EDITORIAL

TECNOLOGIA Y DERMATOLOGIA

Dr. Oscar Reyes Flores*

En los ltimos aos, el avance de la tecnologa ha E ofrecido ala medicina diversos procedimientos que han resultado de gran utilidad para la investigacin y especialmente para la identificacin y diagnstico de diversas patologas. La aplicacin de estos mtodos en la dermatologa nos ofrece una estupenda oportunidad de estudio e investigacin y constituyen hoy da una pieza indispensable para el diagnstico de diversas enfermedades cutneas. INMUNODERMATOPATOLOGIA La aplicacin de tcnicas inmunolgicas a la histologa convencional comenz en 1.941 cuando Coons y colaboradores crearon los mtodos de inmunofluorescencia para detectar depsitos de protenas en los tejidos. La inmunodermatopatologa comienza con la descripcin de la Banda Lupica demostrada por Bumham y colaboradores en 1.963. En los aos siguientes Beutner y Jordon demostraron la presencia de auto-anticuerpos en suero de pacientes con Penfigo Vulgar. (1.964).
* Coeditor Dermatologa Venezolana

Otras observaciones claves en el diagnstico de varias enfermedades dermatolgicas han sido las siguientes: Cormane, Dermatitis Herpetiforme (1.967) Jordon y colaboradores, Penfigoide Ampollar (1 .967) ProvostyTomasi, Herpes Gestationis (1.973) Esterlyy colaboradores, Dermatosis Ampollar Lineal IgA de la infancia (1.977) Yaoita y colaboradores, Dermatosis Ampollar Adquirida (1.981) Hall y colaboradores, Lupus Eritematoso Ampollar (1.982) Leonard y colaboradores, Enfermedad IgA Lineal del Adulto (1.982) Huff y colaboradores, Dermatosis neutroflica IgA Intraepidrmica (1.985) ANTICUERPOS MONOCLONALES Una nueva era en inmunologa naci en 1.975 con el descubrimiento de latcnicade Hibridoma, porGeorges Kohlery Csar Milstein. Hasta entonces era virtualmente imposible producir un anticuerpo o cualquier anticuerpo contra un simple Antigeno. En esencia, la tcnica consiste en la fusin del material nuclear de dos clulas: una clula normal, Linfocito B sensibilizado obtenido del Bazo de ratn y una segunda

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clula, de Mieloma Multiple de ratn que crece en cultivo. El resultado es una clula hbrida con caractersticas de ambas clulas con produccin constante inmortal de la clula de Mieloma. Laclula Hbrida es capaz de producir anticuerpos monoclonales con predeterminada especfficidad contravirtualmente cualquierantgeno. Clones de clulas produciendo anticuerpos crecen en cultivo de tejidos o en la cavidad peritoneal del ratn de donde se pueden retirar cantidades ilimitadas de anticuerpos. La actividad especificada los anticuerpos producidos porhibridomascon inmungenos respectivos, pueden ser revisadas y detectadas con mtodos bioqumicos, radioinmunoensayo o inmunoensayo enzimtico (Elisa), mtodos inmunocitoqumicos, inmunofluorescencia e inmunoperoxidasa, o ensayos de citotoxicidad o inmunoprecipitacin. Anticuerpos monoclonales seleccionados para usar en diagnstico inmunohistoqumico: ANTICUERPO: AnticitoqueratinasAE1/AE3 Cam5.2 Mak-6 Antidesmina Antivimentina Protena antineurofilamento Membrana Antiepitelial Antileucocito comn Anticarcinoembrionario Antifactor VIII Pal-M1 y Pal-M2 OKT 9 D07 CD30 (Ki-1) MY 7 (CD 13) MARCAJE: Clulas epiteliales y tumores Clulas epite liales y tu mores Clulas epitelialesytumores Clulas miognicasytumores Clulas mesequimales y tumores Clulas neurales y ytumores Clulas epiteliales y tumores Clulas Hematopoyticasy tumores Epitelio y tu mores epiteliales Clulas endotelialesy tumores Melanoma Maligno Melanoma Maligno Epiteliomas Linfoma Linfoma

