CENTRO AGRONMICO TROPICAL DE INVESTIGACIN Y ENSEANZA

CATIE

PROGRAMA DE EDUCACIN PARA EL DESARROLLO Y LA CONSERVACIN ESCUELA DE POSGRADO

EVALUACIN MORFOLGICA Y MOLECULAR DE LNEAS AVANZADAS DE MEJORAMIENTO GENTICO DE ARROZ (Oryza sativa) DEL INSTITUTO DE INVESTIGACIN AGROPECUARIA DE PANAM, (IDIAP).

Tesis sometida a consideracin de la Escuela de Posgrado, Programa de Educacin para el Desarrollo y la Conservacin del Centro Agronmico Tropical de Investigacin y Enseanza como requisito parcial para optar por el grado de:

Magster Scientiae

Por: EVELYN ITZEL QUIRS McINTIRE

Turrialba, Costa Rica 2003

Esta tesis fue aceptada en su presente forma por la Escuela de Posgraduados, el Programa de Educacin para el Desarrollo y la Conservacin y aprobada por el Comit Consejero del Estudiante, como requisito parcial para optar al grado de: MAGISTER SCIENTIAE . FIRMANTES: _______________________________________ Carlos Astorga Domian, MSc Consejero Principal

___________________________________ Andreas W. Ebert, Ph. D MiembroComit Consejero

_______________________________________ Ismael Camargo B., Ph. D Miembro Comit Consejero

___________________________________________ Nelly Vsquez Morera, MSc Miembro Comit Consejero

_____________________________
Glenn Galloway, Ph. D Decano de la Escuela de Posgraduados

________________________________ Director del Programa de Investigacin.

___________________________ Evelyn Itzel Quirs McIntire Candidato

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DEDICATORIA

Con gran amor a mi hijo, Kennet David que es la inspiracin de mis das

Con cario a mi hermana, Charollette por su compaa y apoyo incondicional en todo momento Con amor a mi madre, Evelyn McIntire el mejor ejemplo de superacin

A todo ser humano que se supera a base de sacrificios....

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AGRADECIMIENTO

Mi sincero agradecimiento a las siguientes personas: En primer lugar a Dios Todopoderoso, por darme la fortaleza y gua. Al Magister Scientiae Carlos Astorga, mi profesor consejero en CATIE, por su gua, por su amistad y colaboracin . Muchas gracias. Al Doctor Andreas W. Ebert, por sus valiosas sugerencias, observaciones y su confianza. Al Doctor Ismael Camargo B., por su confianza, su apoyo en el seguimiento de campo y laboratorio en Panam y amistad. Al Magister Scientiae Nelly Vsquez Morera, por su apoyo incondicional, por su confianza y amistad. Al Magister Scientiae Carmen Yvonne Bieberach, por su colaboracin, sus palabras alentadoras y observaciones. Al Ing. Olman Quirz, por el apoyo brindado en el Laboratorio de Biologa Molecular del CATIE. Al Tcnico Gabriel Montero, por su colaboracin brindada en el Laboratorio de Semillas del CIARG, IDIAP , Panam. A mis colegas del Sub-centro del IDIAP en Penonom, Panam, Manuel Rojas, Fernando Fernndez, Yariela Cedeo. Agradezco a mi hermana, Charollette Quirs , cuya colaboracin fue de asistirme durante el trabajo de campo y laboratorio en Panam. A mis compaeros en CATIE, Alexis Quirz, Esteban Ruz, Anabella Meneses, Mara del Pilar, Paola Solera, Sara Yalle, Manuel Mollinedo y esposa, Octavio Galvn , Walter Robledo y esposa, por su amistad, colaboracin y porque no, a sus chistes.

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BIOGRAFIA

La autora naci en Penonom, Provincia de Cocl, Panam; realiz estudios primarios en la Escuela Simen Conte y secundarios en la Escuela Secundaria ngel Mara Herrera de su cuidad natal. En 1993 se recibi como Ingeniero en Desarrollo Agropecuario, titulo otorgado por la Universidad de Panam, en la Facultad de Ciencias Agropecuarias, David, Chiriqu. En 1997, curso estudios de Profesorado en Educacin Media, en el Centro Regional Universitario de Cocl. Entre 1996 y 2002 se desempe como investigador agrcola y productor de semillas de arroz y hortalizas, en el Instituto de Investigaciones Agropecuarias de Panam (IDIAP), con sede en el Centro de Investigacin Agropecuaria y de Recursos Genticos (CIARG). En enero de 2002, ingreso al Programa de maestra del Centro Agronmico Tropical de Investigacin y Enseanza (CATIE), en Turrialba, Costa Rica y egresa en diciembre de 2003 como Magister Scientiae en el rea de Agricultura Ecolgica con nfasis en Recursos Fitogenticos.

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TABLA DE CONTENIDO Pag. CONTENIDO........................................................................................................................ LISTA DE CUADROS.......................................................................................................... LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................ LISTA DE ANEXOS............................................................................................................. RESUMEN. SUMMARY.... 1. 1.1. 1.2. 1.3. 1.3.1. 1.3.2. 1.4. 2. 2.1. 2.2. 2.3. 2.4. 2.5. 2.6. 2.7. 2.8. 2.8.1. 2.8.2. 2.9. 2.9.1. 2.9.2. 2.10. INTRODUCCIN................................................................................................ Definicin del problema...................................................................................... Importancia de la investigacin.......................................................................... Objetivos............................................................................................................. Objetivo general................................................................................................. Objetivos especficos......................................................................................... Hiptesis............................................................................................................. REVISIN DE LITERATURA............................................................................ Origen y distribucin geogrfica del gnero Oryza............................................ Descripcin morfolgica y fisiolgica................................................................. Etapas del cultivo............................................................................................... Germoplasma de arroz....................................................................................... Mejoramiento gentico del arroz en Centroamrica.......................................... Importancia del mejoramiento gentico en Panam.......................................... Descripcin varietal........................................................................................... Caracterizacin morfolgica............................................................................... Marcadores morfolgicos................................................................................... Componentes de rendimiento............................................................................ Caracterizacin molecular.................................................................................. Marcadores moleculares.................................................................................... Descripcin de la tcnica de AFLPs................................................................... Mtodos estadsticos multivariados aplicados a la biologa molecular.............. vi ix x xii xiv xv

1 2 3 3 3 3 4 5 5 5 7 8 8 9 11 13 13 14 15 16 18 21

vi

3. 3.1. 3.1.1. 3.1.2. 3.1.3. 3.1.4. 3.1.5. 3.1.5.1. 3.2. 3.2.1. 3.2.2. 3.2.3. 3.2.4. 3.2.5. 3.2.6. 4. 4.1 4.1.1. 4.1.2. 4.1.2.1. 4.1.2.2 4.2. 4.3. 4.3.1. 4.3.1.1. 4.3.2. 4.3.3. 4.4. 4.5.

MATERIALES Y MTODOS.............................................................................. Etapa de campo................................................................................................. Ubicacin............................................................................................................ Material experimental......................................................................................... Semillero, trasplante y manejo agronmico....................................................... Evaluacin de las caractersticas morfolgicas y rendimiento........................... Anlisis estadsticos........................................................................................... Anlisis de los datos cuantitativos y cualitativos................................................. Etapa de laboratorio............................................................................................ Ubicacin............................................................................................................. Material experimental y mtodos........................................................................ Extraccin de ADN.............................................................................................. Determinacin de la concentracin de ADN....................................................... Amplificacin de los fragmentos de ADN............................................................ Anlisis estadsticos............................................................................................ RESULTADOS.................................................................................................... Caracterizacin morfolgica................................................................................ Distribucin porcentajes por lnea de las caractersticas cualitativas................. Anlisis de las caractersticas morfolgicas cuantitativas................................... Anlisis de varianzas de los rendimientos.......................................................... Calidad molinera y temperatura de gelatinizacin.............................................. Estructuras de los agrupamientos....................................................................... Caracterizacin molecular con marcadores AFLP.............................................. Resultados de aislamientos y concentracin de ADN........................................ Descripcin del polimorfismo revelado................................................................ Matrz de distancia y dendogramas.................................................................... Componentes principales.................................................................................... Comparacin de la variabilidad detectada a partir de caractersticas morfolgicas y marcadores moleculares............................................................. Descripcin morfolgica y molecular de lneas promisorias y progenitores.......

22 22 22 22 22 24 26 27 27 27 28 28 28 28 30

32 32 32 38 40 41 42 43 48 49 49 51 52 54 57

4.1.2.1.1 Comparaciones de medias..................................................................................

vii

5. 5.1. 5.2. 5.3. 5.4. 5.5. 6. 7. 8. 9.

DISCUSIN........................................................................................................... Variabilidad en caractersticas cualitativas............................................................ Variabilidad en caractersticas cuantitativas......................................................... Variabilidad gentica molecular............................................................................ Comparacin entre los marcadores morfolgicos y moleculares.......................... Variabilidad gentica entre lneas promisorias y progenitores.............................. CONCLUSIONES.................................................................................................. RECOMENDACIONES.......................................................................................... BIBLIOGRAFA..................................................................................................... ANEXOS................................................................................................................

61 61 65 75 76 77 79 81 82 91

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LISTA DE CUADROS Cuadro

Pg. Anlisis de varianza para la caracterstica de rendimiento en kg/ha de 48 lneas, 5 progenitores y 4 variedades testigos de arroz....................................... Promedio del rendimiento en kg/ha de 57 lneas de arroz del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP, Panam............................................ Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y acumulada que explican el anlisis de los componentes principales............................................ Contribucin de las variables en los componentes principales (C1, C2, C3, C4 y C5)..................................................................................................................... Distribucin de la frecuencia y porcentajes de los grupos de acuerdo al anlisis de varianza mnima de Ward (1967)....................................................... Combinaciones enzima-primer utilizadas, promedio de bandas amplificadas, nmero de bandas polimrficas, porcentaje de polimorfismo y rango de amplificacin......................................................................................................... Matriz de similaridad de 5 lneas avanzadas de mejoramiento de arroz, 5 progenitores y 2 variedades testigos, generada a partir de datos moleculares por el ndice de Jaccard....................................................................................... Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y acumulada que explican el anlisis de los componentes principales , de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos, segn datos moleculares.......................... Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y la acumulada que explican el anlisis de los componentes principales , de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos, segn datos morfolgicos........................ Distribucin de la frecuencia y porcentajes de los grupos de acuerdo al anlisis de varianza mnima de Ward (1967), de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos de arroz.............................................................................. Matriz de similaridad de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos arroz, generada a partir de datos morfolgicos por el coeficiente de Gower................................................................................................................... Matriz generada de los datos morfolgicos y datos moleculares sobrepuestas.. 41 42 44 45 45

1 2 3 4 5 6

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55

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56 60

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LISTA DE FIGURAS
Figura

Pag. Etapas de crecimiento de la planta de arroz...................................................... A. Tratamiento de semillas, B. Semillero en bandejas, C. Trasplante manual, una planta por sitio, D. Parcela con lmina de agua durante todo el ciclo de las plantas........................................................................................................... A. Etiquetado de plantas, B. Registro de altura de planta, C. Medidas en hoja bandera y pancula, D. Secado al sol de grano cosechado, para estimar rendimiento en kg/ha.......................................................................................... A. Rendimiento de molinera: (1) muestra descascarada, (2) muestra de granos pulidos, B. Escala visual de clasificacin para centro blanco del grano................................................................................................................... A. Prueba alcalina con 10 cc de la solucin de KOH al 1.7%, B. Grados de dispersin alcalina (1) temperatura de gelatinizacin baja, (2) temperatura de gelatinizacin alta, (3) temperatura de gelatinizacin intermedia....................... Diseo de la parcela experimental en la etapa de campo.................................. Escala de graduacin para clasificar el hbito de crecimiento de la planta de arroz.................................................................................................................... Escala de graduacin para registrar la caracterstica, posicin de la hoja bandera............................................................................................................... Escala de graduacin para clasificar la forma de la lgula en la hoja de arroz... Esquema de la posicin de la aurcula y lgula en la planta de arroz................. Escala de graduacin para clasificar la caracterstica, densidad de la pancula Escala de graduacin para clasificar la caracters tica, exercin de la pancula de la planta de arroz........................................................................................... Escala de graduacin para registrar la caracterstica, ngulo del pice que forman la lema y la plea en la espiguilla........................................................... Esquema de la semilla de arroz: a) vista frontal; b) vista lateral, para registrar las caractersticas de longitud y ancho de la semilla.......................................... Dendograma de clasificacin de 48 lneas, 5 progenitores y 4 variedades testigos por mtodo de varianza mnima de Ward de las variables cualitativas y cuantitativas..................................................................................................... Amplificacin de las combinaciones enzima-primers EACT/MCAC, EACG/MCAC, EACC/MCAA, EACA/MCAT, en gel de poliacrilamida al 6% con tincin de Nitrato de Plata (AgNO 3)............................................................ x 7

1 2

23

24

25

26 27 32

6 7

8 9 10 11 12 13 14 15

33 34 35 36 37 38 40

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Figura

Pag. WPGMA dendograma del agrupamiento de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos del proyecto de mejoramiento gentico de arroz de Panam, segn la matriz de distancia y similitud de Jaccard............................................................................................................... Proyeccin de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos del proyecto de mejoramiento gentico de arroz d IDIAP, por el anlisis de el componentes principales................................................................................... 53 Dendograma de agrupamiento de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP por caractersticas morfolgicas..............................................................

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52

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LISTAS DE ANEXOS Anexo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Lneas avanzadas de mejoramiento gentico de arroz (Oryza sativa), generacin y cruces utilizados para la caracterizacin morfolgica.......................................... Progenitores del programa de mejoramiento gentico de arroz (Oryza sativa) del IDIAP, Panam....................................................................................................... Descriptores cualitativos utilizados en el ensayo de caracterizacin morfolgica.. Descriptores cuantitativos utilizados en el ensayo de caracterizacin morfolgica............................................................................................................ Clasificacin de granos en calidad molinera........................................................... Escala de clasificacin utilizada para evaluar centro blanco.................................. Escala de clasificacin para la dispersn alcalina y su relacin con la estimacin de la temperatura de gelatinizacin........................................................................ Protocolo de extraccin de ADN para arroz........................................................... Preparacin de gel de Agarosa.............................................................................. Preparacin de gel de Polyacrilamida..................................................................... Limpieza y preparacin de vidrios.......................................................................... Preparacin de la cmara de electroforesis, desnaturalizacin y revelado del gel de polyacrilamida.................................................................................................... Pg.

91 92 93 96 97 97 98 99 100 100 101 103

Distribucin de los porcentajes por lnea de arroz de las caractersticas cualitativas............................................................................................................. 106 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est) y coeficiente de variacin (C.V.) de los das a floracin de las 57 lneas de arroz........................................................................................................................ 122 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est) y coeficiente de variacin (C.V.) de la longitud de la lmina de la hoja bandera de las 57 lneas de arroz.............................................................................................. 123 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) del ancho de la lmina de la hoja bandera de las 57 lneas de arroz................................................................................................... 124 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la longitud de la lmina foliar de las 57 lneas de arroz................................................................................................................... 125 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) del ancho de la lmina foliar de las 57 lneas de arroz....................................................................................................................... 126

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QUIROS McINTIRE, E.I. 2003. Evaluacin morfolgica y molecular de lneas avanzadas de mejoramiento gentico de arroz (Oryza sativa) del Instituto de Investigacin Agropecuaria de Panam, (IDIAP). Palabras claves: Oryza sativa, lneas avanzadas, caractersticas cualitativas y cuantitativas, rendimiento, centro blanco, temperatura de gelatinizacin, marcadores moleculares, AFLPs, variabilidad gentica, mejoramiento gentico.
RESUMEN

El objetivo de la investigacin fue determinar la variabilidad gentica presente en lneas avanzadas de arroz, progenitores y variedades comerciales del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP, a travs de la caracterizacin morfolgica, utilizando descriptores fenotpicos, y molecular mediante el uso de marcadores moleculares. La investigacin, consisti de dos etapas, una de campo realizada en el IDIAP, Penonom, Cocl, Panam y la otra de laboratorio que se realiz en el CATIE, Turrialba, Cartago, Costa Rica. En el IDIAP se evaluaron 48 lneas avanzadas de arroz (Oryza sativa), 5 progenitores y 4 variedades comerciales del programa de mejoramiento gentico. Las evaluaciones morfolgicas se basaron en 28 caractersticas cualitativas, 10 cuantitativas, rendimiento en kg/ha, y otras como rendimiento de molinera, evaluacin del centro blanco y temperatura de gelatinizacin del grano. Para el anlisis de laboratorio se utilizaron 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos analizados a travs de la tcnica molecular AFLPs, con 8 combinaciones enzima-primer con reactivos de Starter Primer Kit (INVITROGEN). La extraccin de ADN se realiz a partir de hojas liofilizadas utilizando el protocolo de extraccin CTAB minipreparaciones, seguido de la digestin, ligacin, preamplificacin, amplificacin selectiva y revelado en gel de polyacrilamida con tincin de nitrato de plata. Las evaluaciones realizadas permitieron demostrar que ciertas caractersticas como el ciclo fenolgico de la planta, la arquitectura como, la altura de la planta, el ancho de la lmina foliar y la fertilidad de la pancula explican el 31.08% de la variabilidad observada en las lneas de arroz estudiadas. Las caractersticas morfolgicas permitieron clasificar a las lneas de arroz en 4 grupos, a travs del agrupamiento de Ward, con tendencia a agrupar de acuerdo a su procedencia, a excepcin de la lnea 6. Las lneas de arroz que presentaron los mejores rendimientos fueron las lneas ms avanzadas del proyecto de mejoramiento, Chi 4523, IDIAP 22 y Chi 3210, superando los rendimientos de sus progenitores y variedades testigos. Las evaluaciones de rendimiento de molinera y calidad de grano reflejaron que las lneas con denominacin FLAR y Chi, presentan las mejores caractersticas. En este estudio la tcnica AFLPs gener un 44% de polimorfismo y 22.12 bandas polimrficas promedio por combinacin, en este estudio. La variabilidad observada mediante la caracterizacin molecular permiti establecer diferencias entre los 12 genotipos estudiados. Los progenitores Anayansi L2 y Surinam 70, presentaron la mayor semejanza gentica de 0.838. La prueba de Mantel permiti determinar la baja correlacin entre los datos morfolgicos y moleculares. Las comparaciones realizadas entre los cultivares prximos a registro y sus progenitores, indican que existen caractersticas propias de cada lnea que establecen diferencias con respecto a sus progenitores. Las distancias genticas a nivel molecular presentaron valores bajos. El uso de descriptores morfolgicos y marcadores moleculares AFLPs, permiti determinar la variabilidad gentica presente en 48 lneas avanzadas de arroz, 5 progenitores y 4 variedades comerciales del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP.

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QUIROS McINTIRE, E.I. 2003. Morphological and molecular evaluation of advanced breeding lines of rice (Oryza sativa) of the Institute of Agricultural Research of Panama, (IDIAP). Key words: Oryza sativa, advanced breeding lines, qualitative and quantitative characteristics, yield, grain translucency, gelatinisation temperature, molecular markers, AFLPs, genetic variability, genetic breeding.
SUMMARY

The objective of this investigation was to determine the existing genetic variability in advanced rice breeding lines, progenies and commercial varieties of the rice breeding project of IDIAP through morphological and molecular characterization using phenotypic descriptors and molecular markers, respectively. The investigation consisted of two stages: one carried out in the field at the IDIAP Research Station in Penenome, Cocle, Panama, the other one in the Molecular Biology Lab of CATIE in Turrialba, Cartago, Costa Rica. The field work focused on the evaluation of 48 advanced breeding lines, five progenies and four commercial varieties obtained through the rice breeding program of IDIAP. The morphological evaluations were based on 28 qualitative characteristics and 10 quantitative ones, among those: yield in kg/ha, milling quality, grain translucency and gelatinisation temperature of the grain. The laboratory work was undertaken with five advanced breeding lines, five progenies and two varieties, which serves as control. The analyses were carried out with the molecular technique AFLPs using 8 enzyme-primer combinations with reagents of the Starter Primer Kit (INVITROGEN). DNA was extracted from lyophilised leaves using the extraction protocol CTAB mini-preparations, followed by digestion, ligation, selective pre-amplification, and development in polyacrylamid gel stained with silver nitrate. The evaluations allowed to conclude that certain characteristics, such as phenological cycle of the plant, plant architecture, plant height, width of the leaf lamina and the fertility of the inflorescence explain 31,08% of the variability observed in the studied rice lines. The morphological characteristics allowed to classify the lines into four groups, using the grouping method of Ward. With the exception of line 6, the grouping coincided with the origin of the lines. The rice lines, which presented the highest yield, were the most advanced lines of IDIAPs breeding project: Chi 4523, IDIAP 22 and Chi 3210, surpassing the yield of their progenies and the control varieties. The evaluations of the milling quality of the grain revealed that the lines with denomination Flar and Chi presented the best results. In this study, the AFLP technique generated 44% polymorphism and 22,12 polymorphic bands on average per combination. The variability observed by means of the molecular characterization allowed to establish differences between the 12 studied genotypes. The progenies Anayansi L2 and Surinam 70 presented the greatest genetic similarity of 0.838. The Mantel test indicated a low correlation between the morphological and molecular data. The comparisons made between the new cultivars, which are close to registration and their progenies indicated that each line has characteristics of its own, which establish differences with its progenies. The genetic distances at the molecular level, however, are low. The use of morphological descriptors and AFLP markers allowed to determine the existing genetic variability in 48 advanced lines of rice of IDIAPs breeding project, five progenies and four commercial varieties, which served as control.

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CENTRO AGRONMICO TROPICAL DE INVESTIGACIN Y ENSEANZA PROGRAMA DE EDUCACIN PARA EL DESARROLLO Y LA CONSERVACIN

ESCUELA DE POSGRADO

EVALUACIN MORFOLGICA Y MOLECULAR DE LNEAS AVANZADAS DE MEJORAMIENTO GENTICO DE ARROZ (Oryza sativa) DEL INSTITUTO DE INVESTIGACIN AGROPECUARIA DE PANAM, (IDIAP).

Por: EVELYN ITZEL QUIRS McINTIRE

CATIE

Turrialba, Costa Rica 2003

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INTRODUCCIN

Los cereales constituyen el rengln alimenticio ms importante del mundo. El 50% de la base alimentaria de la poblacin mundial est compuesta por siete cultivos, como papa, maz, trigo, yuca, pltano, frijol y arroz. En conjunto, el arroz, maz y el trigo suministran el 50% de las caloras consumidas por la misma poblacin (Martnez y Weeraratne, 1982). Solo en los cultivos de papa, maz, trigo y arroz, se han hecho grandes inversiones en programas de mejoramiento gentico por sectores nacionales e internacionales (Alarcn et al., 1998). El objetivo principal de estos programas es incrementar el rea de cultivo para abastecer la demanda de la poblacin (Rosero, 1977). El arroz constituye uno de los principales renglones alimenticios en Amrica Latina; la tercera parte de las caloras consumidas provienen del arroz (Martnez y Weeraratne, 1982). El cultivo del arroz en Amrica Latina, est influenciado por los programas de mejoramiento gentico que buscan el desarrollo de variedades ms productivas para utilizarlas a nivel de explotaciones (Jennings et al., 1985). Lo anterior, debido a la gran diversidad de problemas como la uniformidad gentica que ha sido responsable de grandes reducciones en la produccin del cultivo como resultado de la aparicin de plagas y enfermedades que atacan el cultivo de arroz en los trpicos (Gonzlez et al., 1991). sto hace necesario que cada pas tenga programas nacionales de evaluacin de nuevas variedades, para la difusin de los materiales o variedades que presenten mejores caractersticas a los productores. Pero muchos de los pases cuentan con un pequeo capital humano y solo estaran en capacidad de adaptar materiales en estados avanzados de seleccin, mientras que otros pases con programas fuertes de investigacin pueden trabajar con materiales de generaciones de mejoramiento gentico tempranas (Posada, 1985). La capacidad de evaluacin del germoplasma mejorado conlleva a utilizar quizs una pequea porcin del germoplasma existente del arroz, como son los casos conocidos que muchas variedades liberadas sean utilizadas en ms de dos pases representando el rea de mayor produccin y que lneas avanzadas, provenientes de los mismos progenitores sean lanzadas como nuevas variedades en un mismo periodo de aos, solo con la nica diferencia del nombre comercial. A pesar que existen ms de 80,000 entradas de arroz (Oryza sativa) que se conservan en bancos de genes, los mejoradores estn interesados en usar solamente una fraccin pequea del

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germoplasma total, ya que existen programas de mejoramiento gentico de los pases para resolver problemas especficos de la produccin de arroz comercial (Guevara et al., 2001). 1.1. Definicin del problema El arroz representa uno de los componentes ms importantes de la canasta bsica de la poblacin panamea (Espinoza, 1977), presentando un consumo percpita de 72 kilogramos para el ao 2001 (FEDACPA, 2001). En Panam se siembran aproximadamente 89,000 hectreas por ao de arroz mecanizado, con una produccin de 224,300 tm. Esta actividad genera 60 millones de balboas, representando un aproximado de 2.3% del PIB agropecuario (MIDA, 2000). La globalizacin representa un desafo para los sistemas agropecuarios del pas, sin dejar de lado que puede representar una buena oportunidad para mejorar los niveles de competitividad del cultivo, en base principalmente a incrementos de la productividad y disminucin en los costos de produccin (IDIAP, 1998). El Instituto de Investigacin Agropecuaria de Panam (IDIAP) mediante la formulacin del Proyecto de investigacin y desarrollo para mejorar la competitividad del arroz en Panam, trata de elevar la productividad en el cultivo del arroz. Participa activamente en el intercambio de germoplasma a nivel nacional e internacional, con el fin de adquirir germoplasma que se usa en el desarrollo de nuevas variedades o para seleccionar lneas adaptadas a una determinada zona ecolgica (Bieberach y de Gonzlez, 1997). El programa de mejoramiento gentico de arroz hace nfasis en el desarrollo y liberacin de cultivares de arroz con resistencia a las principales plagas como Piricularia oryzae, Helminthosporium oryzae, con alto potencial de rendimiento y excelente calidad molinera y culinaria; adems, de buena adaptabilidad especfica para los sistemas de siembra de secano y riego (Camargo Buitrago, 2001). Como seala Shastry (1978), Amrica posee lugares o regiones agroecolgicas variables para el cultivo del arroz, pero la variabilidad gentica es baja. Con lo antes mencionado, existe la probabilidad que las lneas avanzadas y las variedades liberadas por el proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP en Panam, provenientes del programa de cruzas nacionales que buscan nuevas recombinaciones de genes, estn fundamentadas en una base gentica muy estrecha por el nmero limitado de progenitores que son utilizados.

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1.2. Importancia de la investigacin

El IDIAP tiene como misin fortalecer la base agrotecnolgica nacional para contribuir a la seguridad alimentaria, la competitividad del agronegocio y la sostenibilidad de la agricultura, en beneficio de la Sociedad Panamea (IDIAP, 1998). Basados en esta misin institucional y en la importancia del cultivo del arroz, se ha establecido como uno de los productos finales esperados del Proyecto de investigacin y desarrollo, mejorar la competitividad del arroz en Panam, identificar y liberar los genotipos superiores, una vez demostrado que son diferentes, homogneos y estables (DHE) a travs de la definicin de descriptores fenotpicos y/o moleculares que permitan caracterizar e identificar con precisin cada nuevo cultivar liberado. Estas actividades de descripcin varietal de cultivares en proceso de registro, y de materiales sobresalientes con caractersticas deseables en e valuaciones previas (Martnez, 1997a), permitir multiplicarlos en categora gentica para utilizarla despus como progenie de la categora bsica. El proceso se lleva a cabo bajo la supervisin de un programa de mejoramiento y bajo la vigilancia del Comit Nacional de Semillas para que la pureza e identidad gentica sean preservadas (Quirs Mc, 1997). 1.3. Objetivos 1.3.1. Objetivo general

Determinar la variabilidad gentica presente en 48 lneas avanzadas de arroz, 5 progenitores y 4 variedades comerciales del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP, a travs de la caracterizacin morfolgica utilizando descriptores fenotpicos y moleculares mediante el uso de marcadores moleculares Fragmentos Amplificados de Longitud Polimorfica (AFLPs). 1.3.2. Objetivos especficos Determinar la variabilidad gentica de cuarenta y ocho lneas avanzadas del programa de mejoramiento gentico de arroz a travs de descriptores morfolgicos. Conocer el nivel de diversidad gentica de cinco lneas avanzadas, cinco progenitores y dos variedades comerciales utilizadas como testigos, a travs de marcadores moleculares Comparar la variabilidad gentica obtenida por los descriptores morfolgicos y los marcadores moleculares de ADN.

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Realizar la descripcin v arietal de tres cultivares en proceso de registro, mediante la caracterizacin morfolgica y molecular, utilizando como comparadores a sus progenitores.

1.4. Hiptesis

Existe variabilidad gentica entre las 48 lneas gentico de arroz del IDIAP.

avanzadas del proyecto de mejoramiento

Existen diferencias morfolgicas y moleculares entre los 3 cultivares prximos a registro y sus progenitores y las variedades comerciales testigos. Hay relacin entre la variabilidad gentica obtenida por los descriptores morfolgicos y los marcadores moleculares de ADN. Es posible determinar la variabilidad gentica de los 5 progenitores a travs de marcadores morfolgicos y moleculares. .

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2. REVISIN DE LITERATURA. 2.1. Origen y distribucin geogrfica del gnero Oryza El arroz (Oryza sativa L), pertenece a un grupo de plantas que componen la familia de las gramneas. Estudios botnicos realizados indican que prcticamente todas las plantas cultivadas del mundo civilizado tuvieron origen de formas primitivas silvestres. Carrasco Garca (1951) y Heinrichs (2001), mencionan que la mayora de los autores de historia antigua indican que el arroz es originario del sudeste de Asia y que la domesticacin ocurri alrededor de hace 10000 aos. Center (1976), aade a frica; otros afirman que tiene su origen en las cuencas de los ros Indo y Ganges; algunos aseguran que fue en China porque los especmenes de arroz encontrados datan de 3,000 aos antes de la era cristiana, los primeros escritos histricos chinos indican que de las cinco principales plantas alimenticias en el pas, el arroz fue la ms importante (Heinrichs, 2001). El gnero Oryza pertenece a la subfamilia Oryzoideae de la familia Poaceae (tradicionalmente se conoce como gramneas). Se cultiva en todas las reas tropicales y subtropicales del mundo y se adapta a un rango amplio de condiciones ambientales (Len, 2000). El arroz es cultivado en un rango de temperaturas medias entre 24 y 28C, desde los 53 latitud norte hasta 40 latitud sur, en zonas comprendidas entre 0 y 1,250 msnm, elevaciones altas tales como las terrazas arroceras en las montaas en las Filipinas, altiplanicies, los bajos anegados y elevaciones bajas hasta el nivel del mar (Heinrichs, 2001). La principal formacin ecolgica donde se cultiva este cereal, corresponde al bosque hmedo sub-tropical segn la clasificacin de Holdridge (Romero Medina, 1977). 2.2. Descripcin morfolgica y fisiolgica El arroz es una especie muy variable, se conocen cerca de 100,000 cultivares, por lo que sus caracteres morfolgicos generales son difciles de precisar (Len, 2000). La planta de arroz es una hierba anual con tallos redondos, huecos y con junturas, hojas bastante planas y una panoja terminal. Est adaptada para crecer en suelos inundados; pero se desarrolla muy bien en suelos secos no anegados (UNI, 1975). Las partes de la planta pueden dividirse en rganos vegetativos como los tallos, las hojas y las races; as como en rganos reproductivos, flores, espiguillas. Las races son de dos clases, las

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seminales o temporales y las adventicias o permanentes, las cuales son fibrosas y que consisten en radculas y vellos radiculares (Gonzles et al., 1985) . Los tallos son de color verde, de forma cnica y son ms gruesos que la raz. Se componen de una serie de nudos e internudos, en cada nudo se forma una hoja y una yema (Arroz, 1971). Las hojas se encuentran distribuidas alternamente a lo largo del tallo. En la hoja completa se distinguen la vaina, el cuello y la lmina. La vaina es de forma enrollada como de cilindro, envuelve al tallo cuando es joven y despus envuelve a los internudos (UNI, 1975; Len, 2000). En el cuello de la hoja se encuentra la lgula que es una estructura triangular apergaminada o membranosa y difiere en tamao, color y forma segn la variedad de arroz; y las aurculas, que son dos apndices que tienen forma de hoz, con pequeos dientes en la parte convexa. La lmina es de tipo lineal, punta aguda, larga y ms o menos angosta, segn las variedades. La lmina de la hoja bandera es ms corta y ancha que las dems y segn la variedad, forma diferentes ngulos con el tallo: erecto, intermedio, horizontal o descendente. Segn la presencia de vellos se pueden clasificar como glabras, intermedias o pubescentes, tambin se reconocen por las combinaciones de colores, verdes o prpuras (Gonzlez et al., 1982; 1985). Los rganos florales, son inflorescencias denominadas pancula (Vergara, 1985), la cual es un grupo de espiguillas nacidas en el nudo superior del tallo. El tallo de la pancula se llama raquis y se encuentra dividida en nudos y entrenudos. Las ramas que producen granos en la pancula se forman solas o en conjunto de los nudos del raquis y estas ramas pueden ser simples y divididas. El tamao y la forma de las panculas varan generalmente en las diferentes variedades (Arroz, 1971). Segn la variedad puede extenderse ms all de la hoja bandera o quedar encerrado en la vaina de sta (Gonzlez y Rosero, 1982). La flor del arroz es hermafrodita. Contiene las partes masculinas y femeninas. Es esencialmente autofertilizada con el plen de una flor, fertilizando el estigma de la misma flor (Arroz, 1971). La espiguilla es la unidad de la inflorescencia; est formada por dos glumas externas (lemas estriles), la raquilla y la florecita. El nervio central de la lema se llama quilla y puede ser liso o pubescente. La arista, que es una prolongacin de la quilla, puede ser corta o larga, su tamao est condicionado por factores hereditarios e influenciado por el medio ambiente (Gonzlez y Rosero, 1982; Vergara, 1985).

