Coccidios intestinales.

Las infecciones humanas causadas por Cryptosporidium spp., Cyclospora cayetanensis e Isospora belli. Transmisin oral-fecal. Diarrea Principal sndrome. Individuo competente e inmunocomprometidos. Criptosporidiosis produce la ms severa y prolongada enfermedad en pacientes con SIDA. C. cayetanensis. Importancia. Diarrea en inmunocompetente. Isospora belli: Grave y prolongada en inmunocomprometidos tambin se presenta en inmunocompetente. Todos intracelulares. Raramente hay invasin extra epitelial. Cryptosporidium spp. 4-6 um extra citoplasmtica. C. cayetanensis. 15-20 um profundo supra nuclear. Isospora: no MO si MET supra nuclear.

Diagnostico. Mtodos directos. 1. Diagnostico parasitolgico. Demostracin de Ooquiste en heces. Visualizacin del Ooquiste/otros estudios secreciones y biopsias. 2. Intestinal. 1.-Metodos de concentracin. 2.- Coloracin (ZN, safranina, quimioluminiscencia) 3.- Histologa.

en

Cryptosporidium spp.
Cryptosporidium descubierta por Tyzzer 1907. 76 Se determina su patogenicidad en Humano (Animales => Humanos) Ubicuo. Resistente al cloro. Principal patgeno entrico. Parasito oportunista. Asociado al agua (Enfermedad Hdrica.) No tratamiento definitivo o paliativo.

Mtodos indirectos. Deteccin de antgeno en heces. Kit comerciales (IFI, IFD, ELISA) Diagnostico Inmunolgico. IFI. Ac. Monoclonales y policlonales. ELISA. Western Blot. Electroforesis Biologa molecular: PCR.

Epidemiologia.
Tratamiento de agua. 80 ppm con cloro por 30 minutos Ozono 1ppm por 5 horas. Congelacin o calentamiento (>72 C / 1h) Viable por una semana.

Biologa y morfologa.
Ciclo monoxenico. No especificidad del husped. Ooquiste sin esporoquiste con 4 esporozoito. Microgametos son flagelos. Intracelular extra citoplasmtica. Posee ciclo asexual ciclo sexual. Ooquiste 80% Pared Gruesa (Ambiente) 20% (Autoinfeccin)

Clnica.
Portador asintomtico. Enfermedad en inmunocompetente auto limitada 2-14dias. Diarrea acuosa. Desequilibrio hidroelectrolitico. Sndrome de mala absorcin.

Transmisin. Directa. Persona a persona. Los Ooquiste son infectante al ser expulsados. (Antroponotica) A travs del agua: con 30 Ooquiste puede ocurrir la infeccin (Urbana) Zoonotica. Ambos genotipos estn presentes en animales (Rural) Infeccin por contacto sexual. Patognesis. Fase infectante Ooquiste (Heces animales enfermos). Ooquiste Esporozoito (Infecta las clulas epiteliales intestino delgado) Trofozoito Meronte 1 generacin Meronte 2 generacin Gametos micro gametocitos macrogrametocitos. Merogonia: Lumen intestinal. Ooquiste: de pared gruesa. Sale del ambiente. De pared delgada. Causa autoinfeccin. Tamao. Menos de 8 um.

C. parvum. Al fresco. Grnulos negros en los Ooquiste. Contraste de fase. Flotacin de Shealther. Ooquiste refractiles. (El mtodo de Shealther solo es con heces fresca) Kinyoun: Ooquiste de rojo intenso con grandes negros.

