Aplicaciones Ultravioleta visible

Anlisis Cuantitativo. 1. Determinacion directa 2. Determinacion mezclas Estudio de reacciones

Cualitativo

Anlisis cuantitativo

Calculo de la concentracin por interpolacin en recta calibrado

Adicin standard
CM
CM +C1
CM +C2

CM +C3

CM +C4

Ejemplo

Calculo de la concentracin adicin estandard

Lento y tedioso:
(curva de calibrado para todas las muestras) Puede usarse una adicin simple si la muestra es conocida: A1 = b(Cmuestra) A2 = b(Cmuestra + Cadicion)

A1 A2

C muestra C muestra + C aadida

A1C aadido (A2 ! A1 )

CMuestra =

Mezclas
Espectros no superpuestos
A M N

!1

! 2

Medidas a 1 para M y 2 para N

Espectros superpuestos parcialmente

M+N A M N

! 1

!2

La eleccin de es funcin del grado de superposicin

Espectros completamente superpuestos

A M+N

N M

! 1

! 2

A1 = M1 b CM + N1 b CN A2 = M2 b CM + N2 b CN

(a 1) (a 2)

Mezclas
Ejemplo . Una muestra de dos compuestos , X and Y, necesita ser analizada. Se sabe que la max para el compuesto X es 632 nm, y max para el compuesto Y es 447 nm. A partir d Standards preparados para X e Y y a partir de la curva de calibrado se obtienen los siguientes valores de

Las absorbancias a las dos longitudes de onda obtenidas para una muestra son: A632 =0.771 y A447 = 0.815. cual ser la concentracin de los dos compuestos?

mezclas
En lugar de medir A, M y N solamente a dos longitudes de onda, se miden estas magnitudes a varias longitudes de onda

! A i = C + Ni C ! b M ! Mi N Mi
Ai

! Mi b

pendiente=CN CM =ordenada origen

! Ni ! Mi

Ejemplo mezcla
0,002 0,0018 0,0016 0,0014 0,0012 0,001 0,0008 0,0006 0,0004 0,0002 0 0 10 edicro/eper 20

y = 0,0001x

Amez/eper

Serie1 Lineal (Serie1)

!! ,nm 266 288 320 350 360

C= 0,0001 pendiente intersecion

MnO 4 0,042 0,082 0,168 0,125 0,056

Cr2 O720,41 0,283 0,158 0,318 0,181

Mezcla 0,766 0,571 0,422 0,672 0,366

e,per
420 820 1680 1250 560

e,dicro
7660 5710 4220 6720 3660

e,dicro/ e,p Ame/ eman er

18,2380952 6,96341463 2,51190476 5,376 6,53571429 0,00182381 0,00069634 0,00025119 0,0005376 0,00065357

0,0001 4,33681E-19 0,002 0,0018 0,0016 0,0014 0,0012

y = 0,0001x

per

Hoja excell

Resolucin con Mathcad

Se forma una matriz de datos X-Y para analizarla donde : X es Absorbanciapatron2/Absorbancia patron1 e Y es Absorbancia Mezcla/ Absorbancia patron1 (X coordenada 1 column, Y coordenada en la 2 columna):

+, X := data 0
Number of data points:

+, Y := data 1 n=5

% 0.94 & 2.5 & data := & 3.23 & 3.45 & ' 9.76

) ) 6.5 ) 6.96 ) ) 18.23 *

5.3

2.51 (

n := rows ( data)
Standard deviation:

SD ( x) := stdev ( x) !

n n" 1
Y-Coordinates

1 n o r t a p s b A / a l c z e my s b A

19

19 0 15.2

X-Coordinates Mean Median Standard dev. Variance

mean ( X) = 3.976 median ( X) = 3.23 SD ( X) = 3.379 SD ( X) = 11.421

Regression Statistics

mean ( Y) = 7.9 median ( Y) = 6.5 SD ( Y) = 6.028 SD ( Y) = 36.341 b0 = 0.808 b1 = 1.784

2

11.4

7.6

Intercept Slope Correlation coeff. R2 Covariance Plots

b0 := intercept ( X , Y) b1 := slope ( X , Y) corr ( X , Y) = 1 corr ( X , Y) = 1 cvar ( X , Y) = 16.298

