UNIVERSIDAD MICHOACANA DE SAN NICOLAS DE HIDALGO.

LABORATORIO DE BIOQUIMICA.
*PRACTICAS*

RESPONSABLE DEL LABORATORIO: QFB. YESSICA ALEJANDRA SANCHEZ HERNANDEZ ALUMNA: KARLA ALEJANDRA ESTRADA RUBIO LICENCIATURA: NUTRICIN SECCION: 02 FECHA DE ENTREGA: 30 DE ENERO DEL 2012

NDICE:
Portada...1

ndice..2

Practica N 1. Introduccin al laboratorio..3

Practica N 2. Protenas en sangre...9

Practica N 3. Determinacin de urea en suero.12

Practica N 4. Determinacin de glucosa en suero15

Practica N 5. Determinacin de la actividad enzimtica...19

PRACTICA N 1. INTRODUCCION AL LABORATORIO.

OBJETIVO.- conocer las normas generales, reglas de seguridad y recomendaciones que debemos seguir dentro del laboratorio, para manejar instrumentos y sustancias de una manera adecuada.

NORMAS GENERALES DEL LABORATORIO. 1.- Se debe asistir puntualmente a la practica de a cuerdo al horario asignado. 2.- Es obligatorio el uso de bata blanca de manga larga completamente abotonado. 3.- Una vez iniciada la practica, no se permitir el acceso a dichas instalaciones. 4.- Esta estrictamente prohibido comer, beber, fumar y almacenar alimentos. 5.- Antes de iniciar cualquier trabajo en el laboratorio, se debe leer, estudiar cuidadosamente el protocolo, ejecutar con esmero la practica, anotar lo observado y tratar de llegar a conclusiones precisas para que la siguiente sesin de trabajo se entregue un reporte fundamentado en la consulta de por lo menos tres fuentes bibliogrficas, y en lo realizado en la practica de referencia. 6.- Mantener las mesas de laboratorio libres de libros, cuadernos u objetos personales, excepto aquellos equipos necesarios para la realizacin del trabajo prctico. 7.- Mantener el rea de trabajo limpio y ordenado. 8.- Una vez terminada la prctica de laboratorio es indispensable que los alumnos laven el material utilizado, recojan todo de la mesa y una persona del equipo de trabajo entregue el material al tcnico acadmico a cargo.

9.-Todas las sustancias son potencialmente toxicas y peligrosas por lo que el profesor o el tcnico acadmico deber dar a conocer las propiedades de los reactivos que se empleen. 10.- Evitar probar en inhalar directamente las sustancias de trabajo. 11.- Evitar contacto con la piel y con sustancias corrosivas. 12.- Nunca dirigir un tubo de ensaye o la boca de un matraz con lquidos en ebullicin hacia el compaero o uno mismo, ya que puede proyectarse el contenido. 13.- En caso de accidente, guardar la calma, inmediatamente dar aviso al tcnico acadmico a cargo y seguir sus indicaciones. 14.- El equipo debe cuidarse con esmero y hacer uso debido de l. 15.- Todos los aparatos deben mantenerse alejados de sustancias corrosivas, ya que pueden sufrir deterioro o dao irreparable. 16.- Se debe atender todas las observaciones que el instructor indique para la operacin y desarrollo adecuado de este curso practico.

REGLAS DE SEGURIDAD. 1.- No deben efectuarse experimentos no autorizados, a menos que estn supervisados por el docente. 2.- Cualquier accidente debe ser notificado de inmediato al docente o al auxiliar del laboratorio. 3.- Uso indispensable de bata como medida de proteccin. 4.- No pipetee los cidos, puede llegar a ingerirlos. 5.- Lea cuidadosamente la etiqueta del frasco hasta estar seguro de que es el reactivo que necesita, no utilice reactivos que estn en frascos sin etiqueta. 6.- Despus de que utilice un reactivo tenga la precaucin de cerrar bien el frasco.