Genotipo 1 o H:
Afecta humanos y se denomina C. hominis (Transmisin antroponotica)

Genotipo 2 o C.
Afecta animales y algunas veces a humanos. C. parvum (Transmisin zoonotica)

Cyclospora cayetanensis.
Coccidio intestinal causante de cyclosporidiosis, descubierto en la universidad peruana Cayetana Heredia, presenta caractersticas morfolgicas semejantes a Isospora y Cryptosporidium. Salvo que posee 2 esporoquiste en cada ooquiste y 2 esporozoito por esporoquiste los ooquistes se eliminan de forma inmadura a travs de las heces por lo que no es infectante. Cyclospora est relacionada al consumo de alimentos contaminados a diferencia de Cryptosporidium que su transmisin es bsicamente hdrica. EPIDEMIOLOGIA Cyclosporidioses se presenta con ms frecuencia en paciente inmunocompetentes, su trasmisin es fecal-oral (Agua y alimentos Contaminados) Brote presentado en bolvar: 12% (+) indgenas 9% (+) VIH MORFOLOGA Son esfricos ovales, los ooquiste no presentan refringencia Miden 8-10 micras son acido alcohol resistente se tien Rosa plido o Rosa Rojizo con Ziehl Neelsen. CICLO BIOLGICO. Poco definido se cree que s parece a los de Cryptosporidium, los esporozoitos se desenquistan o exquistan a partir de los ooquistes en el tubo digstivo despus de ingerir alimentos contaminados, estos esporozoitos ingresan a las clulas epiteliales del intestino delgado ocasiona reaccin inflamatoria, posee un ciclo sexual (formacin de zigote-division-ooquiste), el ooquiste sale a travs de las, contaminan los alimentos, luego estos son ingeridos. PATOGENIA Agresin tisular y celular Reaccin inflamatoria del epitelio en forma de borde de cepillo Acortamiento y atrofia de de vellosidades intestinales Hiperplasia de las criptas del yeyuno Se pierde la superficie y capacidad de Absorcin intestinal CLNICA Cuadro agudo (inmuno competentes) Diarrea Acuosa/Dolor abdominal Flatulencia Hiporexia Fiebre de poca intensidad Nauseas Vmitos. Forma crnica (Inmunosuprimido VIH+) estos pacientes suelen ser crnico y de larga duracin) Das de gran severidad Otros

Puntos clave para el Diagnstico de laboratorio de Cyclospora. Identificacin del ooquiste en especmenes fecales por microscopia de luz Otros mtodos bajo investigacin 1. Microscopio Muestra de heces mltiples (al menos 3) Usar mtodos de concentracin (formol ter) Tcnica diagnostica de eleccin. Moteje al fresco - Microscopia de Campo Brillante contraste de fase - Fluorescencia Bajo LUV Coloracin Acido Alcohol Resistente modificada de (Kinyoum) - Color rojo sobre fondo Verde azulado - Tonos variables - No perifrico Redondo (Capsulados o distorsionados) - Grnulos y/o tener una pared Caracterstica. Coloracin con Safranina - Se colorean uniformemente de rojo a naranja, requiere calentamiento. Otros mtodos - Coloracin tricomina: ooquistes detectados ms no pueden ser confirmados, pueden aparecer no coloreados. - Identificacion Histolgica por Biopsia intestinales - No rutina. 2. Ensayo de esporulacin 2-3 semanas en dicromato de Potasio 2.5%, se presenta ooquiste maduro con 2 esporoquiste difcil de ver los esporozoitos en microscopio. Mtodos moleculares PCR: NO RUTINA, BUENOS RESULTADOS Diferencia entre Crypto, Ciclo Cryptosporidium Cyclospora Tamao 4-6 micra 8-10 micras Esporozoito discernibles No visibles Autofluerescencia Ausente presenta Ensayo con Anticuerpos Fluorescentes Disponible Ausente directos EIA disponible ausente Isospora belli Isosporidiasis enfermedad causada por el gnero Isospora, que tiene una especie que afecta al humano I.belli, parasito oportunista, causante del sndrome Diarreico Crnico. Se puede encontrar en pacientes con SIDA (con mayor frecuencia) pero tambin en inmunocompetentes. Tiene