2

intersepcion es C1 pendiente C2

3.8

!0

0 0 0 2 4 x Abs patron2/Abs patron1 6 8 10 10

$$$$ # r ( x) := b0 + b1 !x scale := max r ( X) " Y !1.1 % 0.94 2.51 (

trazo 1

Default range for plot:

& 2.5 & Coords := & 3.23 & 3.45 & ' 9.76

) ) 6.5 ) 6.96 ) ) 18.23 *

5.3

+, x := Coords 0 +, y := Coords 1

r := 1

Valoraciones fotomtricas
La ley de Beer se cumple Al menos una de las especies debe absorber la Radiacin
A A A

punto final punto final punto final

Volumen

Volumen

Volumen

a
A A

b
A

A
Punto final del Cu

Punto final del Bi

punto final

punto final

punto final

vol. de AEDT

Volumen

Volumen

Volumen

Determinacion de constantes de disociacion de cidos y bases

HA <> A + H
+

.
pK a = pH + log HA A

B ea1 908,00 ea2 352,00 C eb1 104,00 D eb2 1646,00 E F

Ka =

H HA

615 nm

punto isosbstico

9 8 7.5 7 6.5 6

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

A calculo de pK de un acido Parametros conocidoos

Datos

A,1 mezcla A,2mezcla 0,47000 0,35000

Solucion Concentracion b Concentracion a Concentracion b=(C6*B311 C3*B6)/(E3*B3-C3*D3) 12 13 9 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 Concentracion a=(B6-D3*B9)/B3

0,000105 0,000506

400

500

600

700

pH

datos indicador C=

5,00E-04 A,485 InH(pH=0) In(pH=14) pH=5 0,45 0,05 0,47 A,625 0,18 0,82 0,35 e,485 908,00 104,00 e,625 352,00 1646,00

K=

2,17002E-06 pK=

5,66353685

pH

c := 4! 10

#5

k := 10

#8

x := 0 , 0.2 .. 14 c c
#x $ 10 ' %1 + ( k ) &

k=cnstante c= concentacion total x=pH Cin( x) := CinH<----> Cin +H+

CinH( x) :=

$1 + k ' % # x( 10 ) &
77 4 ! 10
3

a1 :=

a2 := 1.5! 10

Coeficientes de absorptividad a "1(a1 y a2)y "2(a3 y a4)

3 3 4 a3 := ! 10 a4 := 1.5! 10 4 A1( x) := a1! CinH( x) + a2! Cin( x) A2( x) := a3! CinH( x) + a4! Cin( x)

A1=absorbancia a "1 A2= absorbancia a "2 x=

0

A1( x) =
7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 7 . 0 2 . 0 4 . 0 6 . 0 8 . 0 1 2 . 1 4 . 1 6 . 1 8 . 1 2 . 2 4 . 2 6 . 2 8 . 2 3

A2( x) =

a i c n a b r o A1( x) s b A2( x) A

1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314 x pH

Determinacin de la estequiometra de complejos

Mtodo de las variaciones continuas

Se preparan mezclas de diferentes concentraciones de M y L, pero manteniendo constante la concentracin final Se representa la absorbancia frente a la fraccion molar de L =L/M+L
.

B . C

0.66

xL

Estequiometra variaciones continuas

Mtodo de la relacin molar

Se mantiene constante la concentracin de uno de los componentes (a menudo, el in metlico) mientras que el otro se hace variar. Se representa la absorbancia frente a las relaciones molares de L y M: L/M o M/L
.
1.2

ML

A
1.0 0.8 0.6 0.4 0.2

ML2

[L] /[M]

Determinacin de constantes

Error fotomtrico
La ley de Beer la podemos escribir; Derivando esta ecuacin Dividiendo esta ecuacin por la primera Representando el eror reletivo en c para una incertidumbre relativa en la medida Frente a la transmitancia se obtiene el error instrumental que se comete para cada T

Curva de Ringbon error de mtodo espectrofotomtrico

Se define una nueva unidad Absortancia AbsT = 100-%T. A=bc=-logT ; 10-bc=T

De los datos de la curva de calibrado se calcula para cada concentracin el valor de absortancia que se obtiene a partir de la transmitancia y se representa en una escala semilogaritmica la absortancia ( eje de ordenadas frente a la concentracion (log c)eje de abscisas. El error se obtiene de la pendiente en cada punto de la curva obtenida Se debe utilizar unicamente aquella zona de menor error de metodo