7.- Los tubos y varillas de vidrio y objetos calientes deben colocarse sobre tela de asbesto y en un lugar no muy accesible de la mesa de trabajo, para evitar quemaduras as mismo o a algn compaero. 8.- Los tubos de ensaye calientes, con lquido o no, deben colocarse en una gradilla de alambre o en un vaso de precipitados. 9.- Cuando se calientan sustancias contenidas en un tubo de ensaye, no se debe apuntar la boca del tubo al compaero o a si mismo, ya que pueden presentarse proyecciones del liquido caliente. 10.- La dilucin de cidos concentrados debe hacerse de la siguiente manera: i Utilizar recipientes de pared larga. i Aadir lentamente el acido al agua resbalndolo por las paredes del recipiente, al mismo tiempo que se agita suavemente. i Nunca aadir agua al acido, ya que puede formarse vapor con violencia explosiva. 11.- No se debe probar ninguna sustancia. Si algn reactivo se ingiere por accidente, se notificara de inmediato al docente. 12.- No manejar cristalera u otros objetos con las manos desnudas, si no se tiene la certeza de que estn fros. 13.- No se debe oler directamente una sustancia. Sino que sus vapores deben abanicarse con la mano hacia la nariz. 14.- No tirara o arrojar sustancias qumicas, sobre nadantes del experimento o no, al desage. En cada prctica deber preguntar al profesor sobre los productos que pueden arrojar al desage para evitar la contaminacin de ros y lagunas. 15.- Cuando en una reaccin de desprendan gases txicos o se evaporen cidos, la operacin deber hacerse bajo una campana de extraccin. 16.- Los frascos que contengan el reactivo a usar en la prctica deben mantenerse tapados mientras no se usen. 17.- No trasladar varios objetos de vidrio al mismo tiempo. 18.- No ingerir alimentos ni fumar dentro del laboratorio.

19.- Se debe mantener una adecuada disciplina durante la estancia en el laboratorio. 20.- Estar atento a las instrucciones del docente.

SUSTANCIAS QUE DEBEN USARSE CON PRECAUCION. Todas las que se utilizan en las operaciones y reacciones en el laboratorio de qumica son potencialmente peligrosas por lo que para evitar accidentes, debern trabajarse con cautela y normar el comportamiento en el laboratorio por las exigencias de la seguridad personal y del grupo que se encuentre realizando una practica. Numerosas sustancias orgnicas e inorgnicas son corrosivas o se absorben fcilmente por la piel, produciendo intoxicaciones o dermatitis, por lo que se ha de evitar su contacto directo; si esto ocurriera, deber lavarse inmediatamente con abundante agua la parte afectada.

RECOMENDACIONES PARA EL MANEJO DE ALGUNAS SUSTANCIAS ESPECFICAS. Acido fluorhdrico (HF). Causa quemaduras de accin retardada en la piel, en contacto con las uas causa fuertes dolores, y solo si se atiende a tiempo se puede evitar la destruccin de los tejidos incluso el seo. Acido ntrico (HNO3). Este acido daa permanentemente los ojos en unos cuantos segundos y es sumamente corrosivo en contacto con la piel, produciendo quemaduras. cidos sulfrico (H2SO4), fosfrico (H3PO4) y clorhdrico (HCl). Las soluciones concentradas de estos cidos lesionan rpidamente la piel y los tejidos internos. Sus quemaduras tardan en sanar y pueden dejar cicatrices. Los accidentes mas frecuentes se producen por salpicaduras y quemaduras al pipetearlos directamente con la boca. QUE HACER EN CASO DE ACCIDENTE? En caso de accidente en inmediatamente al docente. el laboratorio, hay que comunicarlo

Salpicaduras por cidos y lcalis.

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Lavarse inmediatamente y con abundante agua la parte afectada. Si la quemadura fuera en los ojos, despus de lavado, acudir al servicio medico. Si la salpicadura fuera extensa, llevar al lesionado al chorro de la regadera inmediatamente y acudir despus al servicio medico. Quemaduras por objetos, lquidos o vapores calientes. Aplicar pomada para quemaduras o pasta dental en la parte afectada. En caso necesario cubrir la piel con una gasa y acudir al servicio medico. CONCLUSIONES. Es importante seguir adecuadamente las normas de prevencin al ingresar a laboratorio para prevenir cualquier tipo de accidentes, o en caso de que estos sucedan saber que hacer y con quien acudir. Tambin es importante saber que sustancias son corrosivas y dainas para nuestros ojos, piel, etc. y as tener mas cuidado al utilizarlas en una practica.