dos tipos de reproduccin; asexuada por esquizogonia a nivel de los enterocitos, y sexuada (ooquiste). EPIDEMIOLOGIA Ms frecuente en inmunodeprimidos que en inmunocompetetntes, prevencin variable en inmunocompetentes (3%). Se ha estimado el 30-50% de pacientes VIH (+) USA, 90% en frica, en pacientes de este tipo la diarrea es crnica en un 0,4-16%. Se trasmite a travs del agua y alimentos. Esta infeccin es ms frecuente en el trpico y pases sub desarrollado. MORFOLOGA Presenta Ooquiste, que son estructuras ovaladas, en el interior se observa un esporoblasto . De cada esporoblasto se forman dos esporoquiste de cada eporoquiste se forma 4 esporozoito. El ooquiste tiene una pared trasparente de resistencia y una pared gruesa parecida a los quiste. Los ooquistes inmaduros son ovoides con extremo ligeramente redondeado. Mide aproximadamente de 22-33 micras de largo por 10-20 de ancho. CICLO BIOLGICO Ooquiste (agua y alimentos) son ingeridos infectado al individuo, del esporoquiste sale los esporozoito, se introduce la regin apical dentro del enterocito, dentro de la clula ocurre la reproduccin asexual (esquizogonica) se forma l trofozoito luego se forma una vacuola parasitofara, da lugar al esquizonte y luego al merozoito ocurre ruptura de la clula (enterocito), los merozoito se diferencia a microgametocitos y macrogametocitos, ocurre reproduccin sexual se forma el ooquiste. PATOGENIA Relacionado al nmero de parasito en el intestino Hay atrofia de Vellosidades, sndrome de mala absorcin intestinal, reaccin inflamatoria, diarrea dolor abdominal, meteorismo. Necrosis de la mucosa y submucosa. CLNICA Casos prolongados, fiebre, cefalea, esteatorrea y prdida de peso, puede persistir durante meses en pacientes con VIH (+) sndrome diarreico. Desequilibrio electrolito. Muerte. DIAGNOSTICO DE LABORATORIO. Demostracin del ooquiste alargados tpicos No esporulado en heces. Examen directo o Concentracin (sedimentacin o flotacin). En el Zehl neelsen el esporoblasto dentro de ooquiste se colorea rojo. Tamao ooquiste

Cyclospor a del 8-10

Cryptosporidiu m 3-6

N de esporoquiste N de esporozoito Variable Autofluorescenci a

2 2 variable Verde azul

ninguno 4 si brillante

Isospor a 20-30 por 1019 2 8 si variabl e

MALARIA. (PALUSDIMO).
CARACTERISTICAS. Enfermedad causada por un protozoo del genero Plasmodium. Pertenece al subphylum Apicomplexa. Enfermedad parasitaria metaxenica (Vector biolgico: Anopheles.) Laveran demuestra el protozoo en sangre, y Ross demuestra el papel del mosquito en la enfermedad. P. vivax, P. falciparum, P. malariae y P. ovale EPIDEMIOLOGIA. Mayor rea endmica: frica (80M de casos). Mayor concentracin de casos. Latinoamrica. Cada ao 400 M de casos y 1,3 M de muertos/ao. Mayora de los muertos nios. Aumento del riesgo en emb. y RN. Inaccesibilidad de serv. Emerg. De cepas de parasito resistente. (Venezuela 1er caso) 5ta parte de la pob. Mundial en riesgo de contraer la enf. Cambios climticos. Degradacin del medio ambiente. Def. De Atencin en salud. Mov. Migratorio. Conflictos armados. Vnzla. Edo. Bolvar, Amazonas (Comunidad Amerindia: P. malariae) (P. falciparum) y Sucre se origina el 80% de los casos descrito anualmente. La formula parasitaria sigue siendo a favor de P. vivax (80.9%) En Bolvar el municipio Sifontes, es donde se tiene ms casos, luego Piar, Cedeo, Sucre, Ral Leoni Para 1920, Tasa de mortalidad. 240 x cada 100.000 Hab. Dr. Arnaldo Galvandon. Control sobre los mosquitos. Vectores. Anopheles darlingi. Anopheles aguasalis. Anopheles nueztovari. Anopheles Marajoara. Anopheles braziliensis.