Absorbancia 0,1 0,15 0,2 0,4 0,6 0,8 0,89 0,9 0,98

Transmitancia Absortancia 100 82,3908741 69,8970004 39,7940009 22,184875 9,6910013 5,06099934 4,57574906 0,87739243 0 17,6091259 30,1029996 60,2059991 77,815125 90,3089987 94,9390007 95,4242509 99,1226076

concentracio n ppm 1 1,5 2 4 6 8 8,9 9 9,8

ESPECTROFOTOMETRIA DE DERIVADAS
La primera derivada de un espectro original tambien puede definirse como la representacin grfica de la pendiente de la curva de absorcin a cada longitud de onda

dA para la primera derivada d! 2 d A para la segunda derivada 2 d!

A A

1 derivada

2 derivada

Ventajas de la espectrofotometra de derivadas

Medida exacta de max. Mejor resolucin de los espectros

Determinaciones cuantitativas en presencia de dos o ms componentes.

En el espectro normal, la estructura fina puede ser difcil de ver. En estos casos al emplear la segunda derivada, puesto que los mximos y mnimos del espectro normal y de la segunda derivada aparecen prcticamente a las mismas longitudes de onda y por tanto la estructura fina del espectro normal se pone mejor de manifiesto lo que tiene gran importancia con fines de identificacin, como criterio de pureza o para control de calidad.

Espectro normal

1 derivada

a)

b)

Instrumentacion UV
Los componentes bsicos son:
Fuentes de energa (lmpara) Seleccionador de longitud de onda (filtros, monocromadores) Recipiente porta muestras (cubeta) Detector Procesador de seales

Instrumentos
Filtros

- Fotmetros
Fototubos
Monocromadores

Espectrofotmetros
Fototubos o tubos multiplicadores

Fotmetros
fotmetros, son instrumentos sencillos que permiten medir la intensidad de radiacin, ya que van provistos de filtros para seleccionar un rango estrecho de longitudes de onda, y como detectores, usan fototubos.

Espectrofotmetros
Los espectrofotmetros, son instrumentos ms o menos sofisticados que usan monocromadores para seleccionar estas bandas estrechas de longitud de onda. El monocromador permite una variacin continua al seleccionar las longitudes de onda, y tambin permite realizar un barrido en una zona amplia de longitud de onda. Como detectores usan fototubos o tubos multiplicadores.

Fuente de energa
Una fuente de radiacin ideal debe ser continua en una amplia zona del espectro, tener una intensidad elevada y que no vare esta intensidad con la longitud de onda. Fuentes trmicas : lmpara de filamento de Wolframio,

Fuentes de descarga elctrica:

Lmpara de H- UV prximo. Lmpara de H (Deuterio) UV prximo Lmpara de descarga de Xe : 250 y 600 nm, Lmpara de arco de Hg se utiliza para el calibrado de instrumentos

Seleccin de
Filtros de absorcin:
absorcin selectiva de que no interesan

Filtros de interferencia
una parte de la radiacin que llega es absorbida y otra, se refleja

monocromador
dispositivo que genera un haz de radiacin de gran pureza espectral (anchura de banda estrecha) y que permite ir variando la de manera continua.

detectores.
elementos que convierten la radiacin en un flujo de electrones y posteriormente, en una corriente o voltaje en el circuito de lectura.
Clulas fotovoltaicas Fototubos (Tubos fotoemisores) Tubos fotomultiplicadores

Haz sencillo

Doble Haz en espacio

Doble haz en tiempo

Diodo Array

calibrado del instrumento

Instrumento de haz simple :
Poner un obturador de manera que no llega radiacin al detector, se ajusta el detector a cero (en unidades de transmitancia) o mxima (en unidades de absorbancia). Con la disolucin del blanco, ajusto a cero la absorbancia. Con otra cubeta de disolucin incgnita, mido la absorbancia.

Si trabajamos a ms de una estas tres etapas se deben repetir para cada

Calibrado instrumentos de doble haz.

Se pone el blanco en ambas cubetas y se ajusta a cero la absorbancia. Se quita la cubeta de la muestra, cerramos este obturador para ajustar de nuevo a cero la transmisin o al mximo la absorbancia. Colocamos la muestra y medimos la absorbancia.