CUESTIONARIO. Razona, discute y escribe acerca de los siguientes puntos: 1.- Por qu es de importancia una adecuada introduccin a laboratorio? Al haber ledo la introduccin y las normas para ingresar a laboratorio te das cuenta de que es muy importante seguirlas, ya que eso te ayudara a poder tener un mejor desempeo en tu prctica, prevenir accidentes en tu persona o con compaeros, lo que debes y no debes hacer estando dentro. 2.- Qu consejos de seguridad para el laboratorio conoces? Que no debes comer, tomar o fumar estando dentro del laboratorio, que debes de tener cuidado en como manipulas las sustancias corrosivas, que es lo que se debe hacer en caso de un accidente de salpicadura. Se debe mantener orden en las mesas y los bancos en su lugar, no se debe pipetear con la boca, probar o inhalar sustancias. 3.- Qu consejos de seguridad has aprendido el da de hoy? Aprend para que esta una regadera en un laboratorio, que sustancias deben usarse con precaucin y lo que sucede al tener contacto con ellas. Lista de aparatos en el laboratorio y su utilidad.
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Gradilla.- Sirve para colocar tubos de ensayo y facilita el manejo de estos. Pipeta graduada: Es de vidrio y sirve para dar volmenes exactos, con esta pipeta, se pueden medir distintos volmenes de lquido, ya que lleva una escala graduada. Pipeta volumtrica: Es de vidrio y posee un nico valor de medida, por lo que slo puede medir un volumen. Frascos de reactivos.- Permiten guardar sustancias para almacenarlas, hay de color mbar que se utilizan para guardar sustancias que son afectadas por los rayos del sol, y transparentes que se utilizan para contener sustancias que no son afectadas por la accin de los rayos del sol. Tubos de ensaye.- Sirven para hacer experimentos o ensayos, los hay en varias medidas y aunque generalmente son de vidrio tambin los hay de plstico. Pinzas para tubo de ensaye.- Permiten sujetar tubos de ensaye y si stos se necesitan calentar, siempre se hace sujetndolos con estas pinzas, esto evita accidentes como quemaduras. Matraz Erlenmeyer.- Recipiente que permite contener sustancias o calentarlas. Tela de alambre.- Tiene forma cuadrangular con la parte central recubierta de asbesto, con el objeto de lograr una mejor distribucin del calor. Se utiliza para sostener utensilios que se van a someter a un calentamiento y con ayuda de este utensilio el calentamiento se hace uniforme.

PRACTICA N 2 PROTEINAS EN SANGRE.

OBJETIVO.- Desproteinizar la sangre por el mtodo Folin, hasta llegar al filtrado libre de protenas. SANGRE. La sangre es un tejido fluido que circula por capilares, venas y arterias de todos los vertebrados e invertebrados. Su color rojo caracterstico es debido a la presencia del pigmento hemoglobnico contenido en los eritrocitos, es un tejido conjuntivo lquido, cuyas clulas fluyen rodeadas de una sustancia intercelular denominada plasma, a travs de un sistema cerrado de vasos sanguneos. Permite la nutricin, comunicacin, proteccin y reparacin de los diversos tejidos del organismo. PLASMA. El plasma sanguneo es la porcin lquida de la sangre en la que estn inmersos los elementos formes. Se obtiene de una muestra de sangre en un tubo con anticoagulante, pero se centrifuga a 2500 rpm durante 5 min. Es de color amarillento traslcido y es ms denso que el agua. El plasma es una mezcla de protenas, aminocidos, glcidos, lpidos, sales, hormonas, enzimas, anticuerpos, urea, gases en disolucin y sustancias inorgnicas como sodio, potasio, cloruro de calcio, carbonato y bicarbonato. SUERO. El suero sanguneo o suero hemtico es el componente de la sangre resultante tras permitir la coagulacin de sta y eliminar el coagulo resultante. Este se obtiene a partir de una muestra de sangre venosa que se deposita en un tubo seco (sin anticoagulante) y se deja coagular. MATERIAL: i i i i i Guantes de ltex. Solucin de H2SO4 1/12N. Solucin de tungstanato de sodio. Embudo. Papel filtro.
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i Tubos de 13 x 100. DESARROLLO: Desproteinizacin de la sangre por el mtodo Folin. Mezclar 1ml de sangre con 8ml de la solucin H2SO4 1/12N. Agregar 1ml de tungstanato de sodio. Mezclar 1min. Filtrar con un papel filtro a travs de un embudo colocado en un tubo de 13 x 100 (el filtrado debe ser incoloro). i Al lquido obtenido de este procedimiento se le llama filtrado libre de protenas. i i i i CONCLUSIONES: Se pudo observar como al agregarle la solucin H2SO4 se rebajo el color de la sangre y al mezclar se oscureci ms hasta llegar casi a color negro. Al agregar el tungstanato se le formo a la mezcla una especie de nata, lo cual indico que se empezaban a desnaturalizar las protenas. Al final de la prctica nos pudimos percatar de que los residuos que quedan en el papel filtro son las protenas que han sido eliminadas de la sangre, y el lquido sobrante en el tubo de ensaye es el filtrado libre de protenas. CUESTIONARIO: 1.- explica lo que le sucedi a los glbulos rojos cuando se agreg la solucin H2SO4 a la sangre. i Al comienzo se rebajo el color de la sangre, al mezclarlo cambio su color de caf oscuro a casi negro. 2.- identifica en que paso de la practica se realizo la desnaturalizacin de las protenas en la sangre y proporciona una explicacin de porque sucedi este fenmeno. i Al aadirle el tungstanato de sodio se comenzaron a formar grumos mas claros, esto sucedi porque se comenzaron a desnaturalizar las protenas. Despus cambio a color chocolate. 3.- explica cual es la funcin del tungstanato de sodio para la obtencin del filtrado libre de protenas.

