y amorfo tras la acidificacin. A De Saussure (1804) se le atribuye la introduccin del trmino humus para describir la materia orgnica de color oscuro del suelo. Adems, este investigador fue el primero en presentar la teora de que el humus participa en la nutricin vegetal, que luego sera desarrollada ampliamente por Thaer (1809). El trmino cido hmico para identificar la fraccin soluble en lcali e insoluble en cido, de la materia orgnica del suelo, tiene su origen en la poca de Berzelius (1839). A finales del siglo XIX se lleg a la conclusin que el humus estaba compuesto por una mezcla compleja de sustancias orgnicas, la mayora de ellas de naturaleza coloidal con dbiles propiedades cidas, y no de compuestos qumicos definidos precursores de las sustancias hmicas como trat de demostrar Mulder (1862). Shmook (1930) realiz un detallado estudio de la naturaleza y estructura de los cidos hmicos y los consider no como un compuesto especfico sino como una mezcla de sustancias interrelacionadas con rasgos estructurales similares. Waksman (1936) recomend la utilizacin del concepto humus para hacer referencia a la totalidad de la materia orgnica presente en el suelo. Este concepto engloba un amplio espectro de constituyentes de naturaleza orgnica que proviene de la degradacin biolgica y bioqumica de restos animales y vegetales, as como productos del metabolismo de los microorganismos (Schnitzer, 1978). Como resultado de esta idea, se han generado dos categoras muy generales de compuestos que componen la materia orgnica del suelo, que fueron sugeridas por Page (1930) y que siguen vigentes en la actualidad: - Sustancias no hmicas, que consisten en compuestos qumicamente definidos como son carbohidratos, protenas, pptidos, aminocidos, grasas, lpidos y cidos orgnicos de bajo peso molecular, entre otros. La mayora de estos compuestos son degradados rpidamente tanto en suelos como en sedimentos por la microflora. - Sustancias hmicas, que se encuentran en todos los ambientes terrestres y acuticos, y pueden considerarse como un grupo de sustancias orgnicas heterogneas constituidas por un conjunto de molculas altamente polimerizadas, de peso molecular relativamente alto y con un color entre amarillo y negro. Estas sustancias amorfas y con propiedades coloidales e hidroflicas muy marcadas, estn constituidas principalmente por C, H, O y N. Contienen estructuras moleculares alifticas y aromticas y muestran alta capacidad de intercambio catinico as como gran cantidad de grupos acdicos (carboxlicos y fenlicos). Otra definicin posible para ellas es considerarlas como complejas macromolculas de unidades aromticas con uniones de aminocidos, pptidos, aminoazcares, cidos alifticos y otros constituyentes orgnicos (Kononova, 1966; Flaig y col., 1975; Stevenson, 1982), donde los anillos aromticos son del tipo di y trifenlico, conteniendo grupos OH libres y dobles uniones quinona con puentes de O, S y tomos de N, as como NH, CH2 y otros grupos (Stevenson, 1985). Para el estudio de las propiedades qumicas y coloidales de la materia orgnica en el suelo y ms concretamente las sustancias hmicas, es necesario su aislamiento de la matriz inorgnica que est asociada a ella mediante la extraccin qumica con disolventes. En base a su solubilidad, las sustancias hmicas pueden clasificarse en tres grupos universalmente reconocidos:

o cidos hmicos (AH): Extrables en medio alcalino y que precipitan al acidificar. La base de su estructura est formada por un gran grupo de estructuras aromticas y cadenas alifticas. Poseen diversos grupos funcionales tales como hidroxilos, carboxilos, metoxilos, fenlicos, etc. Son de color pardo oscuro y peso molecular muy alto. o Fraccin flvica (FF): Extrable en medio alcalino y cuyos componentes permanecen en disolucin despus de acidificar el extracto. Poseen una estructura relativamente similar a la de los AH pero con un menor peso molecular. Tambin estn menos polimerizados y contienen una mayor proporcin de cadenas alifticas, a la vez que son ms ricos en grupos fenlicos, hidroxlicos, carboxlicos y cetnicos. o Huminas: No son extrables con disoluciones alcalinas. Debido tanto a su insolubilidad como a su naturaleza macromolecular, la humina ha sido la fraccin hmica menos estudiada de todas. Gracias a tcnicas como la resonancia magntica nuclear (13C-RMN) en estado slido, se ha podido dilucidar en parte su composicin y estructura. Dependiendo de la naturaleza del material hmico, se considera en general que las huminas poseen una estructura muy similar a la de los AH, tanto por su composicin elemental como por su contenido