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El grano de arroz se compone del ovario maduro, consta de una cscara formada por la lema, plea, y asociadas a la raquilla, las lemas estriles y las aristas, cuando se encuentran presentes. El embrin se encuentra en el lado ventral de la espiguilla, junto a la lema el cual contiene las hojas embrionarias (plmula) y la raz embrionaria (radcula) (Len, 2000). 2.3. Etapas del cultivo Las plantas de arroz completan su ciclo de vida pasando por tres etapas distintas, con perodos definidos de crecimiento y desarrollo (Figura 1).

Figura 1: Etapas de crecimiento de la planta de arroz.

La etapa vegetativa comprende la germinacin, el estado de plntula y el macollamiento. La plntula tiene un desarrollo muy rpido, hasta el estado de 4-5 hojas, seguido del macollamiento caracterizado por un vigoroso crecimiento de races y tallos, cuyo nmero depende principalmente de la densidad de la poblacin, la variedad y las condiciones de manejo de cultivo. Es esta etapa la que determina el ciclo de vida de la planta de arroz (Vargas, 1990; Hernndez, 1969). La etapa reproductiva, se inicia con la formacin del primordio de la pancula en la base del tallo, seguida del embuchamiento, estado en el cual ocurre una elongacin de los entrenudos en la parte superior del tallo. A partir de este instante, el cultivo pasa aceleradamente a la floracin con la elongacin rpida de los entrenudos y emergencia de la pancula en pocos das. Tiene una duracin de ms o menos 35 das (Vargas, 1990). Finalmente la fase de maduracin que comprende desde que la pancula emerge de la vaina de la hoja bandera (floracin), consecuentemente se inicia con el estado lechoso hasta el estado de llenado, pasando por el estado pastoso y endurecimiento del grano. Esta etapa dura

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aproximadamente 30 das y puede alargarse debido a das lluviosos o de bajas temperaturas, mientras que das soleados y calurosos pueden acortarla (Vergara, 1985; Arvalo, 2001). 2.4. Germoplasma de arroz

La existencia de diferencias sustanciales en el germoplasma del arroz garantiza la base gentica para el desarrollo de los programas de mejoramiento, que incrementan las fuentes diversas de progenitores, con el objetivo de ampliar la variabilidad en los genotipos mejorados, logrando una estabilidad en los rendimientos y un comportamiento agronmico a ms largo plazo ( Daz et al., 2000). La cantidad de germoplasma de arroz conservado es grande. Por ejemplo, el Instituto de Investigacin Internacional del Arroz (IRRI), establecido desde 1961, conserva una gran coleccin de recursos genticos del arroz. Aproximadamente conserva 120,000 accesiones de Oryza; tiene alrededor de 80,000 entradas de O. sativa, 2,408 entradas de O. glaberrima y 2,214 especies silvestres e hbridos de sus especies que se conservan en bancos de genes. Estas colecciones son duplicaciones de los programas nacionales de ms de 110 pases de Asia, frica, Oceana, Amrica del Norte y Amrica del Sur. Pero los mejoradores estn interesados en usar solamente una fraccin pequea del germoplasma total, ya que existen propsitos u objetivos de los programas de mejoramiento gentico de los pases en mencin, especficos para resolver problemas inmediatos de la produccin de arroz comercial (Guevara et al., 2001). 2.5. Mejoramiento gentico del arroz en Centroamrica

La generacin de materiales genticos mejorados tom un fuerte impulso como consecuencia de la llamada Revolucin verde, perodo en el cual los rendimientos promedios d arroz el aumentaron sustancialmente en algunas regiones del mundo (Fedearroz 1986; Ronnie et al., 1992). Los programas de mejoramiento gentico, de pases productores de arroz y en particular de Centroamrica, tienen una fase en comn en la seleccin de variedades, en donde el proceso de desarrollo de una variedad inicia con el cruce de los progenitores, los cuales han sido previamente evaluados en sus caractersticas y seleccionados para tal fin con base en las prioridades regionales y caractersticas especficas que puedan brindar al fitomejorador. Luego se obtienen lneas promisorias, las cuales pasan por otra fase que consiste en realizar pruebas

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de adaptacin con variedades introducidas con la meta final de incrementar la produccin por unidad de superficie a un menor costo (Rosero, 1977; Fedearroz, 1986). Los objetivos estn dirigidos a caractersticas de alto potencial de rendimiento como lo es la elevada capacidad de macollamiento, tolerancia al vuelco, hojas erectas de color verde oscuro, ciclo intermedio, senescencia tarda, panculas de tamao adecuado, grano pesado y poca esterilidad. Todas estas caractersticas son importantes para los programas de mejoramiento gentico pero la resistencia a enfermedades, principalmente piricularia (Piricularia oryzae) y el virus de la "Hoja Blanca", as como, la tolerancia a plagas merece especial atencin. Otras enfermedades como Rizoctonia (Rhizoctonia solani), Helminthosporium (Helminthosporium orizae), Manchado del grano, Sarocladium (Sarocladium oryzae) y Escaldado de la Hoja (Monograpella albescens), tambin son tomadas en consideracin y por lo general se realiza seleccin negativa en las poblaciones segregantes; as como, el mejoramiento incluye al insecto Sogata (Tagosodes orizicola), el cual es el vector del virus de la hoja blanca. La calidad culinaria est basada en el tamao del grano que debe ser superior a 6.6 mm, con una relacin largo ancho mayor o igual a 3.3 mm y con un contenido de amilosa que debe ser entre 23 y 27%. La calidad de molinera basada en el rendimiento del grano en el molino y la tolerancia a la cosecha retrasada, son los factores en los cuales se hace mayor nfasis al seleccionar las lneas que deben continuar en otros ciclos de pruebas (FLAR, 2002). En publicaciones de CIAT y otros, la tolerancia a la sequa y a la salinidad o alcalinidad son otros de los objetivos del mejoramiento (Jennings et al., 1985; Topolanski, 1975). 2.6. Importancia del mejoramiento gentico en Panam.

El arroz es uno de los cultivos de mayor importancia econmica en Panam. En el pas se cultiva arroz bajo condiciones de secano en un 80% y bajo riego en un 20%. La mayor parte de la produccin est concentrada en las provincias de Chiriqu, Cocl, Veraguas y Panam. Los mayores problemas que enfrentan los productores son los tpicos de las regiones del mundo, incertidumbre de lluvias para el sistema de secano y la incidencia de enfermedades y plagas. As como, la necesidad de cambiar las variedades en uso, buscando aquellas que representen mayores ventajas por su capacidad de rendimiento, calidad de grano, tolerancia a plagas, enfermedades y a la sequa para el sistema de secano. Para el sistema de riego, adems de lo mencionado, se busca que sean tolerantes o resistentes a la toxicidad de hierro (Espinoza, 1977). El Instituto de Investigacin Agropecuaria de Panam (IDIAP), mediante el Proyecto de mejoramiento gentico de arroz apunta a cumplir con el fortalecimiento del sector arrocero,

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mediante la bsqueda de soluciones a los problemas especficos, que en el corto y mediano plazo redundarn en una alta productividad y rentabilidad del sistema. El IDIAP contribuye a una produccin sostenible y competitiva a largo plazo (Camargo Buitrago, 2001). El proyecto se alimenta de muchas introducciones que se realizan por diferentes vas, pero, las principales fuentes de abastecimiento de germoplasma son la Red Internacional para la Evaluacin Gentica del Arroz (INGER) y el Centro Internacional de Agricultura Tropical- Fondo Latinoamericano y del Caribe para Arroz de Riego (CIAT-FLAR). El proyecto tambin produce lneas mediante un programa de cruzamientos y seleccin. Las lneas obtenidas de una u otra forma son consecuentemente conducidas a experimentos de observacin, rendimiento y validacin en numerosos sitios representativos de la produccin arrocera del pas (Lasso et al., 1997). El objetivo general del proyecto est basado en desarrollar y liberar cultivares de arroz con resistencia a las principales plagas y con alto potencial de rendimiento, excelente calidad molinera y culinaria. Adems, debe presentar buena estabilidad y adaptabilidad en los sistemas de produccin tipificados. Entre las actividades que desarrolla el proyecto de investigacin se menciona : ? Introduccin y caracterizacin de germoplasma de arroz de los Viveros de Observacin ? del Fondo Latinoamericano y del Caribe para Arroz de Riego; y Viveros de Observacin de Amrica Latina (VIOFLAR y VIOAL). ? Evaluacin de lneas F8 de arroz del IDIAP en etapa de observacin en los Viveros de ? Observacin de Amrica Latina (VIOIDIAP F8). ? Evaluacin de lneas promisorias y variedades comerciales de arroz de ciclo precoz e ? intermedio, bajo condiciones de riego y secano ? Prueba de adaptabilidad y estabilidad del comportamiento de cultivares promisorios de ? arroz. ? Descripcin varietal de cultivares en proceso de registro. ? ? Prueba de calidad molinera de lneas experimentales. ? ? Prueba de calidad culinaria de lneas experimentales. ? Dentro de los productos esperados del Proyecto de mejoramiento gentico de arroz, se mencionan:

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? Identificar las mejores lneas F8 nacionales e introducidas con resistencia a factores ? adversos biticos y abiticos, calidad de grano y rendimiento. ? Lograr la definicin de descriptores fenotpicos y/o moleculares que permitan identificar ? con precisin cada nuevo cultivar liberado. ? Obtener semilla muy homognea para uso experimental y entregar semilla de alta ? pureza varietal al programa de semilla bsica y registrada. ? Identificar las progenies con rendimiento de granos enteros superiores a 62.0%, ? rendimiento total encima de 70,0% y granos tizas inferiores a 2,0%. ? Identificar las progenies con centro blanco por debajo de 1,2 y digestin alcalina entre ? 4,0 y 7,0. 2.7. Descripcin varietal

La descripcin varietal se puede deducir de los objetivos del usuario para los estudios genticos y evolutivos, los cuales se realizan principalmente en los bancos de germoplasma, donde se precisan datos tomados con exactitud de muchas caractersticas botnicas. La descripcin varietal empleada por los fitomejoradores con fines de promocin comercial, se basa solo en aquellas caractersticas de inters econmico y comercial que tienen importancia para el agricultor (Muoz y Poey, 1993). Por lo que, tan pronto se designa una nueva variedad, el fitomejorador prepara una descripcin varietal para registrarla. Estas descripciones son usualmente una enumeracin de los rasgos ms sobresalientes y de las caractersticas de la variedad. La descripcin varietal debe ser cuidadosa en dos aspectos: (1) no debe ignorar las desventajas varietales en la misma forma que se destaca las ventajas, (2) se debe describir cualquier caracterstica en la que influya el medio ambiente, por insignificante que sea. Se debe incluir tambin comparaciones de rendimiento de la nueva variedad con varias variedades comerciales estndar (Jennings et al., 1981). La descripcin varietal debe realizarse con base en el fenotipo observado de las plantas de una variedad. El fenotipo depende del potencial gentico (genotipo) de cada planta y de expresin del fenotipo acorde con los efectos ambientales aparentes. Aunque, el arroz es una especie autgama, y por lo tanto supuestamente todas las plantas son de constitucin homocigota o pura, los fenotipos variarn por causas ambientales en las caractersticas cuantitativas y cualitativas cuya expresin sea afectada por accin de genes modificadores (Muz y Poey, 1983). El lanzamiento de una variedad, somete a un gran esfuerzo la capacidad de investigacin de un pas y la habilidad de la industria de semilla y de los agricultores para cambiar de

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variedades y mantener su pureza (Vargas, 1986). Una vez terminado el proceso de purificacin de una lnea promisoria, cosa que por lo general ocurre en arroz en la sptima u octava generacin donde se tiene una lnea homocigota, se inicia la produccin de semillas para ser entregada a los agricultores que son a quienes se trata de beneficiar con todo el programa de mejoramiento (Vallejo, 1977). La inscripcin de una variedad es un requisito indispensable para la circulacin como semilla comercial. Esta inscripcin requiere una descripcin varietal donde se registran las caractersticas cualitativas y cuantitativas de la variedad en mencin con el propsito de garantizar semilla de identidad varietal que significa que la semilla debe producir exactamente en la progenie las caractersticas genotpicas y fenotpicas de la planta original; calidad por su pureza fsica que implica que la semilla debe estar limpia y libre de materias extraas; sanidad; debe estar libre de plagas y agentes patgenos y debe tener alto poder germinativo (Fara y Agudelo, 1993; Gonzlez y Johnson, 1983; Higuera et al., 1997). El uso de semillas comerciales inscritas y previamente descritas busca evitar la llamada degeneracin de la semilla de variedades de arroz que se refiere al alto grado de impureza varietal que presenta un material que es usado como semilla y que presenta caractersticas, las cuales reducen el rendimiento y desmejoran considerablemente la calidad comercial del grano pilado (Contreras y Castillo, 1966). Tambin, se busca disminuir problemas de tipificacin de las variedades. Cuando existe un nmero demasiado grande de variedades, eso dificulta el mantenimiento de la pureza varietal. Estos problemas se presentan cuando las caractersticas fenotpicas son muy similares (color de cscara, dimensiones del grano, etc). Si hay bastante similitud entre plantas, se pueden presentar mezclas en ocasiones muy difciles de diferenciar, obligando a un mayor trabajo, tanto para el agricultor en el campo, como para el analista en el laboratorio y el procesador en las plantas de procesamiento (Lpez, 1972). La descripcin varietal que utilice pocos descriptores, adjetivos calificativos sujetos a interpretacin subjetiva y que utilice un rango aproximado para la medicin de caractersticas como una muestra muy pequea de plantas, trae consecuencias a los inspectores de calidad de campo de semilla. A la hora de analizar un lote, y de acuerdo con la variabilidad existente, hace que tengan que analizar criterios subjetivos para determinar la pureza varietal, a falta de una descripcin varietal adecuada a la cual referirse e implica en muchas ocasiones errores involuntarios que pueden representar la prdida de mucho esfuerzo y dinero (Muoz y Poey, 1983).

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2.8.

Caracterizacin morfolgica

La caracterizacin morfolgica de los genotipos permite definir una serie de descriptores tiles por su importancia agronmica, o por su valor para clasificar e identificar grupos genticos (Tapia et al., 1999). Las caractersticas morfolgicas han sido usadas para la identificacin de especies, familias y gneros de plantas. Las cuales involucran resistencia a enfermedades y plagas y el rendimiento (Falconer, 1981). Para la obtencin de patrones de identificacin, caracterizacin y evaluacin de la mayora de las plantas cultivadas, se han realizado estudios bsicos para conocer la variabilidad de las caractersticas dentro y entre plantas y seleccionado aquellas caractersticas cualitativas o cuantitativas que sean tiles para la descripcin. Los rganos ms importantes para la descripcin morfolgica son aquellos que estn menos influenciados por el ambiente como la flor y el fruto, as como las hojas, troncos, races y los tejidos celulares ( Enrquez, 1966; 1991). Siendo el arroz un cultivo autgamo, sus caractersticas varietales deben estar determinados por un mismo genotipo, que se expresa en todas las plantas en una condicin homocigota o pura (Iglesias et al., 1994). Sin embargo, los fenotipos observados seguirn demostrando variaciones por causas ambientales, principalmente en aquellas caractersticas que dependen de muchos genes (variables cuantitativos) como por ejemplo, la longitud de la pancula y el ancho de la semilla. An, las caracters ticas fijas cualitativas pueden segregar si al momento de la liberacin de la variedad no se estabiliza en forma homocigota dentro de la poblacin inicial de incremento como por ejemplo, el hbito de crecimiento, la pubescencia y el color de la hoja. La segregacin puede ocurrir en caracteres que carecen de inters agronmico para el fitomejorador (Muoz, 1993). 2.8.1. Marcadores morfolgicos Los mejoradores seleccionan plantas valindose de indicadores o marcadores cuando una caracterstica importante y difcil de comprobar, est ligado estrechamente con otra caracterstica que puede percibirse sin dificultad. Estos marcadores tienen las siguientes desventajas: a. Solo se conocen unos pocos. b. Tienden a ser especficos de alguna variedad de arroz. c. El marcador y la caracterstica deseable deben ser ambos dominantes o recesivos. d. Solo funcionan si estn controlados por genes principales simples ( Bio...,1994).

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Bernal et al. (1985), concluyeron en sus trabajos que las caractersticas morfolgicas de la arquitectura de la planta que ms influyeron sobre el rendimiento, son el nmero de panculas efectivas por metro cuadrado, nmero de granos por pancula, longitud de pancula, peso de la raz y altura de la planta . Segn Martnez (1997a), el rendimiento del grano es una funcin de la capacidad de rendimiento de las plantas, resistencia a enfermedades e insectos, adaptabilidad y prcticas agronmicas. Se han realizado investigaciones para la deteccin de posibles marcadores morfolgicos para la seleccin temprana de genotipos de arroz tolerantes a la salinidad por Gonzlez (1997), quien encontr que debido a altas concentraciones de salinidad existe estimulacin en el crecimiento radicular en algunas variedades y un rpido crecimiento vegetativo por efectos de la dilucin de sales por los tejidos. Las caractersticas, de altura, longitud de las races, emergencias de nuevas races, acumulacin de materia seca y fresca, as como la supervivencia se afectan por la salinidad y eso puede atribuirse, a la acumulacin de iones de Na y Cl en la planta. Estas caractersticas morfolgicas pueden ser utilizadas como marcadores para la seleccin temprana de genotipos tolerantes a la salinidad. Quipe et al. (1994), sealan que la tolerancia a la marchitez est relacionada con la capacidad del sistema radical y con el tamao ms compacto de la planta. La intensidad de color verde estara posiblemente relacionado con la capacidad de mantener el contenido de clorofila, bajo un dficit hdrico. As mismo, Garca y Gonzlez (1997), concluyen que la elongacin del sistema radicular fue el marcador morfolgico ms adecuado para evaluar la tolerancia ante el estrs de la sequa. 2.8.2. Componentes de rendimiento Como factor importante para el xito del fitomejoramiento, figuran aquellos recursos genticos que posean caractersticas deseables y que se involucren en el rendimiento. Los tallos cortos y fuertes, ms que ninguna otra caracterstica, determinan la resistencia al volcamiento. Una combinacin de la habilidad de alto macollamiento y una agrupacin compacta de tallos son caractersticas deseables para todos los productores de arroz. Las plantas con alto vigor inicial (que llenan rpidamente los espacios entre las plantas y surcos) son deseables si tal vigor no conduce a un crecimiento excesivo y sombro mutuo. La caracterstica ms importante de la hoja es la posicin erecta despus de la iniciacin de la pancula, asociado con la alta

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capacidad de rendimiento. La longitud de la hoja es supremamente variable en e arroz, el l ancho es menos variable y el grosor de la hoja ha sido relacionado con la alta habilidad de rendimiento por tener una tasa fotosinttica mayor por unidad de rea foliar. La rigidez de la hoja parece estar asociada directamente con el grosor de la hoja y la lignificacin de los tejidos foliares. Las hojas y espiguillas de la mayora de las variedades del arroz son pubescentes, algunas pocas son glabras o lisas, con poco o ningn tricoma bicelular (Jennings et al, 1981). Las hojas banderas son importantes para la capacidad de rendimiento por cuanto suministran directamente fotosntatos a las panculas (Martnez y Weeraratne, 1982). Las panculas dispersas son consideradas como indeseables, aunque las variedades de arroz con esta caracterstica no tienen necesariamente menos espiguillas. El peso del grano vara de menos de 10 a ms de 50 mg/grano. Esta caracterstica es ms comnmente expresado como peso de 1000 granos al 14% de contenido de humedad (Jennings et al., 1981). 2.9. Caracterizacin molecular

Los marcadores moleculares son uno de los tantos productos provenientes del desarrollo de la tecnologa del ADN recombinante, la cual se inici a comienzos de la dcada del 70. El descubrimiento de las enzimas de restriccin, enzimas que cortan el ADN en secuencias especficas, fueron el punto de partida para el inicio y posterior desarrollo de la tecnologa recombinante. Posteriormente el uso de enzimas ligasas y polimerasas permitieron construir molculas recombinantes in vitro (ngel, 2000). Las tcnicas moleculares son una herramienta poderosa para ayudar a resolver problemas en sistemtica. Una de sus principales bondades es la gran cantidad de caractersticas que aportan. sto permite que se puedan utilizar en grupos de plantas con morfologa muy reducida (como parsitas) en los que sera difcil aplicar otra tcnica que diera el mismo nmero de caractersticas. Una aplicacin importante es la valoracin de caractersticas consideradas de valor taxonmico en grupos en los que la rpida divergencia morfolgica o la seleccin sobre ciertas caractersticas deseables han obscurecido sus relaciones, como por ejemplo en las plantas cultivadas (Martnez, 1997a). El advenimiento de los marcadores moleculares revolucion los estudios genticos, debido a sus mltiples ventajas con respecto a los marcadores morfolgicos. Los marcadores moleculares permiten analizar directamente el genotipo sin la influencia de los factores ambientales ( Prez, 2000).

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La tendencia reciente en estudios taxonmicos es el uso combinado de datos morfolgicos y moleculares, especialmente los que provienen de enzimas de restriccin y secuencias de genes particulares. Los continuos desarrollos tecnolgicos estn haciendo posible el muestreo de un nmero mayor de genes y taxa a comparar. Paralelamente, el desarrollo de mtodos analticos basados en la teora cladstica ha provisto la formalidad y robustez para interpretar la variacin de esos datos (Gonzlez y Garca, 1997). Los marcadores moleculares presentan muchas ventajas en comparacin con los marcadores morfolgicos, especialmente por su nmero alto y su independencia de los efectos del ambiente. Permiten revelar las diferencias que han desarrollado los genomas durante su proceso de evolucin. Como aplicaciones de estas tcnicas, se puede mencionar la definicin de grupos genticos al nivel intraespecficos y la organizacin filogentica de las especies (Anthony et al., 1995). En el marco de un programa de mejoramiento gentico, los marcadores moleculares tienen por lo menos tres potenciales aplicaciones: a. Eleccin de progenitores para un cruzamiento: se puede preseleccionar materiales genticamente similares o diferentes, de acuerdo a los objetivos de la cruza. b. En base a estos polimorfismos se pueden construir mapas genticos sobre la base de poblaciones planificadas de acuerdo a la caracterstica de inters y en estos mapas identificar marcadores moleculares asociados a estas caractersticas (genes de resistencia a enfermedades, problemas de origen metablico como el centro blanco del grano, o factores abiticos como tolerancia a fro). A futuro, estos marcadores podran ser de uso rutinario en el anlisis de segregantes, con el consecuente ahorro de tiempo requerido para generar una nueva variedad; y c. Estos marcadores sern la herramienta de eleccin para realizar fingerprinting de variedades comerciales, lo que ser imprescindible para registrar la propiedad del material gentico (Hinrichsen et al., 1996). 2.9.1. Marcadores moleculares En 1944 surgieron pruebas experimentales directas de que los cidos nucleicos, en concreto el ADN, eran los que servan de base a la informacin en el proceso de la herencia. Con el descubrimiento de la estructura del ADN (cido desoxirribonucleico) por Watson y Crick (1953), los cuales expusieron la naturaleza de doble hlice del ADN, as como la suposicin de que las funciones de las molculas se clarificaran ms fcilmente tras determinar su estructura general

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(Klug y Cummings, 1999). Se inicia en el campo del conocimiento biolgico el desarrollo de la biologa molecular. En forma explosiva, la gentica molecular emerge como una de las ciencias ms apasionantes y el hombre empieza a entender el fenmeno de la vida en trminos qumicos (Balbs y Zapata, 1989). Las molculas de ADN se pueden fragmentar mecnicamente al azar en pequeos trozos. Un fragmento que contenga un gen aislado ser uno entre cientos de miles de otros fragmentos, indiferenciables por su tamao.

Algunas de las etapas principales del desarrollo de la tecnologa de ADN, se mencionan a continuacin: (Alberts et al., 1996) 1869 1953 1957 1961 1962 Miescher aisl por primera vez el ADN. Watson y Crick propusieron el modelo de la doble hlice para la estructura del ADN, basados en los resultados de rayos X de Franklin y Wilkins. Kornberg descubri la ADN polimerasa, la enzima que ahora se utiliza para producir sondas de ADN marcadas. Marmur y Doty descubrieron la renaturalizacin del ADN, estableciendo la especificidad y la posibilidad de las reacciones de hibridacin de los cidos nucleicos. Arber proporcion la primera evidencia de la existencia de las nucleasas de restriccin del ADN, que condujo a su posterior purificacin y utilizacin en la caracterizacin de la secuencia del ADN por parte de Nathans y H. Smith. 1967 1985 Gellert descubri la ADN ligasa, la enzima utilizada para unir fragmentos de ADN. Mullis y colaboradores desarrollaron la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR, de Polimerase Chain Reaction).

Los marcadores moleculares pueden clasificarse en marcadores dominantes y codominantes. Un marcador codominante significa que al evaluar un individuo diploide, el marcador permite visualizar tanto el alelo aportado por la madre como el aportado por el padre, lo que implica que son identificables los individuos heterocigotos de los homocigotos. Un marcador dominante por el contrario, produce una sola banda que slo en ciertos casos puede ser identificada si proviene de la madre o del padre (Phillips, 1998). Existen dos tipos de marcadores, las protenas y los moleculares de ADN. La seleccin del marcador que se vaya a utilizar en un estudio depender del uso que se le dar, de la especie

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en que se est trabajando, de la disponibilidad de recursos tcnicos y financieros como de otras razones, las cuales deben analizarse antes de tomar una decisin (Phillips et al., 1995). Len, (s/f), los agrupa de la siguiente manera: 1. Post transcripcin-traduccin (Anlisis indirecto del ADN: ej. Isoenzimas) 2. Pre transcripcin-traduccin (Anlisis directo del ADN). a. Basados en hibridacin: RFLP, VNTR ( Minisatlites) b. Basados en PCR con cebadores arbitrarios (Multilocal) RAPD, AP-PCR, DAF, SAMPLE, LSSP, SIR, DAMD. En general muestran alto nmero de bandas/ loci. c. Basados en PCR especfico (Unilocal): Secuenciamiento, TGGE, DGGE, CAPS, SSCP, SSR. Regiones especficas: se conoce la secuencia que flanquea ese fragmento de ADN . De forma general se seala que entre las caractersticas ms ventajosas que pueden tener un marcador molecular se encuentran: -Alto polimorfismo (Nmero de alelos/ loci) -Gran nmero (Disponibilidad de marcadores en el genoma) -Codominancia (Expresin gentica) -Heredables -Modelo Mendel -Simples (Pleiotropa y epistasia: nula o mnima) -Independientes (Recombinacin) -Distribuidos por todo el genoma -Mnima GxE (Interaccin genotipo- ambiente) -Independiente del estado de desarrollo de la planta -Selectivamente neutro (con relacin a efectos fenotpicos) -Fcil de obtener y analizar -Fcil de ser analizados entre diferentes especies y razas -Rpido -Barato (Len, s/f). 2.9.2. Descripcin de la tcnica de AFLPs La tcnica de AFLPs (Fragmentos Amplificados de Longitud Polimrfica) se basa en la amplificacin selectiva de fragmentos de restriccin usando la reaccin en cadena de la

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polimerasa (PCR) en el ADN genmico. La tcnica AFLPs es la ms reciente y la ms resolutiva de las que se aplican para la identificacin varietal. Se basa tambin en la PCR, pero con una variante. El ADN de la planta que se estudia, inicialmente se realiza una extraccin de ADN (Perry et al., 1998), luego es digerido por la accin de dos enzimas de restriccin. sto produce miles de fragmentos cortos de ADN. Posteriormente, los extremos de estos fragmentos son ligados a unas secuencias de nucletidos denominadas adaptadores. A continuacin, se realiza una PCR en la que se utilizan cebadores que hibridan con los adaptadores y uno o dos nucletidos extras, que imponen una seleccin y reducen el nmero de fragmentos que se van a amplificar a unos cientos. El resultado de la amplificacin se somete a electroforesis y deteccin radioactiva, visualizndose cientos de bandas polimrficas (Vos et al., 1995; Cho et al., 1998). En las reacciones de AFLPs se podran presentar posibles problemas como: a. Bandas dbiles o ausencia de ellas en la autoradiografa, lo que puede estar sujeto a una marcacin dbil o no marcacin del primer, insuficiente ADN molde, ADN contaminado (Sales, Triton X-100, SDS, protenas), incorrecto ciclo del PCR, evaporacin durante la amplificacin, baja sensibilidad de la pelcula. b. Pocas bandas pesadas, causado por la combinacin de primer no ptima. c. Prdida de lneas, debido a la evaporacin durante el PCR o error en el pipeteo d. Muchas bandas de alto peso molecular ocasionado por una digestin parcial. e. Bandas slo en la parte superior del gel, producto de una baja actividad de la polimerasa (Rodrguez Barreneche, 2000). En experimentos realizados en vid ha sido posible separar clones dentro de variedades, lo que lo convierte en una herramienta muy til para la seleccin clonal. Tambin es muy til para la elaboracin de mapas genticos, dado que se pueden obtener numerosos marcadores polimrficos en cada experimento. En contra de la tcnica est el hecho de que estos marcadores son dominantes como los RAPDs (ADN Polimrfico Amplificado al Azar), no pudiendo identificarse los loci a los que pertenecen las bandas (Hinrichsen et al., 2000). Esta tcnica AFLPs tiene la cualidad de reunir ventajas del RFLP (Fragmentos de Restriccin de ADN de Longitud Polimrfica) en la reproducibilidad de los ensayos y la PCR en la amplificacin con capacidad de diferenciar mltiples marcadores en una sola muestra. De la misma manera, Narvez et al. (2000), sealan que los AFLPs seran una buena alternativa para diferenciar clones, dado que tienen alta reproducibilidad y entregan mayor informacin por

34

cada reaccin que RAPDs. En estudios de diversidad gentica del maz, Marsan Ajmone et al. (1998), sugieren que los AFLPs pueden detectar un nmero ms grande de polimorfismo de una manera ms eficiente en comparacin a RFLP, debido al nmero ms alto de los lugares geomtricos probados en una sola reaccin de PCR. Los AFLPs tienen una mayor capacidad de generar bandas y consecuentemente de detectar polimorfismo, por esta razn constituyen la va ms rpida y reproducible para generar mapas genticos de alta densidad, usados en seleccin apoyada por marcadores genticos. Son ideales para determinar la identidad varietal y detectar plantas fuera de tipo. Como desventaja se puede mencionar que es un marcador dominante, aunque puede ser modificado para que acte como codominante (Phillips, 1998). Es importante sealar que la tcnica no detecta diferencias de longitud, sino presencia o ausencia de fragmentos de restriccin amplificados (Melgarejo Muz, 2000). Slo detecta un alelo, o sea, el fragmento que se amplifica. Las dems variaciones allicas son clasificadas conjuntamente como un alelo nulo. Los marcadores AFLPs son dominantes y los datos tienen naturaleza binaria. Los genomas heterocigotos no pueden discriminarse directamente de los homocigotos. El anlisis de los marcadores de AFLPs, incluyen mayor nmero de etapas, al compararlo con RAPDs, tambin necesitan un mayor nmero de reactivos y equipo de laboratorio. El ADN a usarse en las reacciones debe ser ms puro, donde la calidad del ADN es el elemento crucial para el xito de esta tcnica. Con lo antes mencionado es fcil deducir que es una tcnica ms laboriosa y que demanda recursos econmicos ms altos que RAPDs (Ferreira y Grattapaglia, 1998). Los AFLPs no se han utilizado mucho en identificacin varietal, debido a su gran complejidad experimental y al hecho de que se han desarrollado en fechas recientes. Sin embargo, presentan una importante caracterstica y es que su poder resolutivo en la separacin de genotipos es el ms alto en comparacin con el resto de las tcnicas. Las actuales tendencias del uso de marcadores moleculares AFLPs, en el cultivo de arroz, se fundamentan en estudios de la diversidad gentica, usados en la generacin de fingerprint de las accesiones, (Zhu et al., 1998). As, como la generacin de polimorfismos comparables con otras tcnicas moleculares (Mackill et al., 1996). Tambin como mtodo para analizar el germoplasma y su caracterizacin (Subudhi et al., 1998) y la generacin de mapas del genoma del arroz (Maheswaran et al., 1997).

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2.10.

Mtodos estadsticos multivariados aplicados a la biologa molecular

Los mtodos y procedimientos estadsticos de utilidad en ensayos biotecnolgicos, Martnez Wilches (1995), los agrupa en categoras como, aquellos que tienen como propsito evaluar la variabilidad, clasificacin, estructura y composicin gentica de las poblaciones. Los desarrollados para construccin de mapas cromosmicos o genmicos y los denominados QTL Quantitative Trait Loci, los cuales son loci asociados con caractersticas cuantitativas de importancia econmica. Tambin seala Martnez Wilches (1995), que los mtodos estadsticos ms usados son las distancias genticas, ndices de similitud, dendogramas y coordenadas principales. En dependencia de su naturaleza y objetivos de aplicacin se utilizan indicadores sobre la base de los cuales se describe la variabilidad y se clasifican las entidades de cuatro tipos principales: a. ndices de similitud, b. ndices de diferenciacin, c. ndices de identidad, d. Distancias genticas (Cornide y Coto, s/f.). Cornide y Coto (s/f), mencionan que los ndices de similitud de caractersticas de forma binaria se conocen como coeficientes de asociacin y sus matrices, como matrices de asociacin. Estos coeficientes expresan la concordancia entre cada par de unidades experimentales, unidades de organizacin taxonmicas, genotipos e individuos de una poblacin, etc, para una serie de caractersticas individuales de 2 ms estados. Los indicadores de asociacin pueden ser de tres tipos; pero los ms usados en trabajos con marcadores moleculares son los que resaltan la doble presencia y en especial los de Nei y Li (1979) y Jaccard.

