Qualidade microbiolgica de cosmticos de cabelo e cuidados da pele fabricados na Jordnia

Um total de 57 marcas de cabelo disponvel comercialmente e cosmticos de cuidados da pele fabricados na Jordnia eram avaliados quanto sua qualidade microbiolgica utilizando procedimentos padro. Microorganismos viveis no eram recuperado a partir de 56,1% dos itens testados e aproximadamente 5,3% nutria inferior a 102 UFC g 1. Dominantes isolados bacterianos foram espcies de Bacillus, Pseudomonas spp. E estafilococos coagulase-negativo. Mais testes de diferentes lotes das marcas que foram encontrados para ser contaminados com > 104 UFC g 1 revelou que a persistente problemwas nestes produtos. Testes de eficcia conservante foram realizado para as marcas livre de contaminao utilizando Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027. este teste demonstraram que 28,1% dos produtos testados foram inadequadamente preservada. Conclui-se que o pobre qualidade microbiolgica das preparaes investigadas podem ser atribudas para um problema inerente a formulao dessas marcas e / ou higiene fabricao pobres. Espera-se que a implementao de boas prticas de fabrico no Jordana s indstria de cosmticos vai melhorar a qualidade microbiolgica qualidade destes produtos.

1. Introduo Cosmticos so formuladas a partir de uma variedade de produtos qumicos no presena de uma quantidade abundante de gua. Muitos destes produtos exibem um pH prximo da neutralidade e so geralmente mantidos a uma temperatura prximos ou acima da temperatura ambiente, particularmente quando eles so utilizados em pases com condies de clima quente. Portanto, a menos que sejam adequadamente preservada, estes produtos proporcionam microorganismos com ambientes propcios para o seu crescimento. Contaminantes podem ganhar acesso a cosmticos incidentalmente durante a fabricao processo ou durante a utilizao pelos consumidores. Estes contaminantes podem ser patgenos, infeces oportunistas e / ou saprfitas. O consequncia de tal contaminao pode ser dispendiosa em termos de sade e economia (Anelich e Korsten, 1996; lvarez- Lerma et al., 2008). Na Europa, os fabricantes de produtos cosmticos so responsveis para o cumprimento dos princpios e directrizes das boas Prticas de Fabricao (BPF). Estes requisitos foram includos na Directiva 93/35/CEE (Anon, 1993), que foi a alterao 6 da directiva Cosmticos primeiro acordado entre Europeia pases em 1976 (Anon, 1976). Uma atualizao recente deste directivewas emitido em 2009, a fim de reforar o quadro regulamentar para cosmticos, tais como o controlo no mercado, com vista a assegurar um elevado nvel de proteco da sade humana (Anon, 2009). A microbiologia comit tcnico encarregado de cosmticos produtos no mbito da Organizao Internacional de Normalizao (ISO / TC 217) veio com orientaes sobre GMP (Anon, 2007). Estes diretrizes foram elaboradas para cobrir os aspectos da qualidade de vrios cosmticos, incluindo documentao, produo, e especfico os