MORFOLOGIA. Trofozoito. Constan de dos partes, citoplasma que se colorea de azul y ncleo o cromatina, de color rojo. El citoplasma en los parsitos jvenes tiene forma de anillo y en los adultos es ameboidea o en banda, segn la especie de Plasmodium. El eritrocito parasitado puede sufrir deformaciones y presentar granulaciones rosadas, que en las especies P. vivax y P. ovale se denominan de Schffner; en P. falciparum se llaman de Maurer y en P. malariae que son difciles de observar, las granulaciones de Ziemann. Trofozoito maduro y Trofozoito ameboidea se ven nicamente en infecciones severas. Anopheles inyecta trofozoito y se infecta con Merozotos. Se localizan en capilares profundos, por su baja concentracin de oxigeno. Trofozoito joven: Atrofian el G.R. Trofozoito ameboidea: Ocupan el 30-40% del G.R. Trofozoito maduro: Tienen un ncleo nico, crean una malla dentro del G.R., En su interior aparecen unas estructuras llamadas merozotos. Esquizonte. Si tienes menos de 8 estructuras internas (Merozotos) es un Esquizonte, pre segmentado (Inmaduro) Si tienes ms de 8-16 estructuras internas (Merozotos) es un Esquizonte Segmentado (Maduro) En las especies vivax y ovale hay formas de parasito que a nivel heptico forman una fase latente por meses, por lo que se les da el nombre de Hipnozoitos. No estn presente en el Plasmodium falciparum. Merozotos. Salen del Esquizonte maduro, por ruptura del eritrocito para luego entrar cada uno a un nuevo eritrocito. Tienen forma oval y miden 1.5 micras de longitud por 1 micra de dimetro. Por uno de los lados del parsito se encuentra el citostomo, a travs del cual ingiere citoplasma de la clula del husped. En el extremo apical tambin se encuentran las roptrias que estn rodeadas por los micro- nemas, estas dos estructuras juegan un papel importante en la entrada del merozotos a las clulas del husped. Gametocitos. (Importancia epidemiolgica) Clulas sexuales pero inmaduras. En el hombre no puede progresar hasta clula maduras, todo el tiempo que lo pasa en el humano es en forma inmadura. Ocupan casi todo el eritrocito o pueden estar libres. Macrogametocitos.: Clula sexual femenina. Cromatina condensada, citoplasma azul o grisceo, ncleo picnotico excntrico, adosado o separado de la membrana parasitaria. Microgametocitos.: Clula sexual masculina. Cromatina dispersa, citoplasma rosado ncleo particulado

P. falciparum. Macrogametocitos.: - Granulaciones de Maurer.. - Ncleo excntrico. - Basfilo con policromatofilia. - Citoplasma azul plido. Microgametocitos.: - Ncleos con grnulos en su interior. - Sufre una ex flagelacin. - Citoplasma Rosado. PATOLOGA. 1. Alteraciones en el eritrocito. Todas las especies de Plasmodium que afectan al hombre daan los eritrocitos. Los cambios de los eritrocitos son ms intensos en P. falciparum y consisten en: a) Prdida de la elasticidad. b) Cito adherencia. Aumento de la adhesividad al endotelio capilar. c) Aumento de la fragilidad. Se presenta tanto en glbulos parasitados como en no parasitados. d) Transporte de oxgeno disminuido. e) Liberacin de toxinas y antgenos 2. Alteraciones posteriores al dao eritrocitario. a) Hemolisis. Es la causa principal de la anemia, En esta hemlisis se liberan, adems de hemoglobina, parsitos, pigmento malrico o hemozona, toxinas y antgenos. Las toxinas y antgenos pueden actuar sobre el sistema vascular y la formacin de complejos inmunes, b) Bloqueo capilar. Los trombos de eritrocitos taponan los capilares, lo cual contribuye a la anoxia y al dao tisular. c) Vasodilatacin y aumento de la permeabilidad capilar. d) Defectos de la coagulacin. Se originan en deficiencia de la formacin de factores coagulantes por la insuficiencia heptica, lo cual tambin ha sido atribuido a la coagulacin intravascular diseminada. 3. Alteraciones en los rganos.
Diferencia Biolgicas. vivax falciparum malariae ovale knowlesi