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3. MATERIALES Y MTODOS 3.1. Etapa de campo 3.1.1. Ubicacin

El ensayo se realiz en el Campo Experimental del Sub- Centro Pacfico Marciaga, ubicado a 7 km al sur de la cuidad de Penonom, en el corregimiento de El Coco, del distrito de Penonom, provincia de Cocl, perteneciente al Centro de Investigacin Agropecuaria de Recursos Genticos (CIARG), del IDIAP. Esta rea de llanuras corresponde al bosque seco tropical (Mariscal et al., 2000), ubicado dentro del Arco Seco del pas, entre 8 05 y los 9 03 de latitud norte y 80 02 y 80 55 de longitud oeste, con una precipitacin promedio anual de 1400 mm distribuidos en 7 meses de mayo a noviembre. El suelo del rea experimental es cido; con bajo contenido de bases intercambiables, fsforo y materia orgnica, con una densidad aparente de 1.7 y con pobre drenaje superficial (Arosemena et al., 1997). Los anlisis de calidad de grano se realizaron en el Laboratorio de Calidad de grano en la Finca de El Bajo, del CIARG, ubicado en el Corregimiento de Ro Hato en la provincia de Cocl. 3.1.2. Material experimental Se evaluaron 48 lneas avanzadas de arroz (Oryza sativa), producto del programa de mejoramiento gentico (Anexo 1), 5 progenitores y 4 variedades comerciales utilizados como testigos de rendimiento y calidad de grano (Anexo 2). 3.1.3. Semillero, trasplante y manejo agronmico

La semilla del material experimental se increment en La Finca El Bajo, cosechando este material en el mes de diciembre del ao 2002. Se rompi la latencia de las semillas en un horno a 70 C por un periodo de 72 horas, en el laboratorio de semilla del CIARG. Las semillas fueron tratadas con una solucin de Carboxin+thiram a 10cc por galn de agua e hidratadas en agua fresca por 24 horas, luego fueron incubadas por 24 horas, colocndolas en un envase plstico a oscuridad (Figura 2A). El semillero se realiz en bandejas plsticas de 60 x 30 cm, con suelo de aluvin, permaneciendo por un periodo de 21 das, hasta alcanzar el tamao adecuado de trasplante (Figura 2B). A los 21 das despus de la siembra se inici el trasplante del material en una parcela de 20 X 50 metros, preparada bajo el sistema de fangueo, trasplantando una planta por sitio en forma manual (Figura 2C). La unidad experimental utilizada fue de 1 metro cuadrado para cada

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tratamiento, en cada metro se trasplantaron 25 plantas a una distancia de 0.25 X 0.25 cm. El manejo agronmico del ensayo fue uniforme para cada tratamiento (Figura 3). La fertilizacin fue fraccionada en 5 aplicaciones, la primera con fertilizante 12-24-12 de NPK a razn de 180 kg/ha, al momento de la nivelacin de la parcela. La segunda, tercera y cuarta a los 10, 20 y 30 das despus del trasplante con Urea al 46% a razn de 180 kg/ha . La quinta aplicacin entre los 55 y 60 das, cuando se observaron los primeros primordios florales, con la misma dosis de urea. Se realiz un nico control de malezas utilizando Bispiribac de sodio 40% a razn de 0.15 lts/ha, ms coadyuvante AD-3 a razn de 0.3 lts/ha; y otro control manual. Para el control de plagas se realizaron seis aplicaciones con Monocrotofos a razn de 0.35 lts/ha, dos controles en el primer mes de trasplante y cuatro controles entre el llenado y maduracin de los granos en la espiga. El manejo del agua, fue mantener la lmina de agua durante el crecimiento vegetativo y reproductivo de las plantas, eliminndola al momento de cosecha. No se realiz control de enfermedades, ya que no se presentaron (Figura 2D).

Figura 2: A. Tratamiento de semillas, B. Semillero en bandejas, C. Trasplante manual, una planta por sitio, D. Parcela con lmina de agua durante todo el ciclo de las plantas.

38

3.1.4. Evaluacin de las caractersticas morfolgicas y rendimiento.

Para la evaluacin de las caractersticas morfolgicas, en el estado de floracin se etiquetaron al azar 5 plantas por repeticin y tratamiento, y se procedi al registro de 28 descriptores (Anexo 3). Se utiliz escalas y cuadros de colores del libro de Descriptores Varietales (Muz et al., 1993). En el estado de maduracin, se registraron 10 descriptores en maduracin, sobre las mismas plantas (Anexo 3). Se registr la altura de planta (Figura 3B) y se cort el tallo principal con hojas y pancula, de las plantas etiquetadas (Figura 3A), para registrar las medidas de los descriptores cuantitativos con mayor facilidad (Figura 3C). El rendimiento se estim a travs de la cosecha manual de cada tratamiento en estado de maduracin, La cosecha fue secada al sol y limpiada manualmente al viento, se registr el peso en kilogramos y se tomo la humedad, de cada repeticin de los tratamientos (Figura 3D).

Figura 3: A. Etiquetado de plantas, B. Registro de altura de planta, C. Medidas en hoja bandera y pancula, D. Secado al sol de grano cosechado, para estimar rendimiento en kg/ha.

39

Para la calidad de grano se evalu el rendimiento de molinera de los granos, tomando una muestra de 250 gramos por tratamiento (Anexo 5). Se determin la humedad de la muestra, la cual luego fue descascarada, pulida (Figura 4A) y clasificada por zarandas N 12 y 10 para grano quebrado y N 15 para arrocillo. En el laboratorio de semilla del CIARG, se determin el porcentaje de grano entero, grano quebrado y arrocillo por diferencia de peso con respecto a la muestra original. Para estimar el porcentaje de grano tiza, se tom una muestra de 10 gramos del arrocillo y visualmente se clasific el grano tiza, luego se pes el grano tiza obtenido de la muestra y se estim el porcentaje con referencia al peso inicial. El centro blanco se evalu en una muestra de 2 gramos del grano entero, utilizando patrones y escala visual de clasificacin (Anexo 6), (Figura 4B).

(1)

(2)

Figura 4: A. Rendimiento de molinera: (1) muestra descascarada, (2) muestra de granos pulidos, B. Escala visual de clasificacin para centro blanco del grano.

La calidad culinaria de los tratamientos se evalu con la temperatura de gelatinizacin o prueba alcalina (Anexo 7). Para ello se colocaron 12 granos enteros al azar, en cajas petris cuadradas de tamao 5.5 x 2.3 cm. Agregando 10 cc de la solucin de KOH al 1.7% (Figura 5A). Luego dichas cajas fueron incubadas en un horno a 30 C por 23 horas. Pasadas las 23 horas se realiz el conteo, utilizando la escala del libro Evaluacin de calidad culinaria y molienda del arroz (CIAT, 1989) y se compar visualmente con los testigos (Figura 5B).

40

3 2

Figura 5: A. Prueba alcalina con 10 cc de la solucin de KOH al 1.7%, B. Grados de dispersin alcalina (1) temperatura de gelatinizacin baja, (2) temperatura de gelatinizacin alta, (3) temperatura de gelatinizacin intermedia.

3.1.5.

Anlisis estadsticos

El diseo experimental utilizado fue de bloques incompletos balanceados con 8 unidades de parcelas para cada sub-bloque (Cochran y Cox ,1980; Montgomery,1991), con 57 tratamientos, donde cada tratamiento correspondi a una lnea o seleccin de arroz, (Anexos 1 y 2). El rea de la parcela utilizada fue de 1000 m2, el rea para cada bloque fue de 9.7 m2 con distancias entre bloques de 0.50 m. y el rea para cada repeticin fue de 1 m2, con 25 plantas/repeticin. Teniendo as un total de 200 plantas por tratamiento. La muestra utilizada fue de 5 plantas por repeticin (Figura 6). El modelo matemtico formulado para el ensayo fue: Yijq = + Tli + ij + Tq + eijk Donde; Yijq = Observacin individual = Media comn Tli = Efecto de repeticiones ij = Efecto de bloques Tq = Efecto de la i-sima lnea

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9.75m 1m 1 8.50m 2 3 4 5 6 7 1m 8 9 10 11 12 13 14 1m 2 51 10 11 12 13 14 3 16 51 18 19 20 21 4 23 24 51 26 27 28 5 30 31 32 51 34 35 6 37 38 39 40 51 42 7 9 45 46 33 48 49 50 44 17 25 47 41 51 15 16 17 18 19 20 21 1m 22 23 24 25 26 27 28 1m 16 28 22 53 24 25 36 17 33 34 35 29 30 53

9.75 m 1m 18 38 12 40 41 53 36 19 53 44 45 46 3 48 50 11 7 1 2 8 4 21 6 39 13 53 47 31 20 43 53 23 14 42 9 29 30 31 32 33 34 35 1m 36 37 38 39 40 41 42 1m 30 40 41 42 36 55 38 31 43 44 55 46 47 48 50 55 5 6 7 1 2

9.75m 1m 33 14 8 9 55 11 15 32 17 18 19 20 21 55 34 27 55 22 23 37 25 35 4 28 45 10 24 12 43 44 45 46 47 48 49 1m 50 51 52 53 54 55 56 57 1m 50 3 4 5 6 7 1 45 11 57 13 14 8 9 46 57 20 21 15 16 17

9.75m 47 27 28 57 23 24 25 48 35 29 30 31 57 33 44 19 12 38 57 32 41 49 36 37 22 39 40 57

1m

1m

8.50m

9 15 52 17 18 19 20

10 28 22 23 52 25 26

11 34 35 29 30 31 32

12 52 41 42 36 37 38

14 46 47 52 49 43 44

50 40 4 5 24 52 1

13 3 16 48 6 7 52

23 34 35 29 54 31 32

24 38 39 40 41 54 36

25 49 54 44 45 42 47

50 4 43 6 7 1 2

27 54 9 10 15 12 13

28 8 20 54 30 16 17

26 19 5 21 11 46 54

37 46 47 48 49 56 44

50 6 7 1 2 12 4

39 8 9 19 56 43 13

40 17 18 10 20 21 56

41 26 56 28 22 23 24

42 35 29 56 11 3 15

38 56 27 30 31 32 33

57 8 21 27 33 39 45 43

56 15 27 32 37 49 5 42

52 22 33 37 48 3 14 10

54 29 39 49 22 13 16 26

53 36 45 5 3 16 25 34

51 43 2 10 14 26 36 18

55 1 8 15 18 29 34 2

Figura 6: Diseo de parcela experimental en la etapa de campo. 3.1.5.1. Anlisis de los datos cuantitativos y cualitativos Las observaciones realizadas durante la etapa de campo fueron introducidas en una base de datos, donde se coloc los tratamientos en filas y las variables en columnas. El anlisis de los datos cuantitativos se realiz por el programa computacional (SAS Institute Inc Cary, NC, USA 1999). Para lo cual se estim el mximo, mnimo, promedio, coeficiente de variacin y desviacin estndar. Los datos cualitativos se analizaron porcentajes, para describir morfolgicamente cada tratamiento. Los datos de rendimiento fueron analizados por el programa SAS, utilizando un anlisis de varianzas (ANOVA), mediante el procedimiento GLM y la prueba de rangos mltiples de Tukey. La evaluacin morfolgica, se analiz por medio del anlisis de correlacin de Pearson, anlisis de componentes principales (ACP) y el anlisis de conglomerados. Se utiliz la tcnica de agrupamiento gerrquico de Ward y se determin el ndice de distancia eucludiana. Para la evaluacin se utilizaron 10 caractersticas cuantitativas y 9 cualitativas. por frecuencia y

3.2. Etapa de laboratorio 3.2.1. Ubicacin La caracterizacin molecular de 12 lneas de arroz se realiz en el Laboratorio de Biologa Molecular de la Unidad de Biotecnologa y Recursos Fitogenticos, del Centro Agronmico Tropical de Investigacin y Enseanza (CATIE), ubicado en Turrrialba, provincia de Cartago, Costa Rica.

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3.2.2. Material experimental y mtodos

Para la caracterizacin molecular se utilizaron 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 testigos del programa de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP (Anexo 1 y 2). El material experimental fue sembrado en los invernaderos de la Unidad de Fitoproteccin del CATIE, en macetas plsticas negras, con tres semillas por maceta, y luego se rale a una planta, por un periodo de 45 das. Luego de ese periodo se cosech dos hojas, y se liofilizaron por 48 horas a una temperatura de 50 C. Se utiliz un liofilizador MODULYO Thermo Savant. 3.2.3. Extraccin de ADN La extraccin de ADN se realiz a partir de hojas liofilizadas utilizando el protocolo de extraccin CTAB minipreparaciones, (Murray y Thompson, 1980), modificado en el Laboratorio de Biologa Molecular (Phillips et al., 2003). Para realizar la extraccin de ADN se tom un fragmento de hoja de aproximadamente 1.5 cm de hojas liofilizadas de cada lnea de arroz (Anexo 8). 3.2.4. Determinacin de la concentracin de ADN

Se realiz a travs de electroforesis en gel de agarosa al 1.2% (Anexo 9) en una cmara de electroforesis marca KODAK, BioMax. HR2025. Para ello se prepar 220 ml de TBE, Buffer 10X, se agreg 2.4 grs. de agarosa, se calent por 4 minutos en microondas (Marca SAMSUNG modelo MG6920w), se coloc en la cubeta de electroforesis y se mezcl con dos gotas de bromuro de ethidio. Esta tcnica se basa en la cuantificacin de la fluorescencia producida por el bromuro de ethidio en el ADN, a travs de una cmara de luz ultravioleta, ULTRA? LUM, Electronic V.V. Transilluminator. Se utiliz 2l de ADN de cada lnea de arroz y 5l de bromofenol, los cuales se colocaron en el gel de agarosa, junto a un marcador testigo Fago Lambda/ Hind III (PROMEGA) y se dejaron migrar por espacio de 40 minutos a 70 watts. 3.2.5. Amplificacin de los fragmentos de ADN

En esta parte se utiliz la tcnica de Fragmentos Amplificados de Longitud Polimrfica (AFLP) (Vos et al., 1995), con reactivos de AFLP Starter Primer Kit (INVITROGEN). Para la reaccin de PCR se utiliz un Termiciclador Amplifier Biosistem, Perkin Elmer, Modelo: GENE-AMP PCR-System-9700. La electroforesis fue llevada a cabo con geles de polyacrilamida (Anexo 9)

43

con tincin de nitrato de plata (AgNO 3) para el revelado. La tcnica de AFLP utilizada consisti en los siguientes procedimientos: Digestin del ADN: Se utiliz 250ng/ADN por reaccin, 5 l de Buffer 5X , 2 l de las enzimas EcoR1/ MseI y 13 l de agua grado AFLP. La digestin se realiz por 60 minutos a 37C, y 15 minutos a 70C. Ligacin: A la solucin de digestin, se le adicion para cada muestra, 24 l de adaptador de ligacin ms 1 l de T4 DNA ligasa, la reaccin de ligacin se realiz por 180 minutos a 37C y 10 minutos a 60C. Luego de finalizada la reaccin de ligacin, se verific el producto digestin-ligacin en gel de agarosa al 1%, utilizando 10 l de la solucin. El producto de digestn-ligacin de cada muestra se diluy en proporcin de 1:10 para la etapa de preamplificacin. Preamplificacin: Consisti en utilizar 5 l de la solucin de digestin-ligacin 1:10, 4.8 l de Buffer 10X, 0.3 l de Taq polimerasa PROMEGA a 5U, lo que corresponde a 1.5 U/l por reaccin, 40 l del mix de preamplificacin. La reaccin de preamplificacin segundos a 94C, 1 minuto a 56C , 1 minuto a 72C . Los productos de esta reaccin fueron verificados en una gel de agarosa al 2%. El producto de preamplificacin se diluy en proporcin de 1:30. Amplificacin: Se prepar una mezcla de amplificacin con 2 l de agua ultra pura, 2 l de Buffer 10X, 1 l de cloruro de magnesio (MgCl2 ) a 25mMol, 0.4 l de DNTPs 0.15 mM, 0.5 de primer EcoRI (27,8 ng/l) y 9 l de primer MseI (6,6 ng/l), 1.5 l de ADN Taq polimerasa PROMEGA (5 U/l) y 5 l de la dilucin 1:30 del ADN preamplificado, para un volumen total de 20 l. El programa de PCR utilizado realiza un gradiente de 65 C hasta 56 C , bajando 1 C por ciclo (1 ciclo a 94 C 30 segundos), luego 65 C 30 segundos y 72 C 1 minuto, seguido de 33 ciclos 30 segundos a 94 C, 30 segundos a 56 C y 1 minuto de 72 C, y un ciclo final de extensin de 7 minutos a 72 C. Una vez finalizada la reaccin de PCR de amplificacin se le agreg 5 l de formaldehdo y se realiz la electroforesis en gel de polyacrilamida (Anexos 10, 11 y 12). Previo a la electroforesis en el gel de polyacrilamida se procede a desnaturalizar las muestras, colocndolas en el termociclador por 3 minutos a 94 C y 20 minutos a 72C. consisti de 20 ciclos cada uno de 30

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Las muestras colocadas en el gel de polyacrilamida se migran por dos horas a 50 watts y 3.000 voltios, la electroforesis se realiz en una cmara vertical Life Technologies, GIBCO BRL, Sequenci System modelo S2. Revelado del gel de polyacrilamida: El gel de polyacrilamida se coloc en cido actico al 10%, agitndolo por 20 minutos a 95rpm, en un agitador marca FISHER SCIENTIFIC, Orbital Shaker, modelo 361. Luego se hicieron 4 lavados ligeros con agua destilada y se coloc en una solucin de AgNO 3 al 1% ms 1.5 ml de formaldehdo en un litro de agua, agitndolos por 60 minutos a 85 rpm (Anexo 12). El revelado del gel se realiz con un lavado ligero en agua destilada enfriada a 4C y colocando el gel en una solucin de carbonato de sodio fra al 3.0% ms 400 l de tiosulfato de sodio al 1.5% y 3ml de formaldehdo. Se utilizaron dos litros de la solucin de carbonato de sodio distribuidas en dos recipientes y se coloc el vidrio el cual se agit suavemente hasta que se observ el marcador utilizado y algunas bandas dbiles, luego se pas al segundo recipiente para acentuar el color de las bandas. Para detener la reaccin, se le adicion el cido actico al 10% recuperado despus de la fijacin del gel (Anexo 12). 3.2.6. Anlisis estadstico

Para el anlisis estadstico de los datos morfolgicos, se hizo el registro de los datos. Utilizando el anlisis de SAS para las caractersticas cualitativas se estim el porcentaje de las escalas de calificacin. Para las caractersticas cuantitativas se estimaron los valores mnimos, mximos, promedios, desviacin estndar y coeficientes de variacin. Se realiz anlisis de varianza para la caracterstica de rendimiento al igual que comparacin de medias por la prueba da Tukey. Anlisis de componentes principales, anlisis de conglomerados, agrupamiento por la varianza mnima de Ward (1967) y generacin de un dendograma por el alogaritmo de Ward; (1967). Para el anlisis estadstico de los datos moleculares, primeramente se hizo el registro de los mismos, construccin de una matriz binaria, matriz de similitud con el ndice de Jaccard, generacin del dendograma WPGMA, anlisis de componentes principales e interpretacin de los resultados.

Para realizar la comparacin de los datos morfolgicos y moleculares, se utiliz la matriz de similitud de los datos moleculares, se gener una matriz de los datos morfolgicos de los doce genotipos analizados molecularmente por el coeficiente de Gower. Los datos morfolgicos de

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los doce genotipos se analizaron por componentes principales y se gener un dendograma por el alogaritmo de Ward. Se utiliz la estadstica de Mantel, para obtener la correlacin de las matrices de los doce genotipos. La descripcin gentica de las tres lneas avanzadas y sus progenitores, y la comparacin con los testigos comerciales se realiz utilizando las distancias genticas generadas por las matrices, los porcentajes de las caractersticas cualitativas, los valores generados para las caractersticas cuantitativas, las pruebas de molinera y calidad de grano.

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4. RESULTADOS 4.1. Caracterizacin morfolgica

Basados en los descriptores cualitativos y cuantitativos (Anexos 3 y 4) rendimiento en kg/ha y evaluaciones de calidad molinera y culinaria, se detalla la variabilidad que presentan las lneas en el estudio: 4.1.1. Distribucin de porcentajes por lnea de las caractersticas cualitativas

Las caractersticas cualitativas estudiadas se presentan en el anexo 13, con la distribucin de los porcentajes de acuerdo a la escala utilizada, para evaluar las lneas de arroz. Con respecto a la variabilidad en el hbito de crecimiento (X2), se determin que el 31.80% de las lneas de arroz presentan hbito de crecimiento erecto, el 38.59% hbito de crecimiento intermedio, 24.56% hbito de crecimiento abierto, y 3.50% de lneas comparten porcentajes con mayor tendencia a hbito de crecimiento erecto y 1.7%, con tendencia a habito de crecimiento intermedio (Figura 7).

Figura 7: Escala de graduacin para clasificar el hbito de crecimiento de la planta de arroz.

Para la capacidad de macollamiento (X3), la lnea 29 fue la que present la mayor capacidad de macollamiento con ms de 20 hijos por planta, la lnea 55 present buena capacidad de macollamiento con un promedio de 15 a 19 hijos por plantas. Con macollamiento intermedio, la lnea 39, con 11 a 14 hijos por planta. La lnea 4 present un pobre macollamiento, con 7 a 10

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por plantas. Dentro de las lneas se presenta variabilidad, ya que la mayora presentan diferentes porcentajes en las escalas de 1 a 5, entre 11 a 20 hijos por planta. La caracterstica de color predominante del pice que forman la lema y la palea (X4), 26 lneas presentaron color verde, 20 lneas, color rosado y 3 lneas el color prpura, en forma uniforme. Solo 8 lneas presentan heterogeneidad en los colores, presentando variaciones entre los colores verde y rosado. En relacin a la pubescencia predominante de las glumas (X5), 14 lneas no presentaron pubescencia, 29 lneas presentaron pubescencia hacia el pice de la lema y la palea; en 9 lneas la pubescencia de las glumas fue totalmente cubierta de vellos cortos y en 2 lneas con vellos largos, en forma uniforme. Solo 3 lneas mostraron heterogeneidad en la pubescencia de las glumas. Con respecto al color predominante del estigma (X6), 26 lneas presentaron color blanquecino en el estigma, 3 lneas color prpura claro, y 20 lneas color prpura uniforme en todas las plantas. Ocho lneas presentaron variabilidad respecto al color predominante del estigma. En relacin con la hoja bandera (X7), es importante mencionar que 36 lneas presentaron posicin semierecta para la hoja bandera, 18 lneas una posicin erecta de la hoja bandera y solo 2 lneas presentaron una hoja bandera intermedia (Figura 8).

Figura 8: Escala de graduacin para registrar la caracterstica, posicin de la hoja bandera. Para la posicin predominante del pice de la primera hoja por debajo de la hoja bandera (X10), 43 lneas presentaron una posicin semiabierta en la primera hoja. Con posiciones erectas fueron 9 lneas y 3 lneas con posicin abierta. Dos lneas mostraron desuniformidad en sus

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datos, para este descriptor, con mayor tendencias a la posicin semiabierta y menor tendencia a erecta. En la vellosidad predominante de la lmina de la hoja (X11), se observ alta variabilidad, 14 lneas presentaron una vellosidad escabrosa o spera a tacto. Seis lneas no presentaron l vellosidad, 5 lneas manifestaron vellosidad aterciopelada, 1 lnea present vellosidad aterciopelada en tres cuartas partes de la lmina y 1 lnea con vellosidad ligeramente pubescente, y 5 lneas mostraron vellosidades diferentes en sus lminas. Respecto al color de la lmina foliar (X14), 47 lneas presentaron el color verde (cdigos 37,38,39 y 43), seis lneas presentaron verde (cdigos 40 y 42). En 2 lneas se presentaron hojas con mrgenes oscuros (cdigo 3), de acuerdo a la tabla de colores (Muz et al., 1993). Para la caracterstica corrugacin y lado corrugado de la lmina foliar (X15 y X16), estuvo ausente en las lneas de arroz en estudio. De acuerdo al descriptor color predominante de la lgula (X17), 44 lneas mostraron color blanquecino,10 lneas presentaron color blanquecino con lneas prpuras, y 1 lnea present la coloracin prpura. Para el descriptor forma predominante de la lgula (X18), todas las lneas presentaron la lgula de forma hendida (Figura 9).

Figura 9: Escala de graduacin para clasificar la forma de la lgula en la hoja de arroz.

En relacin al color de las aurculas (X19), 55 lneas presentaron una coloracin crema, y en solo 1 lnea se observ color prpura. Se observ que la lnea Surinam 70, (Lnea 33), no presentaba aurculas (Figura 10).

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Figura 10: Esquema de la posicin de la aurcula y lgula en la planta de arroz.

Con respecto al color predominante de la vaina de la hoja (X20), el 80.7% de las lneas presentaron coloracin verde, el 14% coloracin verde con lneas prpuras y el 1.75% coloracin prpura. El 3.5% de las lneas presentaron coloracin verde y prpura en la vaina de la hoja. El 89.5% de las lneas mostraron coloracin verde para el descriptor color predominante del nudo (X21), el 8.77% de las lneas mostraron coloracin verde con lneas prpuras y el 1.75% mostr coloraciones entre verde y verde con lneas prpuras en sus nudos. Para el color predominante del entrenudo (X22), el 98.24% de las lneas presentaron una coloracin verde y el 1.75%, una coloracin prpura. Esta misma distribucin porcentual se observ en el color predominante del anillo subnodal en todas las lneas, para el color verde y el 1.75% con lneas prpuras en el anillo. Con respeto al color predominante de la base del tallo (X24), se observ que el 52.63% de las lneas presentaron una coloracin verde, el 21.05% coloracin verde con lneas prpuras, el 12.28% color prpura plido en la base, y el 3.5% color prpura. El 10.5% presentaron coloraciones entre verde y prpura plido.

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En el tamao de las aristas de los granos (X27), se determin que en 20 lneas la arista estaba ausente; que corresponde al tipo de aristas (X28) se considera aristado ausente, 10 lneas presentaban entre el 5 y 13% de los granos arista corta. Segn el tipo de aristado (X28) se considera arista corta y presente en menos del 50% de los granos. En 8 lneas el mayor porcentaje de sus granos presentaban arista corta, para el tipo de aristado es arista corta y presente en ms del 50% de los granos, y 19 lneas con aristas medianas, arista larga y presente en menos del 50% de los granos. Con respecto al color predominante del pice del grano apical de la pancula (X29), 26 lneas presentaron un color pajizo en ms del 90% de los granos; 11 lneas presentaron el color caf claro en ms del 80% de los pices de los granos, 4 lneas el color prpura en ms del 90% de los pices de los granos y l6 lneas presentaron variabilidad en el color del pice de los granos. Los resultados para el color predominante de las glumas frtiles del grano apical de la pancula (X30), el 71.9% de las lneas presentaron el color pajizo en todas las glumas frtiles, el 17.54% de las lneas presentaron el color pajizo en ms del 80% de las glumas y el 10.5% de las lneas mostraron el color pajizo en menos del 70% de las glumas. La densidad predominante de la pancula (X33), reflej una alta distribucin porcentual de las categoras en todas las lneas. Las lneas que mayor porcentaje alcanzaron en la categora de densidad intermedia fueron la lnea 50, con un 87.5% en las panculas, las lneas 42 y 47 con un 85% en sus panculas. Para la categora semicompacta la lnea que present el mayor porcentaje fue la lnea 35, con un 62.5% en las panculas y para la categora de panculas compactas el mayor porcentaje se observ en la lnea 8, con un 64.1% de las panculas (Figura 11).

Figura 11: Escala de graduacin para clasificar la caracterstica, densidad de la pancula.

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Con respecto a la exercin predominante de la pancula (X34), la lnea 41, present el mayor valor para la categora de panculas bien emergidas con un 92.5% de las panculas, en la categora de panculas moderadamente emergidas la lnea 54, con un 85% de las panculas, en panculas coincidentes en la lnea IDIAP 22 (Lnea 50), mostr en el 87.5% de sus panculas y la lnea Surinam 70 (Lnea 33) present panculas parcialmente incluidas en el 82.8% de sus panculas (Figura 12).

Figura 12: Escala de graduacin para clasificar la caracterstica, exercin de la pancula de la planta de arroz.

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Para la fertilidad predominante de la pancula (X36), las lneas 36, 37, 44, 42 y 52, presentaron porcentajes mayores al 90% de panculas muy frtiles. En panculas frtiles la lnea 15 present un 72% de las panculas. Para panculas parcialmente frtiles, la lnea 26 represent el porcentaje ms alto, 42.8% en las panculas. El 36.8% de las lneas presentaron un difcil desgranado de la pancula (X37), el 35.08% de las lneas presentaron desgranado moderadamente difcil de la pancula y el 28.07% de las lneas presentaron desgranado intermedio. Para el ngulo del pice que forman la lema y la p alea en la espiguilla (X38), 34 lneas mostraron que ms del 90% de sus espiguillas presentaban granos con ngulos de 11 a 40?, en 4 lneas se observ que ms del 90% de sus espiguillas presentaban ngulos entre 71 y 90. En las lneas restantes se present variabilidad entre los ngulos mencionados anteriormente (Figura 13).

Figura 13: Escala de graduacin para registrar la caracterstica, ngulo del pice que forman la lema y la plea en la espiguilla. 4.1.2. Anlisis de las caractersticas morfolgicas cuantitativas En cuanto a los das a floracin (Anexo 14) en la lnea 2, se observ el mayor promedio, siendo de 109.65 das, y el menor promedio se observ en la lnea 35, con 65.33 das. El mayor coeficiente de variacin lo present la lnea 51 con un 8.46%, y el menor coeficiente de variacin se present en la lnea 1, con 1.38%.

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Con respecto a la longitud de la lmina de la hoja bandera (Anexo 15), el mayor promedio fue de 41.28 cm en la lnea 41 y el menor promedio fue de 25.01cm, en la lnea 49. El mayor coeficiente de variacin fue de 25.08%, lo present la lnea 20 y el menor coeficiente de variacin fue en la lnea 56, de 11.61%. Para el ancho de la lmina de la hoja bandera (Anexo 16) el mayor promedio lo obtuvo la lnea 17 con 1.63 cm y el menor promedio la lnea 54 con 1.04 cm. Los valores del coeficiente de variacin mayor y menor, fueron de 40.66% dado para la lnea 49 y 8.94%, para la lnea 11. La longitud de la lmina foliar (Anexo 17) se present el mayor promedio en la lnea 33, con 57.13 cm y el menor promedio fue de 37.54 cm, en la lnea 49. Los coeficientes de variacin fueron dados por 19.11% como mayor valor en la lnea 45 y de 7.21% como menor valor en la lnea 33. Para el ancho de la lmina foliar (Anexo 18), el mayor promedio fue de 1.42 cm, observado en la lnea 1 y el menor promedio, por la lnea 52 con 0.81cm. Los coeficientes de variacin obtenidos, fueron de 26.09% como mayor valor en la lnea 36 y de 7.15% como menor valor por la lnea 9. En los das a madurez (Anexo 19), el mayor promedio lo present la lnea 2, con 141.78 das y la lnea 35, el menor promedio con 96.40 das. El mayor coeficiente de variacin lo present la lnea 24 con 6.69% y la lnea 1 present el menor coeficiente de variacin con un valor de 1.11%. En relacin a la altura de plantas (Anexo 20), la lnea que present la mayor altura promedio fue la lnea 28 con 124.28 cm y la de menor altura fue la lnea 54, con 88.45 cm. Con respecto a los valores del coeficiente de variacin, el mayor coeficiente lo present la lnea 44 con un valor del 9.23% y el menor valor lo present la lnea 50 con un 3.36%. Con respecto a la longitud de la semilla (Anexo 21), se observ que el mayor valor promedio fue de 1.05 mm para la lnea 19 y el menor promedio fue de 0.83 mm, para la lnea 34. El mayor coeficiente de variacin fue de 10.55% para la lnea 42 y el menor de 0.00% presentado por tres lneas, 13, 11 y 36 (Figura 14).

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Figura 14: Esquema de la semilla de arroz: a) vista frontal; b) vista lateral, para registrar las caractersticas de longitud y ancho de la semilla. El 87.7% de las lneas mostraron promedios de 0.30 mm en la anchura de la semilla (Anexo 22), y el menor promedio fue de 0.27 mm, en la lnea 34. El mayor y menor coeficiente de variacin, para este descriptor fue de 16.59% presentado en la lnea 34 y de 0.00% en el 33.33% de las lneas, respectivamente. La lnea que mostr el mayor promedio de longitud en la pancula (Anexo 23) fue la lnea 1, con 30.89 cm y la de menor promedio fue la lnea 54, con 23.84 cm. Los coeficientes de variacin se encontraron entre 11.37%, para el mayor valor dado por la lnea 44; y 4.64%, para el menor valor por la lnea 39. 4.1.2.1. Anlisis de varianza de los rendimientos

Se realiz el anlisis de varianza para la caracterstica de rendimiento en kg/ha, obtenidos en campo de cada lnea de arroz estudiada. Los resultados indican que existe diferencia altamente significativa (P ? 0.001) entre lneas. El anlisis demostr diferencia altamente significativo para el efecto de filas, mientras para el efecto de columnas fue no significativo. Estos resultados indican que el modelo estadstico utilizado para la investigacin fue el apropiado, debido al alto nmero de lneas de arroz (Tratamientos) en el estudio.