procedimentos de limpeza. As diretrizes tambm cobrir microbiolgica controle de matrias-primas, a granel e produtos acabados, embalagem materiais, pessoal, equipamentos e reas de armazenamento. Apesar de todos estes esforos para melhorar a qualidade microbiolgica de cosmticos, relatos de contaminao microbiana dos comercialmente produtos disponveis ainda aparecem na literatura cientfica. Tal Relatrios ter aparecido em vrios pases em desenvolvimento, incluindo Ir (Behravan et al., 2005), Egito (Abdelaziz et al., 1989), e Nigria (Okeke e Lamikanra, 2001). Na Jordnia, houve apenas uma publicao preocupada com este assunto (Na'was e Alkofahi, 1994). Os pases desenvolvidos passaram mais um passo aps o implementao de GMP e comearam a recordar produtos considerados fora dos limites microbiolgicos (Wong et al, 2000;. Lundov e Zachariae, 2008). A Jordnia um membro pleno do Comit Tcnico ISO 217, ea Jordan Instituto de Padres e Metrologia tem se empenhado em elaborao de um manuscrito GMP com base em que foi adoptada pela ISO comisso de cosmticos. O projecto est agora nos estgios finais e Provavelmente ser implementado no final de 2011. O objetivo deste trabalho foi estudar a qualidade microbiolgica do cuidado da pele e cabelo os produtos comercializados em Jordan modo que os resultados seria considerada como uma referncia contra o qual medir as melhorias na qualidade decorrentes da execuo do PBF. 2. Materiais e mtodos Um total de 57 preparaes representando uma variedade de cabelo e pele cosmticos cuidados foram comprados em lojas, em Am, todos foram fabricados por empresas jordanianas. Trs adicional amostras, representativas de diferentes nmeros de lote, de produtos apresentado a ser fortemente contaminado foram obtidos para estudo posterior. Todos contentores foram cuidadosamente examinados para a integridade descolorao, contedo, r tulo-divulgados odor, informao, e separao. 2,1. Contagem microbiana vivel Contagem total bacteriana foi determinada para cada unidade formulao comprado usando o seguinte procedimento: Uma grama de a preparao foi disperso em uma fosfato esterilizado autoclavado tampo contendo 0,5% de Polissorbato 80 (conservante neutralizador) e, em seguida, 10-diluies em srie foram efectuadas sob condies asspticas. Verter tcnica de placa foi realizada em um de 1 ml alquota da diluio adequada de feijo de soja utilizando casena digest agar (SBCD). Placas de agar foram incubadas a solidificados 37? C durante 48 h antes de colnias desenvolvidas foram contadas. Leveduras foram contadas como descrito para as bactrias, mas Sabouraud de dextrose (SDA) foi usado. Moldes foram isolados em gar Sabouraud de dextrose e os resultados foram considerados positivos se, aps incubao a 25 C durante 2 semanas, o crescimento de fungos apareceu nas placas inoculadas. Certo bactrias podem crescer em SDA;, assim, o meio foi suplementado com antibiticos (cloranfenicol e gentamicina) para inibir o crescimento bacteriano. Colnias recuperadas foram confirmados como levedura, observando a sua resistncia aos antibiticos, utilizando o disco mtodo de difuso. 2,2. Cultura de enriquecimento e identificao de isolados Alquotas de 1 g da preparao sob investigao eram assepticamente transferido para um frasco contendo 50 ml de caldo SBCD suplementado com 0,5% de Polissorbato 80. Aps incubao a 37 C durante 48 h, uma ala completa dos contentwas balo estrias em agar SBCD (Suplementado com 0,5% de Polissorbato 80) e as placas foram ento incubadas a 37

C durante 48 h. Colnias desenvolvidas foram obtidos em cultura pura e identificado ao nvel de espcie utilizando o diagnstico tabelas dada por Barrow e Feltham (1993). Testes de identificao incluram: coagulase, catalase, urease, a reaco de Gram, forma, gelatina formao de liquefaco, esporos, fermentao de acar, e outros testes convencionais. Isolamento de Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, e Staphylococcus aureus foi realizada como descrito no ISO publicaes tcnicas (Anon, 2006a, b, c). 2,3. Avaliao da eficcia conservante Produtos encontrados de ser livre de contaminao microbiana foram desafiados com P. aeruginosa ATCC 9027. Este organismo de teste um das estirpes bacterianas recomendadas pelo 11.930 ISO / WD para o avaliao de proteo antimicrobiana de produtos cosmticos. Inoculae para este teste foram preparados por colnias de colheita de teste organismo cultivadas em gar SBCD com tampo de fosfato estril, pH 7. A absorvncia desta suspenso foi ajustado espectrofotometricamente a 625 nm para coincidir com a de 0,5 McFarland padres utilizando tampo semelhante (Sutton, 2006a). Esta suspenso contida 2? 108 CFU ml? 1 como determinado por contagem de placas. O teste de desafio procedimento envolveu a inoculao de 0,1 ml de suspenso de teste em 20 g do produto sob investigao;, assim, a desafiados produto continha 106 UFC ml? 1. Alquotas inoculadas foram incubadas em um banho de gua com agitao a 27 C e as amostras foram assepticamente removidas nos dias 0, 7, 14, 21 e 28 para contagem de viveis, como descrito acima. Un-inoculadas amostra de cada preparao foi tratada como descrito acima, para servir como um controlo. O produto foi considerado como adequadamente preservada quando a reduo de 99,9% do inculos inicial contagem foi obtida no dia 7 de incubao, permanecendo sem aumento at o 28 dia do experimento (Anon, 2008). Meios de cultura microbiolgica utilizados eram provenientes de todos Difco, EUA. 2,4. Eficcia da neutralizao Vinte g-se alquotas dos produtos que foram encontrados para ser livre de contaminao microbiana foram desafiados com P. aeruginosa ATCC 9027 para dar uma contagem de 103 UFC g? 1 da marca respectiva. Um grama de amostra foi ento diluda com 9 ml de tampo fosfato alterado com 0,5% de Polissorbato 80 antes de uma diluio de 10 vezes em srie utilizando tampo semelhante foi feita. Todas as diluies foram mantidas em sala temperatura durante 40 min para permitir a neutralizao de ocorrer. Recuperao de pelo menos 50% das bactrias em gar inoculadas SBCD suplementado com 0,5% de Polissorbato 80 indicou a eficcia do processo de neutralizao. 3. Resultados Itens comprados foram inspecionados pela aparncia fsica, tudo foram limpo e noadulterado. Uma verificao visual revelou que no havia separao de fases no caso de cremes ou emulses nem havia qualquer sedimentao ou descolorao no caso de champs ou os outros produtos. Apenas cinco dos 16 shampoo As preparaes divulgado o tipo de conservante utilizado na sua formulao. Trs fabricantes indicaram que os seus produtos foram conservadas com betana cocamidopropil (um anfotrico de formao de espuma surfactante e no um conservante) e os outros dois foram preservada com isotiazolinonas. Todos os outros preparados no vrias categorias de produtos ou indicado o uso de parabenos ou fez no

