INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGIA

LABORATORIO FISIOLOGIA Y BIOFISICA I PRCTICA No. 2

EFECTO DONNAN

EQUIPO 3: MAGALLON ROJAS ALEJANDRO ARMANDO SERRANO ESPINDOLA ERIC

OBJETIVOS Explicar el efecto Donnan en un sistema in vitro

OBJETIVOS ESPECIFICOS Observar el comportamiento de una solucin electroltica Observar la generacin de un potencial de membrana en un sistema artificial Calcular las concentraciones de los iones al equilibrio

EFECTO DONNAN El equilibrio de Gibbs - Donnan es el equilibrio que se produce entre los iones que pueden atravesar la membrana y los que no son capaces de hacerlo. Se juega con los iones y con las cargas. Cuando las partculas de gran tamao cargadas elctricamente, como las protenas, que no se difunden a travs de una membrana semipermeable, atraen los iones cargados positivamente y repelen los iones cargados negativamente. Como consecuencia de ello, se establece un gradiente elctrico y gradientes de concentracin de los iones, estos dos ltimos iguales y de signo opuesto. En consecuencia, la concentracin de partculas es desigual a ambos lados de la membrana y se establece un gradiente osmtico en direccin hacia el compartimiento que contiene las protenas. El efecto de Donnan sobre la distribucin de los iones difusibles es importante en el organismo a causa de la presencias en las clulas y en el plasma Membrana existen barreras que limitan la libre difusin como el caso de las membranas que permiten paso de agua pero no de solutos. Se tienen dos compartimientos acuosos separados por una membrana semipermeable Uno de ellos contiene protenas, estas tienden a captar el comportamiento vecino, efecto que es proporcional al nmero de partculas dispersas. Proceso que en el cual las protenas se ven afectadas por el agua de hidratacin que forma la envoltura acuosa y por otro lado el comportamiento que presentan las protenas como polianiones cuyas cargas estn neutralizadas por los iones Na+ o K+, estas concentraciones deben existir en equilibrio de lo contrario provoca la retencin permanente de de iones difusibles hen ese lado por lo que sucede el efecto donnan, lo cual incrementa en efecto osmtico.

Cuando existen molculas) su presencia cambia la distribucin de las partculas onicas. En efecto, la protena intracelular, cargada negativamente, atre iones K+ y repele iones Cl-, producindose un gradiente elctrico (simbolizado por las cargas + y - a ambos lados de la membrana) y sendos gradientes de concentracin de K y Cl, iguales y de signo opuesto En el equilibrio, se tiene:

La concentracin de partculas a ambos lados de la membrana es desigual (en el interior estn adems de los iones las protenas) de forma que se produce un gradiente osmtico hacia el compartimento que contiene estas ltima. Establecido a travs del epitelio por la existencia de protenas no difusibles aade un pequeo pero significativo incremento a esta actividad osmtica. Las protenas del plasma originan una presin osmtica de unos 20 mm de Hg. En el equilibrio de Gibbs-Donnan es de unos 6-7 mm de Hg. La suma de ambas es la presin onctica o sea la atraccin hacia el agua que ejercen las protenas del plasma.

Material y equipo Balanza Analtica Potencimetro Esptula Termmetro Matraz volumtrico 25,100,250 ml Pipetas graduadas 1,5 y 10 ml Vasos de precipitados 100,250,500 ml Membrana semipermeable Reactivos y sustancias:

Solucin Buffer pH 4 y 7 Albmina Cloruro de sodio Hidrxido de sodio Fenolftalena Etanol DESARROLLO EXPERIMENTAL

1 2 3
RESULTADOS t 0 1 2 3 4 5 10 15 20

Remojar la membrana en 10 min en agua destilada Llenar solucion de albumina con una gota de fenoftaleina Medir t Colocar electrodo en 200 ml de NaCl .09 M Colocar gota de fenoftaleina Tomar ph en tiempo 0.1.2.3.4.5. ycada 5 min hasta estabilizar

ph 4 4.04 4.09 4.013 4.15 4.22 4.35 4.44 4.59

25 30 35 40 45 50 55 60 65 70

4.7 4.81 5.01 5.11 5.2 5.35 6.02 6.91 7.09 7.21

8 7 6 5 pH 4 3 2 1 0 -9 1 11 21 31 Tiempo (s) 41 51 61 71

GRAFICA 1. Tiempo vs Ph Podemos observar que nuestro incremento fue muy lento. Tuvimos que repetir 2 veces el experimento pues al comparar con otros equipos iba el nuestro lento Para poder conocer la concentracin que tenemos tenemos que aplicar la formula:

Despejando la concentracin claramente. Y asi obtenemos: t 0 1 2 3 4 5 10 15 20 ph 4 4.04 4.09 4.013 4.15 4.22 4.35 4.44 4.59 [] 0.60206 0.6063814 0.6117233 0.6034692 0.6180481 0.6253125 0.6384893 0.647383 0.6618127 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 4.7 4.81 5.01 5.11 5.2 5.35 6.02 6.91 7.09 7.21 0.6720979 0.6821451 0.6998377 0.7084209 0.7160033 0.7283538 0.7795965 0.839478 0.8506462 0.8579353