torios Cilag Corp. registr una preparacin de liposomas conteniendo econazole. Posteriormente se prepar Liposomas conteniendo dipropionato de betametasona y se estudia el encapsulamianto liposmico de tretinoina, minoxidil, hidroquinona, antibiticos, fotoprotectores y otras sustancias. Los liposomas pueden encapsulartanto sustancias hidroflicas como lipoflicas. El liposoma acta como transportador de un agente activo encapsulado en su interior hasta el sitio pre-establecido donde por diversos mecanismos (absorcin, endocitosis) libera la sustancia para ejercersu accin farmacolgica. Los liposomas son producidos por varios mtodos artificiales: evaporacin reversa, dispersin por ultrasonido, microfluidificacin y otros. Conforme al mtodo escogido hay formacin de vesculas pequeas unilamelares, vesculas grandes unilamelares y vesculas grandes multilamelares. Las lminas o membranas estn formadas por una parte h idrofoba insoluble en agua y compuesta dedos cadenas de cidos grasos conteniendo 10 a24 tomos de carbono y una parte hidroflica formada por la unin de cido fosfrico con cualquier molcula hidrosoluble. Para uso dermatolgico los liposomas vienen preparados en gel conteniendo del 1 al 5% de la sustancia activa. REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA Con este procedimiento tcnico, es posible, en pocas horas, y partiendo de una cantidad mnima de ADN producir grandes cantidades o porciones de la molecula inicial gracias al crecimiento molecular en que se basa el proceso. Su aplicacin diagnstica tiene gran utilidad en las enfermedades hereditarias, en las infecciones por microorganismos, procesos autoinmunes, patologa forense y antropologa. As, la muestra en estudio para determinarun diagnstico basado en la secuencia de ADN por el mtodo RCP puede provenir del laboratorio, del quirfano, del consultorio, de la morgue o de una momia, y estar representada por piel u otro rgano, sangre, saliva, semen o cabello. Este procedimiento fue ideado por Kary B. Mullis, bioqumico especializado en sntesis de oligonucleotidos. (1.983 -1.984). EPILUMINESCENCIA MICROSCOPICA Epiluminescencia microscpica es unatcnica clnica que permite in vivo una inspeccin visual de las estructuras anatmicas pigmentadas de la epidermis, de la unin dermoepidermica y de la dermis papilar.

Actualmente se dispone de muchos marcadores celulares, provenientes de varios laboratorios de USA y Europa. LIPOSOMAS Los liposomas son partculas artificiales compuestas por varios tipos de fosfolpidos, que, dispersos en un medio acuoso orientan sus cargas elctricas formando microesferas con agua en su interior, siendo anlogas a las membranas celulares. Los liposomasfueron descubiertos por Bangham, Alec D. en 1.961. En 1.988 los labora

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El concepto de epiluminescencia microscpica no es nuevo. Hans Hinselmann public en 1.933 un clsico artculo sobre la materia, titulado "Die Bedeutung der Kolposkopiefurden Dermatologen". Leon Goldman us el procedimiento para evaluar los nevus pigmentados, hace ms de 40 aos. En 1.974, William Cunliffe y colaboradores, emplearon un microscopio monocular sobre la superficie de la piel. Pero la actualizacin de este procedimiento y su reconocimiento internacional se debe a los estudios de Fritsch y Pechlaner de Innsbruck, Austria, en 1.980. La tcnica consiste en colocar una fina capa de aceite mineral sobre la lesin a examinar y observar las estructuras pigmentadas debajo de la superficie de la piel, con un lente de aumento de 6X a 40X usando un lente de mano, un este reomicroscopo, una cmara o un sistema de imagen electrnica. Diversos patrones morfolgicos se han descrito correspondiendo a determinada lesin pigmentada. Imgenes conforma radiada, con extensin irregular con pseudpodos y si tienen forma de red o malla, sugieren melanoma. Imgenes con tonalidad rojo-azulada, sugieren hemangiomao angioqueratoma. Imgenes con patrn que parecen comedones sugieren queratosis seborreica. RESONANCIA MAGNETICA Imagen de resonancia magntica es una tcnica que ha provocado unaverdadera revolucin en muchas reas de la medicinay est comenzando a ser apreciada por los dermatlogos. La primera descripcin experimental de resonancia magntica nuclear apareci en una carta al editor de Physical Review escrita por Rabi y colegas del departamento de fsica de la universidad de Columbia, New York, NY. Muchos investigadores de la comunidad radiolgica comparan el 31 de enero de 1.938, fecha en que Rabiy sus colegas hicieron su publicacin, con el 5 de noviembre de 1.895, la fecha del descubrimiento de los rayos X por Roentgen. La base de la tcnica de imagen de resonancia magntica es la variante respuesta de diferentes molculascuando ellas son perturbadas en un campo magntico. Atomos con nmero imparde protones respondern fuertemente a la presencia de un campo magntico