Clula GR todo tipo de todo tipo infectada jvenes GR. de GR. esquizogon 48 horas. 24-36 horas 72 horas ico Formas sexuales 4 da 9 das 15 das. 18.000 Mz

48 horas 5 das.

24 horas

6 das

exoeritrocit 8 das 5-7 das aria Esquizonte 10.000 40.000 Mz s Mz. Caract. Hipnozoito Paroxismo s. irregular. Barbero de Laveran

15.000 Mz Cuadro clnico ms intenso y mortal

MANIFESTACIONES CLNICAS El cuadro clnico caracterstico se resume bsicamente en escalofro, fiebre y sudoracin, asociados a anemia, leucopenia y posteriormente a esplenomegalia. En muchos casos se presen-tan cuadros atpicos. La enfermedad tiende hacia la cronicidad, estado que se caracteriza por perodos de latencia, con etapas de recadas o recrudescencia. Se entiende por recada a la sintomatologa debida a la reaparicin de merozotos procedentes de hipnozoitos hepticos, principalmente en P. vivax, desencadenada por traumas, inmunosupresin, etc. El perodo de incubacin es comnmente de 10 a 14 das, pero se acorta o prolonga segn el nmero de parsitos inoculados, la especie de Plasmodium y el grado de inmunidad del husped. Durante este tiempo ocurre en el hgado el ciclo pre-eritroctico. DIAGNOSTICO. Examen microscpico. Se hace por gota gruesa y extendido, teidos con los colorantes derivados del Romanowsky, como son Giemsa, Wright, Leishman y Field. Deteccin del ADN y ARN del parsito. Este procedimiento se conoce con el nombre de "QBC" (Quantitative Buffy Coat). La separacin de las clulas de la sangre se hace en una micro centrfuga especial para los tubos capilares y se lee mediante un aparato de luz ultravioleta conectado a un microscopio comn, pero con condensador de campo oscuro. El ADN y el ARN fluorescen, lo cual permite identificar los protozoos en la parte superior de la capa de glbulos rojos separados en el tubo capilar. La prueba llamada ParaSigh(R) se basa en la deteccin inmunolgica de la protena-2 rica en histidina, derivada de los trofozotos de P. falciparum (HRP -2).

Toxoplasma gondii (TOXOPLASMOSIS)

Parasito intracelular obligado; es el ms diseminado en el ambiente. Puede servirle como hospedador desde el humano hasta un canario. Aislado en 1908 en Ctecnodactylus gondii Fase Sexual: Epitelio entrico del gato .Fase Asexual: Extra intestinal en los hospedadores intermedios.

Husped definitivo ingestin de quisteesquizogonia (esquizonte trofozoito)Gamagonia (microgametos y macrogametosgametos). Esporogonia (ooquiste 2 esporoblasto con 4 Ez) CLNICA Inf asintomtica: frecuentemente se encuentra Ac circulantes sin sntomas. Inf crnicas ms frecuentes. Toxoplasmosis aguda. Fiebre alta, escalofro, sudoracin, cefalea, astenia, anorexia, tos, dolor abdominal, nauseas, vmitos, diarrea, encefalitis, miocarditis. Toxoplasmosis ganglionario/linftico. Forma clnica ms comn en nios y jvenes. Cuadro clnico ms frecuente es el sndrome febril, ganglios aumentan de tamao, anemia y leucopenia. Toxoplasmosis ocular. Muy comn, cualquier edad sexo, inf aguda o crnica, inf granulomatosareninocoiditis, disminuye bruscamente la visin, desprendimiento de la retina. Infeccin materna. 90% (subclinica) asintomtico, linfadinopatias, fiebre, cefalea, malestar general, mialgias, ocasionalmente, dolor de garganta. Inf congnita. Hidrocefalia, calcificacin intracraneal. DIAGNOSTICO
PARASITOLGICO.