[]
1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 10 20 30 40 tiempo (s) 50 60 70 80

La grafica nos ensea que a como aumenta el tiempo aumenta la concentracin , adems de que deber llegar a un nivel de equilibrio. DISCUSION DE RESULTADOS El efecto donan es aquel en el cual un gradiente de concentracin genera otro gradiente es el elctrico esto se da gracias a que dentro de la clula hay iones con una carga negativa estos al interaccionar con los iones del exterior que tiene otra carga positiva generan un gradiente elctrico como ya dije es consecuente por que los iones dentro no serian posibles si no hubiera cierta concentracin de estos y distinta en el exterior, una ves que interaccionan generan una diferencia de potencial esta rodea ala clula es decir alrededor de ella viaja el impulso permitiendo abrir canales o cerrarlos gracias a esto se inicia el intercambio de iones para despus de adquirir el equilibrio El estado Donan representa un equilibrio entre dos fases que contienen no solo aniones Cl- y cationes Na+ ambos de los cuales pueden pasar a travs de la membrana, sino tambin molculas para las que la membrana es impermeable. El equilibrio Donan requiere que los iones se distribuyan de forma pasiva, de acuerdo al equilibrio termodinmico Donnan muestra como la distribucin de iones sirve para explicar que el equilibrio en ambas fases a su vez forma un equilibrio de pH y de potencial. Por otro lado le Cl- cambia muy poco el potencial de la membrana. Esto es debido a que el potencial de equilibrio del cloro est muy cerca del potencial de reposo. El cloro es un in negativo, y el potencial negativo de la membrana tiende a impedir la entrada en la clula de este in. Este efecto nos lleva a pensar que el volumen de la clula puede sufrir alteraciones, lo que llevara a cambios de concentraciones; adems, se llegara a un equilibrio del pH en ambas fases, y esta alteracin del pH podra a su vez alterar el potencial de Donan, ya que la carga de las molculas orgnicas (para las que la membrana es impermeable) dependen del valor del pH

concentracion

CONCLUSIONES PETIT CHAVARIA CARLOS En conclusin de la practica nmero 2 que nos habla del efecto donan con la cual sabemos que es el equilibrio de iones que puede atravesar la membrana lo cual vimos en el experimento al llenar de solucin albumina la membrana que sera la parte intracelular y fenolftalena apara ver el paso de iones en la membrana como se traspasaba lo cual el cloruro de sodio era la solucin externa y pro medio del potencimetro veamos como cambiaba el voltaje dndonos cuenta de que si haba un diferencial de potencial provocado en la membrana lo cual provocaba el paso de iones como el calcio a travs de las protenas correspondientes hasta llegar un medio isotnico en el cual lo confirmbamos con el potencimetro ya que no haba un gran cambio de variacin de voltaje es decir que quedo estable y eso nos dimos cuenta aproximadamente despus de una hora lo cual esto es un buen experimento ya que es una forma de visualizar algo que ocurre en nosotros y no lo podemos ver que es el funcionamiento de las clulas gracias a los neurotransmisores o cundo realzamos un accin de movimientos en musculares saber qu es lo que paso al igual con las sensaciones. SERRANO ESPINDOLA ERICK En el experimento se trata de ver como se llega al efecto, por que? Por que recordando el efecto es de equilibrio entre el gradiente de concentracin y su consecuente el gradiente elctrico es decir concretamente si uno es consecuente del otro que es lo que se requiere: el equilibrio en el de concentracin. la membrana como se estudio genera una diferencia de potencial pero esto es en la clula, en la membrana de la practica no existira este efecto tal cual, pero si permitira ala albumina empezar a salir es por eso que las pruebas se realizan en el exterior es aqu donde entra otra relacin el pH el cual se define como la cantidad de iones hidronio en una solucin entonces recordando que es el log de pka para sacar la concentracin se tiene que sacar el anti log del pH y es as como obtenemos la concentracin en el experimento. Por supuesto que se puede ver el equilibrio es donde ya no cambia el pH y por consecuente la concentracin se lleva acabo por el intercambio entre el interior y el exterior. Tomando en cuenta que es aqu donde se aprecia el efecto donan y tambin aadiendo que este estado puede durar por siempre solo cumpliendo el hecho de que nadie altere ninguna solucin. MAGALLON ROJAS ALEJANDRO El efecto donnan busca un equilibrio entre dos medios , en el cual se encuentre la misma cantidad de sustancias o valores del mismo tipo que puedan provocar un equilibrio. Este proceso interacta por las diferencias de carga que existen en los medios. Pudimos descubrir que la albumina es una protena muy fuerte e que es la base para el efecto donnan , ya que en este proceso la protena tiene una carga negativa y no puede pasar por la membrana , ya que esta es demasiado grande para pasar por ella por lo que para que exista un equilibrio debe existir un mismo numero de cargas con las que pueda interactuar.

El proceso donnan se ve afectado tambin la concentracin de las sustancias , y debemos recordar que en una clula hay gran cantidad de aniones y cationes.