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Cuadro 1. Anlisis de varianza para la caracterstica de rendimiento en kg/ha de 48 lneas, 5 progenitores y 4 variedades testigos de arroz. Fuente de variacin GL Columna Fila Lneas Error Total 7 56 56 334 453 S.C. 32249444 545420977 685074863,1 7402298589 2142176104 C. Medio Valor de F. 4607063,4 9739660,3 12233480 2216463 2,08 4,39 5,52 Pr F 0,0453 0,001** 0,001**

4.1.2.1.1. Comparaciones de me dias

Debido a que se encontr diferencias estadsticas altamente significativas entre la caracterstica de rendimiento kg/ha de las lneas, se realiz las comparaciones de las medias de rendimiento mediante la prueba de Tukey (Cuadro 2). El mayor rendimiento en peso de campo corresponde a lnea 57,con un promedio de 10767.2 kg/ha, siguindole en su orden las lneas 50 y 51, las cuales no difieren entre ellas, con pesos de 10574.4 y 10517.5 kg/ha, respectivamente. Las tres mejores lneas de arroz se caracterizan por presentar rendimientos superiores a sus progenitores, como por ejemplo la lnea 57, uno de sus progenitores es la lnea 47 (P1048), la cual presenta un rendimiento inferior en ms de 1.500 kg/ha. El menor rendimiento en peso de campo corresponde a la lnea 2, con un promedio de 4897.7 kg/ha.

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Cuadro 2. Promedio de rendimiento en kg/ha de 57 lneas de arroz del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP, Panam. Lnea 57 50 51 552 542 43 471 45 42 531 26 49 44 18 522 25 46 10 41 24 17 481 16 27 39 6 35 28 9
1

Promedio (x) Prueba de Tukey 10767,2 a 10574,4 ab 10517,5 ab 9873,5 abc 9409,7 abcd 9369,9 abcd 9258,6 abcde 9229,3 abcdef 8921,1 abcdefg 8797 abcdefg 8416,8 abcdefgh 8398,5 abcdefgh 8273,1 abcdefgh 8152,4 abcdefghi 8080 abcdefghi 7963,1 abcdefghi 7915 abcdefghij 7845,9 abcdefghij 7818,4 abcdefghij 7733,4 abcdefghij 7663,7 bcdefghij 7635 bcdefghij 7539,7 bcdefghij 7448,1 cdefghij 7402 cdefghij 7274,7 cdefghij 7250,1 cdefghij 7146,8 cdefghij 7139,6 cdefghij
2

Lnea 8 4 34 40 20 56 312 23 7 331 22 37 38 30 15 5 1 21 19 29 14 11 321 12 13 3 36 2

Promedio (x) Prueba de Tukey 7135,2 cdefghij 7117 cdefghij 7097 cdefghij 7018,8 cdefghij 6943 cdefghij 6897,5 cdefghij 6877 cdefghij 6849,4 cdefghij 6848,3 cdefghij 6842,9 cdefghij 6839,5 cdefghij 6722,9 defghij 6677,1 defghij 6484,9 defghij 6461,8 defghij 6407,7 defghij 6287,3 efghij 6238,7 efghij 6182,1 dfghij 6174,6 dfghij 6148,2 ghij 6093,6 ghij 5916,7 ghij 5492,2 hij 5405,2 hij 5174,7 Ij 5105,3 Ij 4897,7 h

Progenitores, Testigos *Lneas con la misma letra no difieren significativamente al 0.05.

4.1.2.2.

Calidad molinera y temperatura de gelatinizacin.

De acuerdo a los resultados obtenidos en estas evaluaciones (Anexo 24), se indica que: La lnea 40 present el porcentaje ms alto en granos enteros en un 65.96% y el menor porcentaje de granos quebrados en un 4%. La lnea 20, present el menor porcentaje de granos

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enteros en un 33.4%. y el mayor porcentaje de granos quebrados lo obtuvo la lnea 15, en un 26.08%. Treinta y cinco lneas estudiadas presentaron 0.00% en la presencia de granos tiza, la lnea 19, present un 4% de grano tiza, siendo este el porcentaje mayor. El porcentaje de arrocillo ms alto lo obtuvo la lnea 2, con un 4.80% del peso, el porcentaje ms bajo fue de 0.52% en la lnea 12. El mayor rendimiento de molinera lo present la lnea 54, con un 71.28% y el menor rendimiento de molinera fue de 58.8% en la lnea 1. La evaluacin de centro blanco del grano, indica que 5 lneas presentaron granos traslcidos, ellas son: lnea 12, lnea 40, lnea 36, lnea 52 y lnea 55. Tres lneas presentaron el mximo valor en la escala que abarca la totalidad del grano, ellas fueron lnea 1, lnea 2 y lnea 20. La temperatura de gelatinizacin fue estimada indirectamente mediante el grado de dispersin (Anexo 25). Los resultados obtenidos muestran que la temperatura de gelatinizacin es baja, con promedio de 7 (Anexo 7), en las lneas 55, 50, 47, 43,42 y 13. Los valores intermedios entre 4 y 5, se presentan en las lneas 2, 5, 22, 23,24, 25, 26, 28, 36, 37, 39, 45 y 46. Los promedios menores a 3.5, que muestran mayor tendencia a tener temperaturas de gelatinizacin alta, se presentan en las lneas 51, 33, 29, 17, 18, 19 y 1. 4.2. Estructuras de los agrupamientos

Para realizar una estructura de agrupamiento, se consider 20 variables, 11 variables cuantitativas y 9 variables de escala ordinal. stos son consideradas como caractersticas de seleccin, por la asociacin con la capacidad de rendimiento en los programas de mejoramiento. Con el propsito de disminuir la dimensionalidad de los datos, y obtener una mejor respuesta de la variabilidad del conjunto de variables de esta evaluacin, se analiz los datos considerados por el anlisis de componentes principales (ACP), a travs del anlisis con el software SAS. Los valores y vectores propios, proporcin absoluta y acumulada que explican el anlisis de los componentes principales (Cuadro 3), indica que cinco componentes obtenidos explican el 72.34 % de la variacin total.

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Cuadro 3. Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y la acumulada que explican el anlisis de los componentes principales .
Componentes Principales Primero Segundo Tercero Cuarto Quinto Valor propio P. Absoluta P.Acumulada

6.52588407 2.53303891 2.36755755 2.21781181 1.54749085

0.3108 0.1206 0.1127 0.1056 0.0737

0.3108 0.4314 0.5441 0.6497 0.7234

Se observa que la variabilidad que explica cada componente principal es diferente y decrece. El primer componente principal explica el 31.08 % de la variabilidad total, el segundo explica el 12.06 %, el tercera y cuarto explican el 11.27 y 10.56 %, respectivamente y el quinto componente, explica el 7.37%. El primer componente estuvo caracterizado fundamentalmente por las caractersticas, das a floracin, ancho de la lmina foliar, das a madurez, altura de planta y la fertilidad de la pancula. El segundo componente, lo caracteriz la longitud de la lmina de la hoja bandera, longitud de la semilla, ancho de la semilla y el ngulo del pice del grano de la pancula. El rendimiento, la densidad de la pancula, la longitud y el ancho de la lmina foliar, caracterizan el tercer componente. El cuarto componente principal est explicado por el hbito de crecimiento, tamao de la arista, tipo de aristado y desgranado de la pancula. El quinto componente est caracterizado por cinco variables, que contribuyen a explicar la variabilidad observada en un 10.56% (Cuadro 4).

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Cuadro 4. Contribucin de las variables en los componentes principales (C1, C2, C3, C4, y C5).
Caractersticas/Componentes principales Das a floracin Hbito de crecimiento Capacidad de macollamiento Long. de la lmina de la hoja bandera Ancho de la lmina de la hoja bandera Long. de la lmina foliar Ancho de la lmina foliar Das a madurez Altura de la planta Tamao de las aristas Tipo de aristado de las semillas Longitud de la semilla Ancho de la semilla Densidad de la pancula Exercin de la pancula Longitud de la pancula Fertilidad de la pancula Desgranado de la pancula. ngulo del pice del grano de la pancula Rendimiento en kg/ha. Indice de rea foliar.

C1
0.3639

C2

C3

C4
0.3236

C5

0.3862 -.4423 -.3718 0.3002 0.3359 0.3241 0.3236 0.3410 -.3566 -.3248 0.3918

0.3139 -.3833 0.4971 0.3899 -.3083

Se realiz el anlisis de conglomerados para hacer la clasificacin por grupos de las lneas y explicar mejor la variabilidad presente en las lneas en estudio. El anlisis realizado por la varianza mnima de Ward (1967), que incluy las variables evaluadas en el anlisis de ACP, sirvi de referencia para la formacin de los grupos en el anlisis de conglomerados. El anlisis de varianza mnima de Ward, indica que las lneas en estudio forman cuatro grupos. El grupo 1 formado por 13 lneas que representa el 22.81%. El grupo 2 es el que agrupa el 31.58%, representado por 18 lneas. El grupo 3, agrupa el 19.30%, que corresponde a 11 lneas y el grupo 4 con 15 lneas, y porcentaje del 26.32% (Cuadro 5). Cuadro 5. Distribucin de la frecuencia y porcentajes de los grupos de acuerdo al anlisis de varianza mnima de Ward (1967).

Grupo 1 2 3 4

Frecuencia 13 lneas 18 lneas 11 lneas 15 lneas

Porcentaje 22.81 % 31.58 % 19.30 % 26.32 %

60

Los datos morfolgicos para las 57 lneas de arroz fueron analizadas por la distancia euclidiana del anlisis de SAS, que dio como resultado un ndice de correlacin cofrentico de 0.40, ndice adecuado para el nmero de variables evaluadas en las lneas para datos morfolgicos. Segn la matriz generada (Anexo 26), se observa que las distancias cercanas a cero, representan similaridad, la menor distancia entre las lneas la present la lnea 14 y 15, con un valor de 0.27, lneas procedentes del mismo cruce, acervo gentico CNAIRAT-P. La mayor distancia se obtuvo por las lneas 1 y 54, con valor de 3.94. El anlisis de conglomerados origin el dendograma (Figura 15), de clasificacin de las lneas evaluadas. De acuerdo al dendograma se forman dos grupos genticos, stos a su vez se dividen en otros subgrupos para mejor comprensin se detalla a continuacin: Grupo A representado por el grupo A1 y A2. El grupo A1, constituido por 4 lneas, como lnea , 33 (progenitor), lnea 34, 44, 56 y en A2, con las lneas 35, 37, 38, 36, 39 procedentes del cruce FLAR 135, 144,145,138 y 146, lneas 52, 54, 55 utilizadas como testigo, lnea 53 y 33 progenitores y las lneas avanzadas lnea 45 y 49. Grupo B, que contiene a los grupos B1, B2 y B3, los cuales se dividen en Grupo B1, se pueden observar 18 lneas, las cuales se subdividen en dos subgrupos, el subgrupo B1.1, se constituye por 10 lneas, como las lneas 1, 2, 7, 4, 5, 3, que proceden del cruce CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT y las lneas 28, 27, 29, 30, correspondientes al cruce LLANO 5/ ANAYANSI L-2. El segundo subgrupo B1.2, formado por las lneas 8, 10, 9 correspondientes al cruce CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT y las lneas 22, 23, 26, 24, 25 que derivan del cruce LLANO 5/ANAYANSI L2. En el grupo B2 representado por 11 lneas, las cuales se subdividen en dos subgrupos, el subgrupo B2.1 constituido por 4 lneas, entre ellas, lnea 6 procedente del cruce CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT, las lneas 40 y 41 provenientes del cruce Chi 3-30-171 y Chi 3-30-172 y la lnea 31 que corresponded a un testigo. El segundo subgrupo B2.2, representado por 7 lneas, como lneas 42, 43, 46 que derivan del cruce Chi 3-30-200, 201 y 157, las lneas 50, 51, 57 y la lnea 47, es progenitor de las lneas 50 y 57.

61

62

63

48

El grupo B3 formado por 13 lneas, las cuales se subdividen en dos subgrupos. El subgrupo B3.1, constituido por las lneas 11y 12 procedentes del cruce DO2F2), las lneas 13, 14, 15 que derivan del cruce D39F2, las lneas 19 y 21 correspondientes al cruce VIOAL3189/ANABEL, lnea 16 del cruce D64F2) y los progenitores, lnea 32 y 48. El subgrupo B3.2, formado por las lneas,17, 18, 20 que derivan del cruce VIOAL3189/ ANABEL. Se observa claramente la formacin de cuatro grupos diferentes, el grupo A, constituidos principalmente por las lneas procedentes de los cruces FLAR, las variedades comerciales, utilizadas como testigos y dos progenitores, Surinam 70 y Anabel. El patrn de agrupamiento tiende a mantener juntas a todas las lneas procedentes de la seleccin recurrente con excepcin de la lnea 6 y a todas las lneas procedentes del cruce LLANO5/ANAYANSI L2. De acuerdo a la agrupacin del subgrupo B2, todas las lneas denominadas Chi pertenecen a este grupo, ms un progenitor. El grupo B3 agrupa las lneas procedentes del cruce DO2F2, D39F2, y VIOAL3189/ANABEL, y dos progenitores, Anayansi L2 y Cica 8. Cabe resaltar que las lneas que derivan del progenitor ANAYANSI L2 pertenecen al grupo B1 y el progenitor ANAYANSI L2, pertenece al grupo B3. De la misma manera las lneas procedentes del progenitor ANABEL pertenecen al grupo B3 y el progenitor ANABEL al grupo A1. Se podra decir que, las lneas procedentes de los cruces en mencin podran tener mayor asociacin con las caractersticas de los otros progenitores, pero no se presentan en el estudio.

4.3. Caracterizacin molecular con marcadores AFLPs Para la caracterizacin molecular, se inici con la extraccin de ADN, digestin/ligacin, preamplificacin y amplificacin de las 5 lneas avanzadas del programa de mejoramiento gentico, 5 progenitores y 2 variedades comerciales (Anexo 1 y 2), para las cuales, los resultados son los siguientes.

49

4.3.1. Resultados de aislamientos y concentracin de ADN

Para realizar el aislamiento de ADN, se utiliz el mtodo de minipreparaciones-CTAB, con el cual se obtuvo suficiente ADN, a partir de un fragmento de 1.5 cm de hojas liofilizadas. Se realiz la extraccin por duplicado de las 12 lneas de arroz. Se utilizaron las muestras que presentaron mayor concentracin de ADN, comparadas con el marcador de peso molecular conocido (100 g/ml). 4.3.1.1. Descripcin del polimorfismo revelado En el cuadro 6 se presentan las combinaciones enzima-primers utilizadas en la amplificacin, dando como resultados, un promedio de 36 bandas amplificadas por muestra. Del total 177 bandas fueron polimrficas. El promedio obtenido de bandas polimrficas por combinacin fue de 22.12. La combinacin enzima-primer EAAG/MCTA, amplificadas en un rango de 135-675 pares de bases, produjo el mayor nmero de bandas polimrficas, y el menor nmero de bandas se observ en la combinacin enzima-primer EACC/MCAA, en un rango de 170-840 pares de bases, con valores de 31 y 15, respectivamente. El porcentaje de polimorfismo observado, oscil entre 39.47% para la combinacin EACC/MCAA y 86.2% para la combinacin EACT/MCAC. El porcentaje promedio de polimorfismo en las 8 combinaciones enzima-primers es de 61.94%. El rango total de amplificacin de las bandas obtenidas fue entre 121 y 840 pares de bases. En la figura 16 se muestra un ejemplo de amplificacin para las combinaciones enzimaprimer EACT/MCAC, EACG/MCAC, EACC/MCAA, EACA/MCAT poliacrilamida. reveladas en gel de

50

Cuadro 6. Combinaciones enzima-primer utilizadas, promedio de bandas amplificadas, nmero de bandas polimrficas, porcentaje de polimorfismo y rango de amplificacin.

Combinaciones enzima-primer

Promedio de bandas Nmero de bandas amplificadas por muestra. polimrficas

Porcentaje de polimorfismo

Rango de amplificacin en pares de base

EACT/MCAC EACG/MCAC EACC/MCAA EACA/MCAT EAAC/MCAA EAAG/MCTA EACA/MCTC EACC/MCAG TOTAL PROMEDIO

29 36 38 43 36 45 30 34 36.38

25 27 15 19 18 31 21 21 177 22.12

86.20 75.00 39.47 44.19 50.00 68.89 70.00 61.76 61.94

145-840 142-675 170-675 147-675 125-256 135-675 121-700 129-800

Figura 16. Amplificacin de las combinaciones enzima-primer EACT/MCAC, EACG/MCAC, EACC/MCAA, EACA/MCAT, en gel de polyacrilamida al 6% con tincin de Nitrato de Plata (AgNO 3).

51

4.3.2. Matriz de distancia y dendogramas

De acuerdo a los resultados obtenidos en la matriz de similaridad, las lneas en estudio ms similares son Anayansi L2 y Surinam 70, ya que sus distancias genticas son de 0.838. Las lneas menos similares, por obtener una distancia gentica de 0.165, fueron IDIAP L7 y la lnea 19 (Cuadro 7).

Cuadro 7. Matriz de similaridad de 5 lneas avanzadas de mejoramiento de arroz, 5 progenitores y 2 variedades testigos, generada a partir de datos moleculares por el ndice de Jaccard.

(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12)

Chi 3210 Cica 8 Surinam 70 Anayansi L2 Lnea 25 IDIAP 22 Chi 4523 P-1048 Anabel Lnea 19 VIORH 38 IDIAP L7 -

(1) 1.000 0.390 0.649 0.676 0.586 0.563 0.336 0.565 0.476 0.344 0.342 0.270 (1)

(2) 1.000 0.358 0.390 0.354 0.336 0.208 0.395 0.301 0.240 0.269 0.208 (2)

(3) 1.000 0.838 0.632 0.515 0.348 0.600 0.470 0.356 0.323 0.287 (3)

(4)

(5)

(6)

(7)

(8)

(9)

(10)

(11)

(12)

1.000 0.647 0.522 0.370 0.582 0.489 0.378 0.336 0.281 (4)

1.000 0.438 0.323 0.573 0.450 0.352 0.362 0.268 (5)

1.000 0.288 0.425 0.421 0.297 0.343 0.310 (6)

1.000 0.350 0.336 0.316 0.200 0.217 (7)

1.000 0.437 0.393 0.369 0.282 (8)

1.000 0.309 1.000 0.371 0.211 1.000 0.297 0.165 0.342 1.000 (9) (10) (11) (12)

En el dendograma WPGMA generado por el ndice de Jaccard, (Figura 17), se observa que las lneas estudiadas conforman dos grupos, uno de ellos (grupo A) compuesto por la lnea 19 (10) y Chi 4523 (7), con un coeficiente de Jaccard de 0.31, y el segundo grupo (grupo B) formado por las restantes lneas d estudio. En este segundo grupo se presenta la formacin de un e subgrupo (B.1), conformado por 5 lneas, lnea 25 (5), Anayansi L2 (4), Surinam 70 (3), Chi 3210 (1) y P1048 (8). Los datos moleculares tambin fueron analizados, por los ndices de diversidad de Nei y Li (1979) y Dice (datos no presentados), dando resultados consistentes, ya que conserv la misma estructura de agrupamiento en los dendogramas, obtenidos por el ndice de Jaccard, lo cual demuestra que no hubo un efecto del ndice utilizado. El ndice cofrentico obtenido en los anlisis fue de 0.95, explicando que el agrupamiento es consistente.

52

WPGMA
Lnea 19 Chi 4523 Cica 8 IDIAP- L7 VIORH 38 Anabel IDIAP 22 P-1048 Lnea 25 Anayansi N22 Surinam 70 Chi 3210

0.04

0.2

0.36

0.52

0.68

0.84

Jaccard's Coefficient
Figura 17. WPGMA dendograma del agrupamiento de 5 lneas avanzadas de arroz, 5 progenitores y 2 variedades testigos del proyecto de mejoramiento gentico de arroz de Panam, segn la matriz de distancia y similitud de Jaccard. 4.3.3. Componentes principales Este anlisis explica la variabilidad, en los dos primeros componentes. Es el primer eje o componente que explica el 23.12% de la variabilidad de los datos el segundo componente explica el 12.59%, el 72.74 % de la variabilidad total se explica por seis componentes. Se alcanza el 100% de esta variabilidad en el eje o componente 11, segn este anlisis (Cuadro 8).

53

Cuadro 8. Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y acumulada que explican el anlisis de los componentes principales, de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos, segn datos moleculares. Componentes Principales Componente 1 Componente 2 Componente 3 Componente 4 Componente 5 Componente 6 Valor propio 8.31 4.52 3.91 3.45 2.98 2.95 P. Absoluta 23.12 12.59 10.88 9.62 8.30 8.22 P.Acumulada 23.12 35.71 46.59 59.21 64.51 72.74

Mediante el Anlisis de Componentes Principales, se gener una proyeccin de la variabilidad encontrada con los 177 marcadores moleculares, (Figura 18).
PCA case scores
Lnea 19 Chi 4523
1.3 1.0 0.8 0.5

P-1048
0.3 Axis 2 -1.3 -1.0 -0.8 -0.5 -0.3 -0.3

Lnea 25
0.3 0.5 0.8 1.0 1.3

Anayansi L2

Anabel Cica 8

Surinam 70 Chi 3210

-0.5 -0.8

IDIAP 22

IDIAP L7 VIORH 38

-1.0 -1.3 Axis 1

Figura 18. Proyeccin de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos de arroz del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP, por el anlisis de componentes principales. La distribucin grfica de los grupos en funcin de las variables utilizadas, el componente 1, indica la separacin de dos grupos principales, el primero compuesto de tres progenitores y dos lneas. Esta agrupacin puede estar fundamentada en que la lnea 25 y Chi 4523, tiene como

54

uno de sus progenitores a Anayansi L2 . La lnea Chi 4523, tiene como progenitor a Surinam 70, el cual pertenece a este grupo. El segundo grupo mantiene juntas a dos lneas hermanas, IDIAP L7 y VIORH 38, a dos progenitores y una lnea promisoria que no se asocia con los progenitores de la distribucin. El tercer grupo, separa del resto a Chi 4523 y Lnea 19, es importante sealar que estas dos lneas comparten un mismo progenitor ANABEL. De acuerdo al componente 2, se explica claramente la formacin de dos grupos, el primero dado por las lneas Chi 4523 y lnea 19, el segundo grupo por las lneas hermanas IDIAP L7 y VIORH, dos progenitores Cica 8 y ANABEL, as como la lnea IDIAP 22. El resto de lneas, las cuales son tres progenitores, Surinam 70, Anayansi L2 y P-1048, y las lneas 25 y Chi 3210, no forman un grupo distribuido en el componente dos. 4.4. Comparacin de la variabilidad detectada a partir de caractersticas morfolgicas y marcadores moleculares

La comparacin de la variabilidad detectada por caractersticas morfolgicas y marcadores moleculares de las 12 lneas de arroz, se realiz a partir de las 12 lneas de arroz utilizadas en la etapa de laboratorio (Anexo 1 y 2), evaluadas por las 21 variables utilizadas en el anlisis de grupos del acpite 4.2. Para realizar esta comparacin, primeramente se analizaron las 12 lneas de arroz, a travs de un anlisis de componentes principales, distribucin de lneas a travs del anlisis de conglomerados, generacin de un dendograma y anlisis de varianza mnima de Ward (1967). Luego se realiz una matriz de similaridad de 12 lneas de arroz, generada a partir de datos morfolgicos por el coeficiente de Gower. Segn la proporcin acumulada en el anlisis de componentes principales, para estas 12 lneas, indica que cinco componentes principales explican el 84.72 % de la variabilidad total (Cuadro 9). Donde el primer componente explica el 31.06% de la variabilidad. El segundo componente explica el 20.64%, el 13.37% lo explica el tercer componente, el 11.27% el cuarto y el quinto componente explica el 8.38%. la contribucin de las variables a cada componente se presenta en el anexo 27.

55

Cuadro 9. Matriz de valores y vectores propios, proporcin absoluta y acumulada que explican el anlisis de los componentes principales, de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos, segn datos morfolgicos.

Componentes Principales Componente 1 Componente 2 Componente 3 Componente 4 Componente 5

Valor propio 6.52262453 4.33385650 2.80847100 2.36608560 1.76060759

P. Absoluta 0.3106 0.2064 0.1337 0.1127 0.0838

P.Acumulada 0.3106 0.5170 0.6507 0.7634 0.8472

Segn el anlisis de varianza mnima de Ward (Cuadro 10), las 12 lneas se agrupan en tres grupos, con porcentajes de 58.33, 25.0 y 16.67 %, para los grupos 1, 2 y 3 respectivamente, la descripcin de los grupos (Anexo 28), se observa que el grupo 1 est compuesto por las lneas Anayansi L 2, Chi 4523, Cica 8, VIORH 22, P-1048, Chi 3210, Surinam 70. El grupo 2 formado por la lneas VIORH 38, Anabel, IDIAP L 7 y el grupo 3, por VIOAL3189/ANABEL-13-1-2-1-1 (lnea 19), LLANO 5/ ANAYANSI L2-28-1-1-6-3. (lnea 25).

Cuadro 10. Distribucin de la frecuencia y porcentajes de los grupos de acuerdo al anlisis de varianza mnima de Ward (1967), para 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos de arroz.

Grupo

Frecuencia 7 lneas 3 lneas 2 lneas

Porcentaje 58.33 % 25.00 % 16.67 %

1 2 3

Para la comparacin de los datos morfolgicos y moleculares, se refiere a la matriz

de

similaridad, generada a partir de datos moleculares por el ndice de Jaccard (Cuadro 7) y la matriz de similaridad, generada a partir de datos morfolgicos por el coeficiente de Gower (Cuadro 11).

56

Cuadro 11. Matriz de similaridad de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos de arroz, generada a partir de datos morfolgicos por el coeficiente de Gower
(1) 1.000 0.819 0.562 0.788 0.668 0.799 0.842 0.829 0.716 0.722 0.714 0.636 (1) (2) 1.000 0.590 0.837 0.684 0.758 0.808 0.756 0.755 0.730 0.758 0.681 (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12)

(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) (10) (11) (12)

Chi 3210 Cica 8 Surinam 70 Anayansi L2 Lnea 25 IDIAP 22 Chi 4523 P-1048 Anabel Lnea 19 VIORH 38 IDIAP L7 -

1.000 0.598 0.415 0.473 0.556 0.484 0.454 0.514 0.554 0.503 (3)

1.000 0.712 0.798 0.833 0.706 0.723 0.778 0.751 0.713 (4)

1.000 0.773 0.692 0.695 0.671 0.774 0.603 0.535 (5)

1.000 0.829 0.779 0.713 0.748 0.631 0.588 (6)

1.000 0.789 0.744 0.768 0.767 0.668 (7)

1.000 0.783 0.702 0.666 0.549 (8)

1.000 0.626 1.000 0.781 0.645 1.000 0.682 0.554 0,807 1.000 (9) (10) (11) (12)

De acuerdo a la matriz de Gower, las lneas ms similares son Chi 3210 (1) y Chi 4523 (7), donde sus distancias genticas son de 0.842. Las lneas menos similares son Lnea 25 (5) y Surinam 70 (3), resultados que no son de concordancia con la matriz de Jaccard. Para comparar las matrices se utiliz la prueba de Mantel y se obtuvo el coeficiente de correlacin de Pearson. De acuerdo a esta prueba no existe correlacin significativa al 5%, pero si al 10%, y con valores de Z iguales a 35.46 y 20 permutaciones. Es decir, hay compatibilidad al 90%, con cierto grado de correspondencia. El dendograma (Figura 19), realizado con los datos morfolgicos de las doce lneas caracterizados molecularmente, presenta dos grupos (A y B), stos a su vez forman tres subgrupos para las lneas (A1, A2 y B1). Cabe mencionar que el progenitor Surinam 70 se separa de las lneas del grupo A2 al que corresponde. Al comparar el dendograma WPGMA (Figura 17) de los datos moleculares para las mismas 12 lneas, se observa que el dendograma WPGMA presenta un agrupamiento diferente, ya que forma dos grupos y un subgrupo, y para el caso de Surinam 70, no se separa como se aprecia en el dendograma de datos morfolgicos. Se puede indicar que la posibilidad de concordancia en los dos dendogramas se presenta en posicin de las lneas 11, 9 y 12, que en caso de la figura 17, pertenecen al grupo B donde estn ubicados muy cercanos y en la figura 19 conforman el grupo B1. La conformacin de los dos dendogramas es diferentes, por tanto es difcil visualizar a las lneas.

57

A
A2 B1

A1

10

11

12

Figura 19. Dendograma de agrupamiento de 5 lneas avanzadas, 5 progenitores y 2 variedades testigos del proyecto de mejoramiento gentico de arroz del IDIAP por caractersticas morfolgicas.

4.5. Descripcin morfolgica y molecular de lneas promisorias y progenitores

Para la descripcin morfolgica entre lneas promisorias (Chi 3210, Chi 4523 e IDIAP 22) y progenitores (Anabel, Surinam 70, Anayansi L2, P-1048 y Cica 8) se consideraron 28 caractersticas cualitativas y 10 cuantitativas, rendimiento en kg/ha y 4 evaluaciones de calidad de grano, comparndolas con los testigos (Anexos 29 y 30). Se utilizarn las distancias genticas generadas por los datos morfolgicos y moleculares, presentadas en el cuadro 12.

58

Del total de las caractersticas cualitativas de la lnea promisoria Chi 3210, al compararlas con el total de caractersticas de cada uno de sus progenitores, presenta caractersticas asociadas con el progenitor Cica 8 en un 75%, con el progenitor Anayansi L2 un 50% y con Surinam 70 el 35.71%. Existe un 7.14% de la variabilidad que se separa de las caractersticas evaluadas en cada progenitor, ellas fueron color del estigma y color de la base del tallo. De igual manera al comparar el total de caractersticas cuantitativas, tanto de la lnea y de los progenitores, se asocia el 40% con el progenitor Anayansi L2, y porcentajes iguales del 30%, con Surinam 70 y Cica 8. El 20% de las caractersticas no presentan asociacin. La lnea promisoria Chi 3210, present mayor rendimiento en kg/ha respecto a sus progenitores, de igual manera a los rendimientos de los testigos VIORH 38 e IDIAP L7. En rendimiento de molinera y porcentaje de granos enteros, los valores son ms similares al progenitor Cica 8. En relacin al centro blanco del grano, la lnea Chi 3210 present igual calificacin que el progenitor Anayansi L2, inferior al testigo Oryzica 1, pero dentro de los rangos aceptables de calidad. La temperatura de gelatinizacin fue de alta a intermedia, similar con el progenitor Surinam 70, iguales a las temperaturas de los testigos comerciales Idiap L7 y VIORH 38, pero diferente al testigo de calidad culinaria Oryzica1. En relacin al coeficiente de Gower (Cuadro 12), para datos morfolgicos. La mayor similaridad de la lnea promisoria Chi 3210, es con respecto al progenitor Cica 8, con coeficiente de 0.819 y la menor similaridad con el progenitor Surinam 70, con 0.562. De acuerdo a los datos moleculares obtenidos para la lnea promisoria Chi 3210, y los progenitores (Cuadro 12), se presenta que la distancia gentica mas cercana es con respecto al progenitor Anayansi L2, con ndice de similaridad de 0.676, y la ms lejana de 0.390 con respecto al progenitor Cica 8. La matriz del cuadro 12, muestra a las dos matrices sobrepuestas utilizadas para el anlisis de correlacin, los datos colocados arriba de la diagonal corresponden a las distancias genticas a partir de los datos morfolgicos con referencia a la fila superior, para su interpretacin. Bajo la diagonal se ubican las distancias genticas a partir de losmarcadores moleculares, con referencia a la fila inferior.

59

Cuadro 12. Matriz generada de los datos morfolgicos y datos moleculares sobrepuestas.