especificar o nome do conservante. Resultados da contagem microbiana em relao aos tipos de produtos so ilustrada na Tabela 1. evidente a partir dos valores apresentados que quando a contaminao foi detectada, a contagem microbiana foi maior em casos bem acima do limite aceitvel. Foi calculado que 88% dos os produtos contaminados continha contagens microbianas em excesso de 102 UFC g? 1. A Tabela 2 mostra os tipos de contaminantes em relao na categoria de produtos a partir do qual eles foram isolados. P. Aeruginosa e Bacillus spp. foram os Gramnegative mais isolado e bactrias positivas, respectivamente. interessante notar que staphyllococci coagulase negativa e espcies Micrococcus s foram isolados a partir de produtos que abrigavam> 104 UFC g? 1. 2. Tabela 1
Nmero de marcas em cada categoria do produto em relao ao nvel de contagem microbiana descobertos e nmero de marcas contaminada. Nmero tipo de produto marcas N de amostras contaminadas (CFU / g) <102> 102-104> 104 Shampoo 16 0 0 3 Condicionador de cabelo 6 0 1 2 Gel para cabelos 4 1 0 1 Cabelo noivo 4 0 1 1 Cabelo reparao emulso 5 0 1 2 Loo para o corpo 6 0 1 2 Hand & creme para o corpo 14 2 3 4 Peeling creme 2 0 0 0 Total de n (%) 57 (100) 3 (5,3) 7 (12,3) 15 (26,3)

tabela 2 Tipos de contaminantes microbianos isolados de categoria de vrios produtos. Organismos tipo de produto isolado Shampoo Pseudomonas spp., E. coli Cabelo condicionador de S. aureus, leveduras, Coag? Ve Staphylococcia Cabelo estilo gel S. aureus, Enterobacter spp., Micrococcus spp., Pseudomonas spp., Serratia spp. Cabelo noivo Alcaligenes spp., Coag? Ve estafilococos, um Pseudomonas spp., Bacillus spp. Cabelo Levedura emulso de reparao, Pseudomonas spp., Alcaligenes spp., Bacillus spp. Loo para o corpo Bacillus spp., Coag? Ve estafilococos, um Pseudomonas spp., Enterobacter spp., Micrococcus spp. Mos e Corpo Bacillus creme spp., Pseudomonas spp., Enterobacter spp., Coag? Ve estafilococos, um Micrococcus spp. um estafilococos coagulase-negativo.

O teste foi realizado em trs mais repeties para cada um dos marcas que foram encontrados para ser contaminado e os repeties foram com nmeros de lote diferentes do que aqueles utilizados em a experincia inicial. As demais amostras incluiu trs shampoos, dois condicionadores de cabelo, e duas emulses de reparao do cabelo,

bem como quatro mo e cremes para o corpo. Os resultados mostraram que estes adicional. As amostras foram novamente fortemente contaminado e as observaes foram muito semelhantes s apresentadas na Tabela 1;, por conseguinte, os dados no so imediata. Os testwas desafio realizadas para os produtos que no eram contaminada utilizando P. aeruginosa ATCC 9027. Os resultados so resumidos na Tabela 3. Este quadro demonstra claramente que nove dos 32 formulaes das marcas de cosmticos que eram do aceitvel qualidade microbiolgica no ponto de venda foram encontrados para ser inadequadamente preservada. O processo de neutralizao de conservantes nos produtos estudados utilizando Polissorbato 80 foi eficaz como foi possvel recuperar mais do que 50% do nmero do desafio bactrias utilizado no ensaio. 4. discusso Os resultados deste estudo revelou que% no ponto de venda 56. De os itens testados estavam livres de contaminantes microbianos e 5.% nutria inferior a 102 UFC g? 1, dando um total de 61. dos produtos estudados encontram-se em conformidade com as especificaes. Estes observaes no esto longe de nmeros publicados, em especial os dos pases em desenvolvimento; Abdelaziz et al. (1989) encontraram que a taxa de contaminao microbiana em marcas de shampoo comercializado no Egito foi de 43%, mas a contagem bacteriana nestes produtos foi baixo e os patgenos estavam ausentes. Eles tambm descobriram que apenas 15% dos essas marcas comerciais contidas contagens microbianas em excesso de 102 UFC g? 1. Estes resultados so quase idnticos aos obtidos no esta investigao para as marcas de xampu, como 18,5% deles eram verificou-se ser contaminados com as populaes microbianas elevadas.