en grupos funcionales, diferencindose de stos en una menor aromaticidad, debida al mayor contenido de polisacridos alifticos presentes en la estructura de las huminas (Hatcher y col., 1985). En el perodo comprendido entre 1730 y 1930, fueron apareciendo los trminos con que se conocen las distintas fracciones hmicas que se han ido aislando en base a su solubilidad: cidos hmicos, fraccin flvica, huminas, cidos lmicos, ulmina, cido crnico, cido apocrnico, cido himatomelnico, cidos hmicos pardos y grises, etc. Gran parte de esta terminologa ha ido desapareciendo con el tiempo, excepto las fracciones que conocemos actualmente y que han perdurado, como son AH y FF. El origen de las sustancias hmicas se ha tratado de explicar histricamente mediante diversas teoras, las cuales se basan por un lado en la procedencia de los materiales de partida de la materia orgnica, que pueden ser tanto de origen vegetal como microbiolgico, y por otro, de una compleja combinacin de reacciones influenciadas por muchos factores tanto qumicos, biolgicos y ambientales, que tienen lugar durante el proceso de humificacin. En la primera de ellas se incluira el trabajo de Maillard (1916), el cual intent sintetizar sustancias hmicas haciendo reaccionar aminocidos con azcares reductores. La experiencia no tuvo mucho xito, pero su idea de que el humus se forma a partir de sustancias ms simples procedentes de la descomposicin de residuos vegetales por procesos sintticos muy complejos, no fue desacertada. No obstante, el concepto de humificacin de Trusov (revisado por Kononova, 1966) se acerca ms an al concepto que tenemos actualmente. Este autor postul la siguiente secuencia en el proceso de humificacin: (1) descomposicin hidroltica de restos de plantas seguido de sntesis de sustancias simples de naturaleza aromtica; (2) oxidacin de estas ltimas por enzimas microbianas para formar hidroquinonas y, (3) condensacin de las quinonas y transformacin en productos de color pardo-oscuro caracterstico de las sustancias hmicas. Otra de las teoras, llamada ligno-proteica, surgi en aos posteriores y se caracteriz por la tendencia general entre los investigadores (Fuchs, 1931; Hobson y Page, 1932; Waksman, 1936) a considerar la lignina como principal fuente de sustancias hmicas que, durante la humificacin, experimentara un gran nmero de transformaciones complejas, especialmente fisicoqumicas como la condensacin y la oxidacin. A favor de esta teora, adoptada durante algunas dcadas, se exponan consideraciones tales como la naturaleza semejante de los AH y la lignina, basada en el hecho comprobado de que por oxidacin alcalina la lignina se transforma en compuestos de aspecto parecido a las sustancias hmicas, as como tambin a la relativa resistencia de ambos compuestos al ataque microbiano y al hecho de que son solubles en lcali y precipitan en medio cido. A mitad del siglo XX, la teora ligno-proteica de formacin del humus, popularizada slo dos dcadas atrs por Waksman y otros, haba sido rechazada por muchos investigadores (Kononova, 1966; Flaig, 1966 y Flaig y col., 1975). Segn stos, seran las quinonas, sintetizadas por una parte por los microorganismos y provenientes de la lignina por otra, las principales materias primas de las sustancias hmicas, originndose as la teora polifenlica de formacin de estas sustancias. Segn este modelo, el primer paso consiste en la ruptura de todos los biopolmeros de las plantas (incluida la lignina) a sus correspondientes unidades estructurales monomricas (sustancias

derivadas del fenilpropano). A continuacin, las cadenas de lignina son oxidadas y demetiladas, transformndose los polifenoles en quinonas por medio de enzimas polifenoloxidasas. En ltimo trmino, las quinonas reaccionan con compuestos nitrogenados como aminocidos para formar polmeros coloreados de naturaleza hmica. En la prctica, tanto la teora ligno-proteica como la polifenlica pueden ser operativas, pero no en la misma extensin o en el mismo orden de importancia, sino dependiendo de los ambientes a los que nos refiramos. Por ejemplo, es poco probable que la lignina sea la precursora de sustancias hmicas en sedimentos marinos puesto que se piensa que las sustancias hmicas marinas son autctonas y contienen fitoplancton y no lignina, siendo en cambio este biopolmero, uno de los principales componentes de la biomasa terrestre. De este modo, la importancia de los precursores especficos de las sustancias hmicas en diferentes ambientes depende no slo de su distribucin en la biosfera, sino tambin de su relativa estabilidad en aquellos ambientes (Ertel y col., 1988).