Morfologico 1 Chi 3210 2 Cica 8 3 Surinam 70 4 Anayansi L2 5 Lnea 25 6 IDIAP 22 7 Chi 4523 8 P-1048 9 Anabel 10 Lnea 19 11 VIORH 38 12 IDIAP-L7

1 1 0,819 0,562 0,788 0,668 0,799 0,842 0,829 0,716 0,722 0,714 0,636 12

2 0,342 1 0,590 0,837 0,758 0,808 0,756 0,755 0,730 0,758 0,681 11

3 0,165 0,211 1 0,598 0,473 0,556 0,484 0,454 0,514 0,554 0,503 10

4 0,297 0,371 0,309 1 0,712 0,798 0,833 0,706 0,723 0,778 0,751 0,713 9

5 0,282 0,369 0,393 0,437 1 0,773 0,692 0,695 0,671 0,774 0,603 0,535 8

6 0,170 0,200 0,316 0,336 0,350 1 0,829 0,779 0,713 0,748 0,631 0,588 7

7 0,310 0,343 0,297 0,421 0,425 0,288 1 0,789 0,744 0,768 0,767 0,668 6

8 0,268 0,362 0,352 0,450 0,573 0,323 0,438 1 0,783 0,702 0,666 0,549 5

9 0,281 0,336 0,378 0,489 0,582 0,370 0,522 0,647 1 0,626 0,781 0,682 4

10 0,287 0,323 0,356 0,470 0,600 0,348 0,515 0,632 0,838 1 0,645 0,554 3

11 0,208 0,269 0,240 0,301 0,395 0,208 0,336 0,354 0,390 0,358 1 0,807 2

12 0,270 0,342 0,344 0,476 0,565 0,336 0,563 0,586 IDIAP L7 VIORH 38 Lnea 19 Anabel P-1048 Chi 4523 IDIAP 22 Lnea 25 12 11 10 9 8 7 6 5

0,684 0,415

0,676 Anayansi L2 4 0,649 Surinam 70 3 0,390 1 1 Cica 8 Chi 3210 Molecular 2 1

La lnea promisoria Chi 4523, presenta un 57% de las caractersticas cualitativas totales asociadas con el progenitor Anabel, un 54% con P-1048 y el 29% de las caractersticas presenta caractersticas diferentes con los progenitores. Las caractersticas que difieren respecto a los progenitores son: color del estigma, posicin de la hoja bandera, vellosidad de la lmina foliar, color de la lmina foliar, tamao de las aristas, tipo de aristado, color de las glumas y desgranado de la pancula. El 30% de las caractersticas cuantitativas, se asocian al progenitor P-1048, y el 10% al progenitor Anabel. Un 20% de las caractersticas de la lnea promisoria comparten entre ambos progenitores, un 30% no presenta asociacin. Respecto al rendimiento en kg/ha, Chi 4523 present mayor rendimiento que ambos progenitores y los testigos (Cuadro 2). En el rendimiento de molinera el porcentaje fue similar al progenitor P-1048, pero inferior al testigo. El porcentaje de granos enteros fue mayor que los progenitores y testigo. El centro blanco del grano y la temperatura de gelatinizacin fue de intermedia a alta, se mostraron similares al progenitor Anabel e inferior al testigo, pero dentro de la escala aceptable. De acuerdo al coeficiente de Gower los valores se presentan cercanos, 0.789 con el progenitor P-1048 y 0.744 con Anabel, en la matrz de similaridad generada a partir de los datos morfolgicos.

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De manera similar, las distancias genticas presentadas en la matrz generada por los datos moleculares, tienen valores de 0.350 con el progenitor P-1048 y 0.336 con Anabel, se observa mayor similaridad con el progenitor P-1048 (Cuadro 12). Del total de las caractersticas cualitativas evaluadas para la lnea Idiap 22, comparte el 75% de las caractersticas con el progenitor Anayansi L2 y con el progenitor P-1048 el 57%. Un 14% de las caractersticas, como ngulo del pice del grano, color de la lmina foliar, color de la base del tallo y posicin de la hoja bandera, fueron diferentes con respecto a los progenitores. Para las caractersticas cuantitativas, se asocia el 60% del total de las caractersticas de la lnea con el progenitor Anayansi L2 y el 30% con P-1048, el 20% fueron diferentes con respecto a los progenitores, entre ellas, ancho de la lmina foliar y altura de planta. La lnea promisoria Idiap 22, present un rendimiento de 10574.4 kg/ha mayor que los progenitores y los testigos. El rendimiento de molinera fue similar al progenitor P-1048, pero no mayor al testigo Oryzica 1. En cuanto al porcentaje de grano entero fue mayor que los progenitores y el testigo Oryzica 1. El centro blanco del grano fue igual a los dos progenitores, pero en escala inferior al testigo. La temperatura de gelatinizacin fue baja, similar al progenitor P-1048 y al testigo Oryzica 1. A partir de la matriz de similaridad con los datos morfolgicos, los coeficientes para el progenitor Anayansi L2 fueron de 0.798 y para P-1048 de 0.779. Los coeficientes de similaridad, a partir de los datos moleculares, indican 0.522 para el progenitor Anayansi L2 y 0.425 en P-1048, con respecto a la lnea promisoria. En ambas matrices se observa ms similaridad con el progenitor Anayansi L2 (Cuadro 12). Cabe resaltar que se observa una expresin del vigor hbrido en las lneas promisorias respecto al promedio de los progenitores y stos a su vez respecto a los testigos.

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5. DISCUSIN

El flujo de germoplasma de arroz introducido en los ensayos de observacin en Panam, iniciaron entre 1984 y 1985 procedentes del Programa de Arroz del CIAT, a travs del Proyecto Colaborativo IDIAP/FCA-UP/CIAT, junto con los ensayos del Vivero de Observacin de Arroz para Amrica Latina de 1986. Estos materiales fueron sometidos a evaluaciones en varios sitios de la Repblica de Panam, en los ecosistemas de riego y secano favorecido. La seleccin de lneas por su comportamiento agronmico, rendimiento, opacidad del endosperma y enfermedades, principalmente a Pircularia oryzae (Gaona et al., 1992). Por tal razn la mayor parte del germoplasma manejado en el Proyecto de Mejoramiento de Arroz del IDIAP, tiene lneas avanzadas que proceden de un nmero reducido de progenitores. En general en Amrica Latina, el mejoramiento del arroz de riego ha dependido de un ncleo gentico principal compuesto por 12 cultivares (Cueva-Prez et al., 1992). En Panam como parte del proceso de seleccin de materiales superiores se realizan evaluaciones morfolgicas y agronmicas; adems se hace necesario realizar descripciones varietales de las lneas prximas a ser liberadas al productor, para tener un registro de caractersticas que indiquen diferencias, similitudes, asi como las ventajas y desventajas de cada material fenotpico; de acuerdo a la respuesta a prcticas de cultivo y ecosistemas donde se recomienden cultivar. Las lneas de arroz utilizadas en el estudio, se consideran para el cultivo en ecosistemas bajo riego por lo que requiere cumplir con una arquitectura de plantas adecuadas para ser consideradas como variedades de arroz de riego. 5.1. Variabilidad en caractersticas cualitativas El crecimiento de la planta de arroz es un proceso fisiolgico continuo, que muestra un patrn comn en el tiempo, que puede variar ligeramente dependiendo de las caractersticas genticas de la planta o la influencia del ambiente (Fernndez et al., 1985). Con respecto a la variabilidad en la caracterstica de hbito de crecimiento (Anexo 13), las lneas de arroz mostraron mayor tendencia, con el 70.39%, a plantas con hbitos de crecimiento erecto e intermedio, cuyos ngulos de abertura estn entre los 10 y 30 con respecto a una lnea perpendicular imaginaria que pasa por centro de la planta (Muz et al., 1993). Lo anterior indica que la caracterstica deseable busca disminuir la competencia entre plantas, pero a la vez aumentar los rendimientos. Una planta de arroz que tenga un ngulo de abertura

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el 65 o ms, ocupa ms espacio en el suelo y se hace ms competitiva, pero desde el punto de vista fotosinttico sera menos eficiente debido al autosombreamiento (Diarra et al., 1985). La caracterstica deseable para variedades de riego sera tener plantas con hbito de crecimiento erecto. Entre las lneas que presentan esta cualidad, se pueden mencionar las lneas que proceden del acervo gentico CNAIRAT P, como 1, 2, 3, 6, 8 y 9; la lnea16, las lneas que proceden del cruce VIOAL3189/ANABEL, seran 17, 18, 20 y 21, y las lneas procedentes del FLAR: 34, 35, 36, 37 y 39, y las lneas 44 y 49 (Anexo 1). El mayor nmero de macollas o hijos permite una alta capacidad de competencia y asi mismo se espera que un mayor macollamiento asegure una buena produccin de panculas al final de la fase reproductiva (Montealegre y Vargas, 1992). Esta capacidad es una caracterstica muy importante que debe poseer cada lnea seleccionada, permite reducir las labores de cultivo al cerrar los entresurcos y se incrementa la cosecha al aumentar el nmero de panculas por unidad de superficie. De acuerdo a los resultados las lneas 29 y 54 (IDIAP L-7) presentaron la mayor capacidad de macollamiento. La lnea 54 representa un testigo de alto rendimiento en el estudio y es utilizado en Panam como una variedad comercial del sistema de riego. De igual forma la lnea 55 (Oryzica 1), es un testigo de alto rendimiento de molinera, el cual present buena capacidad de macollamiento. Solo la lnea 29 super la capacidad de macollamiento de estos dos testigos. El macollamiento alto no produce crecimiento excesivo de la planta ni el sombreamiento entre plantas cercanas (Jennings et al., 1981), para variedades de riego se consider conveniente que las plantas posean ms de 16 hijos (Chatel et al., 1997). La variabilidad presentada en la coloracin del pice que forman la lema y la palea, lmina foliar, vaina de la hoja, nudo, entrenudo y base del tallo, tiene la mayor tendencia a coloraciones verdes. La coloracin de las plantas de arroz se les ha restado importancia, debido a que ellas pueden variar en intensidad, en localizacin, y en el manejo de la fertilizacin. Solo se han utilizado para la identificacin varietal o trabajos de taxonoma, los mejoradores no prestan mucha atencin a estas caractersticas para realizar una seleccin (Jennings, et al. 1981). Especficamente para la caracterstica del color de lmina foliar, recientemente, con el lanzamiento de la variedad Fedearroz 50 en Colombia, con color verde oscuro en la lmina de la hoja se observ una correlacin entre las hojas plidas y una senescencia temprana, en tanto que las coloraciones verdes oscuras presentan correlacin con la senescencia tarda (Jennings, et al., 2002). Mengliang, (2001) citado por Jennings, et al., (2002), seala que en algunas investigaciones pioneras, aunque exploratorias realizadas en China, relacionan la permanencia verde con el potencial de rendimiento.

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Bajo estos resultados, las lneas que presentaron coloraciones verde oscuras fueron el progenitor Surinam 70, lneas 44, 50 y 57. Es importante sealar que las dos ltimas lneas presentaron los mejores rendimientos en kg/ha. Con respecto a la coloracin del pice del grano apical de la pancula y las glumas frtiles, la tendencia fue al color pajizo. El color bsico del arroz es pajizo o dorado. La cscara de color pajizo, es muy comn en las variedades comerciales. El color de la cscara no afecta el rendimiento del grano y no es una caracterstica importante para seleccin (Jennings et al., 1981). En los anlisis de calidad de arroz paddy, tener una descripcin clara de la coloracin del pice y las glumas frtiles, es de gran ayuda para diferenciar posibles contaminaciones con malas hiervas comunes en el cultivo arroz como el arroz rojo, especficamente con los rojos varietales que son los ms difciles de diferenciar, sin restar importancia a los rojos pipones, mechudos y rayones, que presentan diferentes pigmentaciones. El color del estigma en las lneas presenta una mayor tendencia al color blanquecino. Las plantas que presentan esta coloracin blanquecina tienen mayor tendencia a coloraciones verdes en su pice, vaina, nudo, entrenudo y tallo. Los estigmas de coloracin prpura, tienen tendencia a presentarse en plantas que hayan presentado coloracin prpura en algunas de sus rganos, como en el borde de la hoja, pice del grano, base del tallo, etc. La literatura consultada reporta la importancia de estas caractersticas en los aspectos taxonmicos, se puede considerar como descriptores morfolgicos y no tanto para seleccin de materiales superiores. De igual manera, la forma y color de la lgula, color de las aurculas, no tienen importancia para la seleccin en programas de mejoramiento, pero pueden ser tiles para diferenciar a la planta de arroz de algunas malezas comunes en estado de plntulas (Gonzlez et al.,1985). La mayor tendencia de las lneas fue al color blanquecino en la lgula y las coloraciones prpuras se observan asociadas a la presencia del color prpura en algn rgano de la planta. El color de las aurculas present fuerte tendencia al color crema, y se observ que el progenitor Surinam 70, no present aurc ulas. En cuanto a la pubescencia de las glumas y la vellosidad de la lmina foliar se observ mayor tendencia a plantas con pubescencia en las glumas y vellosidades en la lmina foliar y menor tendencia a glumas lisas con lminas lisas. Segn Jennings et al. (1981), las hojas y glumas de la mayora de las variedades del arroz son pubescentes, algunas glabras o lisas, con poco o ningn tricoma bicelular. Sealan tambin que ninguna variedad tiene hojas pubescentes y glumas lisas, o viceversa. En el estudio morfolgico, se encontr que la lnea 20

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(VIOAL3189/Anabel 13-1-2-3-1), present una variante diferente, no pubescencia en la lmina foliar, y glumas con vellos cortos y algunos largos hacia el pice. La caracterstica deseable para seleccin es tener hojas lisas, para el cultivo de arroz altamente mecanizado. Bajo esta caracterstica, las lneas aptas son: 1, 2, 7, 11, 17, 18, 19, 20, 21, 32, 33, 41, 42, 44 y 50. La posicin de las hojas es un descriptor que tiene relevancia al momento de la seleccin, porque est asociado a la alta capacidad de rendimiento debido a que permiten mayor penetracin y distribucin de la luz dentro del cultivo, por lo tanto mayor capacidad fotosinttica (Jennings et al., 1981). La mayor tendencia de las lneas caracterizadas presentaron la posicin semierecta tanto para la hoja bandera como para la segunda hoja. La posicin semierecta est dada por un ngulo entre 11 y 40, siguindole la tendencia hacia hojas erectas, que tienen ngulos entre 0 y 10. Solo 5 lneas presentaron hojas abiertas . Aunque no es un descriptor determinante de seleccin, es importante sealar que la posicin de la hoja con relacin a los rayos solares influye notablemente en la absorcin del CO2. Por eso, hojas con ngulo erecto tienen mayor asimilacin de CO2 que las que tienen una posicin paralela (Hernndez, 1969). De acuerdo al tipo de planta de una variedad de arroz de riego con alto potencial de rendimiento, la caracterstica ideal son hojas erectas para una mejor distribucin de la luz (Vergara,.1985) y algunas cadas (Hernndez Aragn y Tavitas Fuentes, 1992). De las lneas en estudio las que presentan la hoja bandera erecta son las lneas: 17, 18, 21, 24, 35, 37, 38, 39,41, 42, 45, 48 y 49. El tamao y tipo de arista del grano, en las lneas presentan la tendencia a tener granos con ausencia y pocas aristas. La presencia de arista es una caracterstica poco deseable porque son duras, persistentes, e inconvenientes para el desgrane y la molinera. No representan una funcin til, porque ocasionan desgaste de partes de la maquinaria de cosecha, as como en la maquinaria de secado. La presencia de las aristas es controlada por dos o tres genes dominantes (Jennings et al., 1981). Las lneas que presentan ausencia de arista en todos sus granos son : 3, 14, 15, 17, 18, 20, 31, 33, 35, 36, 39, 40, 41,44, 49, 52, 54, 55, 56 y 57. Con respecto al ngulo del grano, la mayor tendencia fue hacia granos con ngulos de 11 a 40, se observ tambin variabilidad para este descriptor. La lneas en estudio presentaron alta variabilidad, para el descriptor densidad de la pancula. La mayor tendencia fue hacia una densidad intermedia, aunque el ideal es obtener lneas con

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panculas compactas y eso es considerado como caracterstica de seleccin por los fitomejoradores. El porcentaje ms alto para panculas compactas lo present la lnea 10. La exercin de las panculas en las lneas caracterizadas fue variable porque presentaron diferentes valores en la escala para este descriptor, dentro y entre lneas. Esta variacin puede estar sujeta a factores ambientales como la temperatura (Jennings et al., 1981). La tendencia de esta caracterstica fue hacia panculas bien y moderadamente emergidas, considerado como aceptable, ya que las panculas incluidas son indeseables por presentar granos vanos hacia la vaina de la hoja y presencia de decoloraciones provocadas por patgenos. El progenitor Surinam 70 present el mayor porcentaje de panculas parcialmente incluidas. La fertilidad de la pancula es un requisito importante para la seleccin temprana. Este descriptor se present de manera variable en las lneas, con mayores tendencias a panculas muy frtiles, frtiles y parcialmente frtiles. Se considera que una esterilidad entre el 10 a 15%, es un rango aceptable para obtener rendimientos altos, porcentajes mayores al 15% disminuyen los rendimientos. La esterilidad puede estar dada por temperaturas extremas, volcamiento y esterilidad hbrida o incompatibilidad gentica (Jennings et al., 1981). Segn las observaciones de campo, las lneas procedentes del acervo gentico CNAIRAT P que es originada en la combinacin de varios genotipos mediante cruces manuales o utilizando el gen de androesterilidad (Chatel y Guimaraes, 1995), mostraron porcentajes altos para la categora parcialmente frtil. Quizs esta falta de fertilidad en los granos este influenciada por la segregacin del gen ms de androesterilidad (Chatel et al.,1997). Las lneas procedentes del cruce Llano 5/Anayansi L2, tambin presentaron porcentajes poco favorables para esta categora. En relacin al desgrane de la pancula, la tendencia fue hacia difcil y moderadamente difcil. Las lneas 1, 35 y 36 presentaron los mayores porcentajes de desgrane para la categora moderadamente difcil. Esta caracterstica es de importancia econmica y es uno de los principales objetivos del mejoramiento gentico, porque produce prdidas de rendimiento de grano en el campo. De acuerdo con Jennings et al., (1981), esta caracterstica tambin est influenciado por el medio ambiente. 5.2. Variabilidad en caractersticas cuantitativas

Las evaluaciones de floracin (Anexo 14) se basan en una distincin de tres clases, la clase menor a 74 das se consideran materiales precoces; entre 75 y 84 das estn los de ciclo

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intermedio, y por encima de los 90 das estn los tardos (Chatel et al., 1997; Ortz et al. 1999). Las lneas evaluadas presentaron variabilidad para esta caracterstica. Claramente s observa que 26 lneas presentaron ciclos mayores a 90 das, especficamente las lneas que proceden del acervo gentico recurrente y del cruce Llano 5/Anayansi L2. Para el ciclo intermedio se observ en 18 lneas, mayormente en los cruces denominados FLAR y Chi, en este rango se ubican la mayora de los progenitores y lneas promisorias. Solo 13 lneas presentan ciclo corto, entre las variedades comerciales, Oryzica, IDIAP L-7 e I-863, utilizadas como testigo. De acuerdo a los das a madurez (Anexo 19), el cual tiene una correlacin alta (>90) con los das a floracin, (datos no presentados) el ciclo precoz corresponde a menos de 117 das; intermedio que va desde 118 a 125 das; y tardo entre 135 a 140 das (IDIAP, 1987). Estos ciclos se presentaron en las evaluaciones, con un patrn de 30 a 35 das despus de los das a floracin en casi todas las lneas. De igual manera, los grupos de lneas que presentaron ciclo tardo para la floracin, presentan ciclo tardo a la maduracin. Es importante sealar que esta variabilidad presentada tanto para das a floracin como a maduracin, est sujeta a factores ambientales, dependiendo de la zona y el semestre en que se cultive una variedad de arroz (Gutierrez et al., 1995), y de algunas prcticas agronmicas como la fertilizacin nitrogenada (Jennings et al., 1981), manejo del agua, mtodo de siembra, edad de las plantas al trasplante y las condiciones en que se desarroll el almcigo (Hernndez, 1969). Desde el punto de vista de seleccin por los mejoradores, la mayor parte de las variedades modernas son de ciclo intermedio, porque se les asocia con mayor rendimiento (Jennings et al., 1981). Genticamente las variedades precoses y tardas, varan por un solo gen o factores mltiples ( Hernndez, 1969). En relacin a la altura de planta (Anexo 20), se observa que las lneas procedentes de la seleccin recurrente as, como las lneas del cruce Llano 5/Anayansi L2, presentan el grupo de lneas con tendencia a plantas con mayor altura respecto al resto. La clasificacin por altura de planta puede ser arbitraria, como plantas enanas, tipo riego y tipo secano (Chatel et al.,1997). Segn Hernndez Aragn y Tavitas Fuentes (1992), el arqueotipo de planta para riego debe tener una altura entre 80 a 90 cm. La reduccin de la altura de la planta est asociada a aumentar el potencial de rendimiento del arroz; as como a aumentar la resistencia al acame (Vergara, 1985; Lasso, 1992). Cabe sealar que en las evaluaciones de campo no se registr el acame de plantas, debido a que este descriptor podra estar influenciado por el constante pisoteo al momento de el registro de datos dentro de la parcela, as como la permanencia de la lmina de agua que estuvo sujeta a los diferentes ciclos de las lneas en estudio.

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La longitud y ancho de la segunda hoja se present muy variable en todas las lneas evaluadas, como seala Jennings, et al., (1981). El ancho de la hoja es menos variable, pero hay diferencias obvias entre materiales enanos y altos. Se le presta ms atencin al largo de la hoja respecto al sombriamento que produzca y el ancho de la hoja est relacionado con l alta a habilidad de rendimiento. Con respecto a la longitud y ancho de la hoja bandera (Anexos 15 y 16), se present variabilidad para ambos descriptores en todas las lneas, de igual manera Jennings et al. (1981), sealan que la longitud de la hoja bandera es variable y puede ser afectada por deficiencias nutricionales y altas densidades. La hoja bandera tiene mayor relevancia para la habilidad de rendimiento por suministrar fotosntatos a las panculas ( Hernndez, 1969). Se estim el ndice de rea foliar (IAF) a partir de la longitud y ancho de la lmina de la hoja bandera, el cual fue utilizado en el anlisis de componentes principales. De acuerdo a la descripcin de los resultados la lnea 54 present el menor ancho de la lmina; y la lnea 49 la menor longitud de la hoja (Anexo 17 y 18) y de igual manera, ambas el menor IAF, pero los rendimientos fueron superiores a las lneas que presentaron mayor longitud y mayor ancho de la hoja con IAF mayores. Estos resultados no concuerdan con lo que seala (Hernndez, 1969) donde informa que cuanto mayor el IAF, mayor ser la absorcin de radiacin solar y menor ser la proporcin que pasar al suelo, pero depender del grado de covertura de las hojas. Se puede mencionar que la asociacin con el rendimiento depende del conjunto de otros factores. La longitud de las panculas es un indicador de la capacidad de formar florecillas y producir mayor cantidad de semillas (Montealegre y Vargas, 1992). Las lneas en estudio mostraron variabilidad para este descriptor (Anexo 23), donde la lnea 1 tiene las panculas ms largas, pero un bajo rendimiento con respecto a la lnea 54 que present la pancula ms corta, con una diferencia de 3122.4 kg/ha. Segn Sierra y Muz (1985), la longitud de la pancula no present correlacin positiva con IAF, peso de la materia seca de la raz, altura de planta y el porcentaje de pilada. Jennings et al., (1981), indican que es ms relevante prestar atencin a las variedades que tengan macollamiento alto con panculas cortas y macollamiento bajo con panculas largas, para tener presente la compensacin entre el tamao de la pancula y el nmero de hijos o macollos. Concluyen tambin que las caractersticas de la pancula no causan o determinan estrictamente el rendimiento.

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Con relacin a la longitud de la semilla se observa variabilidad entre las lneas (Anexo 21). La longitud del grano esta asociado con la calidad del grano, para lo cual se prefieren que los granos descascarados estn en el rango de 6.6 a 7.5 mm (Gonzlez et al., 1985). La variabilidad en el ancho de la semilla tiende a semillas de 0.30 mm (Anexo 22). Las evaluaciones de rendimiento (Cuadro 2) se analizaron utilizando un cuadrado latino incompleto, el cual tiene adecuada justificacin para la evaluacin de 57 tratamientos. Este diseo posee el doble control caracterstico de los cuadrados latinos sin la restriccin de que el nmero de repeticiones tenga que ser igual al nmero de tratamientos y pueden tener, en teora, cualquier nmero de tratamientos (Zimmermann, 1997). Cada tratamiento aparece una vez en una columna, eliminando las diferencias automticamente con la comparacin de los tratamientos (Cochran y Cox, 1980). Las diferencias significativas de las filas, se explican por la presencia incompleta de los tratamientos en cada una de ella. Es importante indicar que los promedios de los rendimientos en kg/ha de las 57 lneas estn sujetos a un rea experimental de 1m 2, debido a la magnitud de las diferentes evaluaciones morfolgicas anteriormente discutidas, el rendimiento puede diferir con evaluaciones anteriores de rendimiento especficamente para los progenitores y testigos. Vega y Lasso (1990), en trabajos realizados en Panam, sealan que dentro de diseo experimental el tamao y forma de la parcela son los q influyen en la precisin o exactitud, y las dimensiones adecuadas ue pueden atenuar los efectos de la heterogeniedad del suelo, concluyen que las dimensiones que disminuyen los C.V. son las establecidas entre 4.5 a 6m 2 de ancho y el largo de 4 a 5 m de largo. Los rendimientos obtenidos en este estudio y analizados mediante la prueba de Tukey indican que las lneas se pueden agrupar en 19 categoras de rendimiento, determinando mucha variabilidad para esta variable. Los mayores rendimientos fueron obtenidos por las tres lneas promisorias, lnea 57, 50 y 51, superando a sus progenitores que tambin fueron evaluados en el estudio. sta diferencia con respecto a los progenitores puede explicarse por la expresin del vigor hbrido de las nuevas lneas. Los rendimientos de las lneas con denominacin Chi, presentan en su mayora, rendimientos cercanos a las variedades testigos. Dentro de las lneas del acervo gentico CNAIRAT-P, se obtuvo rendimientos inferiores a los testigos, resaltando que el menor rendimiento entre todas las lneas lo present la lnea 2 que pertenece a este grupo. Estos bajos rendimientos obtenidos pueden estar influenciados, por la segregacin del gen de androesterilidad ms, que produce plantas denominadas estriles por la poca formacin de granos. Adems en las observaciones de campo que no tuvieron un registro para el estudio, se observ que las lneas 3, 5, 6, 7, 8, 9 y 10, presentaron plantas con la enfermedad de hoja

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blanca entre 3 a 7 plantas totalmente afectadas. Esta enfermedad tambin fue observada, en la lnea 16 con un total de 36 plantas con hoja blanca; en las lneas 18, 28,30 y el progenitor Cica 8, con un promedio de una planta enferma. Adems la lnea 36 y la lnea 3 (acervo CNAIRAT-P) , presentan bajos rendimiento. Para el caso de la lnea 36, su bajo rendimiento puede estar asociado a que la mayora de sus panculas presentaran un desgrane moderadamente difcil, pero especficamente esta lnea present porcentajes de desgrane superior al 15 %. Dentro de las lneas procedentes de las mismas cruzas se puede observar variaciones en los rendimientos y entre las diferentes cruzas. Segn Vargas, et al. (2000), las variedades presentan diferencias en rendimiento altamente significativas debido en gran parte a la diversidad de su constitucin gentica. Otro factor a considerar en las lneas que presentaron promedios de rendimientos bajos es la interaccin a la poca de siembra, como sealan Pez y Rodrguez (1995), en ensayos con la variedad Araure 4, mencionan que esta variedad responde favorablemente a las condiciones climticas de la zona en que se cultive. Podemos sealar que algunas de las variedades comerciales utilizadas en Panam, como Oryzica 1, presenta mejores rendimientos en la poca seca que en la poca lluviosa, siendo sembradas en la misma localidad y manejo agronmico. De manera similar, Reyes y Holgun (2001), mencionan que las condiciones climticas como precipitacin, temperatura, brillo solar especficamente al momento de la floracin, pueden disminuir los rendimientos de las variedades de arroz, as como tener presente el ciclo vegetativo de la variedad para que la floracin coincida con la poca seca. De acuerdo a esto, el manejo agronmico para las 57 lneas fue igual, sin considerar que los ciclos vegetativos diferan, lo cual pudo tener influencia en los resultados obtenidos, ya que se recomienda realizar un manejo agronmico basado en los ciclos del cultivo. Los programas de mejoramiento gentico de arroz buscan variedades con alto potencial de rendimientos de grano, resistencia a piricularia y con granos de calidad deseables. La calidad del grano se puede fundamentar en un grano traslcido, con una relacin largo/ancho de 2.9, al igual que promedios de 54% de grano entero, con rendimientos de molinera de 67%, y con temperaturas de gelatinizacin baja. (Alvarado, et al., 1997). De acuerdo a los resultados obtenidos en la evaluacin de la calidad de grano, el porcentaje de granos enteros para las lneas fue variable. Las lneas del acervo CNAIRAT-P no superaron el porcentaje de granos enteros de las variedades testigos y los progenitores de las lneas,

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presentaron porcentajes altos de

grano quebrado y grano tiza, tambin presentaron altos

valores para la escala de clasificacin del centro blanco y temperatura de gelatinizacin fue de intermedia a baja. De acuerdo a las caractersticas deseables de una variedad de riego, la mayora de las lneas no cumplen con algunos de los requisitos de calidad, por presentar altos porcentajes de granos quebrados, y un grano poco traslcido, a pesar de que sus rendimientos de molinera son adecuados. Las lneas del acervo CNAIRAT-P presentan mayormente temperaturas de gelatinizacin de intermedia a alta, lo que indica que tienen buena capacidad de absorcin de agua, lo que significa que el grano ser suelto y seco despus de cocido (Viveros, 1989). Las lneas de denominacin DO2F2, presentan variabilidad en los porcentajes de granos enteros, siendo muy bajos, y altos porcentajes de grano quebrado, arrocillo. La clasificacin de centro blanco present valores adecuados. La temperatura de gelatinizacin presenta una calificacin favorable de intermedia a alta. Estas lneas poseen granos suaves y sueltos despus de la coccin. El cruce VIOAL3189/ANABEL, presenta variabilidad en el porcentaje de granos enteros, siendo muy bajo al comparar con las variedades testigos, se pueden considerar indeseables, ya que no alcanzan valores cercanos al 50%, adems presentan altos porcentajes de grano quebrados y valores en la escala de centro blanco que van desde 2 hasta 5, donde se puede considerar como indeseable a valores 5 para los molinos, ya que tienden a quebrarse con facilidad. Tambin presentan tendencia a granos con poca absorcin de agua y se espera sean pegajosos al cocinarlo, ya que a forma general presentan una temperatura de gelatinizacin de alta a intermedia. Para las lneas que comparten a la lnea Anabel como progenitor, las calificaciones presentadas son inferiores a los que presenta el progenitor. De igual manera, el progenitor VIOAL3189, es material parental del testigo IDIAP L7 el cual present los mejores rendimientos de molinera y porcentajes de grano enteros. Torres et al., (2002) comentan que es posible que la recombinacin de las caractersticas de progenitores estn influenciados por las condiciones climticas de la localidad, causando un estrs durante el llenado de grano. Las lneas procedentes del cruce Llano 5/ Anayansi L2, presentaron porcentajes adecuados y otros cercanos a 50% en el porcentaje de granos enteros, lo que indica que es una calificacin adecuada. Los porcentajes de arroz quebrado, fueron bastante similares a los del testigo Oryzica 1, tienen buena calificacin para grano tiza, con sto se presentan como buenas en

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rendimiento de molinera, pero su calificacin de centro blanco est entre 3 a 4 en la escala, lo que indica que no son granos traslcidos, como lo requiere una variedad de riego. En general presentan buena temperatura de gelatinizacin, lo que puede considerar como arroces sueltos y no pegajosos despus de la coccin. Con lo antes explicado, se pueden considerar a estas lneas con caractersticas de rendimiento de molinera, aptas para variedades de riego; aunque no presenten granos traslucidos ya que esta expresin puede estar sujeta a pocas de siembra y efectos ambientales. Holgun et al., (1995) reportaron la variacin observada en el progenitor IR5, en relacin al centro blanco, entre distintos semestres de siembra y Jennings et al. (1981), mencionan que la temperatura despus de la floracin puede influenciar en la opacidad del grano. Las lneas de denominacin FLAR y Chi, al igual que las lneas promisorias presentaron en forma general calificaciones adecuadas para el rendimiento en molinera y centro blanco, con granos traslcidos. Con adecuadas temperaturas de gelatinizacin de intermedias asociadas con altas y algunas con temperaturas bajas. Lo que indica que estas lneas tienen caractersticas deseables, para variedades de riego. Las condiciones agronmicas para las lneas fueron iguales, lo que podemos sealar es que la lmina de agua fue mantenida hasta que se present la maduracin total de las plantas, es decir que para las lneas que presentaron ciclos ms corto o precoses tuvieron disponibilidad del agua casi hasta su cosecha, como sealan Alvarado y Gallardo (1994), que el mantenimiento del agua estancada hasta su consumo total, no afecta el rendimiento del grano ni su calidad industrial. De esta manera se seala que los granos cosechados fueron secados al aire, colocados al sol y por precipitaciones en la localidad, se mantenan bajo techo de dos a tres das, hasta alcanzar la humedad adecuada para su almacenamiento. Es posible que variaciones en el tiempo de secado, as como la humedad del ambiente hayan influenciado en la calidad de los granos, como sealan Zeledn y Mata (1992), en trabajos con diferentes temperaturas de sacado en laboratorios, que la temperatura del aire de secado afect significativamente los rendimientos de molienda, ndice de pilada, quebrado total y semolina total. Pero, segn Rojas et al. (1992), las caractersticas del grano dependen significativamente de los genotipos de arroz. Jennings, et al. (1981), sealan que la presencia y grado de centro blanco estn parcialmente bajo control gentico, aunque ciertos factores ambientales como la temperatura despus de la floracin afectan marcadamente su expresin. Similar a lo que sugiere Holgun, et al. (1995), que el medio ambiente influye de manera significativa en la

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expresin del centro blanco, especficamente la temperatura, a lo cual aade que el endospermo sin centro blanco es dominante sobre el endospermo opaco. Componentes Principales: En base a la importancia que se presentaron en las variables cualitativas y cuantitativas, con respecto al aporte que realizan para tomar una decisin en la seleccin de lneas de mejoramiento, se realiz un anlisis de componentes principales. Para determinar cuales son las caractersticas que ms aportan a explicar la variabilidad de las lneas en estudio. Para explicar la variabilidad presente en las lneas de arroz en el estudio lo realizan

caractersticas fenolgicas como das a floracin y a madurez, las caractersticas de arquitectura de plantas, ancho de la lmina foliar, altura de planta, y la fertilidad de la pancula. Este resultado indica que el ciclo vegetativo de una planta de arroz explica claramente el 31.08% de la variabilidad. De igual manera la altura de plantas y el porcentaje de fertilidad, aportar a la variabilidad del conjunto de lneas. L resultados del anlisis de componentes os principales no concuerdan con resultados obtenidos por Vsquez et al. (2002), en una caracterizacin morfolgica y fenolgica de arroces rojos. Indican que las variables que ms aportan en el primer componente principal son las relacionados con la hoja bandera y semilla. Daz et al. (1998, 2000a, 2000b), en evaluaciones de lneas de arroz procedentes de estudios de rendimiento, evaluaciones de germoplasma y caracterizacin morfoagronmica de arroz afirman, los aportes a la variabilidad en el primer componente estn relacionados con el rendimiento. Las caractersticas de las semillas, las dimensiones de la hoja bandera y el rendimiento contribuyen a explicar la variabilidad presentada en las lneas de arroz, segn el segundo componente principal. La caracterstica de rendimiento contribuye a explicar la variabilidad en el tercer componente, pero segn los resultados en menor proporcin porcentual. Debido a que los dos primeros componentes explican el 43.14 % de la variabilidad entre las lneas de arroz. En relacin a la matriz generada por las distancias euclidiana, las lneas ms similares pertenecen al mismo cruce, el acervo gentico CNAIRAT-P, y las ms distantes fueron IDIAP L7 que es una variedad comercial y utilizada como testigo en el estudio; con respecto a la lnea 1 procedente del acervo gentico CNAIRAT-P, por seleccin recurrente.

