Universidad de la Frontera Facultad de Medicina Dpto.

De ciencias

Laboratorio Numero 1 Glcidos

Integrantes: Sergio Marin Nicols Mellado A. Daniel Moller Bastian Obreque Profesor: Edoardo Tosti-Croce Fecha de entrega: 18/04/12

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Introduccin Las biomoleculas son de vital importancia para los distintos organismos existentes sobre la superficie terrestre; ya que cumplen una serie de funciones imprescindibles para su supervivencia. Dentro de las cuales se puede destacar la respiracin celular, el aporte energtico, la de estructura, etc. Una de los representantes de estas son los Hidratos de Carbono; los que comnmente llamamos azucares; estos se forman a partir de la unin de atamos de hidrogeno, carbono y oxigeno; adems se pueden unir entre si, por medio de enlaces glucosidicos para dar origen a una diversa variedad de estos. Los hidratos de carbono son la principal fuente de energa de ah su importancia; tambin son parte de las estructuras celulares, como por ejemplo: la pared celular en las plantas y la membrana plasmtica en las clulas. Tambin estos pueden almacenarse para prximos requerimientos energticos por parte del organismo, existiendo distintas formas para su almacenaje, tales como es el almidn en la clula eucarionte vegetal y glucogeno en la clula eucarionte animal los cuales son polmeros formado por el mas comn de los glcidos, la glucosa; este monmero es uno de lo mas importantes ya que participa en el proceso de la respiracin celular, siento una pieza fundamental dentro de este ya que es el combustible que la clula empleara para la formacin de energa, la que es destinada para las distintas necesidades celulares. Se hace necesario hacer mencin sobre la participacin de la glucosa en otros procesos, como por ejemplo: la fotosntesis, en la cual la molcula resultante de este proceso es glucosa, la que posteriormente servir a la clula eucarionte vegetal para formar otras biomoleculas y/o almacenarla como almidn. Es as como esta cadena va tomando forma, ya que como dijimos anteriormente son vitales para obtener energa y por ende estn en nuestra dieta, presentes en los distintos alimentos que consumimos ya sea en sus formas mas simples hasta las mas complejas. Es por esta razn que su estudio se hace necesario, ya sea de la forma terica y/o practica para conocer sus formas, su composicin, su distribucin en el espacio molecular y las generalidades que trae consigo su estudio. En el presente informe se conocern y explicaran algunas caractersticas propias de los hidratos de carbono, buscaremos la presencia de polisacridos en los alimentos que consumimos habitualmente y conoceremos algunas de las propiedades qumicas y formas fsicas de estos.

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Objetivos Los objetivos de esta actividad prctica con glcidos son: 1) Determinar las caractersticas organolpticas de algunos glcidos. 2) Establecer la presencia de polisacridos en materiales corrientes. 3) Verificar el carcter reductor o no de seis glcidos. 4) inferir estructura secundaria del almidn. Actividad 1: Apreciar con el sentido del gusto algunos glcidos Materiales: Soluciones al 0.5% p/v de:

* Glucosa: La glucosa es un importante combustible para la mayora de los organismos, en los mamferos es el nico combustible que utiliza el cerebro para su nutricin correcta y el nico combustible que ocupan siempre los glbulos rojos. (Biochemistry, sixth edition.) * Sacarosa: Corresponde al disacrido mas importante, por hidrlisis se desdobla en los dos disacridos constitutivos glucosa y fructosa. (Qumica, Enrique Gutirrez Ros, Edit. Revert SA. Pg. 447) * Maltosa: Corresponde a un disacrido formado por dos molculas de glucosa a travs de un enlace glucosdico. (Biochemistry, sixth edition.) * Almidn: corresponde a un tejido de reserva para las plantas y la principal fuente de glucosa para el organismo humano. * Lactosa: corresponde a un importante disacrido, se encuentra unido entre si por enlaces glucosdicos (Qumica, Enrique Gutirrez Ros, Edit. Revert SA. Pg. 447) * Fructosa: Corresponde al principal producto de la fotosntesis en las hojas verdes, se sintetiza por la accin de una batera de enzimas. (Biochemistry, sixth edition.) Tubos de ensayo. Gotarios.

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Mtodo: Cada integrante del grupo debe probar con la ayuda de su compaero los diferentes tipos de glcidos disponibles con un gotario, despus de cada prueba el individuo tiene enjuagarse la boca, permitiendo de esta forma eliminar el sabor obtenido por la muestra anterior. Resultados al desarrollar la actividad: Integrante 1 2 3 4 Glucosa 0 0 0 0 Sacarosa 1 1 1 1 Maltosa 0 0 0 0 Almidn 0 0 0 0 Lactosa 0 0 0 0 Fructosa 1 1 1 1

Tabla 1. Resultados percepcin gusto de glcidos.

