Introduccin Los productos que ingerimos diariamente en nuestra dieta nos aportan los nutrientes, vitaminas y energa necesaria

para cubrir los requerimientos bsicos de nuestro cuerpo y stos deben experimentar diferentes procesos, como la digestin y absorcin. La digestin implica la degradacin qumica de molculas en subunidades ms pequeas las cuales van a experimentar posteriormente la absorcin a nivel intestinal. La absorcin se define como el movimiento de los nutrientes, agua y electrolitos desde el lumen intestinal hasta la sangre, pudiendo ocurrir por 2 tipos de transporte; transcelular y paracelular. Los carbohidratos constituyen aproximadamente el 45% de la dieta tpica de los individuos siendo consumidos en sus distintas formas: monosacridos entre los que se incluye la glucosa, fructosa y sacarosa, siendo las nicas formas que pueden ser absorbidas a nivel intestinal, disacridos (como la sacarosa y lactosa), oligosacridos, polisacridos y formas no digeribles. Entre los monosacridos se incluyen la fructosa, glucosa, galactosa y estas son las nicas formas que pueden ser absorbidas a nivel de las clulas epiteliales intestinales. Objetivo Evidenciar y analizar el transporte de glucosa a travs de la pared intestinal y algunos factores que lo influencian El transporte de glucosa y galactosa en el borde en cepillo de las clulas intestinales es de tipo activo secundario, se encuentra activado por un gradiente de sodio y depende de la protena transmembrana SGLT-1. La presencia de sodio (Na+) en la luz intestinal intensifica la absorcin de glucosa. La fructosa se capta a travs de un carrier de fructosa GLUT-5; para que la fructosa, galactosa y la glucosa lleguen a los capilares de la mucosa es necesario el transportador GLUT-2, este proceso se realiza a travs de la membrana basolateral donde tambin podemos encontrar al transportador GLUT-5, especialmente en el yeyuno, y va a transportar la fructosa hacia los capilares, dichos azucares tambin pueden atravesar la membrana basolateral por difusin simple.

Metodologa El experimento in vivo se realiz con segmentos de intestino delgado de ratas macho Sprague Dawley anestesiadas. El intestino de una de las ratas fue llenado con solucin Krebs-Bicarbonato-GlucosaSodio (KBG-Na+) y el de otra rata con solucin Krebs-Bicarbonato-Glucosa-Litio (KBG-Li+) y mediante la comparacin de los dimetros de dichos segmentos intestinales inmediatamente y transcurridos 30 minutos se busc determinar la efectividad en el transporte intestinal de glucosa frente a ambas soluciones. Por otro lado se busco determinar la concentracin de glucosa que permaneci dentro del intestino de las ratas pasada la media hora del estudio; esta concentracin se determin mediante la evaluacin de la reaccin enzimtica mediada por la glucosa oxidasa la cual origina acido D-glucnico y H2O2 a partir de la Dglucosa. A estos residuos se les coloc un reactivo que contena peroxidasa, fenol y 4-aminofenasona que junto al perxido de hidrogeno de la reaccin forman un compuesto coloreado (rojo de iminoquinona) cuya absorbancia puede medirse en el fotocolormetro a 510nm, la cual ser proporcional a la absorbancia de la glucosa en la muestra. Resultados Basndonos en lo mencionado anteriormente (vase metodologa) en la siguiente tabla se exponen los resultados de la absorbancia obtenidos al estudiar las soluciones

Condicin

Absorbancia Absorbancia [GLUCOSA] Corregida (mg/dL) 0,273 0,26 88,13

Volumen (mL) 0,72

Glucosa Absorbida (mg)

Glucosa Absorbida (%)

Segmento 1A

Segmento 1B

Segmento 2A

Segmento 2B

Solucin Original 1 KBG-Na Solucin PostAbsorcin 1A Solucin original KBGNa Solucin PostAbsorcin 1B Solucin Original 2 KBG-Li Solucin PostAbsorcin 2A Solucin Original 2 KBG-Li Solucin PostAbsorcin 2B Patrn de glucosa Blanco de Reactivo

0,585 0,040 0,027 9,15 0,54

92,1

0,273

0,260

88,15

1,28 1,074 95,18

0,035

0,022

7,45

0,72

0,274

0,261

88,47

1,28 1,028 90,77

0,051

0,038

12,88

0,81

0,274

0,261

88,47

1,15 0,939 92,29

0,038

0,025

8,47

0,92

0,308 0,013

0,295

Discusin En primer lugar, es necesario decir que se utiliz nicamente un segmento tratado con la solucin KBG-Na+ debido a una mala realizacin del procedimiento del experimento. En el momento de infundir la solucin en los intestinos (a travs de la cnula), el ejecutante coloc una mayor cantidad de solucin de la que el intestino pudo suportar, por lo que (debido a distensin excesiva), el intestino estall, pudindose nicamente recuperar un solo segmento, del cual se obtuvo una cantidad de solucin suficiente para poder realizar una replica. En segundo lugar, los resultados del porcentaje de glucosa absorbida en ambos segmentos tratados con la solucin KBG-Na+ fue el esperado por los conocimientos tericos. Este resultado se obtuvo debido a

que a que a travs del borde en cepillo, la captacin de glucosa y de galactosa, es catalizada por un sistema de cotransporte activo secundario activado por el Na+, el SGLT-1, o cotransporte de alta afinidad glucosa-Na+. La presencia de Na+ en la luz intestinal intensifica la absorcin de glucosa, o de galactosa, y viceversa [...]1 En tercer lugar, es preciso dejar claro que los resultados que se obtuvieron en los segmentos tratados con la solucin KBG-Li+ no son los esperados por los conocimientos tericos. Lo anterior se debe a que el porcentaje de glucosa abosorbida que se esperaba en estos segmentos deba ser menor que la de los segmentos que se trataron con la solucin KBG-Na+, lo cual no es as, inclusive se observa que el porcentaje de glucosa absorbida del segmento 2B que se trat con la solucin KBG-Li+ es mayor que la del segmento 1A que se trat con la solucin KBG-Na+. Como se dijo anteriormente, era de esperarse que los resultados del porcentaje de glucosa absorbida de los segmentos tratados con KBG-Li+ fuesen menores que los que se trataron con KBG-Na+, esto se debe a que el Li+ es un tomo monovalente muy similar al tomo de Na+, por lo cual, al igual que el este, puede unirse al cotransportador SGLT-1 y causar cambios conformacionales en este lo cual altera la afinidad que tiene por la glucosa, pero el cambio conformacional inducido por el Li+ no es igual al del Na+, la diferencia est en el grado de afinidad que producen, tenindose que cuando el tomo que se une al SGLT-1 es Na+, se produce un cambio conformacional que tiene como consecuencia un gran aumento en la afinidad del cotransportador por la glucosa. Los errores en los resultados de los segmentos tratados con KBG-Li+ pueden haber sido causa de mltiples factores durante la realizacin del experimento, entre los que se consideran: una mala ejecucin al infundir la solucin de KBG-Li+ en el intestino, una mala toma de medidas (circunferencia de los segmentos preabsorbancia y postabsorbancia) por parte de los integrantes del equipo, una mala preparacin de los compuestos a ser estudiados en el Spectronic y/o una mala anotacin de los resultados obtenidos en el mismo.

Gua de Fisiologa del Sistema Gastrointestinal Dra. Noelina Hernndez. Ctedra de Fisiologa. UCV. Caracas 2011