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i Separar las protenas del plasma, previamente iolizar los eritrocitos con el paso del acido. BIBLIOGRAFIA: Randall, D.; Burggren, W. ET French, K. (1998). Eckert Fisiologa animal (4 edicin). Ciencias de la Naturaleza y su didctica pg. 110. Julia Morros Sard. Agustino, AM., Piqueras, R., Prez, M. et al. Recuento de plaquetas y volumen plaquetario medio en una poblacin sana. Rev. Diagn. Biol.

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PRACTICA N 3. DETERMINACION DE UREA EN SUERO.

OBJETIVO.- Determinar la cantidad de urea presente en el suero de una muestra de sangunea. La urea se forma en el hgado y se filtra libremente a travs de los glomrulos, pero es parcialmente absorbida por los tbulos: la absorcin pasiva es dependiente de la velocidad del flujo urinario, de la cantidad de urea presente y del estado del epitelio tubular. La concentracin de urea plasmtica es mayor en hombres que en mujeres y aumenta con la edad, tal vez en relacin con la funcin renal. La urea se encuentra elevada en la insuficiencia renal cuando el valor del filtrado glomerular se ha reducido 1/5 del normal. Algunos signos y sntomas de disfuncin renal incluyen: Fatiga, poco apetito, trastornos del sueo, falta de concentracin. Hinchazn (edema), particularmente alrededor de los ojos o en la cara, muecas, abdomen, muslos o tobillos. Orina espumosa, oscura, o sanguinolenta. Disminucin de la cantidad de orina emitida. Problemas al orinar, como sensacin de quemazn, presencia de secreciones al orinar, o alteraciones en el ritmo miccional, especialmente por la noche. Dolor lumbar o en el flanco, por debajo de las costillas, en la zona donde se localizan los riones. Aumento de la presin arterial. Los valores normales de urea en suero es de 15-45 mg/dl. MATRIALES: i Kit de determinacin de urea. i Suero sanguneo. i Centrifuga.
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i Pipetas Pasteur. i Espectrofotmetro. DESARROLLO: i Mezclar 1ml del reactivo 1 y 50 l de suero de muestra sangunea. i Agregar 1ml del reactivo 2, mezclar e incubar a 37C por 15 min. i Leer el espectrofotmetro a 510 nm. CONLUSION: Formula: .099 .285 D.O MUESTRA (50)= .285 . X 50 = 17.36 Mg/Dl . Mg/Dl

El resultado de urea en la muestra de sangre esta dentro del rango normal. CUESTIONARIO: 1.- explica si una ingesta alta en protenas, el estado de hidratacin o ejercicio podra alterar los valores de urea plasmtica en un adulto sano. i Al exceso de protenas la urea se incrementa y el rin se hace ms lento respecto a la sintetizacin de protenas. 2.- menciona 5 enfermedades hepticas concentraciones de urea plasmtica. que pueden alterar las

i Insuficiencia cardiaca, hemorragias gstricas, hipovolemia. 3.- menciona 5 enfermedades renales concentraciones de urea plasmtica. que pueden alterar las

i Clculos, obstruccin de orina, insuficiencia 4.- explica las diferencias y similitudes de las pruebas de aclaramiento de la urea y la determinacin de urea plasmtica. i La urea se forma en el hgado y se filtra libremente a travs de los glomrulos: la absorcin pasiva es dependiente de la velocidad del flujo urinario, la cantidad de urea presente. La aclaracin de la urea
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est influenciada por tantas variables no es una prueba de velocidad de filtracin glomerular ni de la absorcin tubular. BIBLIOGRAFIA: Johnson WJ, Hagge WW, Wagoner RD, Dinapoli RP, Rosevear JW. Efectos de la carga de urea en los pacientes con muy avanzado de insuficiencia renal. Mayo Clin Proc. 1972 Deepak A. Rao; Le, Tao; Bhushan, Vikas (2007). Primeros Auxilios para el USMLE Step 1, 2008 (Primeros Auxilios prrafo USMLE Paso 1). McGrawHill Medical. http://es.scribd.com/doc/22632638/3-Determinacion-Cuantitativa-deUrea-en-Suero