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La formacin de los grupos, de acuerdo al dendograma de la figura 3, presenta que la mayor variabilidad est entre las variedades comerciales, los progenitores, las lneas promisorias y las lneas de procedencia del FLAR, con el resto de las lneas en estudio, las cuales conforman el grupo A. De acuerdo a la agrupacin generada por el mtodo de varianza mnima de Ward (Figura 3), las lneas que conforman cada grupo presentan caractersticas cualitativas y cuantitativas que se mencionan a continuacin. Las lneas que conforman el grupo A se caracterizan en forma general por presentar ciclos precoses, hbitos de crecimiento con mayor tendencia a erectos e intermedios, con tendencia a capacidad de macollamiento buena y algunas medianas, hojas bandera y segunda cortas y ms angosta que el resto de las lneas, de porte bajo, densidad intermedia para las panculas, con exerciones entre moderadas y coincidentes, panculas cortas, con mayor tendencia a panculas muy frtiles, con desgranado de difcil a moderadamente difcil, con ngulos de semillas con mayor tendencia entre 0-10, el menor ndice de rea foliar y rendimiento promedios de 7737 kg/ha. Dentro de esta rango de caractersticas se encuentran las variedades comerciales testigos utilizadas en Panam, para el sistema de riego y el progenitor Surinam 70. En base a sto, las lneas avanzadas que lo conforman pueden ser recomendadas para seguir en las evaluaciones regionales del proyecto de mejoramiento en Panam. Sealando que las lneas 35 y 36 presentan el mayor porcentaje de desgrane en la categora de desgranado moderadamente difcil, lo que podra representar una desventaja comparativa, bajo los sistemas altamente mecanizados. Se puede caracterizar a las lneas que conforman el grupo B1 como plantas de ciclo tardo, de porte intermedio, con aristas ausente a cortas en menos del 50 % de las semillas, de panculas semicompactas, de panculas largas, con panculas parcialmente frtiles, con macollamiento bueno que es entre 15 a 19 hijos por planta, con moderadas exerciones de la pancula, las cuales oscilan desde 1 a 4 cm, del nudo ciliar a la base de la hoja bandera, ngulos de granos entre de 0-10 a 11-40 y con rendimientos promedios de 6883.9 kg/ha. El grupo B2 agrupa lneas que presentan caractersticas de ciclo precoz, de porte intermedio, granos mayormente sin aristas, con densidad intermedia para la pancula, hojas b andera y segunda hoja ms largas en comparacin con el resto de los grupos y hojas angostas, con

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exerciones moderadas, panculas de muy frtiles a frtiles, desgranado difcil, ngulos de semillas con mayor tendencia a 11-40, presentan los mayores ndices de rea foliar y los ms altos rendimientos promedios de 8755.9 kg/ha. Los rangos de caractersticas que presentan las lneas que conforman este grupo B2, proponen tener las mejores caractersticas para variedades de riego. Dentro de este rango se encuentran las tres lneas ms avanzadas Chi 3210, Chi 4523 e IDIAP 22, y de forma clara la lnea 6 del acervo gentico CNAIRAT-P, presenta mejores caractersticas que el resto de las lneas bajo el mismo acervo gentico. El grupo B3, presenta caractersticas de ciclo intermedio, porte intermedio a alto, granos mayormente sin aristas, con densidad de intermedia a semicompacta para la pancula, hoja bandera y segunda hoja medianamente largas y hojas bandera ms ancha, con exerciones con mayor tendencia moderadamente emergida, panculas con mayor tendencia a frtiles, desgranado con mayor tendencia a difcil, ngulos de semillas con mayor tendencia a 0-10 y los menores rendimientos promedios de 6605 kg/ha. La formacin de grupos est fundamentada en la variabilidad entre poblaciones de lneas que proceden de cruces diferentes. Tambin existe variabilidad entre las lneas que proceden del mismo cruce. Las caractersticas dentro de cada cruce no son tan variables, salvo algunas lneas que comparten ms caracters ticas con las poblaciones de otros cruces como la lnea 6, la cual procede del mismo acervo gentico, pero se separa de su poblacin recurrente, para la cual algunas caractersticas podran estar influenciadas por el ambiente. sto indica que existe variacin posible de medir a travs de los anlisis multivariados (Martin et al. 2000). Hidalgo (2003), menciona que el anlisis de componentes principales es una herramienta til para analizar datos que se generan de la caracterizacin y evaluacin preliminar de germoplasma, adems de conocer la relacin existente entre las variables cuantitativas y la semejanza entre poblaciones. Este mtodo puede contribuir a la toma de decisiones del fitomejorador en la seleccin de genotipos valiosos, a travs de muchas caractersticas morfolgicas, ya que en la mayora de los ensayos se consideran con mayor nfasis a las caractersticas que intervienen en el rendimiento y algunos de sus componentes (Faras et al., 1983). Aunque se debe tener presente que los datos morfolgicos tienen una aplicacin inmediata, debido a la susceptibilidad a modificaciones producidas por el ambiente, pero tampoco se puede descartar la posibilidad de detectar caractersticas estables (Segura, 2003).

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5.3.

Variabilidad gentica molecular

Los resultados de la amplificacin del ADN de arroz con la utilizacin de 8 combinaciones enzima-primer, fueron la obtencin de 291 bandas totales, de stas 177 polimrficas, que representan el 61%. Zhu et al. (1998), obtuvieron resultados de 410 bandas totales, 179 fueron polimrficas lo que representa el 44%, en 4 combinaciones enzima-primer. Porcentajes inferiores tambin fueron obtenidos por Subudhi et al. (1998), en trabajos con germoplasma de arroz, el fue de 33.2 %. El promedio de bandas polimrficas fue de 22.12 por combinacin, de acuerdo a esto, el promedio de bandas polimrficas obtenidas fue mayor que las reportadas por Fuentes et al., (1999), con promedio de 19.25 bandas polimrficas por combinacin en un anlisis de la diversidad gentica en variedades cubanas de arroz y mayores tambin que las reportas por Maheswaran et al. (1997), cuyo promedio fue de 10.4 bandas polimrficas en estudios con poblaciones de arroz doble haploides. La agrupacin generada por el dendograma WPGMA basado en polimorfismo de AFLP, presenta la formacin de dos grupos y un subgrupo. El primer grupo (A) formado por dos lneas, lnea 19 y Chi 4523, donde sus distancias son iguales. Se puede mencionar que estas dos lneas comparten el progenitor Anabel, el cual se encuentra colocado mas distante. El segundo grupo (B) est conformado por todos los progenitores y las dos variedades comerciales testigos, as como una lnea avanzada, colocados a distancias diferentes. El subgrupo formado tiene una clara agrupacin, con cinco lneas, entre ellas tres progenitores, P-1048 (8), Surinam 70 (3) y Anayansi L2 (4), los dos ltimos son los que presentan la mayor semejanza gentica con distancia gentica de 0.838. De acuerdo a Martnez y Cuevas-Prez, (1995) Anayansi L2, proviene del cruce IR 8/NILO 1, liberada por Panam en el ao de 1977 y Surinam 70, conocida como ELONI, proviene del cruce ACORNI//KAPURI/IR454, liberada por Surinam en 1979. Es importante sealar que tanto Anayansi L2 como Surinam 70, son variedades utilizadas como progenitores en diferentes cruzas, y para el caso de este estudio son dos progenitores de la lnea Chi 3210, la cual se ubica muy cerca de ambos en el subgrupo. La otra lnea, que de igual manera se coloca en este subgrupo, es la lneas 25, la cual tiene como uno de sus progenitores a Anayansi L2. La formacin de este subgrupo se fundamente en la afinidad de las lneas con uno de sus progenitores.

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El anlisis de componentes principales divide la variabilidad en dos o ms componentes. Los componentes principales 1 y 2 explican el 67% de la variabilidad. De acuerdo a esto, el componente uno agrupa los progenitores P -1048, Anayansi L2, Surinam 70 y las lneas Chi 3210, Lnea 25, los cuales tienen similar agrupacin, con el subgrupo presentado por el dendograma WPGMA (Figura 17). De igual manera se agrupa a la lnea 19 y Chi 4523, formando un segundo grupo. El resto de las lneas avanzadas, testigos comerciales y progenitores, forman un tercer grupo. De acuerdo al componente dos, se forman claramente dos grupos, uno de ellos formado por la lnea Chi 4523 y lnea 19, de igual manera estas lneas forman un grupo en el dendograma WPGMA. El segundo grupo constituido por los progenitores Anabel y Cica 8, variedades testigos, IDIAP L7 y VIORH, y la lnea IDIAP 22, estas lneas se colocan cercanas en el dendograma WPGMA. Pero se observa tres progenitores, Anayansi L2, Surinam 70 y P1048, lneas 25 y Chi 3210, que no presentan un grupo definida al ser analizados en el componente dos. Al comparar la formacin de grupos en el dendograma WPGMA (Figura 17), con la proyeccin de dos componentes principales que explican el 67% de la variabilidad, podemos sealar que existe mucha consistencia (Figura 18). En resultados de Zhu et al., (1998), el anlisis de componentes principales a partir de datos moleculares encontr identificacin clara de tres grupos de accesiones de arroz. Tambin sealamos que, de acuerdo a lo generado por el dendograma WPGMA y la matriz de similaridad, a partir de la mayor similaridad entre Anayansi L2 y Surinam 70, las dems lneas, progenitores y variedades comerciales presentan distancia diferentes y ms distantes. Subudhi, et al., (1998), en estudios de clasificacin de germoplasma de arroz, comenta que la tcnica de AFLP debe ser el mtodo de opcin en la identificacin varietal gentica, y los estudios de la composicin del genoma en arroz, as como, en otros cultivos. 5.4. Comparacin entre los marcadores morfolgicos y moleculares

El procedimiento utilizado para correlacionar los datos morfolgicos y moleculares, fue la generacin de una matriz de disimilaridad por el coeficiente de Gower para los datos morfolgicos y la utilizacin de la matriz de disimilaridad generada por el ndice de Jaccard para los datos moleculares, las cuales fueron sobrepuesta en una sola matriz para el anlisis

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(Cuadro11). De acuerdo a las distancias genticas presentadas en las matrices, las lneas que resultaron ms similares en una matriz, no presentando la misma tendencia en la otra. De acuerdo a la prueba de Mantel no existe correlacin significativa al 5%, pero si al 10%. Lo que permite inferir la no presencia de correlaciones estadsticamente significativas. De igual manera los dendogramas generados, presentan poca concordancia en la formacin de grupos, solo para el caso de las lneas 11, 9 y 12, que guardan una posicin cercana en ambas matrices. Resultados similares fueron obtenidos por Riveros et al. (2001), donde claramente describen una inconsistencia entre la identificacin taxonmica de especies del gnero Fusarium, basada en morfologa y la gentica de anlisis de ADN, mediante la metodologa de RAPDs. En otros trabajos realizados por Quirs Vera (2002), se acepta que existe relacin entre las matrices de datos obtenidos entre la caracterizacin morfolgica y molecular, obtenidos por la metodologa AFLPs, de clones de cacao Nacional y otros orgenes de Ecuador. Resultados similares fueron obtenidos por Tapia Bastidas (1998) los cuales indicaban presencia de relaciones estadsticamente significativas entre los datos morfolgicos y moleculares, obtenidos por la metodologa de RAPDs, en la caracterizacin de una coleccin de Pachyrhizus tuberosus (LAM.) SPREG. Se puede sealar, que para este estudio fue necesaria la caracterizacin morfolgica, porque al no existir correlacin con la caracterizacin molecular, la variabilidad existente entre las lneas no sera completamente explicada. Es probable que la no correlacin de los datos morfolgicos y moleculares, se deba a que se utilizaron ms variables cuantitativas, las cuales son ms afectadas por el medio ambiente, que las cualitativas. De acuerdo a Tapia Bastidas (1998), las caractersticas cualitativas obtuvieron los mayores valores de correlacin entre datos morfolgicos y moleculares. Mientras que las caractersticas cuantitativas tuvieron correlaciones bajas, por tener influencia de factores ambientales. 5.5. Variabilidad gentica entre lneas promisorias y progenitores.

En base a los datos obtenidos en la caracterizacin morfolgica de las lneas avanzadas y sus progenitores, se observa que la lnea Chi 3210 comparte mayor asociacin con su progenitor Anayansi L2 a nivel de caractersticas cuantitativas y cualitativas. De igual manera el ndice de similaridad de Jaccard, presenta mayor asociacin hacia el progenitor Anayansi L2. De forma diferente el ndice de similaridad de Gower, asocia a la lnea con su progenitor Cica 8.

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La lnea IDIAP 22, mostr tener mayor asociacin con el progenitor Anayansi L2, tanto en las caractersticas cualitativas como cuantitativas. De manera similar el ndice de Jaccard, tiene mayor valor asociado con el progenitor Anayansi L2. La lnea Chi 4523 no establece claramente asociacin a un progenitor, los ndices de

similaridad de Gower como de Jaccard, presentan valores cercanos. Es importante mencionar que esta lnea present los mayores rendimientos en kg/ha, as como mayores porcentajes de grano entero en el rendimiento de molinera. En resumen, las tres lneas presentan caractersticas diferentes a sus progenitores, de igual forma presentan caractersticas favorables para considerarlas como variedades de riego.

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6. CONCLUSIONES ??El uso de descriptores morfolgicos y marcadores moleculares AFLPs, permiti determinar la variabilidad arroz del IDIAP. ??El anlisis de componentes principales para las caractersticas cualitativas y cuantitativas demostr que las caractersticas fenolgicas como el ciclo de la planta, las caractersticas de arquitectura de planta como la altura de la planta, ancho de la lmina foliar y la fertilidad de la pancula explican el 31.08% de la variabilidad observada en las lneas de arroz estudiadas. El registro de los das a floracin y maduracin, como la altura de la planta, as como la fertilidad de la pancula se consideran como las caractersticas mas discriminantes que pueden contribuir a explicar la variabilidad observada en una poblacin de plantas en evaluaciones tempranas. ??Las lneas de arroz que presentaron los mejores rendimientos fueron las lneas ms avanzadas del proyecto de mejoramiento, Chi 4523, IDIAP 22 y Chi 3210. Estas lneas tambin presentaron caractersticas de rendimiento en molinera y calidad de grano dentro de los rangos aceptables para ser consideradas como variedades para el cultivo bajo riego, de igual manera que en las caractersticas cualitativas y cuantitativas. ??Las evaluaciones de rendimiento de molinera y calidad de grano reflejaron que las lneas con denominacin FLAR y Chi, presentan las mejores caractersticas. Debido a que presentan las calificaciones de centro blanco prximos a granos traslcidos y rendimiento molinero en los rangos superiores al 60%. ??Las caractersticas morfolgicas clasifican a las lneas de arroz en 4 grupos. Esta agrupacin demuestra claramente que existen caractersticas similares entre las lneas que proceden del mismo cruce. A excepcin de la lnea 6, que procede de una poblacin de lneas de seleccin recurrente. ??La caracterizacin molecular mediante la tcnica AFLPs, se gener a partir de la utilizacin de 12 genotipos y 8 combinaciones de enzima-primer, obteniendo un 44% de polimorfismo y 22.12 bandas polimrficas promedio por combinacin. gentica presente en 48 lneas avanzadas de arroz, 5 progenitores y 4 variedades comerciales del proyecto de mejoramiento gentico de

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??La variabilidad observada mediante la caracterizacin molecular, permiti establecer diferencias entre los genotipos. Agrupando a dos lneas avanzadas en un grupo, Chi 4523 y lnea 19. El resto de los genotipos presentaron una estructura de escalera, lo que indica que no se estableci un grupo genticamente cercano entre las variedades utilizadas como testigos IDIAP L7, VIORH 38, los progenitores como Cica 8 y ANABEL, y la lnea IDIAP 22. ??Los progenitores Anayansi L2 y Surinam 70, presentan la mayor semejanza gentica de 0.838. De acuerdo a esta semejanza, sera recomendable no utilizarlos como progenitores en un mismo cruce, ya que es posible que no contribuyan a obtener progresos importantes en las descendencias en un programa de mejoramiento. ??El anlisis de componentes principales a partir de los marcadores moleculares, presentan de manera similar la variabilidad existente en las lneas evaluadas a travs de las distancias genticas. Se observa claramente que los progenitores Surinam 70 y Anayansi L2 son muy semejantes, de diferente manera las dos lneas avanzadas Chi 4523 y lnea 19 son las que ms difieren de el resto de las lneas. Lo que indica que existe consistencia en la variabilidad de las lneas caracterizadas molecularmente. ??La prueba de Mantel permiti determinar la baja correlacin entre los datos morfolgicos y moleculares. Lo que indica que no existi relacin entre las distancias genticas generadas por las matrices, de igual manera se observa que la formacin de grupos generados por los dendogramas presentan baja concordancia. ??Las comparaciones realizadas entre los cultivares prximos a registro y sus progenitores, establece que las lneas comparten porcentajes de sus caractersticas morfolgicas con sus progenitores, de igual forma los datos moleculares establecen la cercana hacia uno de sus progenitores. Pero existen caractersticas propias de cada lnea que establecen diferencias con respecto a sus progenitores y las distancias genticas, a nivel molecular son valores bajos. Estas lneas demostraron tener caractersticas superiores en rendimiento respecto a los progenitores y variedades comerciales utilizadas como testigos en el estudio.

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7. RECOMENDACIONES ??Se recomienda utilizar las caractersticas morfolgicas que discriminan entre genotipos como lista reducida de descriptores preliminares para caracterizar lneas de arroz del proyecto de mejoramiento de arroz. Para determinar el grado de variabilidad presente en la poblacin en estudio. ??Se recomienda hacer uso de las tcnicas moleculares como AFLPs para realizar estudios tempranos de la variabilidad gentica de una poblacin de plantas que sean generadas por programas de mejoramiento gentico. De igual manera utilizar las tcnicas en progenitores del programa. Para conocer las distancias genticas que establecen diferencias y semejanzas entre cada uno de ellos, y as realizar de manera ms eficiente las futuras cruzas. ??Para realizar las comparaciones de marcadores moleculares versus datos morfolgicos, mediante pruebas de Mantel u otras, en el caso de las morfolgicas considerar las caractersticas cualitativas, ya que de acuerdo a la literatura consultada estas presentan menor influencia del ambiente. ??Se recomienda incluir en la caracterizacin de materiales prximos a registros en Panam, la caracterizacin molecular, para as contribuir a una mejor descripcin de las nuevas variedades liberadas para la produccin comercial.

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8. BIBLIOGRAFA Alarcn, E; Gonzalez, LG.; Carls, J. 1998. Situacin institucional de los recursos fitogenticos en Amrica Latina y el Caribe. IICA, BMZ/GTZ. San Jos, Costa Rica. pp 4-9. Alberts, B; Bray, D; Lewis, J; Raff, M; Roberts, K; Watson, JD. 1996. Biologa molecular de la clula. Tercera edicin. Trad. Gracia Brozzo, Roser Pagan, Monserrat Poquet, Manuel Reina, Joseph Valero y Cenen Vilar. Ediciones Omega, Barcelona, Espaa. 314 p. Alvarado A, R; Gallardo A, I. 1994. Influencia de la poca de corte de agua al arroz (Oryza sativa L.) sobre el rendimiento, humedad del grano y calidad industrial. Agricultura Tcnica 54(3):238-242. Alvarado R, JR.; Hernaiz L, S; Gmez T, A; Saavedra B, F. 1997. Brillante INIA, nueva variedad de arroz con grano largo y traslcido. Agricultura Tcnica. 54(4):221-222. Angel, F. 2000. Marcadores moleculares usos y aplicaciones. In curso AFLPs no reactivo. Instituto Amaznico de Investigaciones Cientficas- SINCHI- s/p. Anthony, F; Quirs, O; Phillips, W; Bertrand, B. 1995. Uso de los marcadores moleculares para la evaluacin, la conservacin y el uso de la diversidad gentica. In Acta de la II Semana Cientfica. CATIE, Costa Rica, pp 267. Arvalo S, E.2001. Conozca cmo crecen y se desarrollan las variedades. Arroz, 50(431): 3036. Arosemena, E; Jan, M; Fernndez, F. 1997. Produccin de carne en varios tipos de pasturas en los Llanos de Penonom. In Primer encuentro cientfico de investigadores agropecuarios. IDIAP, Panam, pp 315. Arroz. 1971. El arroz. 1(1):34-42. Repblica Dominicana. Balbas, P; Zapata, FB. 1989. Ingeniera gentica y biotecnologa.; Edit. Eva V. Chesneau, OEA , Buenos Aires, Argentina. pp 3. Bernal R, JH; Del Castillo R, D; Muoz B, D. 1985. Influencia de la arquitectura de la planta de arroz (Oryza sativa L.) y algunas prcticas culturales en el rendimiento y calidad. Acta Agronmica 35 ( 1): 23-33. Bernal R,JH. 1971. El arroz. Arroz 1(1): 34-36. Rep. Dominicana. Bieberach, C; Gonzlez de Alvarado, P. 1997. Intercambio de germoplasma. encuentro cientfico de investigadores agropecuarios. IDIAP, Panam, pp 226. In Primer

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91

ANEXO 1

Lneas avanzadas de mejoramiento gentico de arroz (Oryza sativa), generacin y cruces, utilizadas para la caracterizacin morfolgica.

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Lnea 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 *19 20 21 22 23 24 *25 26 27 28 29 30 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 49 *50 *51 56 *57

Cruzamiento CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M CNAIRAT P/1105 + CNA +RAT + I/4/2/1M DO2F2 DO2F2 D39F2 D39F2 D39F2 D64F2 VIOAL3189/ANABEL VIOAL3189/ANABEL VIOAL3189/ANABEL VIOAL3189/ANABEL VIOAL3189/ANABEL LLANO 5/ANAYANSI L2 LLANO 5/ANAYANSI L2 LLANO 5/ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 LLANO 5/ ANAYANSI L2 FLAR 2 FLAR 135 FLAR 138 FLAR 144 FLAR 145 FLAR 146 Chi 3-30-171 Chi 3-30-172 Chi 3-30-200 Chi 3-30-210 Chi 13-256 Chi 46-7A-1 Chi 3-30-157 VIOAL 2597 (CT8008-6-8-7P-2-11-1P-RHM) IDIAP 22 (Anayansi / P 1048, VIORH 22-2) Chi 32-10 (Cica 8 / Anayansi L2 / S70) Chi 3-30 (Chianung Sen Yu / S70) Chi 4523 (P 1048 / Anabel)

Pedigree 21-4-43-1-1 21-4-43-3-1 14-1-14-3-1-1 14-1-18-1-1-1 14-1-18-3-1-2 14-1-19-1-3-1 14-1-21-1-1-1 14-1-19-1-4-1 14-1-19-1-4-3 14-1-19-1-4-7 3-1-1-1-1 6-2-2-1-1-1 1-1-1-2-1 1-3-1-1-3 1-1-1-3-1 3-5-1-1-1 13-1-1-1-1 13-1-1-3-1 13-1-2-1-1 13-1-2-3-1 13-1-3-1-1 28-3-1-1-1 28-1-1-1-4 28-1-1-2-1 28-1-1-6-3 28-1-1-8-3 25-2-3-3-1 25-2-3-4-2 25-2-3-5-2 25-2-3-7-2 2 2 3 4 1 3 1 1 1 1 2 1 1

Generacin F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F8 F10 F10 F10 F10 F10 F10 F10 F10 F10 F10 F10

* Lneas utilizadas para la caracterizacin molecular

93

ANEXO 2

Progenitores del proyecto de mejoramiento gentico de arroz (Oryza sativa L.), IDIAP, Panam.

Lnea 31 32 33 47 48 52 53 54 55

Progenitor I 863** ANAYANSI L2 Surinam-70 P 1048 Cica 8 IDIAP 38 ** Anabel IDIAP L-7 ** Oryzica 1 **

Cruce IR-8*6 ( IR8 / Nilo I) ACORNI/KAPURI/IR454 P 1221 / P1229 (cruce doble) CICA 4 02/0 .IR665-23-3 / TETEP CT7347 / IR21015-72-3-3-3-1 BG90-2 / Anayansi CT7347 / IR21015-72-3-3-3-1 P 1223 / P 1225

Procedencia CIAT IDIAP SURINAM CIAT/IDIAP/FCA ICA/CIAT CIAT IDIAP CIAT ICA/CIAT

*Lneas utilizadas para la caracterizacin molecular

**Variedades testigos.

94

ANEXO 3 Descriptores cualitativos utilizados en el ensayo de caraterizacin morfolgica

DESCRIPTORES CUALITATIVOS Nomenclatura del texto 1= erecto 2= intermedio 3= abierto 4= disperso 5= procumbente 1= muy prolifera 3= buena 5= mediana 7= pobre 9= muy pobre. 1= verde 3= rosado = prpura 0= glabra o lisa 3= pubescente en la quilla 5= pubescente hacia el pice de la lema y la palea 7= parcial o totalmente cubiertas de vellos 9= parcial o totalmente cubiertas de vellos cortos. 1= sin color o blanquecino 2= amarillo 3= prpura plido 4= prpura 5= negro. 1= erecta 3= semiabierta 5= intermedia 7= horizontal 9= descendente 1= erecta 3= semiabierta 5= abierta 0= glabra o lisa 1= pubescente de la mitad de la lmina hacia el pice 3= ligeramente pubescente 5= aterciopelada en de la lmina 7= escabrosa, spera al tacto 9= aterciopelada 11= escabrosa, spera al tacto en de la lmina.

Escala

Hbito de crecimiento (X2)

Capacidad predominante de macollamiento (X3)

Color predominante del pice que forman la lema y la palea (X4

Pubescencia predominante de las glumas (X5)

Color predominante del estigma (X6)

Posicin predominante de la hoja bandera (X7)

Posicin predominante del pice de la primera hoja por debajo de la hoja bandera (X10)

Vellosidad predominante de la lmina de la hoja (X11)

95

Color predominante de la lmina foliar (X14)

1= verde ( 37,38,39,43 segn tabla de colores) 2= verde oscuro (40,42 segn tabla de colores) 3= mrgenes prpuras (2,3 segn tabla de colores)

Corrugacin predominante de la lmina foliar (X15)

1= ausente 2= presente 0= ausente 1= lado derecho 3= lado izquierdo 1= sin color o blanquesina 2= prpura claro 3= prpura oscuro 4= con lneas prpuras 1= aguda o acuminada 2= hendida 3= truncada 1= crema 2= prpura 1= verde 2= lneas prpuras 3= prpura 1= verde 2= lneas prpuras 1= verde 2= lneas prpuras 3= prpura 1= verde 2= lneas prpuras 3= prpura 1= verde 2= lneas prpuras 3= prpura 4= prpura plido 0= no presenta arista 1= corta 3= media 5= semilarga 7= muy larga 1= arista ausente 2= arista corta y presente en menos del 50% de los granos 3= arista corta y presente en mas del 50% de los granos 5= arista larga y presente en menos del 50% de los granos

Lado corrugado predominante de la lmina foliar (X16)

Color predominante de la lgula (X17)

Forma predominante de la lgula (X18)

Color predominante de la aurculas (X19)

Color predominante de la vaina de la hoja (X20)

Color predominante del nudo (X21)

Color predominante del entrenudo (X22)

Color predominante del anillo subnodal (X23)

Color predominante de la base del tallo (X24)

Tamao de las aristas (X27)

Tipo de aristado predominante de las semillas (X28)

96

7= arista larga y presente en mas del 50% Color predominante del pice del grano apical de la pancula (X29) 1= blanquecino 2= pajizo 3= caf claro 4= rosado 5= prpura

Color predominante de las glumas frtiles del grano apical de la pancula (X30) Densidad predominante de la pancula (X33)

1= pajizo 2= dorado 1= abierta 3= semiabierta 5= intermedia 7= semicompacta 9= compacta 1= bien emergida 3= moderadamente 5= coincidente o emergida 7= parcialmente incluida 9= incluida 1= muy frtil 3= frtil 5= parcialmente frtil 7= parcialmente estril 9= completamente estril 1= difcil 3= moderadamente difcil 5= intermedio

Exercin predominante de la pancula (X34)

Fertilidad predominante de la pancula (X36)

Desgranado predominante de la pancula (X37)

Angulo del pice del grano de la pancula (X38)

1= 0-10 3= 11-40 5= 71-90

97

ANEXO 4
Descriptores cuantitativos utilizados en el ensayo de caraterizacin morfolgica.
DESCRIPTORES CUANTITATIVOS Nomenclatura del texto Das a floracin (X1) Escala Tomado a partir del 50% de flores presentes en los tratamiento,

Longitud de la lmina de la hoja bandera (X8)

Se mide en centmetros, sobre la hoja bandera del tallo ms alto de la planta, desde el pice hasta el punto de unin de la lmina con la vaina Es la distancia, en centmetros, medida de borde a borde en la parte ms ancha de la lmina de la hoja bandera del tallo ms alto de la planta Es la distancia, en centmetros, medida desde la zona de unin de la vaina con el tallo, hasta la punta de la lmina foliar en la hoja inmediatamente inferior a la hoja bandera, del tallo ms alto Es la distancia, en centmetros medida de borde a borde, en el lugar ms ancho de la lmina, en la hoja inmediatamente inferior a la hoja bandera, del tallo ms alto. Es el nmero de das transcurridos desde la siembra en el suelo hmedo. Se mide en centmetros desde el suelo hasta el pice de la pancula del tallo ms alto de la planta. Es la distancia, medida en milmetros, desde la base de la gluma estril ms baja , hasta el pice de la gluma frtil ms larga. Es la distancia, medida en milmetros, entre las nervaduras centrales de la lema y de la plea, en el punto ms ancho. Se mide en centmetros desde la base de la pancula o nudo ciliar hasta el pice de la misma. Se utiliza la pancula del tallo ms alto de la planta.

Ancho de la lmina de la hoja bandera (X9)

Longitud de la lmina foliar (X12)

Anchura de la lmina foliar (X13)

Das a la madurez (X25)

Altura de la planta (X26)

Longitud de la semilla (X31)

Anchura de la semilla (X32)

Longitud de la pancula (X35)

98

ANEXO 5 Clasificacin de granos en calidad molinera. Clasificacin Arroz entero o excelso Arroz partido o quebrado Arroz pica, bavaria o arrocillo Escala Granos enteros y granos 3/4 de su tamao Granos con menos de 3/4 de su tamao Mitades y puntas de grano

ANEXO 6 Escala de clasificacin utilizada para evaluar centro blanco. Escala 0 1a4 5 Granos transparentes Granos con diferentes grados de mancha blanca Mximo que puede existir en ventral blanco o centro blanco Descripcin

99

ANEXO 7 Escala de clasificacin para la dispersn alcalina y su relacin con la estimacin de la temperatura de gelatinizacin. Escala Descripcin Dispersin Clasificacin Temperatura de de la gelatinizacin temperutra de gelatinizacin

1 2 3

Grano no afectado Granos hinchados Granos hinchados con halo incompleto y estrecho Granos inchados con halo completo y ancho Intermedia I 69 a 73 c Granos parcialmente desintegrados con halo completo y ancho Granos desintegrados y emergiendo con el halo; difcilmente se observa su forma Granos completamente desintegrados y solucin clara Poca A 74 a 80 C

4 5

Alta

63 a 68 C

100

ANEXO 8 Protocolo de extraccin de ADN para arroz.