tabela 3 Desempenho conservante (como determinado pelo teste de desafio) em relao ao produto categoria. Nmero tipo de produto itens No. adequadamente conservado No. mal conservado Shampoo 13 8 5 Condicionador de cabelo 3 2 1 Cabelo estilo gel 2 2 0 Cabelo noivo 2 2 0 Cabelo reparao emulso 2 1 1 Loo para o corpo 3 3 0 Hand & creme para o corpo 5 4 1 Peeling creme 2 1 1 Totalizar n 32 (%) (100) 23 (71,9) 9 (28,1)

Okeke e Lamikanra (2001) investigaram a qualidade microbiolgica qualidade da pele hidratando-49 cremes e loes, distribudos em Nigria. Eles descobriram que 41%

destes produtos estavam contaminadas e apenas 16,3% nutria contaminantes em excesso de 103 UFC g? Ou1 ml de produto examinado. Na Jordnia, Na'was e Alkofahi (1994) testadas 19 diferentes marcas de cremes e constatou que o crescimento microbiano foi detectada em culturas de todos os produtos. Alto contagens (> 104 UFC g? 1) foram isoladas pelos mesmos autores de seis (33,3%) de diferentes marcas. Estes resultados so comparveis com os achados aqui relatados, onde 28,6% das marcas de creme testado revelou contagem microbiana elevada. Relatrios relativamente recente de Nigria e ndia tm indicado que a qualidade microbiolgica da cosmticos comerciais, em particular cremes e loes, tm melhorou ligeiramente ao longo dos anos (e Okeke Lamikanra, 2001; Gopalkrishna et al., 2010). Nos pases desenvolvidos, a prevalncia de cosmticos contaminados venda parece ser relativamente incomum (Campana et al., 2006). No entanto, recalls de produtos de o mercado nesses pases devido a contaminaes microbianas ainda motivo de preocupao (Wong et al, 2000;. Lundov e Zachariae, 2008). Em relao aos tipos de contaminantes isoladas, a presena de Organismos grampositivos consistente com relatos na cientfica literatura (Abdelaziz et al, 1989;.. Ravita et al, 2009). O interessante encontrar neste estudo foi que os estafilococos coagulase-negativo e Micrococcus foram recuperados somente a partir de produtos que eram contaminado e esta provavelmente a primeira observao relatou que chama a ateno para este fenmeno. Vale a pena mencionar que este achado foi gravado em produtos de diferentes categorias de marca, como mostrado na Tabela 2, e que estas marcas foram fabricados por empresas diferentes. Portanto, este um genrico observao e no est relacionada a um nico produto ou empresa. A incapacidade para isolar estes organismos Gram-positivos a partir de cosmticos com baixo contagens microbianas ou como contaminantes de solo pode sugerir que eles no foram capazes de crescer ou mesmo sobreviver nestes produtos sem o ajuda de outros microorganismos. Embora esta suposio requer confirmao e, talvez, uma investigao mais aprofundada, consistente com o consenso geral de que bactrias Gram-negativas podem prosperar em produtos industriais mais do que Gram-positivas entes. O isolamento de bactrias Gram-negativas a partir de alguns dos produtos uma preocupao sria. P. aeruginosa um oportunista patgeno com potencial deteriorao e E. coli um indicador de fecal poluio. A mera presena de qualquer um destes dois organismos torna o produto inseguro para utilizao. E. coli foi isolado a partir de um shampoo Considerando que a preparao P. aeruginosa foi isolado a partir de todas contaminadas produtos, exceto os condicionadores de cabelo. A maioria legislativa autoridades exigir que o produto a ser livre a partir de microorganismos especficos tal como E. coli, S. aureus, e P. aeruginosa. Esta especificao faz fabricantes no isentos de proteger os seus produtos contra outros microorganismos desagradveis com a sade possvel riscos e os potenciais de deteriorao (Sutton, 2006b). claro Tabela 2, que muitas marcas estudadas estavam fora das especificaes como certos microorganismos nomeados foram detectados. De acordo com a norma ISO normas estes organismos deve estar ausente. Censurvel microorganismos so relacionados com o produto e da responsabilidade do as empresas que fabricam para estabelecer o que constitui tal uma flora de um determinado produto. Provveis fontes de contaminantes microbianos em cosmticos na ponto de venda so matrias-primas utilizadas na produo, pessoal e o meio ambiente no qual os produtos so fabricados. gua, que o componente granel, em muitos produtos cosmticos, tem

