INSTITUTO OHIGGINS HERMANOS MARISTAS RANCAGUA

Integrantes Grupo 7: Sebastin Gonzlez, Fernanda Nez, Evelyn Riquelme, Juan Sarantitis, Mariana Venegas. Curso: 4 Medio D

OBJETIVOS Aprender a hacer cultivos de microorganismos, especialmente bacterias. Comprobar la existencia de bacterias de diferentes focos infecciosos. Interpretar el resultado de los cultivos y aplicar conocimientos previos. Observar el desarrollo de bacterias y la accin de un antibitico determinado.

HIPTESIS Si cierta muestra se encuentra muy contaminada, entonces presentar ms bacterias que otra menos contaminada. Si los antibiticos sirven slo para inhibir la reproduccin de determinadas bacterias, entonces en el lugar que se aplique el medicamento, no se presentarn este tipo de bacterias. Si los antibiticos inhiben a bacterias especficas, entonces habrn bacterias que no se vern afectadas por este y se presentarn incluso donde se aplique el antibitico. Si se toman muestras contaminadas por microorganismos, entonces tambin se presentarn hongos. Si se presentan hongos en las muestras, entonces estarn en cualquier zona del cultivo, ya que los antibiticos no actan sobre ellos.

INTRODUCCIN El ser humano, dentro del planeta se desarrolla junto a otras formas de vida, como lo son los diferentes tipos de plantas y hongos. Adems, el hombre convive con diversos tipos de animales que se encuentran repartidos a lo largo de todo el planeta. Estas formas de vida las podemos percibir gracias a nuestros sentidos, pero el hombre muchas veces no se da cuenta de que incluso comparte lugar con otras formas de vida existentes que no son distinguidas a simple vista. Estas unidades vitales que, de alguna forma comparten con el hombre, son llamadas bacterias. Las bacterias son clulas del tipo procarionte formadas principalmente por una membrana plasmtica, un material gentico indispensable para vivir y una simple organizacin interna para realizar todas sus funciones vitales. Muchas veces, estos microorganismos causan dao a otras formas de vida, por lo que son considerados como potenciales agentes patgenos, ya que pueden agruparse para formar colonias y as habitar dentro de un organismo mayor, tomando de l, los alimentos necesarios para poder sobrevivir. Como la bacteria puede adoptar diferentes formas dependiendo del medio en que se encuentre, su agrupacin puede generar un dao an mayor que la misma bacteria produce por s sola, ya que es mucho ms difcil destruir su conjunto, que una bacteria individual; otras veces estas bacterias conviven dentro de otros organismos a travs de una relacin simbitica, donde ningn organismo sale perjudicado. La forma en la que estas se reproducen es llamada fisin binaria, que consiste en una serie de procesos que tienen como fin duplicar su material gentico y separarlo de la clula progenitora junto a otras microestructuras, de tal modo de formar otra clula