- Colocar un fragmento de hoja de aproximadamente 1.5 cm de cada lnea de arroz, en un mortero - Agregar 500ul el buffer de extraccin 2 X CTAB y macerar con un pistilo - Agregar 1000ul del buffer, y continuar con la maceracin del tejido vegetal. - Decantar en tubos Eppendorf de 1.5 ml y con la ayuda de una esptula recoger residuos - Centrifugar a 10000 rpm, por 5 minutos, - Eliminar el sobrenadante. - Adicionar 500 ul del mismo buffer, mezclar bien en un vortex - Adicionar 7ul de mercaptoetanol - Incubar en Bao Mara a 65C , por 30 minutos, luego agitar en vortex y seguido colocar por 30 minutos ms a 65C en Bao Mara - Adicionar 200ul de cloroformo y centrifugar a 10000 rpm por 10 minutos - Extraer el sobrenadante y colocarlo en otro tubo Eppendorf de 1.5 ml limpio, - Adicionar 1ml de Isopropanol y agitarlo ligeramente dos veces a mano y se dejar reposar para precipitar ADN. - Centrifugar el precipitado a 10000 rpm por 10 minutos - Decantar el sobrenadante (cuidando el precipitado obtenido), y se seca al medio ambiente sobre papel toalla para secar el ADN. - Adicionar 500ul de Etanol al 70% y pasarlo ligeramente por el vortex. - Reposar por 15 minutos a 4C. Para despus centrifugarlos a 10000 rpm por 5 minutos, y proceder a decantar para secar a medio ambiente por 45 minutos. -Adicionar 300 ul de buffer de lavado ( Etanol 76% y 10mM de acetato de amonio), pasndolo por el vortex y dejando reposar por 10 minutos a 20C -Decantar y secar al medio ambiente. - Agregar 250ul de la solucin de TE, para suspender el ADN, dejarlas reposar por 2 a 3 horas a 4C.

101

TBE, 10X Buffer

12.0 ml

ANEXO 9

Preparacin de gel de Agaro

Reactivos: Agua destilada Agarosa Pasos previos. Antes de la preparacin del gel de agarosa se debe realizar los siguientes pasos: Arreglar la bandeja, colocndole un recipiente donde se ubicar los peines. Agregar 40 l de bromuro de etidio a una concentracin de 0.0000001 % ( 1 g por 1000 ml), presionando la tapa de la botella que lo contiene y evitando salpicar fuera de la cubeta. (altamente toxico). Esperar a retirar el pirex del microondas Retirar el erlenmeyer del microondas usando un guante de caucho, de forma inclinada con la boca hacia fuera del cuerpo con el objeto de evitar absorber los gases emitidos por este Agregar el contenido del erlenmeyer en forma circular sobre la bandeja conteniendo el bromuro de etidio a fin de distribuirlo uniformemente Colocar los peines en las ranuras de las bandejas Esperar a que el gel solidifique (aproximadamente 20 minutos). Retirar los peines Colocar la solucin conteniendo el ADN en el gel Conectar la cmara horizontal Kodak BIOMAX-MP.1015 a la fuente de poder y dejar migrar las muestars de ADN por espacio de 20 minutos, a 100 watts y 50 milamperios. ANEXO 10 Preparacin de gel de Polyacrilamida Preparacin de la solucin de Acrylamide/ bis-Acrilamide 6% Producto Urea Acrylamide / bis- Acrylamide (40%) 19/1 H2O desionizada y destilada TBE 10X Volumen Total Para seis geles 250 gr 75 ml 175 ml 50 ml 500 ml 108.0 ml 1.2 gr.

Colocar esta solucin en el microondas por el espacio de 4 minutos.

Esta es la solucin bsica para la preparacin de geles de polyacrilamida debe colocrsela en ANEXO 11 un envase mbar utilizando un embudo y un filtro.
Limpieza y preparacin de vidrios

102

Limpiar los vidrios (corto y largo), muy bien con agua y jabn. Eliminar el jabn con abundante agua fra y caliente luego remojarlos con agua desionizada y destilada Limpiarlos con cloroformo Limpiar los vidrios cambiando el papel (Kleenex), para cada vidrio con agua desionizada Limpiar los dos vidrios con Etanol absoluto (Alcohol 99%), cambiando los papeles (Kleenex) A.- Agregar 2 ml de repulsivo SIGMACOTE al vidrio mas grande, y distribuirlo uniformemente sobre todo el vidrio Dejar secar 4 a 5 minutos y luego limpiar nuevamente usando alcohol al 99% y utilizar papel (Kleenex), para eliminar el exceso del producto Sigmacote. Nota: Mantener ambos vidrios bien identificados con etiquetas para trabajar siempre del mismo lado. B.- Preparacin de la solucin atractiva:

1 ml de Etanol al 95 % 3 l de Bind Silane (methacryloxipropyltri-methoxysilane) 5 l de cido Actico Glacial. Mezclar para homogenizar Nota: Preparar en dos tubos de 1.5 ml para ser agregados al vidrio pequeo. Repetir los primeros cuatro pasos de la limpieza en el vidrio pequeo Agregar y distribuir la solucin atractiva sobre todo el vidrio pequeo con un papel Kleenex. Eliminar el exceso de atractivo, agregando 2 ml de Etanol y limpiarlo con un papel (Kleenex), vertical y horizontalmente, repitindolo 3 veces cambiando de papel Kleenex cada vez. Pasos previos a la preparacin del gel: 1.-Limpiar las guas (blancas), con Etanol Absoluto y colocarlos sobre los extremos del vidrio grande con la espuma hacia arriba 2.-Levantar el vidrio corto sin tocar la parte interna y colocarlo sobre el vidrio largo tocando la espuma de los separadores o guas. 3.-Sostener los vidrios con las prensas de metal (negras). 4.-Colocar cinta tape (Scotch), en la parte basal de los vidrios.

103

5.-Colocar el soporte o empaque de hule (azul), prensando los dos vidrios.es importante que los pies del empaque queden hacia abajo. 6.-Presionar para que se ajuste bien los vidrios con el empaque. C.- Preparacin de la solucin de Persulfato de Amonio al 10 % ( 10 mg / 1 ml),

Preparar para cada semana de trabajo: a.-Utilizar una botella limpia de 80 ml b.-Agregar 80 ml de solucin Acrylamide/ bis-Acrylamide al 6% c.-Colocar 300 l de Persulfato al 10 % d.-Agregar 30 l de TEMED agitar y chorrear. 7.-Chorrear doblando los vidrios hacia un extremo y rpidamente para evitar la gelificacion de la Acrylamide 8.-Colocar el espaciador (Peine), en el centro del gel, aproximadamente hasta la mitad de los huecos, dentro de la lamina del mismo, y ajustarla con prensas (Cuatro), para una mejor formacin del pozo 9.-Dejar polimerizar el gel por lo menos una hora.

104

ANEXO 12 Preparacin de la cmara de electroforesis, desnaturalizacin y revelado del gel de polyacrilamida 1.-Colocar los vidrios con todo y empaque en una cubeta, se lava con agua caliente para sacar el exceso de Urea, limpiando cuidadosamente los bordes y extremos. 2.-Se desprende el empaque de hule y se lava. 3.-Luego con una toalla en la mesa se seca cuidadosamente los vidrios por ambos lados. 4.-Colocar los vidrios en la cmara, revisando previamente que la gua de hule tenga un poco de Silicona y se ajusta el vidrio. Nota.- Importante cerrar la llave que sirve para drenar la cmara ubicada a mano derecha. 5.-Agregar Buffer TBE 1X (a partir del TBE 10X), aproximadamente 500 ml para cada contenedor. Revisar que no existan fugas. 6.-Extraer el separador (peine), y encender la fuente de poder, con el siguiente ajuste previo. - Volts al mximo - mA al mximo 3000 Volts 300 mA

- Watts a 50 para la migracin y para el calentamiento previo a 70 watts. Nota.-Se deben verificar la presencia de burbujas y mantenerse el paso previo de calentamiento por espacio de 15 a 20 minutos. Durante este lapso utilizando una jeringuilla se toma parte del buffer y extrae la urea remanente dentro del pozo (Dos o tres veces). Importante.-El carbonato de sodio debe prepararse con mucha anterioridad para que permanezca fri para el proceso de revelado. - 60 gr. de carbonato de sodio en dos litros de agua desionizada y destilada. Desnaturalizacin ( Termociclador GENE AMP PCR System 9700) Programa denaturalizacin: 940 C 720 C por dos minutos indefinidamente

Este paso se realiza inmediatamente antes de colocar las muestras en el gel de Acrylamide. 7.- Lavar para eliminar el exceso de Urea con una jeringa antes de colocar el peine. 8.- Colocar el peine con las puntas hacia abajo, cuidadosamente teniendo cuidado de que apenas toque el gel de Acrylamida. 9.- Ajustar la potencia de la fuente ded poder a 50 watts.

105

10.- Retirar las muestras del Termociclador cuando estn a 72 0 C. 11.- Colocar la fuente de poder en Stop para colocar las muestras en el gel de polyacrilamida. 12.-En los extremos del gel colocar colorante AFLP. 13.-Colocar aproximadamente 7 a 8 ul por reaccin en cada pozo e inmediatamente se presiona Start (Encendido), a 50 watts. 14.-Apagar la fuente de poder hasta que el azul de bromo fenol salga completamente del gel (1:45 a 2:00 horas aproximadamente). 15.-Abrir la llave para drenar la cmara colocada en su extremo inferior derecho, posteriormente retirar el peine y luego sacar los vidrios de la cmara. 16.-Colocar los vidrios sobre la mesa con el extremo corto hacia abajo, retirar los espaciadores y luego se separan utilizando para el efecto una esptula insertndola en uno de los extremos de los vidrios. Revelado del gel de polyacrilamida 17.-Fijacin con cido actico al 10%.- para lo cual se coloca el vidrio pequeo dentro de una cubeta en la cual se adiciona un litro de la solucin antes indicada, para luego agitar durante 20 minutos a 95 rpm en el agitador orbital. 18.-Preparar tres cubetas con un litro de agua desionizada y destilada cada una. 19.-Terminada la fijacin se coloca el gel por el espacio de 2 a 3 minutos en cada una de las cubetas removiendo constantemente (para remover el exceso de cido actico). Nota.-El cido actico usado en la fijacin se recoge en un recipiente para luego utilizarlo para fijar el gel despus de la tincin con Plata. 20.-Preparacin de la solucin de Nitrato de Plata (AgNo3 ) al 1 %: a.- Un gramo de Nitrato de Plata b.- 1.5 ml de Formaldehdo c.- Un litro de H2O desionizada y destilada. 21.-Colocar el gel en una cubeta donde se agrega la solucin de Nitrato de Plata al 1 % y agitar a 85 rpm por el espacio de una hora en un agitador orbital. 22.-Lavar el gel en agua desionizada y destilada por 3 segundos (muy rpidamente). 23.-Revelar con Carbonato de Sodio, 30 gr. por litro (Preparado con anticipacin). Agregarle a los dos litros de Carbonato de Sodio, 400 l de Tiosulfato de sodio la misma que se encuentra a 1.5 % (Na2S2O3, 5H2O), tambin 3 ml de Formaldehdo al 37 % . Esta mezcla se realiza justo antes de utilizar el carbonato de Sodio. 24.-Repartir los dos litros en dos cubetas y luego de colocar el gel se agita suavemente hasta que empiezan a notarse las bandas, luego se transfiere a la segunda cubeta para terminar la coloracin.

106

25.-Una vez revelada la totalidad de bandas se agrega el cido actico al 10 % para fijar la coloracin obtenida en las bandas. 26.-Realizar dos lavados en agua desionizada y destilada para concluir el proceso de revelado. 27.-Finalmente se recoge la solucin de nitrato de plata y se agrega 10 gr. de cloruro de sodio y se deja precipitar.

107

Distribucin de los porcentajes por lnea de arroz de las

ANEXO 13

caractersticas cualitativas

Lneas
Caractersticas X2 1 3 5 X3 1 3 5 7 9 X4 1 3 5 X5 0 3 5 7 9 X6 1 2 3 4 5 X7 1 3 5 X10 1 3 5 1 100 32.5 47.5 20. 100 100 100 100 100 2 100 42.5 25. 27.5 2.5 2.5 35. 65. 100 35. 65. 100 100 3 100 42.5 22.5 27.5 5. 2.5 100 15. 65. 20 100.00 100 100 4 75 22,5 2,5 40 35 22,5 2,5 32,5 67,5 70 5 2,5 17,5 5 40 20 37,5 2,5 32,5 67,5 15 85 5 71,8 28,2 45 25 30 22,5 77,5 35 65 22,5 7,5 12,5 52,5 5 2,5 97,5 2,5 97,5 6 100 22,5 30 42,5 5 100 100 100 100 100 7 100 35 47,5 12,5 5 100 100 100 100 100 8 100 45 40 10 5 100 100 100 100 100 9 100 55 32,5 12,5 100 100 100 100 100 10 100 355 32 22,5 7,5 2,5 100 100 100 100 100 11 100 72,5 22,5 5 100 100 100 100 100 12 100 52,5 42,5 5 100 100 100 100 100 13 100 40 35 15 7,5 2,5 100 100 100 100 100 14 100 37,5 2,5 42,5 12,5 5 100 100 100 100 100 15 100 41 38 15,5 5,5 15 85 100 22,5 32,5 45 100 100 16 100 35 45 17,5 2,5 100 100 100 100 100 -

108

Cntinuacin...ANEXO 13
Caractersticas
X2 1 3 5 X3 1 3 5 7 9 X4 1 3 5 X5 0 3 5 7 9 X6 1 2 3 4 5 X7 1 3 5 X10 1 3 5 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 95 5 100 100 100 22,5 77,5 47,5 52,5 95 5 100 100 100 100 100 15 85 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 22,5 77,5 47,5 52,5 95 5 100 100 100 100 100 17,5 82,5 100 100 100 100 100 25 50 22,5 2,5 32,5 47,5 17,5 2,5 45 32,5 20 2,5 40 40 15 5 45 32,5 17,5 5 46,5 38,5 12,4 2,6 62,5 27,5 5 5 42,5 40 17,5 52,5 35 12,5 65,7 31,4 2,9 70 2,5 20 5 2,5 85 12,5 2,5 100 57,5 30 12,5 46,1 33,3 17,9 2,7 37,5 52,5 10 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 17 18 19 20 21 22 23 Lneas 24 25 26 27 28 29 30 31 32

109

Continuacin...ANEXO 13
Lneas 40 100 32,5 42,5 20 5 100 100 100 100 100 -

Caractersticas
X2 1 3 5 X3 1 3 5 7 9 X4 1 3 5 X5 0 3 5 7 9 X6 1 2 3 4 5 X7 1 3 5 X10 1 3 5

33 100 37,2 42,8 20 100 100 100 100 100 -

34 100 25 27,5 30 17,5 100 100 100 100 100 -

35 100 20 32,5 40 5 2,5 100 100 100 100 100 -

36 100 10 47,5 35 7,5 100 100 100 100 100 -

37 100 20 45 32,5 2,5 100 100 100 100 100 -

38 12,5 87,5 10 22,5 65 2,5 100 100 100 100 100 -

39 100 5 95 100 100 100 100 100 -

41

42 100 42,5 45 10 2,5 100 100 100 100 100 -

43 100 52,5 35 12,5 100 100 100 100 100 -

44 100 22,5 32,5 42,5 2,5 100 100 100 100 100 -

45 100 37,5 50 12,5 100 100 100 100 100 -

46 100 15 50 32,5 2,5 100 100 100 100 100 -

47 100 35 52,5 7,5 5 100 100 100 100 100 -

48 100 32,5 47,5 20 100 100 100 100 100 -

100 42,5 45 10 2,5 100 100 100 100 100 -

110

Continuacin...ANEXO 13
Lneas 53 100 20 65 12,5 2,5 100 100 100 100 100 -

Caractersticas
X2 1 3 5 X3 1 3 5 7 9 X4 1 3 5 X5 0 3 5 7 9 X6 1 2 3 4 5 X7 1 3 5 X10 1 3 5

49 100 12,5 52,5 32,5 2,5 100 100 100 100 100

50 100 32,5 57,5 10 100 100 100 100 100 -

51 100 35 47,5 17,5 100 100 100 100 100 -

52 100 25 60 12,5 2,5 100 100 100 100 100 -

54 100 77,5 5 17,5 100 100 100 100 100 -

55 100 7,5 80 12,5 100 100 100 100 100

56 100 17,5 7,5 70 5 100 100 100 100 100

57 100 42,5 40 15 2,5 100 100 100 100 100 -

111

Continuacin...ANEXO 13

Caractersticas Caractersticas X11 X11 0 01 13 35 57 79 91 1 X14 11 2 X14 3 2 37 3 38 37 39 38 40 39 42 40 3 4 X15 42 431 2 X15 X16 1 20 1 X16 3 0 X17 11 32 X17 3 14 X18 2 31 42 X19 X18 11 2

17

18

19

20

21

6 -

22

Lneas Lneas
8 -

23

24

9 -

25

10 -

26

11

27

12 -

28

13 -

29

14 -

30

15 -

31

16 -

32

100- - - - - -

100.00

100 100
-

- - - -100

100- - - - - -

100

- -100 100- - -

100 - - -65. - - -

35.

-100
-

100 0 10
-

- -1 0 0 - - - -

100 ---2 0 -- -

80

-5 2,5 100 62,5 -12,5 17,5

100 --- 70 ---

30

100 -

100 100
-

-20 10 42,5 --5 22,5

---100 100 --100 100 ---

100 ----100 ---100 100

---100 -100 --100 100

---100 100 ---100 --100

---100 100 --100 -100 --

100 -----100 -100 ----

--1-0 0 --100 -100 100 ---

-----100 100 --100 100

-----100 100 --100 100

---1-0 0 100 --100 --1-0 0

100 --100 ---100 100 ----

100 -

100 -

100 -

100 -

100 -

1000 10
-

1-0 0 -

100 -

100 -

1-0 0 -

100 -

100 -100 100 100 - 100- -100 -100 100100 -

100 -100 100 100 - 100- -100 -100 100100 -

100 -1 0 0 100 - 100 0 10 - -1 0 0 -1 0 0 100 100 -

100 100 100 100 - 100 --1 0 0 -1 0 0 100 100 -

100 100 100 95 -5 100 -100 100 -

100 100 100 --100 100 -100

100 -

100 100 100 -100 0 10 -100 100 -

100 100 100 --100 100

100 -

100 100 100 -100 100 -100 100 -

100 100 100 -100 100 -100 100 -

100 1-0 0 100 100 -17,5 -100 82,5

1-0 0 -

100 1-0 0 100 100 -100 -1-0 0

1-0 0 -

100 100 100 100 ---100 100

100 -

100 100 100 100 ---100 100

100 -

100 1-0 0 100 100 -100 -1-0 0

1-0 0 -

100 100 100 100 -100 -100 100 -

2 1 2

100 100 -

100 100 -

100 100 -

112

100 100 -

100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

100 100 -

X19

Continuacin...ANEXO 13

Lneas
Caractersticas X20 X11 1
33

2
34

3
35

4
36

5
37

6
38

7
39

Caractersticas
1 0 2 1 3 3 5 1 7 2 9 11 1 2 2 3 3
37 1 38 2 39 3 40 42 1 43 2 3 1 4 2

Lneas 40

9
41

10
42

11
43

12
44

13
45

14
46

15
47

16
48

X21

X22
X14

X23

X24
X15

X16 X27 0 0 1 1 3 3 5 7 1
2 1 3 2 4 3 5 1 7 2 1 2

100 100 100 100 100 100 100 100 95 100 5 95 100 5 100
***** -

100 100 100 100 100 100 90 10 100 97.5 100 2.2 100 95 5 100
100 -

100 100.01 100 100.01 100.01 100 100 100 100 100 100 100. 100
100 -

100 100 100 100 100 100 65 10 1250 0 1410 0 25,6 33,4 100 41 25,6 33,4 100 100 -

85 15 100 100 100 100 100 12,5 77,5 100 10 38,5 100 38,5 23 100 38,5 38,5 23 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 50 100 45 5 100 50 45 5 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 60 100 40 100 60 40 - 113 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 17,9 100 38,4 43,7 100 20,5 38,5 41 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 35,9 100 35,9 28,2 100 33,4 35,9 30,7 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 7,5 100 62,5 30 100 7,5 62,5 2,5 27,5 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 97,5 100 2,5 100 97,5 2,5 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 5 100 95 100 -5 95 100
100 -

100 100 75 25 100 100 100 100 100 87 100 8 5 100 82 12,8 5,2 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
100 -

100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100
100 -

100 100 97,5 2,5 100 100 100 100 100 90 100 10 100 90 10 100
100 -

X17

X28

X18

X19

Continuacin...ANEXO 13

Caractersticas Caractersticas Caractersticas

X11 0 X2 X20 1 2 3 X21 X21 1 2 X22 X 2 2X 1 4 1 2 3 X23 X23 1 2 3 X24 X24 X15 1 2 X16 3 X27 4 X27 0 X17 1 3 5 X28 7 X28 X18 1 2 3 X19 5 7 0 1 1 2 3 3 5 7 1 9 2 11

Lneas Lneas 33 34 35 36 37 38 39 Lneas 40 41 17 4 9 18 5 0 1 9 5 1 20 5 2 21 5 3 22 5 4 23 5 5 24 5 6 25 5 7 26

100 100 100 100 100 1 0 0 - - 100 - - 100 - - 100 - - 1 0 0 - - - - - 100 - - - 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 - 100 - 100 - 100 - 100 - - - 100 - - 100 - - 100 100 100 - - 100 100 - - - - 100 100 100 - - 100 100 - - - - 100 100 100 - - 100 - - - 100 100 - - 100 100 100 100 100 100 - 1 0 0 - - -100 100 - 100 100 100 100 100 - - 100 1 0 0 -100 15 - - 8,6 52,5 - 54,3 30 100- 37,1 2,5 - - 100 - 22,9 15 - - - 40 52,5100- 37,1 32,5100 -

42

27

43

28

44

29

45

30

46

31

47

32

48

100 100 100 100 100 100 100 100 100 - 17,5 - 100 - 82,5 - 100 - 100 100 15 85 100 - 100 100 - 100 100 - 17,5 82,5 2,5 97,5 67,6 - 32,4 2,5 - 67,6 97,5 - 32,4 100 100 100 100 10 90 10 90 - 100 100 100 100 100 100 - 100 100 100 79,5 17,9 2,6 100 82,5 15 2,5 100 100 100 100 100 100 - 100 100 95 47,4 5 50 2,6 95 47,4 5 50 2,6 100 100 100 100 100 100 100 12,5 87,5 94,9 51,3 5,1 46,6 2,1 74,4 51,3 - 25,6 46,1 2,6 100 100 100 100 100 100 100 100 10 100 87,5 - 2,5 10 100 - 87,5 - 2,5 100 100 100 100 100 100 100 100 72,5 97,5 27,5 2,5 57,5 97,5 - 42,5 2,5 -

1 2 2 3 3 37 38 1 39 2 40 423 43 1 1 2 2 3 4
0 1 0 3 1 3 1 5 2 7 3 4 1 2 1 3 2 5 7 1

100 100 100 100 100 100 100 - 100 - 100 - 100 - 1 0 0 - 100 - 100 - 100 - - - - - - - 100 100 100 100 100 - 100 - 100 - 100 - 100 -100 100 100 100 - 100 - - 100 - - 100 - - 1 0 0 - - 100 - - 100 - - - - 100 100 100 100 100 100 100 100 100 - 100 - 22,5 - 100 - 100 100 100 100 100 100 100 100 100 - 77,5 - - - - - 100 - - 100 - - - - - 1 0 0 - 100 - 100 - 100 - 100 - 100 - 100 - 100 -42,5 - 100 -1 0 0 -97,5 - 7,5 -100 1 0 0 - - 100 -57,5 7 5 - - 100 - - 97,5 - 2,5 17,5 - 9 0 2 0 - - - 25 - - 2,5 - 62,5 2,5 47,5 - 1 0 0- - 100- - 100- - 100- - 100 2 0 100 32,51 0 0 - - - - - - - - - - - - - - 100 47,5 100 100 97,5 7,5 -100 - 100 - 75 - 100 - 82,5 - 12,5 - 2 0 100 114 - - -52,5 1 5 - - - - 15 - 2,5 - -92,5 - - - 1 0 0- - 100- - 100- - 100- 2,5 100 67,5100 47,51 0 0 - - - - 1 0 0 - 100 - 100 - 100 - 100 2 0 100 32,51 0 0

100 100 - - 100 -100 100 100 100 - - 100 100 -100 21 - 42,1 36,9100- - - -100 21 - - 42,110036,9 - 100

Continuacin...ANEXO 13
Lneas 53

Caractersticas
X20 1 2 3 X21 1 2 X22 1 2 3 X23 1 2 3 X24 1 2 3 4 X27 0 1 3 5 7 X28 1 2 3 5 7

49

50

51

52

54

55

56

57

100 100 100 100 100 100 100 -

100 100 100 100 100 2,5 97,5 2,5 97,5 -

100 100 100 100 100 72,5 27,5 67,5 32,5 -

100 100 100 100 100 100 100 -

100 100 100 100 100 22,5 75 2,5 22,5 75 2,5 -

100 100 100 100 100 100 100 -

100 100 100 100 100 100 100 -

100 100 100 100 100 100 100 -

100 100 100 100 100 100 100 -

115

Continuacin...ANEXO 13

Lneas
Caractersticas X29 1 2 3 4 5 X30 1 2 X33 1 3 5 7 9 X34 1 3 5 7 9 X36 1 3 5 7 9 X37 1 3 5 7 X38 1 3 5 1 100 100 30 20 15 35 82.5 15 2.5 10 37.5 30 5 17.5 2,5 95 2,5 95 5 2 17.5 62.5 20.00 95. 5. 15. 47.5 32.5 5. 47.5 37.5 10. 5. 20. 37.5 37.5 2.5 2.5 47.5 52.5 7.50 87.5 5. 3 2,6 84.6 12.8 100. 15.4 20.5 30.8 33.3 20.5 64.1 10.3 5.1 14,4 51.3 23.1 5,1 5,1 94.9 5,1 82,1 17.9 4 41 35,9 23,1 89,7 10,3 7,7 23,1 43,6 25,6 26 38,4 17,8 17,8 12,8 28,2 35,9 15,4 7,7 61,5 35,9 2,6 2,6 97,4 5 33,3 38,5 28,2 78,9 21,1 12,3 15,4 34,9 37,4 74,4 23,1 2,5 16,4 54,4 13,8 7,7 7,7 58,9 41 97,4 2,6 6 100 100 30 20 32,5 17,5 62,5 32,5 2,5 2,5 17,5 50 27,5 5 100 55 45 7 5 95 100 22,5 52,5 22,5 2,5 7,5 70 7,5 15 25 42,5 20 12,5 80 20 27,5 72,5 8 64,1 35,9 100 2,56 10,2 23,1 64,1 25,6 61,5 5,2 7,7 30,7 41 23,1 2,6 2,6 94,9 5,1 5,1 94,9 9 2,6 69,2 28,2 97,4 2,6 5,1 7,7 35,9 51,3 25,6 71,8 2,56 7,7 61,5 7,7 5,3 17,8 97,4 2,6 5,1 94,9 10 52,5 47,5 97,5 2,5 7,5 92,5 65 30 5 5 42,5 32,5 15 5 97,5 2,5 100 11 2,5 97,5 47,5 52,5 10 27,5 42,5 20 70 30 32,5 30 22,5 7,5 7,5 70 30 7,5 92,5 12 12,5 87,5 100 5 20 55 20 17,5 67,5 2,5 12,5 72,5 27,5 97,5 2,5 40 60 13 97,4 2,6 74,4 25,6 7,7 53,8 38,5 5,2 30,7 10,3 53,8 15,4 51,3 30,7 2,56 100 2,6 97,4 14 100 62,5 37,5 42,5 57,5 5 35 17,5 42,5 22,5 60 15 2,5 95 5 97,5 2,5 15 100 5 95 2,5 62,5 32,5 2,5 2,5 50 17,5 30 15 72,5 10 2,5 92,5 7,5 100 16 100 100 55 40 5 72,5 12,5 15 57,5 42,5 95 5 100 -

116

Continuacin...ANEXO 13
Caractersticas
X29 1 2 3 4 5 X30 1 2 X33 1 3 5 7 9 X34 1 3 5 7 9 X36 1 3 5 7 9 X37 1 3 5 7 X38 1 3 5 53 47 67,5 32,5 100 58,9 41,1 17,5 82,5 15 85 15 85 7,9 92,1 100 5,7 94,3 100 100 100 100 100 5 95 100 100 100 100 97,5 2,5 97,5 2,5 100 97,4 2,6 95 5 97,1 2,9 100 100 100 97,4 2,6 97,5 2,5 100 52,5 37,5 10 72,5 22,5 5 40 22,5 22,5 2,5 12,5 58,9 20,5 7,7 7,7 5,2 25 42,5 32,5 22,5 40 25 10 2,5 10 60 17,5 10 2,5 13,1 31,6 42,1 7,9 5,3 5 35 47,5 12,5 11,4 28,6 42,8 14,5 2,7 24,3 64,9 10,8 5,3 46,2 33,3 12,8 2,4 7,9 50 26,3 15,8 12,8 46,2 28,2 7,7 5,1 57,5 27,5 10 5 55 32,5 12,5 15 72,5 2,5 10 37,5 47,5 15 25 70 2,5 2,5 48,7 48,7 2,6 20 62,5 10 7,5 2,5 62,5 12,5 22,5 82,5 17,5 34,2 55,2 7,9 2,7 57,5 40 2,5 37,1 54,3 8,6 60,5 39,5 64,5 35,5 65,8 2,6 29 2,6 76,9 20,5 2,6 70 27,5 2,5 65 27,5 7,5 2,5 85 12,5 20 52,5 27,5 5 12,5 67,5 12,5 2,5 10,2 51,3 23,1 15,3 12,5 75 12,5 10 32,5 40 17,5 7,5 30 52,5 10 7,9 31,9 36,8 23,4 12,5 22,5 42,5 22,5 5,8 66,6 16,2 11,4 5,27 2,63 15,8 76,3 5,1 5,1 2,6 87,2 21 21 15,8 42,2 2,6 12,8 30,8 53,8 17,5 62,5 20 2,5 72,5 15 10 100 95 5 87,5 12,5 100 100 87,5 12,5 87,5 12,5 100 100 85,7 14,3 100 100 100 100 100 100 100 100 15 60 25 30,8 69,2 37,5 60 2,5 100 70 30 97,4 2,6 2,5 55 42,5 14,3 74,3 11,4 13,5 46 40,5 5,2 25,6 69,2 2,6 2,7 94,7 71,8 28,2 100 20 80 17 18 19 20 21 22 23 Lneas 24 25 26 27 28 29 30 31 32

Continuacin...ANEXO 13

117

Caractersticas
X29 1 2 3 4 5 X30 1 2 X33 1 3 5 7 9 X34 1 3 5 7 9 X36 1 3 5 7 9 X37 1 3 5 7 X38 1 3 5

33 100 100 11,4 31,5 57,1 5,7 8,7 2,8 82,8 74,3 25,7 91,4 8,6 100 -

34 100 100 72,5 22,5 5 2,5 50 12,5 35 57,5 40 2,5 100 17,5 77,5 5

35 100 100 2,5 25 62,5 10 5 45 20 30 60 32,5 7,5 47,8 52,2 100 -

36 100 100 2,5 35 57,5 5 40 57,5 2,5 92,5 7,5 25 75 97,5 2,5

37 100 100 2,5 80 17,5 2,5 47,5 10 40 95 5 80 20 65 35 -

38 100 100 82,5 17,5 25 57,5 7,5 10 65 35 87,5 12,5 87,5 12,5 -

39 100 100 40 55 5 15 70 12,5 2,5 75 17,5 7,5 25 75 50 50 -

Lneas 40 97,5 2,5 87,5 12,5 52,5 35 12,5 57,5 42,5 37,5 47,5 15 100 2,5 97,5

41

42 100 100 5 85 10 15 40 5 40 97,5 2,5 100 100 -

43 100 100 57,5 32,5 10 5 40 10 45 65 32,5 2,5 97,5 2,5 2,5 97,5 -

44 100 100 40 52,5 7,5 60 37,5 2,5 90 10 87,5 12,5 100

45 100 100 20 27,5 52,5 35 17,5 47,5 82,5 17,5 97,5 2,5 100 -

46 100 100 56,4 43,6 58,9 33,3 5,1 2,7 74,3 17,9 7,8 100 97,4 2,56

47 100 97,5 2,5 47,5 37,5 15 2,5 25 22,5 50 72,5 25 2,5 87,5 12,5 7,5 92,5 -

48 100 100 70 22,5 7,5 7,5 62,5 5 25 82,5 15 2,5 87,5 12,5 42,5 57,5 -

100 100 65 17,5 17,5 92,5 5 2,5 70 27,5 2,5 100 45 55

118

Caractersticas
X29 1 2 3 4 5 X30 1 2 X33 1 3 5 7 9 X34 1 3 5 7 9 X36 1 3 5 7 9 X37 1 3 5 7 X38 1 3 5 80 20 70 30 -