MORFOLOGA
Taquizoitos: (tachos, reproduccin muy rpida). Se presenta en fase aguada de la infeccin intracelular, infecta dif clulas excepto GR, forma de media luna. 4-8 um x 2-4 um. Rodeado por 3 memb llamada Pelicula, compuesta por glicoprotenas de superficie. Complejo apical roptrias protenas que permite penetrar a la cel y se multiplican por endodiogenia. Bradizoito (bradis, lento, reproduccin ms lenta que los taquizoitos). Morfologa igual que los Tz pero presentan granulos de polisacridos. 2x7um. Se localiza dentro de los seudoquiste reproducindose. Quiste o Seudoquiste. Estructura esfrica cub gruesa capa de glicoprotenas liberado por los Bz. Quiste reciente 6 o 7um con 4 Bz. Ooquiste. Estructura ovalada de pared gruesa muy transparente 9-11x10-13um. En su interior hay un Esporoblastose divide en 2 porciones2esporoblastos4Ez. Intestino de gato y felinosciclo sexual. Infe a temp amb por 2 aos. Esporozoitos (Ez). Darn lugar a los trofozoitos en el husped mamfero. 2-4x7-8um. EPIDEMIOLOGIA Padecimiento cosmopolita (500 mil millones aprox). Gato domestico es el hosp definitivo ms importante. Infeccin generalmente autolimitada asintomtica en inmuno competente. Inf en reas clidas y hmedas. Toxoplasmosis adquirida. Se obtiene por la ingestin de ooquiste que contiene alimento o bebidas presente en la carne cruda o insuficientemente cocida. Toxoplasmosis transfusional. Por donacin de rganos y transfusin de sangre. Toxoplasmosis congnita. Transplacentario de la madre, mujeres que contraen la inf durante el embarazo. Los Tz pueden atravesar la placenta en forma intra y extracelular. MECANISMO DE TRANSMISIN Fecal oral (ingestin de los ooquiste). Carnivorismo (ingestin de Bz). Inhalacin de Oq. Trasplante de rgano o tejido. Inf congnita. Otros mecanismos donde intervienen los Tz. Lactancia materna. Contacto sexual. CICLO BIOLGICO Husped intermediario ingestin del ooquisteliberacion e invasin de las cel epiteliales del intestinoliberacion de Tzva sangunea y linfticainf de la cel (macrfago) divisin intracel por endodiogeniafase proliferativa. Lib de Tzfase qustica no se libera los Bz y pasan aos y meses (inf crnica).

- Presenta notable dificultad, variedad de situaciones clnicas, limitaciones en los mtodos diagnsticos. - Frotis sanguneo. - Biopsia: granular, heptica, esplnica, muscular. Difcil la demostracin del parasito. - Sangre de cordn umbilical. - cultivo. Toxoplasmosis aguda - inoculacin en animales. 73%
SEROLGICO

Prueba tintorial de Sabin y Feldam hemaglutinacin indirecta floculacin en lamina aglutinacin EIA, IFT, ISAGA ELISA

MOLECULAR

-PCR
ndice de avidez IgG IgM IgG + +

Infeccin Aguda Crnica Aguda + + crnica Avidez de IgG Dism (IgM+ IgG+) AGUDA Avidez IgG Aum (IgM+ IgG+) CRONICA Ac IgG Aumenta 1 a 2 semanas.

Tratamiento Si No o