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PRACTICA N 4 DETERMINACION DE GLUCOSA EN SUERO.

OBJETIVO.- Calcular el nivel de glucosa existente en el suero de una muestra de sangre. La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el pncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se mantiene, da lugar a una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la razn principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que tambin la provocan. El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones muy bajas o muy altas aparecen sntomas de confusin mental e inconsciencia. Tipos de mtodos qumicos: Reductimtricos, que se basan en la capacidad reductora de la glucosa. Debido a la presencia en la muestra de otros compuestos reductores, estos mtodos dan cifras superiores a las correspondientes a la glucosa verdadera) Furfurlicos: se basan en la capacidad de la glucosa para formar furfural al sufrir deshidratacin en un medio cido. Un ejemplo es el mtodo que emplea o-toluidina. En cuanto a los mtodos enzimticos: Mtodo de la hexoquinasa: emplea las enzimas hexoquinasa y glucosa-6fosfato deshidrogenasa. Por cada molcula de glucosa se forma una de NADPH, que puede medirse espectrofotomtricamente a 340 nm. Es el mtodo de referencia recomendado por las organizaciones internacionales)

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Mtodo de glucosa oxidasa y peroxidasa (GOD-POD): es el que se utiliza en esta prctica para medir los niveles de glucosa sangunea de ratas diabticas y controles. Valores normales de glucosa en la sangre: El valor normal de glucosa es de 60-110 mg/dl. Los valores ms bajos de 40-50 mg/dl se consideran bajos (hipoglucemia). Los valores ms altos de 128 mg/dl se consideran altos (hiperglucemia). Realizar los clculos correspondientes, segn: Glucosa en mg/dL = ABSORBANCIA DE LA MUESTRA X 100 mg/dL ABSORBANCIA DEL ESTANDAR Glucosa en mmol/dL = ABSORBANCIA DE LA MUESTRA X 5.56 mmol/L ABSORBANCIA DEL ESTANDAR Glucosa en g/dL = ABSORBANCIA DE LA MUESTRA X 1 g/L ABSORBANCIA DEL ESTANDAR MATERIAL: i i i i i Kit de determinacin de glucosa. Suero sanguneo. Centrifuga. Pipetas Pasteur. Espectrofotmetro.

DESARROLLO: i Mezclar 1ml de reactivo y 10l de suero de muestra de sangre. i Incubar 10 min a 37C. i Leer el espectrofotmetro. CONCLUSIONES: Formula: ABS .534 . (100) = . Mg/Dl

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.564 .534

. X 100 = 106.55 Mg/Dl

El resultado de glucosa en la muestra de sangre esta dentro de los valores normales. PREGUNTAS: 1.- Cules han sido los niveles de referencia de glucosa en plasma en los ltimos aos y porque se han considerado dichos valores? i 60-110 mg/dL = 3,33-6,10 mmol/L. estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. 2.- menciona si es posible que otros monosacridos (diferentes a la glucosa) pueden alterar los niveles de glucosa en sangre y por qu? i Los hidratos de carbono elevan los niveles de azcar en sangre y eso obliga al cuerpo a trabajar ms para producir ms y ms insulina para metabolizar el azcar sanguneo. 3.- Cules son las consecuencias fisiolgicas a largo plazo de un decremento/aumento de glucosa en sangre? i Orina oscura, esplenomegalia, fatiga, palidez, frecuencia cardaca rpida, dificultad para respirar, coloracin amarilla de la piel (ictericia). 4.- Cul de los siguientes estudios de laboratorio indica un resultado mas preciso en la correlacin de niveles de glucosa con desbalance metablico y por qu? a) medicin de glucosa en ayuna b) glucosa en orina c) prueba de la glucosa pospandrial i Medicin de glucosa en ayuna BIBLIOGRAFIA: http://es.scribd.com/doc/22632512/1-Determinacion-Cuantitativa-deGlucosa-en-suero
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Devlin, T. M. 2006. Bioqumica, 4 edicin. Revert, Barcelona. Larsen ML, Hrder M, Mogensen EF (1990). Efecto de la vigilancia a largo plazo de los niveles de hemoglobina glicosilada en la diabetes mellitus insulino-dependiente. N. Engl. J. Med. 323 (15): pp. 10215.