idntica. Existen otras formas de intercambio gentico entre bacterias pero que no son consideradas formas de reproduccin donde s hay intercambio gentico, estos procesos son, la conjugacin bacteriana, transformacin y la transduccin. Para detener o evitar el dao que esta forma de vida produce dentro de una persona por ejemplo, se deben aplicar medicamentos llamados antibiticos cuya funcin es destruir o evitar la reproduccin de colonias de bacterias dentro de un organismo con el fin de evitar que siga causando un dao mayor. Un ejemplo es la Amoxicilina, la cual es un tipo de antibitico que destruye un amplio espectro de bacterias, se refiere a amplio espectro debido a que el antibitico no tiene slo un mecanismo de accin, ya que puede atacar a la pared celular, la membrana celular o tambin puede bloquear la sntesis de ADN, ARN, protenas, enzimas e incluso la funcionalidad de los ribosomas de una clula procarionte (bacteria). Hay que dejar en claro que muchas de las bacterias no mueren con determinado antibitico, esto se produce, debido a que la tasa de reproduccin bacteriana e intercambio gentico es muy alta, por lo que pueden generar mucha variabilidad gentica, provocando muchas veces que la bacteria se acostumbre a vivir con el antibitico hasta que de alguna manera le sea una sustancia inocua. Existen diferentes lugares en donde podemos encontrar bacterias, debido a que son millones los tipos que viven a nuestro alrededor. Muchas de ellas viven en el aire, escondidas en lugares hmedos e incluso flotando en el aire, algunas habitan en el agua o en lugares inimaginables del planeta. Algunas te causan dao u otras te ayudan en actividades de tu organismo, pero siempre estas se encuentran distribuidas en todo el planeta y en diferentes zonas, las cuales tienen que entregarle los nutrientes y un buen ambiente necesario para que puedan sobrevivir. Una forma artificial de mantener bacterias vivas es creando un medio de cultivo. Un medio de cultivo es un gel o una solucin que consiste en generar un medio ptimo para el normal desarrollo y reproduccin de microorganismos como bacterias. Como requisitos, este medio generalmente debe estar en solucin acuosa, y debe contener los nutrientes necesarios para el desarrollo ptimo de los microorganismos, como los azcares. Existen diversos tipos de cultivos que se clasifican segn sus caractersticas fsicas, composicin qumica, o su uso. Los requerimientos esenciales que deben tener los medios de cultivo para un correcto crecimiento de los microorganismos, son los siguientes: tener los nutrientes necesarios como carbono, nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas; consistencia adecuada del medio; un nivel mnimo de humedad; oscuridad, por lo general; pH neutro habitualmente; temperatura entre 15 y 43C; y que todos los instrumentos a utilizar estn esterilizados.

PROCEDIMIENTO Materiales: Vaso precipitado Agua (200 ml) Olla campera Azul de Metileno (3 ml) 30 gr de gelatina sin sabor Cpsulas de Vidrio (4) Alcohol Papel Film Mechero Rejilla para mechero Pipeta Cuchara para revolver Amoxicilina en cpsula de 500 gr Agua destilada Mortero Hisopos (cotonetes o cotonitos) Lupa

Actividades Da 1: 1) Colocar el agua (200 ml) en el vaso de precipitado y poner a hervir sobre el mechero. Una vez hervida el agua, vaciar a la olla junto con los 30 grs. de gelatina sin sabor y comenzar a revolver hasta disolver completamente. Agregar 3 ml de azul de metileno a la mezcla utilizando la pipeta. Colocar la olla sobre el mechero y revolver suavemente hasta hervir. Mientras la mezcla est sobre el mechero, limpiar las cpsulas con alcohol. Una vez que la mezcla ha hervido, retirar las burbujas que hayan aparecido. Vaciar el contenido sobre las 4 cpsulas hasta de ellas y dejar enfriar. Cubrir las cpsulas con papel film, de manera que queden bien selladas. Guardar cpsulas preparadas en un refrigerador.

2)

3) 4) 5) 6) 7) 8) 9)

Actividades Da 2: 1) Retirar las cpsulas para los siguientes procedimientos. Cuidar de que el agua evaporada que se encuentra en el papel film no caiga a la mezcla de la cpsula cuando se retire. 2) Moler un trozo de Amoxicilina en el mortero, y disolver en agua destilada. 3) Con la gelatina ya fra y consistente, aplicar el antibitico sobre la mitad inferior de cada una de las cpsulas. 4) Pasar las dos cabecillas de un cotonito por cada foco infeccioso para extraer la muestra (Infeccin (orina), infeccin bucal, objeto y alimento). Debe ser un cotonito para cada muestra. 5) Deslizar el cotonito de cada muestra extrada en forma zig-zag desde la parte superior de la cpsula (donde no hay antibitico), hasta la parte inferior (donde se encuentra la disolucin de amoxicilina) y repetir el procedimiento sobre la misma lnea con la otra cabecilla del cotonito. 6) Repetir el proceso anterior para cada una de las muestras: Infeccin (orina), infeccin bucal, objeto y alimento. 7) Sellar muy bien los cultivos con el papel blanco y guardar tres de las cpsulas (con muestras de infeccin, infeccin a nivel oral y objeto) en una estufa con temperatura entre 24C y 27C, y dejar la cpsula con la muestra de alimento a temperatura ambiente. Se debe procurar dejar las cpsulas de manera que no queden inclinadas. (Da 1 de cultivo)

Actividades Da 3: 1) Retirar cpsulas para su observacin. 2) Observar a simple vista. 3) Observar bajo lupa.