Con este procedimiento se puede evaluar el compromiso extra-cutneo en neurofibromatosis, esclerosis tuberosa, y sndrome de Sturge-Weber. El mtodo ha sido usado para evaluar el tamao y extensin de tumores localizados en zonas anatmicas de difcil acceso tales como la rbita, zonas nasales, manos y reas genitales, pero tambin ha sido usado para evaluartumores agresivos, como carcinoma verrugoso, carcinoma sebceo, melanoma nodular, tumor de Merkel, dermatofibrosarcoma protuberans y linfangioma circunscrito. Tambin ha prestado utilidad en la evaluacin del metabolismo tisular cutneo, irrigacin y/o isqumia de la piel y promete ser til para la evaluacin diagnstica de la dermatomiositis. ULTRASONIDO Esta tcnica ofrece la posibilidad de examinar reas mltiples de piel con un mtodo no invasivo y adems puede apreciarse aspectos de la piel que no pueden ser observadas visualmente o con el examen histolgico. El ultrasonido es una propagacin de energa acstica a travs de sustancias slidas o lquidas, incluyendo tejidos humanos. Por definicin ultrasonido es energa porencima de 20 KHz el cual es el Lmite superior de la capacidad del odo humano. La energaacstica es generada porun transductor que emite una pequea descarga de energa acstica cuando se le aplica el voltaje. El transductor es un cristal muy delgado enforma de disco hecho de un material piezo elctrico. Este material se expande o se contrae cuando se le aplica un voltaje obtenindose vibraciones acsticas. Los primeros transductores estaban hechos de cuarzo, recientemente se han usado otros materiales incluyendo sulfato de litio, titanato de plomo - circonio y polmeros plsticos como el polivinilidene fluor (PVDF). El desarrollo de estos materiales ha hecho posible la aplicacin del ultrasonido en la Dermatologay permiti el desarrollo de transductores que producen frecuencias ms altas. Afrecuencias ms altas la longitud de onda es mas corta y por este motivo se puede rastrearobjetos ms pequeos. La resolucin de los sistemas de ultrasonido puede ser axial o lateral. Las resoluciones axiales y laterales obtenidas a frecuencias mas altas, hace posible la visualizacin de las capas de la piel y sus estructuras.

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La energa acstica queda mas atenuada a frecuencias mas altas, es por esto que las altas frecuencias usadas para visualizar estructuras de la piel, no son capaces de suministrar imgenes de tejidos mas profundos. Los sistemas de ultrasonido para diagnstico funcionan como un radar ("RADIO DETECTION AND RANGING") o ecosonograma. Unadescargade energa acstica es emitida desde el transductor, la rpida expansin y contraccin del mismo se acopla al tejido o fluido adyacente y se propaga como una ola, esta recorre un camino bien definido a una velocidad conocida esta olava conforme a las leyes fsicas de propagacin de ondas de tal forma que todos los efectos son predecibles y entendidos. La onda es parcialmente reflejada y refractada en los lmites del tejido; el eco llega al transductory lo hace vibrar rpidamente generando una diferencia de voltaje entre los electrodos, estas seales son procesadasy almacenadas por un sistema de computacin. Numerosas lesiones dermatolgicas han sido estudiadas por este sistema: estudio del engrosamiento de la piel y mucosa en afecciones inflamatorias, atrofia esteroidea, dermatoesclerosis, arrugas, quemaduras, tumores (Angiomas, Sarcoma de Kaposi, Carcinoma Baso - celulary Melanoma) y otras condiciones Evidentemente que stas tcnicas representan un desafo para las naciones en desarrollo, con poco poder econmico, o con poder econmico mal administrado, puesto que son variablemente costosas necesitando ser manejadas porpersonal mdico y tecnolgico debidamente entrenado.
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