longo sido descrita como a fonte mais provvel de bactrias Gram-negativas, particularmente Pseudomonas spp. (Olson, 1967). O pessoal que pode entrar em contacto com o produto durante a produo podem tambm contribuir para a contaminao do produto com cocos gram-positivos, incluindo espcies de estafilococos e micrococci. Por conseguinte, evidente que a maioria dos contaminantes recuperados podem ser controlada se medidas adequadas so tomadas pelos fabricantes para observar higinico fabricao de condies e aplicar protocolos de garantia de qualidade. importante notar que a deteco de espcies de Cndida foi confinado a condicionadores de cabelo e de emulso de reparao do cabelo; estes produtos continham compostos de amnio quaternrio. Estes Os compostos podem exercer o seu efeito condicionado apenas se a preparao de pH cido. Assim, o ambiente nestas marcas parece ter favorecido o crescimento de leveduras, mas mais uma vez, deve ser notado que as bactrias muitas outras tambm foram isolados a partir destes produtos. O fracasso repetido de repeties de certas marcas para passar o anlises microbiolgicas indicaram que estas marcas sofrem problemas inerentes. A persistncia de contaminao em diferentes lotes da mesma marca lana dvidas sobre a eficcia e compatibilidade do sistema conservante com outros ingredientes utilizado em formulaes. Se os conservantes certas sido utilizados, o produtos teria sido capaz de inibir a contaminantes. O teste ISO para a avaliao da eficcia do preservativo requer a utilizao de cinco culturas microbianas diferentes, a fim de estabelecer a capacidade do produto para lidar com microbiana possvel desafios que podem entrar no produto durante o seu fabrico ou utilizao pelos consumidores. No entanto, apenas P. aeruginosa foi utilizado no estudo de eficcia de preservao descrito aqui; resultados apresentados na Tabela 3 mostraram que nove dos 32 produtos investigados estavam mal conservado. provvel que, se mais de um organismo sido utilizado, a taxa de falha preservao dos produtos investigados teria sido maior. A utilizao de uma cultura microbiana no teste de provocao no deve ser considerada uma desvantagem para a configurao de Nesta investigao, tal como foi concebido para demonstrar que o contaminao de produtos livres podem tambm conter itens com pobre qualidade microbiolgica, e este foi definitivamente alcanada. Estes descobertas, em adio s apresentadas nas Tabelas 1 e 2, sugeriu que uma grande quantidade de melhoria necessria nas vrias fases de cosmticos fabricao na Jordnia. Especial ateno deve ser dada ao ambiente de produo e do processo de formulao, incluindo a escolha do conservante. Isso deve ser estabelecido no fase de desenvolvimento, como parte do estudo de estabilidade microbiolgica. A informao divulgada nos rtulos do cosmtico recipientes estudados apresentaram muitas irregularidades, e estes inclua os nomes de conservante utilizados na formulao. Portanto, nem todos os tentativas de ligar a taxa e extenso de contaminao para o sistema conservante utilizado nos produtos estudados foram bem sucedidas. Na verdade, Hugbo et al. (2003) mostrou que nove entre 10 fabricantes de diferentes produtos cosmticos na Nigria deu indicaes de incluso de um conservante (s), mas no o tipo de conservante utilizado, e apenas quatro fabricantes divulgada esta informao. Uma empresa fez nem mesmo afirmar se um conservante foi includo em tudo. Estes observaes so muito semelhantes aos aqui relatados, e assim o falta de divulgao de informaes parece estar em um problema comum presente nos pases

em desenvolvimento. Espera-se que essas irregularidades ser retificado uma vez que os regulamentos GMP so aplicadas. Em concluso, deve ser dito que a qualidade microbiolgica da as marcas investigadas consistente com a qualidade geral da cosmticos fabricados e comercializados nos pases em desenvolvimento. O efeito da aplicao de normas de BPF na Jordnia Acredita-se que resultar na produo de produtos cosmticos de melhor qualidade, mas este continua a ser apurado. Os dados apresentados neste trabalho podem ser usados como uma linha de base na avaliao do efeito.

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