49 100 100 2,5 50 30 17,5 72,5 20 7,5 -

50 100 100 87,5 12,5 77,5 17,5 5 70 30 100 97,5 2,5 -

51 100 100 65 32,5 2,5 20 55 7,5 17,5 85 12,5 2,5 90 10 2,5 97,5 -

52 100 100 60 25 15 20 2,5 77,5 97,4 2,6 100 37,5 62,5 -

53 12,5 87,5 100 2,5 70 27,5 5 95 55 42,5 2,5 87,5 12,5 2,5 97,5 -

54 100 100 2,5 40 35 22,5 2,5 85 7,5 5 72,5 22,5 2,5 2,5 100 75 25 -

55 100 100 52,5 37,5 10 17,5 17,5 20 45 77,5 20 2,5 100 85 15 -

56 100 100 40 52,5 7,5 35 55 2,5 7,5 57,5 32,5 10 100 10 90

57 2,5 97,5 100 67,5 17,5 15 15 17,5 67,5 52,5 45 2,5 97,5 2,5 37,5 62,5 -

27,5 72,5 -

119

120

121

122

ANEXO 14

Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de los das a floracin de las 57 lneas de arroz.
Lnea 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 Minimo 102.00 104.00 99.00 97.00 88.00 90.00 92.00 97.00 95.00 102.00 83.00 84.00 88.00 90.00 84.00 81.00 84.00 82.00 82.00 79.00 84.00 90.00 94.00 80.00 97.00 92.00 99.00 96.00 96.00 88.00 83.00 72.00 71.00 70.00 61.00 74.00 71.00 73.00 65.00 78.00 78.00 78.00 82.00 66.00 71.00 68.00 77.00 72.00 67.00 83.00 75.00 70.00 78.00 64.00 65.00 70.00 74.00 Mximo 108.00 116.00 112.00 114.00 114.00 105.00 105.00 108.00 110.00 111.00 97.00 100.00 105.00 101.00 102.00 98.00 96.00 93.00 101.00 100.00 102.00 105.00 105.00 105.00 105.00 105.00 113.00 106.00 116.00 116.00 102.00 94.00 84.00 79.00 73.00 85.00 85.00 86.00 81.00 87.00 91.00 91.00 98.00 83.00 82.00 88.00 92.00 92.00 79.00 94.00 98.00 79.00 95.00 71.00 70.00 90.00 85.00 Promedio 104.73 109.65 103.95 103.88 100.40 95.53 98.78 102.95 100.78 104.60 90.58 89.50 96.53 93.90 90.65 86.55 89.05 88.60 92.15 88.25 91.15 97.70 100.50 98.78 101.18 98.60 103.55 103.55 104.65 104.85 91.68 80.08 76.17 75.03 65.33 79.60 75.75 78.65 70.58 81.78 84.38 84.43 88.75 73.80 74.70 78.63 84.58 85.30 71.38 86.88 79.60 75.05 83.83 67.63 67.88 78.45 79.78 Des. Est. 1.45 2.82 3.19 3.15 6.17 3.49 4.00 3.16 4.29 1.89 4.11 4.08 5.04 3.11 4.52 2.78 3.47 2.89 5.87 6.25 5.69 4.40 3.82 7.15 2.51 4.96 2.12 1.71 4.81 5.66 5.03 5.16 3.20 2.21 2.64 3.40 3.14 4.22 4.36 2.26 3.80 3.70 5.14 5.59 2.77 5.56 3.85 4.93 3.51 3.28 6.74 3.00 5.35 1.44 1.07 4.50 3.11 C. Var. 1.38 2.57 3.07 3.03 6.15 3.66 4.05 3.07 4.25 1.81 4.54 4.56 5.22 3.31 4.99 3.21 3.90 3.26 6.37 7.08 6.24 4.51 3.80 7.24 2.48 5.03 2.05 1.65 4.60 5.40 5.48 6.45 4.21 2.95 4.05 4.27 4.14 5.37 6.18 2.76 4.50 4.38 5.79 7.58 3.70 7.07 4.55 5.78 4.91 3.78 8.46 4.00 6.39 2.14 1.57 5.74 3.90

123

ANEXO 15

Valores mnimos, mximos, promedio,desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la longitud de la lmina de la hoja bandera de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

24.60 24.30 22.70 21.30 17.50 26.20 15.20 22.70 14.50 20.60 19.20 20.00 19.60 25.40 17.60 19.20 13.00 18.10 21.90 15.20 23.30 17.20 20.00 19.50 22.50 19.50 21.30 25.00 27.70 24.70 26.90 20.20 20.50 23.90 19.80 22.40 25.00 23.00 21.00 24.60 28.00 20.00 21.80 22.20 27.00 17.70 22.30 21.30 18.60 12.50 23.20 27.50 23.60 20.00 21.60 23.80 23.60

47.10 53.50 47.10 59.40 50.00 57.90 49.00 41.00 59.50 48.20 40.00 47.70 45.60 46.40 44.00 45.50 43.50 42.10 43.40 38.50 43.80 47.00 48.40 47.00 52.20 46.00 51.50 46.00 53.80 57.00 50.00 39.40 49.50 43.80 46.00 41.70 42.90 40.50 36.40 52.30 55.40 52.40 51.00 49.10 43.80 47.80 51.80 48.10 37.50 43.70 52.50 47.00 40.50 36.50 43.00 43.70 47.20

38.02 38.60 33.51 38.22 35.64 40.98 36.54 32.21 36.44 33.46 32.42 31.26 32.84 34.43 32.17 31.47 28.38 28.54 33.44 26.42 31.06 34.20 36.59 34.78 32.90 35.00 35.29 35.00 38.25 37.44 37.47 30.63 35.08 32.70 32.94 31.23 33.07 31.18 28.38 40.13 41.28 32.33 36.24 35.64 36.05 34.46 38.94 33.37 25.01 31.17 38.82 35.42 32.48 29.25 33.80 36.14 33.33

5.57 7.87 6.32 8.29 7.85 8.77 7.00 4.58 8.72 6.16 5.37 6.16 7.03 4.94 5.98 5.38 6.42 5.95 5.32 6.63 5.17 7.60 7.22 6.33 7.26 6.69 7.12 5.89 6.50 8.52 5.65 5.07 6.84 5.38 4.89 4.92 4.15 5.03 3.68 7.07 5.88 7.53 6.99 6.84 4.45 5.61 7.41 7.19 4.29 6.52 6.49 4.82 4.02 4.23 5.54 4.20 5.60

14.65 20.39 18.85 21.68 22.03 21.41 19.16 14.23 23.94 18.42 16.56 19.70 21.42 14.34 18.60 17.10 22.61 20.85 15.93 25.08 16.64 22.23 19.74 18.20 22.06 19.12 20.18 16.84 16.98 22.75 15.09 16.54 19.49 16.46 14.86 15.77 12.56 16.15 12.95 17.61 14.24 23.30 19.29 19.19 12.36 16.27 19.04 21.55 17.17 20.92 16.72 13.61 12.39 14.47 16.39 11.61 16.80

124

ANEXO 16

Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) del ancho de la lmina de la hoja bandera de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

1.00 1.10 1.00 1.00 1.00 0.90 1.00 1.10 0.80 1.00 1.10 1.20 0.90 1.00 1.00 1.00 1.30 0.90 1.10 1.20 1.10 1.20 1.00 1.10 1.10 1.10 1.10 1.00 0.90 1.00 1.10 1.00 0.90 1.00 0.90 0.70 1.00 1.00 1.00 1.00 0.90 1.00 1.10 0.90 1.00 0.90 1.00 0.30 0.70 0.70 1.00 0.30 0.80 0.60 0.10 0.90 1.10

2.00 2.00 1.60 1.90 1.70 1.50 1.90 1.80 1.90 1.06 1.60 1.80 1.70 1.70 1.90 1.90 1.90 2.00 1.70 2.00 2.00 2.00 1.90 1.70 1.80 1.70 1.70 1.60 1.60 1.60 1.70 2.00 1.60 1.80 1.70 1.90 1.70 1.80 1.60 1.60 2.00 1.90 2.00 1.50 1.50 1.50 1.70 1.60 3.00 2.00 1.70 1.40 1.80 1.20 1.60 1.40 1.80

1.57 1.38 1.36 1.39 1.38 1.22 1.51 1.35 1.39 1.32 1.31 1.47 1.33 1.42 1.40 1.57 1.63 1.61 1.46 1.57 1.56 1.42 1.47 1.41 1.37 1.36 1.34 1.35 1.31 1.33 1.42 1.38 1.25 1.43 1.24 1.18 1.40 1.38 1.22 1.31 1.37 1.50 1.50 1.20 1.29 1.37 1.43 1.32 1.14 1.58 1.36 1.11 1.13 1.04 1.25 1.13 1.47

0.22 0.18 0.16 0.24 0.17 0.13 0.20 0.15 0.19 0.15 0.12 0.17 0.20 0.16 0.20 0.15 0.16 0.24 0.14 0.21 0.17 0.19 0.20 0.13 0.15 0.15 0.14 0.14 0.15 0.18 0.17 0.23 0.17 0.21 0.19 0.24 0.17 0.20 0.17 0.14 0.25 0.20 0.25 0.17 0.14 0.13 0.17 0.24 0.46 0.26 0.17 0.19 0.18 0.14 0.25 0.12 0.21

14.29 13.16 11.99 16.93 12.07 10.62 13.21 10.85 13.59 11.75 8.94 11.51 14.75 11.06 13.98 9.77 9.65 14.87 9.79 13.13 11.09 13.17 13.58 9.12 11.16 10.88 10.13 10.31 11.65 13.71 12.26 17.02 13.82 14.62 15.25 20.40 11.89 14.70 14.29 10.87 18.09 13.28 16.34 14.03 10.87 9.52 12.18 18.11 40.66 16.25 12.33 17.02 15.93 13.40 20.05 10.81 14.01

125

ANEXO 17

Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar(Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la longitud de la lmina foliar de las 57 lneas de arroz.
Lnea Minimo Mximo Promedio Des. Est. C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

30.08 32.20 29.00 32.10 21.10 33.60 37.60 28.50 34.00 33.40 31.60 34.60 30.10 35.50 30.80 35.80 29.50 23.20 43.50 33.50 35.20 36.50 35.30 33.20 34.30 35.00 37.80 31.10 34.80 34.30 38.50 34.00 47.40 34.50 27.80 21.20 31.50 29.50 30.00 41.20 43.00 35.20 36.10 17.00 10.20 40.20 37.50 33.00 28.00 35.00 33.50 20.80 28.80 26.90 28.40 32.80 32.60

52.80 63.00 55.00 62.90 62.00 66.30 63.80 51.50 56.10 54.50 58.50 61.20 58.50 59.50 66.60 56.80 62.00 58.80 61.80 56.30 65.50 59.90 60.20 53.20 59.40 59.00 60.40 53.00 60.70 62.20 59.50 55.00 68.60 60.20 56.50 56.20 56.30 55.70 50.40 61.40 60.70 72.80 69.00 60.00 51.00 59.00 66.50 60.30 57.00 58.00 59.30 51.00 50.40 46.50 47.00 52.00 55.60

44.99 44.54 42.22 46.14 47.24 49.76 48.44 40.97 44.56 41.98 43.58 47.58 43.78 46.51 47.02 49.09 46.48 43.86 50.91 45.65 47.65 45.96 48.73 44.36 43.95 46.67 47.60 44.98 46.42 47.98 48.37 44.48 57.13 44.76 40.49 43.05 42.92 41.18 39.10 50.43 52.14 48.94 53.23 47.61 38.45 47.74 53.13 48.51 37.54 46.18 46.93 39.63 39.88 38.50 38.64 44.35 45.03

4.84 7.56 6.85 7.09 7.83 6.67 6.83 4.68 6.11 5.13 6.16 6.65 6.67 6.02 7.51 4.87 7.21 8.02 4.27 5.33 5.90 5.05 6.76 5.09 5.42 6.99 5.67 5.29 5.77 6.64 5.05 5.35 4.12 6.09 6.17 6.73 5.29 6.70 5.83 4.95 4.31 8.29 7.95 8.31 7.35 4.41 7.21 6.94 6.99 6.50 5.62 5.97 4.87 4.98 5.06 3.91 6.17

10.76 16.97 16.23 15.36 16.58 13.40 14.09 11.42 13.71 12.21 14.13 13.98 15.24 12.95 15.98 9.92 15.50 18.29 8.39 11.69 12.39 10.98 13.88 11.47 12.33 14.98 11.92 11.76 12.42 13.83 10.45 12.02 7.21 13.60 15.24 15.63 12.32 16.26 14.91 9.81 8.27 16.93 14.93 17.46 19.11 9.23 13.56 14.31 18.62 14.08 11.97 15.06 12.21 12.93 13.10 8.82 13.70

126

ANEXO 18 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la achura de la lmina foliar de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

1.10 1.00 0.90 0.90 0.90 0.90 0.90 1.00 1.10 0.90 0.80 1.00 0.70 0.80 0.50 0.50 0.90 0.80 0.80 0.90 0.90 0.80 1.00 1.10 1.00 1.00 1.00 1.00 0.80 0.90 0.60 0.60 0.70 0.40 0.60 0.50 0.70 0.70 0.50 0.50 0.80 0.60 0.70 0.40 0.60 0.80 0.70 0.50 0.70 1.00 0.70 0.50 0.50 0.50 0.60 0.60 0.80

1.80 1.80 1.40 1.70 1.50 1.60 1.90 1.60 1.50 1.40 1.40 1.60 1.50 1.50 1.60 1.50 1.70 1.70 1.50 1.80 1.50 1.90 1.80 1.60 1.50 1.60 1.50 1.60 1.40 1.50 1.40 1.50 1.70 1.70 1.20 1.90 1.30 1.40 1.20 1.50 1.80 1.80 1.90 1.20 1.30 1.70 1.50 1.60 1.30 1.70 1.90 1.20 1.20 1.00 1.30 1.00 1.50

1.42 1.24 1.15 1.19 1.17 1.11 1.27 1.20 1.24 1.22 1.12 1.29 1.07 1.13 1.18 1.15 1.31 1.28 1.23 1.33 1.22 1.22 1.34 1.28 1.27 1.23 1.20 1.20 1.14 1.19 1.11 1.10 1.03 1.13 0.95 0.93 0.99 1.03 0.99 0.97 1.12 1.23 1.17 0.91 0.98 1.07 1.15 1.09 0.94 1.32 1.08 0.81 0.88 0.82 0.96 0.78 1.23

0.19 0.17 0.12 0.20 0.15 0.16 0.21 0.11 0.09 0.15 0.14 0.14 0.15 0.16 0.25 0.21 0.18 0.19 0.14 0.20 0.16 0.19 0.20 0.15 0.15 0.11 0.14 0.15 0.15 0.15 0.23 0.21 0.19 0.24 0.17 0.24 0.14 0.17 0.15 0.17 0.22 0.27 0.25 0.18 0.15 0.19 0.18 0.24 0.19 0.15 0.28 0.16 0.16 0.11 0.21 0.11 0.19

13.58 13.79 10.75 16.59 13.21 14.68 16.96 9.29 7.15 12.04 12.75 11.15 13.96 13.93 21.49 18.01 13.61 15.20 11.68 15.03 12.88 15.55 14.90 11.53 12.01 9.17 11.79 12.20 13.43 12.25 21.03 19.50 18.42 21.16 17.97 26.09 13.95 16.93 15.37 18.11 19.34 22.25 21.52 20.19 15.28 18.03 15.48 21.88 20.53 11.75 25.70 19.88 18.66 13.58 22.10 14.54 15.32

127

ANEXO 19 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de los das a la madurez de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

132.00 136.00 129.00 130.00 119.00 125.00 127.00 132.00 130.00 132.00 118.00 119.00 118.00 120.00 106.00 111.00 114.00 112.00 117.00 114.00 119.00 125.00 128.00 100.00 132.00 127.00 134.00 131.00 131.00 123.00 118.00 107.00 103.00 100.00 92.00 104.00 101.00 103.00 95.00 118.00 117.00 111.00 112.00 101.00 101.00 99.00 103.00 103.00 97.00 113.00 105.00 103.00 113.00 96.00 101.00 105.00 109.00

138.00 148.00 142.00 141.00 140.00 140.00 140.00 143.00 145.00 141.00 132.00 135.00 135.00 131.00 132.00 120.00 126.00 123.00 136.00 135.00 137.00 140.00 139.00 139.00 140.00 140.00 148.00 141.00 151.00 151.00 131.00 129.00 128.00 109.00 104.00 115.00 115.00 116.00 111.00 127.00 126.00 124.00 128.00 118.00 112.00 119.00 123.00 123.00 109.00 124.00 128.00 114.00 130.00 108.00 115.00 123.00 120.00

134.75 141.78 135.13 136.00 131.26 130.40 133.75 137.93 135.93 134.95 125.70 124.50 126.56 123.65 120.03 116.30 119.05 118.60 127.15 123.25 126.18 132.70 134.50 131.93 136.53 133.60 138.55 138.54 139.65 139.80 125.40 115.08 108.46 105.03 96.40 109.60 105.79 108.60 100.80 121.73 121.65 117.43 118.75 108.90 104.73 109.60 114.43 116.18 101.35 116.00 109.60 109.70 118.78 101.00 109.08 112.80 114.28

1.50 2.77 3.35 2.84 5.70 3.61 3.97 3.15 4.17 2.24 4.16 4.08 5.04 2.92 5.37 2.09 3.47 2.89 5.87 6.25 5.66 4.40 3.82 8.83 2.61 4.96 2.12 1.73 4.81 5.67 3.89 5.16 3.17 2.21 2.59 3.40 3.16 4.27 4.30 2.30 2.66 3.70 5.14 5.50 2.80 5.56 4.76 4.93 3.53 3.28 6.74 3.65 5.39 2.39 3.57 3.72 3.11

1.11 1.95 2.48 2.09 4.34 2.77 2.97 2.28 3.06 1.66 3.31 3.28 3.98 2.36 4.47 1.80 2.92 2.44 4.62 5.07 4.48 3.32 2.84 6.69 1.91 3.71 1.53 1.25 3.45 4.05 3.10 4.48 2.93 2.11 2.69 3.10 2.99 3.93 4.26 1.89 2.18 3.15 4.33 5.05 2.67 5.08 4.16 4.25 3.49 2.83 6.15 3.32 4.54 2.36 3.27 3.30 2.71

128

ANEXO 20 Valores mnimos, mximos, promedio, varianza, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de altura de planta de las 57 lneas de arroz

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

89.00 94.00 94.00 102.00 90.00 102.00 90.00 92.00 94.00 99.00 97.00 94.00 96.00 102.00 103.00 97.00 105.00 108.00 106.00 103.00 104.00 97.00 97.00 100.00 93.00 98.00 102.00 105.00 105.00 97.00 94.00 90.00 90.00 89.00 84.00 93.00 85.00 87.00 84.00 94.00 97.00 100.00 95.00 86.00 87.00 95.00 96.00 81.00 97.00 104.00 100.00 82.00 88.00 78.00 86.00 90.00 92.00

133.00 123.00 133.00 149.00 135.00 131.00 119.00 134.00 132.00 130.00 117.00 112.00 127.00 127.00 125.00 128.00 135.00 133.00 136.00 130.00 132.00 120.00 132.00 132.00 131.00 124.00 140.00 146.00 136.00 130.00 127.00 125.00 128.00 111.00 112.00 121.00 108.00 117.00 110.00 123.00 127.00 125.00 124.00 122.00 112.00 122.00 123.00 124.00 120.00 126.00 127.00 109.00 112.00 103.00 113.00 115.00 124.00

118.73 111.23 115.80 121.51 114.08 116.33 105.20 113.40 110.18 116.21 109.05 103.48 110.64 113.68 114.65 109.68 119.03 118.35 121.80 111.80 118.65 107.48 116.40 116.90 115.00 112.97 122.45 124.28 117.79 115.95 111.70 106.33 104.46 101.05 93.48 107.98 95.80 99.45 98.63 111.58 111.95 109.88 109.23 104.78 97.08 110.72 107.75 101.73 102.53 113.88 112.90 94.20 101.08 88.45 98.45 102.95 107.35

8.96 7.52 8.29 11.07 9.33 6.91 6.88 8.29 8.86 6.84 5.62 4.98 6.83 6.20 6.43 6.96 5.35 5.50 7.40 6.87 6.58 5.28 7.97 8.26 8.73 5.97 7.97 8.71 6.80 9.73 7.76 8.20 8.78 5.34 5.73 7.23 5.12 7.26 6.39 6.71 6.55 5.93 6.97 9.67 7.19 5.69 6.51 8.07 7.75 3.83 6.66 6.05 5.51 5.48 5.87 6.40 7.27

7.54 6.76 7.16 9.11 8.18 5.94 6.54 7.31 8.04 5.88 5.15 4.81 6.17 5.46 5.61 6.34 4.49 4.65 6.08 6.14 5.55 4.91 6.84 7.06 7.59 5.28 6.51 7.00 5.77 8.39 6.95 7.71 8.40 5.29 6.13 6.70 5.34 7.30 6.48 6.01 5.85 5.40 6.38 9.23 7.40 5.14 6.04 7.93 7.56 3.36 5.90 6.42 5.45 6.19 5.96 6.22 6.77

129

ANEXO 21

Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de longitud de la semilla de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

0.90 0.80 0.80 0.80 0.80 0.90 0.80 0.70 0.80 0.80 1.00 0.70 1.00 0.90 0.80 0.80 0.80 0.80 0.90 0.80 0.80 0.80 0.90 0.90 0.90 0.80 0.90 0.80 0.90 0.90 0.70 0.80 0.80 0.70 0.80 1.00 0.80 0.80 0.80 0.90 0.80 0.70 0.80 0.80 0.80 0.80 0.50 0.80 0.80 0.70 0.80 0.90 0.70 0.90 0.80 0.70 0.80

1.00 1.00 1.00 1.10 1.10 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.10 1.00 1.10 1.00 1.10 1.00 1.10 1.00 1.00 1.10 1.10 1.00 1.00 1.00 1.10 1.00 0.90 1.00 1.00 1.00 1.10 1.00 1.10 1.10 1.10 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.10 1.00 1.00 1.00 1.10 1.00 1.00 1.10 1.00 1.00 1.10 1.00 1.00

0.96 0.94 0.96 0.99 0.99 0.94 0.95 0.93 0.93 0.93 1.00 0.92 1.00 0.99 0.98 0.90 0.98 0.95 1.05 0.97 0.98 0.96 0.98 0.97 0.99 0.95 0.95 0.92 0.95 0.94 0.84 0.92 0.94 0.83 0.97 1.00 0.95 0.94 0.97 0.93 0.97 0.92 0.94 0.96 0.92 0.87 0.94 0.93 0.98 0.92 0.91 0.99 0.94 0.99 1.00 0.87 0.93

0.05 0.05 0.06 0.07 0.05 0.05 0.07 0.07 0.06 0.06 0.00 0.10 0.00 0.04 0.07 0.07 0.07 0.06 0.06 0.05 0.08 0.05 0.04 0.06 0.04 0.06 0.05 0.05 0.06 0.05 0.06 0.06 0.06 0.07 0.08 0.00 0.08 0.07 0.07 0.05 0.05 0.10 0.08 0.05 0.05 0.06 0.09 0.05 0.06 0.09 0.05 0.05 0.07 0.03 0.06 0.08 0.06

5.17 5.80 5.77 6.65 5.29 5.23 7.17 7.90 6.11 6.59 0.00 10.44 0.00 3.67 7.50 7.31 6.75 6.28 5.29 5.59 8.19 5.74 4.13 6.03 3.83 5.87 5.33 5.81 5.85 5.19 7.19 6.72 5.88 8.33 8.16 0.00 8.28 7.17 6.86 5.09 5.43 10.55 8.60 5.68 5.61 7.78 9.27 5.55 6.47 9.97 5.28 5.01 7.93 3.39 6.79 9.35 5.97

130

ANEXO 22 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la anchura de la semilla de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

0.20 0.30 0.30 0.30 0.20 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.20 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.20 0.30 0.20 0.20 0.20 0.30 0.20 0.20 0.20 0.30 0.30 0.30 0.30 0.20 0.20 0.30 0.30 0.20 0.30 0.30 0.20 0.30 0.30 0.20 0.30 0.20 0.30

0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.40 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.40 0.30 0.30 0.40 0.30 0.30

0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.29 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.29 0.30 0.29 0.27 0.29 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.29 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.30 0.29 0.30

0.02 0.00 0.00 0.00 0.02 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.03 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.02 0.00 0.03 0.05 0.04 0.00 0.02 0.02 0.02 0.00 0.00 0.00 0.00 0.03 0.02 0.00 0.00 0.02 0.00 0.00 0.02 0.02 0.00 0.02 0.02 0.04 0.00

5.31 0.00 0.00 0.00 5.38 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 9.12 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 0.00 8.00 0.00 11.19 16.59 13.24 0.00 7.48 5.31 7.48 0.00 0.00 0.00 0.00 11.65 5.31 0.00 0.00 5.31 0.00 0.00 5.31 5.23 0.00 5.31 5.23 12.69 0.00

131

132

ANEXO 23 Valores mnimos, mximos, promedio, desviacin estndar (Des.Est.) y coeficiente de variacin (C.V.) de la longitud de la pancula de las 57 lneas de arroz.

Lnea

Minimo

Mximo

Promedio

Des. Est.

C. Var.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57

25.40 22.00 23.00 23.30 24.00 23.20 23.50 26.00 25.40 26.00 21.20 22.20 18.50 23.20 21.40 22.20 20.30 22.00 23.00 19.40 22.50 24.80 21.30 24.00 22.20 24.00 25.00 24.40 25.00 24.20 21.50 21.40 21.00 22.50 23.00 22.50 23.00 20.50 22.00 23.40 21.50 23.20 25.00 21.70 20.50 25.00 24.00 21.50 21.30 22.10 22.60 19.50 24.30 20.60 19.50 22.30 22.20

38.60 29.60 32.50 36.40 36.00 34.90 34.70 36.00 33.50 34.50 36.00 27.80 31.70 29.40 30.40 30.00 30.70 29.50 30.00 27.00 32.00 32.60 33.00 33.40 31.80 31.00 33.20 33.20 35.00 36.30 30.50 28.40 30.20 33.00 30.00 30.00 35.00 32.20 28.00 33.00 33.50 29.50 33.30 34.50 27.00 32.70 33.50 30.50 28.00 28.80 30.00 35.00 34.00 26.50 27.40 30.80 29.20

30.89 25.84 27.95 30.51 27.54 30.28 29.61 29.98 29.55 30.76 26.34 24.49 26.66 26.38 26.85 25.44 26.01 25.48 26.56 24.80 27.04 28.02 25.89 27.81 26.38 26.99 29.17 29.52 29.23 28.43 26.51 24.37 26.68 25.86 27.14 26.12 27.12 27.28 24.98 28.54 28.51 26.31 27.93 25.79 24.08 29.38 29.38 24.68 25.01 25.58 27.04 25.46 29.16 23.84 24.74 27.81 26.66

2.88 2.05 2.40 3.03 2.64 2.64 2.72 2.11 2.37 1.79 2.83 1.42 2.28 1.43 1.96 1.92 2.40 1.77 1.51 1.62 1.91 1.84 1.86 1.98 2.10 1.62 2.45 2.21 2.12 2.85 1.90 1.77 2.35 1.94 1.85 1.86 1.88 2.68 1.16 2.30 2.74 1.43 1.77 2.93 1.67 1.83 1.92 2.05 1.46 1.60 1.68 2.58 2.23 1.37 1.72 2.03 1.64

9.33 7.93 8.58 9.93 9.57 8.72 9.19 7.04 8.03 5.82 10.75 5.79 8.54 5.42 7.31 7.57 9.23 6.95 5.70 6.54 7.07 6.57 7.20 7.12 7.96 6.01 8.42 7.50 7.26 10.04 7.16 7.28 8.83 7.50 6.83 7.14 6.95 9.83 4.64 8.05 9.61 5.45 6.32 11.37 6.95 6.24 6.53 8.30 5.85 6.24 6.20 10.13 7.65 5.75 6.95 7.29 6.16

133

134

ANEXO 24 Evaluacin de la calidad molinera de 48 lneas avanzadas de mejoramiento, 5 progenitores y 4 variedades testigos
Lnea 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 G. Entero (gr.) 84,2 103 116,7 131,1 126,7 126,8 144,8 100,3 133,5 107,6 134,7 153,7 101,8 97,1 84,8 147,9 104,6 84,3 106,5 89,4 83,5 128,2 126,7 131 134,4 97,3 120,8 13,03 130,5 106,4 129,4 116 137,5 142,4 146 134,9 154,5 152,2 148,6 164,9 146,4 151,2 135,9 114,7 140,9 145,1 134,6 149,6 137,7 149,5 143,2 143 141,9 158,1 133,8 127,7 148,5 G. Entero (%) 33,68 41,2 46,68 52,44 50,68 50,72 57,92 40,12 53,4 43,04 53,88 61,48 40,72 38,84 33,92 59,16 41,84 33,72 42,6 35,76 33,4 51,28 50,68 52,4 53,76 38,92 48,32 52,12 52,2 42,56 51,76 46,4 55 56,96 58,4 53,96 61,8 60,88 59,44 65,96 58,56 60,48 54,36 45,88 56,36 58,04 53,84 59,84 55,08 59,8 57,28 57,2 56,76 63,24 53,52 51,08 59,4 G. Quebrado (gr.) 53,6 44,9 29,3 29,4 31,6 28 17,2 54,2 24,4 49,5 24,7 11,9 51 54,3 65,2 21,1 45,2 64,4 46,4 53,3 64 30,5 29,7 27,6 25,2 47,6 31,9 22,2 26,1 54,7 20,3 38,7 24,7 23,1 20,7 23,9 15,5 18,4 21 10 21,9 17,8 24,4 27,7 25,2 21 30,1 17,5 19,1 18,8 22,1 21,2 18,5 17,2 30,7 30,6 18,5 G.Quebrado (%) 21,44 17,96 11,72 11,76 12,64 11,2 6,88 21,68 9,76 19,8 9,88 4,76 20,4 21,72 26,08 8,44 18,08 25,76 18,56 21,32 25,6 12,2 11,88 11,04 10,08 19,04 12,76 8,88 10,44 21,88 8,12 15,48 9,88 9,24 8,28 9,56 6,2 7,36 8,4 4 8,76 7,12 9,8 11,08 10,08 8,4 12,04 7 7,64 7,52 8,84 8,48 7,4 6,88 12,28 12,24 7,4 G. Tiza (gr.) 0,2 0,1 0,1 0,3 0,1 0 0,3 0,1 0,4 0 0,2 0,1 0 0 0 0,2 0,1 0,1 0,1 0,1 0 0,1 0 0 0 0 0 0,2 0,1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0,1 0 0 0 0 0 0 0 0,1 0 0,1 0 0 0,1 0 0 0 G. Tiza (%) 2 .0 1 1 3 1 0 3 1 4 0 2 1 0 0 0 2 1 1 1 1 0 1 0 0 0 0 0 2 1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1 0 0 0 0 0 0 0 1 0 1 0 0 1 0 0 0 Arrocillo (gr.) 9,2 12 7,2 4,7 5 4,5 2,9 8,8 4,6 8,6 2,7 1,3 6,3 5,1 9 3,4 7,2 10 7,3 5,8 11,3 3,6 4 4,4 3,2 6 5,5 5,5 4,4 6,5 5,4 6,8 4,9 3,6 4,5 6,7 2,9 3,6 2,3 1,6 3,8 1,9 5,2 7,6 5,2 4,6 6,9 3,3 3,8 2,4 2,9 3,8 4 2,9 9,7 6,9 3 Arrocillo (%) 3,68 4,8 2,88 1,88 2 1,8 1,16 3,52 1,84 3,44 1,08 0,52 2,52 2,04 3,6 1,36 2,88 4 2,92 2,32 4,52 1,44 1,6 1,76 1,28 2,4 2,2 2,2 1,76 2,6 2,16 2,72 1,96 1,44 1,8 2,68 1,16 1,44 0,92 0,64 1,52 0,76 2,08 3,04 2,08 1,84 2,76 1,32 1,52 0,96 1,16 1,52 1,6 1,16 3,88 2,76 1,2 C. Blanco 5 5 2 3 3 2 3 2 1,4 1,4 4 1 2 1,2 2 1,2 2 4 3 5 3 4 3 3 3 3 4 4 4 3 1,2 2 1,4 1,2 1,2 1 1,2 1,2 1,2 1 1,2 1,6 1,6 1,4 2 1,2 2 1,4 1,4 2 2 1 1,4 1,2 1 1,2 1,2 Rendimiento (%) 58,8 63,96 61,28 66,08 65,32 63,72 65,96 65,32 65 66,28 64,84 66,76 63,64 62,6 63,6 68,96 62,8 63,48 64,08 59,4 63,52 64,92 64,16 65,2 65,12 60,36 63,28 63,2 64,4 67,04 62,04 64,6 66,84 67,64 68,48 66,2 69,16 69,68 68,76 70,6 68,84 68,36 66,24 60 68,52 68,28 68,64 68,16 64,24 68,28 67,28 67,2 65,76 71,28 69,68 66,08 68

135

ANEXO 25
Dispersin alcalina de 48 lneas avanzadas de mejoramiento, 5 progenitores y 4 variedades testigos
Dispersin Alcalina de 45 lineas avanzadas de mejoramiento y 12 progenitores.

N 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60

Tratamiento 1 IR-8 Colombia-1 Blue Bonnet 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 2 3 11 10 7 4 1 4 1 2 5 12 8 3 2 4 3 3 3 3 2 8 1 2 8 2 1 1 7 5 1

Dispersin 5 6

7 12

1 3 3 2 5 2

8 10 4 8 4 6 7 5 2

4 2

1 10 10 10 5 6

1 3 1 1 1 12 11 12 12 10 5 2

12 11 9

2 2 10 11 7 7 10 1 5 3 1 1 3 3 9 8 11 12 11 2

4 1

2 7 1 7 8 3 4

4 1 1

1 1 1

9 12 12 7

5 4 3 7 3 8 9 1 2 9 3 4 2 2 2 2 8 8 10 1 1

12 1 10 12

136

12

10 10

X 7 3 3,16 3,41 4 3,66 3,91 4,83 5 3,91 4,58 4,25 4,41 4 4 7 6,75 6,33 0,16 3,16 3,2 3,2 3,58 3,58 5 4,91 5 5 4,83 5,58 4,16 3,33 3,41 3,58 5,58 3,25 5 4,58 4,25 4,33 3,91 4 3,91 4,66 7 7 5,33 4,66 4,75 7 3,75 6,83 7 3,33 3,83 3,66 3,83 7 3,83 3,83

DESC. B A A / I A / I I I/A I/A I I/B I/A I / B,A I/A I/A I/A I/A B B / I B / I I/A A / I A / I A / I I/A A-I I I I I I I/B I A/B A / I A / I I/B A / I I/B I/A I I I/A I I/A I/A B B B/A I I B A / I,B B B A / I I/A I/A I/A B I/A I/A