RESULTADOS PRIMER DA Tiempo de cultivo: 3 das Muestra N1 Orina Presenta cierta cantidad de bacterias en la zona sin antibitico, y en la zona con antibitico estn ausentes. Presenta una cantidad disminuida de hongos de tamao pequeo.

Muestra N2 Oral No presenta bacterias Se observa la presencia de un solo hongo.

Muestra N3 Objeto Gran cantidad de bacterias perceptibles nicamente en la zona sin antibiticos.

Muestra N4 Alimento Ausencia de bacterias en ambas zonas del cultivo. Presenta brotes de hongos.

RESULTADOS LTIMO DA Tiempo de cultivo: 9 das Muestra N1 Infeccin (Orina) Presenta gran cantidad bacterias en la zona sin antibitico. Presenta 3 tipos hongos en ambas zonas, distintos de

de

Muestra N2 Oral Presenta 3 tipos diferentes de hongos tanto en la zona sin antibitico como en la zona con medicamento. No presenta bacterias.

Muestra N3 Objeto Presenta bacterias en todo el medio. Presenta hongos en ambas zonas.

Muestra N4 Alimento No presenta bacterias. Presenta 2 diferentes de hongos. tipos

CONCLUSIONES

El cultivo con la muestra de orina desarroll ms bacterias que las otras muestras, por lo tanto la orina estaba ms contaminada. El cultivo de la muestra del objeto present ms bacterias que la muestra del alimento, por lo tanto el objeto se expuso a ms microorganismos que lo contaminaran. En el caso de la muestra de orina, en el lugar donde se aplic Amoxicilina no se presentaron bacterias, en contraste con la zona donde no se aplic el antibitico. Es decir, la Amoxicilina acta sobre las determinadas bacterias que provenan de la orina. En la muestra del objeto se reprodujeron bacterias a lo largo de todo el medio de cultivo, por lo que se comprueba que la Amoxicilina sirve slo para algunas bacterias, y este no es el caso. El hecho de que en la muestra del objeto se hayan presentado bacterias tanto en la zona con antibitico como en la sin antibitico, evidencia que hay bacterias que pueden mutar para hacerse ms resistentes a estos medicamentos. En la muestra de la boca no se desarrollaron bacterias, ya que la placa bacteriana que se haba formado en la dentadura de nuestro compaero, fue removida antes de obtener la muestra tras el lavado de dientes. Y an as, las bacterias que quedaron no fueron obtenidas por el cotonito. En el cultivo con la muestra del alimento (manzana masticada) no se presenciaron bacterias en ninguna de las dos zonas, ya que la persona que ingiri este alimento no tena gran cantidad de bacterias en su boca, y adems debido a que no lograron reproducirse bacterias provenientes del basurero donde fue arrojada la manzana. Todas las muestras presentaron hongos a causa de que todos los focos infecciosos que se utilizaron estaban expuestos a la humedad del medio ambiente. La Amoxicilina no tiene efecto alguno sobre los hongos, ya que acta solo inhibiendo la reproduccin de determinadas bacterias. La muestra de la orina desarroll ms bacterias que la muestra del objeto, debido a que la orina estaba ms contaminada. El caldo utilizado para formar el medio de cultivo es probable que no haya sido propicio para el desarrollo de algunas bacterias, como por ejemplo las de la boca y del alimento. Ya que no se encontraron bacterias en aquellas muestras. La jalea no proporcion los nutrimentos suficientes para el correcto crecimiento de algunas bacterias de la muestra del alimento y la muestra oral.

La solucin preparada como medio de cultivo tambin contiene nutrimentos para el desarrollo de hongos, ya que stos aparecen en todas las muestras. Dentro de las zonas donde se presentaron bacterias, se aprecian unas agrupaciones de ellas ms grandes que otras, por lo que algunas se desarrollaron con distinta tasa de reproduccin.