0 1 2 3

Escala No dulce Poco dulce Dulce Muy Dulce

Discusin: Como se puede apreciar la tabla arroja resultados similares con la concordacin de todos los integrantes del grupo, pero queda en discusin el por que todos perciben lo mismo y adems Por qu el almidn al ser un concentrado de glucosa no presenta sabor? Actividad 2: Reconocer presencia de glcidos en una solucin Materiales: En esta actividad se utilizaron los siguientes materiales: - 6 tubos de ensayo. - Soluciones al 0.5% p/v de glucosa, sacarosa, maltosa, almidn, lactosa y fructosa. - Reactivo Alfa Naftol. - Acido sulfrico concentrado. Mtodo: Se dispusieron con una pipeta 2 ml de cada solucin de glcidos en los tubos de ensayo, luego se agregaron 4 gotas de alfa naftol con un gotario y finalmente se deja resbalar por la pared del tubo de ensayo 1 ml de acido sulfrico concentrado.

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Resultado sobre la presencia de glcidos en las distintas soluciones.. Solucin Almidn Fructosa Maltosa Lactosa Sacarosa Glucosa Si No

Tabla 2. Resultados presencia de glcidos en una solucin.

Discusin: La reaccin de Molisch es una de las reacciones de deshidratacin que se utiliza para identificar la presencia de glcidos en una solucin. Para esto a la solucin se le agregan gotas de alfa naftol y luego de acido sulfrico concentrado. El acido sulfrico se deposita en el fondo y forma un anillo violceo en el contacto con la materia orgnica que contiene algn3 glcido.

En la imagen se aprecia el resultado que se logro con la fructosa, lactosa, sacarosa y glucosa. El resultado obtenido con la solucin de almidn y maltosa no fue el mismo, no se formo el anillo violeta, esto significara que ambas soluciones no tienen presencia de glcidos. Sin embargo el almidn es un polisacrido formado por la unin de varios monosacridos (casi siempre glucosa) que tiene por funcin el almacn de energa en las plantas. Y la maltosa, es un disacrido que se forma a partir de la unin de dos glucosas. Por lo tanto, la nica explicacin lgica al resultado obtenido es que las soluciones de almidn y maltosa estaban tan diluidas que no se pudo apreciar el anillo violeta.

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Actividad 3 y 4: Reconocer la presencia de almidn en materiales frescos y en soluciones de glcidos. Verificar el efecto de calor sobre las muestras de lugol que dieron resultado positivo a las muestras de almidn. Materiales: - Pan - Agua de arroz - Papa - Mani - Macerado de porotos. - Lugol Mtodo: Se utiliza 2 ml. De cada muestra repartida en diferentes tubos de ensayo a los cuales se agrega 2 de gotas de lugol y as apreciar la reaccin que estas tienen con respecto a la presencia de almidn. El almidn es un polisacrido de reserva que se encuentra en grandes cantidades en el reino vegetal, es un constituyente principal de la fuente glucosdica de la alimentacin humana. Se puede detectar por el color azul-violeta que aparece cuando se pone en contacto con el lugol (compuesto iodado). (Practica de laboratorio y aula, Mara Pilar Gonzlez Gonzlez, Manuela Caballero Armenta Mara Pilar Serrano Molina, 2003.)

Material Pan Agua de Arroz Papa Man Macerado Lentejas Glucosa Sacarosa Almidn Lactosa Fructosa Maltosa

Si

No

Tabla 3. Resultados presencia de almidn en materiales frescos y glcidos.

Discusin: El lugol (solucin de yodo y yoduro potsico) es una sustancia utilizada para identificar la presencia de polisacridos dentro de las sustancias, en este experimento lo utilizaremos

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para observar la presencia de almidn, el cual est formado por amilopectina y amilosa, sta ltima est formada por largas cadenas formando una hlice las que atrapan el yodo, provocando que el lugol que absorbe la luz produciendo la coloracin, quede atrapado. (Tosti-Croce E., Molculas biognicas). Los resultados arrojaron que existe presencia de almidn en las muestras de Agua de arroz, Papa y en el Pan. En cambio, en las otras muestras como el Man tienen un gran porcentaje de cidos grasos y poca presencia de carbohidratos, as como las lentejas estn compuestas en su mayora por carbohidratos (almidn), poseen tambin un gran porcentaje de protenas, por lo que sta no sufri una coloracin tan marcada pero si se oscureci, con lo que se deduce que la presencia de protenas tuvo un efecto mayor que el almidn presente en esta semilla. (Tosti-Croce E., Molculas biognicas). * Los que tienen presencia de almidn se tornaron de color morado, los que no se quedaron de color amarillo. * Luego de verificar el efecto del calor (bao mara) a la prueba de lugol todos pierden su color y quedan transparentes o blancos.

Actividad 4: Verificar el efecto de calor sobre las muestras de lugol que dieron resultado positivo a las muestras de almidn. Mtodo: Utilizar las muestras que arrojaron resultados positivos en la actividad anterior para la realizacin de esta parte del laboratorio. Las tres soluciones que resultaron positivas al momento de hacer el experimento con lugol fueron sometidas a 5 minutos a bao mara con una temperatura de aproximadamente 90C. Por lo que se colocan las muestras de Agua de arroz, Papa y Pan a calentar. Discusin: Los resultados arrojados luego del bao mara, es que todas las muestras colocadas a bao mara terminaron con un color amarillento lo cual podemos asociarlo al rompimiento de los enlaces permitiendo as, la liberacin del almidn, lo que queda demostrado con el color observado en las diferentes muestras sometidas a temperaturas elevadas.

