UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA FACULTAD DE AGRONOMIA

I. OBJETIVOS Realizar las prcticas Agronmicas II en CAMPOSOL-MARINAZUL evaluaciones en campo de enfermedad presente en palto y esparrago

2.1 OBJETIVOS ESPECIFICO conocer y poder caracterizar morfolgica y molecularmente el patgeno buscar una alternativa biolgica para el control de Phytophthora sp. evaluaciones en campo de presencia de Phytophthora cinnamomi

Phytophthora sp. en palto.

III. UBICACION

Fundo Frusol y Mar Verde de la empresa CAMPOSOL S.A., ubicado en el km. 506 Panamericana norte en la localidad de San Jos - Vir, La Libertad. croquis Latitud Longitud Elevacin : 82620.96"S : 784422.12"0 : 60-80 msnm

IV. ACTIVIDAD Esta institucin consta de dos reas especifica una en Fundos de Camposol y otra en el instituto BIOTEC, estas estn muy interrelacionadas ya que una depende de la otra para concretar con el objetivo final ,el cual es la identificacin molecular de Phytophthora presente en Camposol. En el instituto de BIOTEC es donde se realiza el rea de investigacin, el cual est a cargo del Ph.D. Erick Mialhe, que se encarga de la realizacin y desarrollo de

proyectos para el rea de Camposol, verificando los avances quincenalmente, propiamente en el rea molecular, asimismo se tiene un rea de transferencia, el cual esta supervisado por la Ing. Agrnoma Tula Syilliam Jave Alcalde que es la jefa de investigacin y desarrollo en el rea Camposol, la cual se encarga de que estos proyectos sean llevados a cabo en el campo de manera prctica, como tambin la supervisin constante del avance general del proyecto realizado en el instituto de BIOTEC.

4.1 SISTEMA DE RIEGO

El fundo Frusol consta de 750 ha de cultivo de palto, dividido en 13 parcelas, 34 bloques y 170 lotes. Es un monocultivo irrigado por el sistema de goteo, pero presenta una pequea rea de ensayo con un sistema de aspersin. En este fundo se evaluaron plantas de Palto cuyo patrn es Duke 07, edad de la plantacin es de 11 aos, la textura de estos suelos es arenoso, con un pH 6.57.5.

El fundo Mar Verde Los cultivos observados en este fundo fueron: esprragos, palto, alcachofa. en este fundo se tomaron muestras de races de palto y suelo, palto, edad de la plantacin es de dos aos y medio, cuyo patrn es de la variedad Santillana estos campos tienen un suelo arenoso, cuyo pH vara entre 6.5-7.5 cuenta con un sistema de riego por goteo, anteriormente en este campo se cultivo esprragos.

4.2 NIVEL TECNOLOGICO La tecnologa con la que cuenta la empresa es muy avanzado ya que cuenta con un sistema de riego por goteo cronogramado, fertilizacin va el sistema de irrigacin , preparacin del terreno con maquinarias pesadas , control de plagas empleando un sistema de mangas transportadas por un tractor que aplicara a estos cultivos. Actualmente implementando el rea molecular para la deteccin acertada y no subjetiva de los estudios de enfermedades presentes en sus cultivos.

V.MATERIALES Y METODOS UTILIZADOS 5.1 Materiales y equipos utilizados en Campo

Equipos

tractor carros trampas de luz

Herramientas

lampas o palas bolsas libreta de campo tijera de podar cajones plstico grueso linterna de gran intensidad Tapers Estantes

5.2 Materiales y equipos utilizados en laboratorio Equipos

Malditof Espectrmetro cmara de flujo laminar centrifuga Termociclador autoclave

Insumos

Reactivos (master mix , agua libre de ARN asas,mgcl2) Agar, agarosa Metalaxil Agua destilada Detergentes Bromuro de etidio Azul de bromofenol Otros

Herramientas

placas petri bistur Ependors mangos de asa equipos en invernadero Otros

5.3 Materiales y equipos utilizados de Vivero

equipo y herramientas

Maya rachel Madera Regadera Baldes Sustrato de almacigo Esptulas Bandeja de siembra

Maceta Tamiz Tijeras de podar

Insumos

semillas de palto, esprrago plntulas de Marigol, esparrago tierra estril musgo Sunshine

VI. METODOLOGIA 6.1 Recoleccin de muestras con presencia de la enfermedad Phytophthora spp. en Palto se realizaron evaluaciones en dos fundos de Camposol (Mar Verde, Frusol), se selecciono un rea donde se presencio incidencia de la enfermedad tomadas por las siguientes caractersticas:

planta con presencia de marchitez plantas de menor tamao plantas clorticas baja productividad (Informacin por el Ingeniero encargado del campo) condiciones de humedad del campo( zonas de mayor humedad).

se evaluaron cinco plantas de cada fundo(estas muestras se tomaron al azar), de las cuales cuatro presenciaban los sntomas de la enfermedad y una planta

aparentemente sana, la muestra recolectada fue tanto de la raz (raicillas), como del suelo, tomando un rea superficial (aproximadamente de10 a 15 cm de profundidad) para posteriormente evaluar la presencia de los microorganismos en la raz, como en el suelo (benficos y patognicos). el mismo mtodo fue realizado tanto para los campos de frusol como para Mar verde.

6.2 Recoleccin de muestra para prodiplosis en esprragos Se realizaron muestreos de prodiplosis para la caracterizacin de este dptero que causa gran perdida en el cultivo de esparrago; ya que interfiere en su produccin doblando los brotes de la segunda campaa. esto se realizo de la siguiente manera

se recolectaron larvas

las larvas por lo general tienden a estar escondidas de la exposicin directa de la luz solar, por ello se ocultan. pudindose encontrar en las brcteas, especialmente en los turiones.

se recolectaron pupas

teniendo en cuenta que en este estadio las pupas se encuentran en el suelo, se realizo un trampeo de suelo, el cual consisti en colocar un plstico de manera que cubriera ambos lados del surco asimismo se le agrego tierra sobre el plstico(para que las pupas no tiendan a morir por la calentura del plstico)y se le

dejo por todo un da, de manera que las pupas que caen de las brcteas al suelo se queda en este plstico, para posteriormente recolectarlo en un frasco.

esta muestra es llevada a un autoclave donde se sembrara en un medio de cultivo 6.3.1 preparacin del medio de cultivo El medio de cultivo preparado fue PDA , ya que se requiere aislar diferentes microorganismos presentes en la raz (entre ellos Phytophthora, Trichoderma y otros). la preparacin de este medio contiene : agarosa 7.8g para 300 ml de agua destilada diluirla para posteriormente auto clavarla por 30minutos a121C . posteriormente esta solucin es colocada dentro de placas petris (toda esta actividad se debe realizar dentro de la cmara de flujo ) luego se coloca a secar