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PRACTICA N 5. EVALUACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA.

OBJETIVO.- La realizacin de esta prctica es para evaluar la actividad enzimtica en el frijol de soya. Y conocer la importancia de la temperatura en las enzimas. Las enzimas son molculas de naturaleza proteica que catalizan reacciones bioqumicas, siempre que sean termodinmicamente posibles: Una enzima hace que una reaccin qumica que es energticamente posible, pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actan sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se les denomina reacciones enzimticas. Debido a que las enzimas son extremadamente selectivas con sus sustratos y su velocidad crece slo con algunas reacciones, el conjunto de enzimas sintetizadas en una clula determina el tipo de metabolismo que tendr cada clula. A su vez, esta sntesis depende de la regulacin de la expresin gnica. La actividad de las enzimas puede ser afectada por otras molculas. Los inhibidores enzimticos son molculas que disminuyen o impiden la actividad de las enzimas, mientras que los activadores son molculas que incrementan dicha actividad. Asimismo, gran cantidad de enzimas requieren de cofactores para su actividad. Muchas drogas o frmacos son molculas inhibidoras. Igualmente, la actividad es afectada por la temperatura, el pH, la concentracin de la propia enzima y del sustrato, y otros factores fsico-qumicos. MATERIALES: i Bao mara. i Tubos de ensaye i Solucin de urea amortiguadora (pH7).
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i Papel indicador de pH. i Frijol de soya. DESARROLLO: i Colocar el bao mara a 50C. i Marcar dos tubo de ensaye y agregar 5ml de solucin de urea amortiguada a un pH de 7.0 (usar el papel indicador para comprobar dichas soluciones). i Agregar a un tubo una cucharadita de frijol de soya y agitar energticamente. i Colocar ambos tubos en bao maria. i Sacar los tubos a los 5 min momentneamente del bao maria para verificar el pH con ayuda del papel indicador de pH (anotar el pH obtenido) i Repetir la actividad anterior con ambos tubos, cada 5 min hasta complementar un total de 25 min. CONCLUSIONES: Tiempo pH papel indicador Tubo 1 0 5 10 15 20 25 7 8 7 8 7.5 Tubo 2 7

En la prctica no cambio el valor del pH, debido a que hubo un error es la misma. El error consisti en que al pasar los 10 min sugeridos por el responsable de laboratorio, no se saco el tubo de ensaye de bao mara ni se mezclo para medir de nuevo el pH. CUESTIONARIO:
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1.- Explica por qu aumenta el pH de la solucin que contiene el frijol de soya en funcin de la reaccin enzimtica que se llevo a cabo. i En esta prctica el pH no tuvo un cambio notable ya que se cometi un error al momento de medir el pH pasado 10 min. 2.- Menciona 5 desventajas de la determinacin de la actividad cataltica de las enzimas en el plasma para el diagnostico clnico. i Deben ser especficas y si hay algn defecto como la sustitucin de un aminocido por otro se ve afectada la reaccin. Deben tener la energa cintica necesaria y la actividad potencial optimizada mediante el pH. Las enzimas pierden actividad con el tiempo debido a inhibiciones inactivaciones o perdida de su estabilidad. No siempre disponemos de una enzima que cataliza la reaccin de inters la podemos encontrar en la naturaleza o puede ser diseada. La presencia de una isoenzima puede suponer la aparicin de reacciones laterales y por tanto de mezcla de productos y disminucin de rendimiento. 3.- Explica por qu la reaccin estudiada en esta prctica debe llevarse a cabo a 50C. i Porque si la temperatura disminuye o aumenta el pH se ve afectado, ya que uno de los factores que alteran las enzimas es la temperatura. BIBLIOGRAFIA: Lilley D (2005). . Estructura, los mecanismos de plegamiento y de ribozimas. Curr Opin Struct Biol 15 (3): pp. 31323 Smith AL (Ed) et al. (1997). Diccionario Oxford de bioqumica y biologa molecular. Grisham, Charles M.; Reginald H. Garrett. Bioqumica. Philadelphia: colegio publico Saunders. pp. 4267

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