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Actividad 5,6 y 7: Reconocer la presencia de glcidos reductores en materiales frescos y en soluciones de glcidos. Analizar el efecto de un acido sobre enlaces glicosdicos. Material: -11 tubos de ensayo. - Pan - agua de arroz - papa - man. - macerado de lentejas. - soluciones al 0,5% p/v de glucosa, sacarosa, maltosa, almidn, lactosa y fructosa. - Licor de Fehling. - Bao Mara Mermet. Mtodo: Se dispusieron con una pipeta 1 ml de una mezcla a partes iguales de las soluciones A (0,5 ml) y B (0,5 ml) del licor de Fehling a los tubos de ensayo que contenan 1 ml de cada suspensin y de cada solucin, y luego se llevo a bao mara durante 5 minutos. Material Pan Agua de Arroz Papa Man Macerado Lentejas Glucosa Sacarosa Almidn Lactosa Fructosa Maltosa Si No

Tabla 4. Resultados presencia de glcidos reductores en materiales frescos y soluciones de glcidos.

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* Se torna de color rojo: presencia de acido reductor. Discusin: Segn los resultados experimentales la glucosa, lactosa, fructosa y maltosa serian las nicas soluciones que contendran glcidos reductores. Glcidos reductores son los que poseen un extremo reductor, es decir los que en un extremo poseen un carbono anomrico libre (que no establece enlace glucosdico). La mayora de los monosacridos y disacridos (excepto la sacarosa por no poseer carbono anomrico libre) posee carcter reductor.4 Ya que el almidn es un polisacrido, no posee carcter reductor; pan, papa, arroz y lentejas, en su composicin contienen mayoritariamente almidn, por lo que al hacerles la prueba dan negativo. El man tampoco posee carcter reductor. Actividad 7: Mtodo: Se dispuso de 0,5 ml de las soluciones que resultaron negativas a la prueba de Fehling, sacarosa y almidn, en tubos de ensayo, se agreg la misma cantidad de HCl (10%) y se calent a bao Mara durante 10 minutos. Luego se dejo enfriar y se neutraliz con la misma cantidad de NaOH (10%), se aplico nuevamente la prueba de Fehling (que incluye una nueva aplicacin de calor a bao Mara.

Solucin Sacarosa Almidn

Prueba Fehling Positiva Positiva

Tabla 5. Resultados prueba fehling despus de la segunda aplicacin de calor.

Al aplicar la prueba de Fehling, por segunda vez, la reaccin de las soluciones de sacarosa y de almidn resultaron positivas. Discusin: El almidn y la sacarosa sometidos a la presencia de cidos y altas temperaturas pierden su estructura secundaria por lo cual se provoca un rompimiento de los enlaces por hidrlisis, esto permite que tras una segunda prueba de Fehling las soluciones logren reaccionar positivamente, ya que los monosacridos de las soluciones presentan una capacidad reductora, y no as en su estado de disacrido o polisacrido respectivamente.

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Conclusiones Generales El grado de dulzura de las diferentes muestras esta en directa relacin con su composicin qumica y con los elementos por los que est formado. El Lugol, en presencia de almidn, reacciona tornndose la mezcla de un color violeta. Por lo cual verificamos la presencia de almidn en sustancias como el pan, arroz, y papa. La reaccin de Molisch permite identificar la presencia de glcidos en una solucin. Al poner la solucin a bao Mara la estructura del almidn se pierde, lo cual decolora la solucin y se obtienen soluciones incoloras.. Los monosacridos tiene un poder reductor, por lo cual el almidn y la sacarosa, que no presentaron reaccin frente al Fehling, al ser sometidos a cidos y temperatura se hidrolizan por lo cual sometidos a una nueva prueba de Fehling reaccionan positivamente

Bibliografa - Macarulla, Jose M., 1994 Bioqumica humana: curso bsico, Editorial Revert S.A, Barcelona - Audesirk, Teresa. 2003 Biologa: La vida en la tierra. Editorial Prentice Hall, Mxico. - Mary K. Campbell, Shawn O. Farrell 2007 Biochemistry, sixth edition - Qumica, Enrique Gutirrez Ros, Edit. Revert SA. 1994 Referencias
1

Frank Bradley Armstrong, Thomas Peter Bennett 1982 Bioqumica. Ed. Reverte, p. 522
2, 3

Macarulla, Jose M., 1994 Bioqumica humana: curso bsico, Editorial Revert S.A, Barcelona, p. 80 4 Lehninger A L. 1995 Bioquimica: las bases de la estructura y funcin celular. Ed. Omega, Barcelona, p. 245.