FAMILIA ENTEROBACTERIACEAE Peste 30 genuri cu 130 specii Habitat: intestinul omului, animalelor Martor al contaminrii fecale al mediului Majoritatea

constituie flora normal (comensal) intestinal CLASIFICAREA N FUNCIE DE PATOGENITATE: Enterobacterii patogene: genurile Shigella, Salmonella, Yersinia, unele variante patogene: Yersinia, ale speciei Escherichia coli; coli; Enterobacterii condiionat patogene: genurile Citrobacter, Enterobacter, Hafnia, patogene: Klebsiella, Morganella, Proteus, Providencia, Serratia, Edwardsiella, etc. Edwardsiella, TESTE-CHEIE ALE FAMILIEI TESTE-CHEIE Bacterii gramnegative Nesporogene Nesporogene Mobile-peritriche/imobile Facultativ-anaerobe Fermenteaz glucoza Catalazo-pozitive Oxidazo-negative Reduc nitraii n nitrii TESTE PRIMARE (identificarea genurilor) Utilizarea citratului de Na (mediul Simmons) Utilizarea Simmons) Utilizarea malonatului de Na Utilizarea Hidroliza ureei Decarboxilarea lizinei (LDC) Dezaminarea fenilalaninei (FAD) Producere de H2S Fermentarea glucozei pn la acizi (testul MR) Fermentarea glucozei pn la acetoin (testul VP) Mobilitatea n geloz semilichid TESTE SECUNDARE (identificarea speciilor/variantelor) Teste biochimice (fermentarea glucidelor, decarboxilarea altor aminoacizi (f (arginin, ornitin), producerea indolului, etc) ornitin) Fagoidentificarea i lizotipia Colicinogenotipia Seroidentificarea Antibiograma CARACTERE MORFOBIOLOGICE Caractere morfologice: bastonae G-, mobile peritriche (Klebsiella, Yersinia morfologice: (Klebsiella, pestis, Shigella imobile), nesporogene, formeaz microcapsule (Klebsiella pestis, (Klebsiella capsulat), posed fimbrii. Caractere de cultur: cultur: Anaerobe facultativ

Temperatura optim 37 grade (20-45) Nepretenioase nutritiv Colonii S, Klebsiella mucoide, Proteus invadeaz suprafaa mediului MEDII DE CULTUR De transport: glicerin 30%, soluie salin 3%, soluie tampon-fosfatic transport: De mbogire a bacteriilor patogene: Kauffmann, Mueller, bulion selenit, etc Kauf Diferenial-diagnostice: Diferenial-diagnostice: de izolare (medii lactozate speciile patogene-lactozo-, speciile oportuniste L+/-) ENDO, LEVIN, PLOSKIREV Componena: baz nutritiv, lactoz, indicator Coloniile L+ : colorate Coloniile L- : incolore Mediul Wilson-Blaire cu sulfit de Bi (Salmonella reduce sulfitul n sulfur de Bi colonii (Salmonella negre pe mediul verde)
-

II. De acumulare i difereniere primar (medii multitest) Russel, Kligler (glucoz, lactoz, sruri de Fe) Olkeniki (glucoz, lactoz, zaharoz, uree, sruri de Fe) III. De identificare primar i secundar CARACTERE ANTIGENICE ECA antigen comun fam. Enterobacteriaceae (interes taxonomic) Ag O (R), de perete, LPZ, termostabil i rezistent la alcool, sensibil la formol, specificitate de gen, specie, grup Ag H, flagelar, proteic, termolabil i inactivat de alcool, rezistent la formol, specificitate de tip (variant) Ag K, superficiale, capsulare, termovariabile, specificitate de specie, tip (mascheaz Ag O) Ag F, fimbriale, termolabile, nespecifice

GENUL SHIGELLA. DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL DIZENTERIEI Shigelele strict umane (bolnavi, reconvalesceni, purttori). Cauzeaz infecii intestinale, cea mai grav dizenteria bacterian. Clasificarea genului Shigella: Shigella: A Shigella dysenteriae (12 s/v, 12 b/v) ManB Shigella flexneri (6 s/v, 14 ss/v, 23 b/v) C Shigella boydii (18 s/v) D Shigella sonnei (1 s/v, 7 b/v) CARACTERE MORFOBIOLOGICE Enterobacteriaceea tipice, imobile, lactozo-negative, scindeaz glucoza pana la acizi (testul MR+), celelalte teste primare sunt negative Factori de patogenitate: Factori de adeziune la mucoasa colonului (fimbrii, LPZ) Microcapsula (antifagocitar) Factori de penetrare i multiplicare intracelular Toxine: Shigatoxina - neurotoxic, enterotoxic, citotoxic elaborat de S.dysenteriae 1

2. Enterotoxine (Shiga-like, verotoxina) (Shiga-like, 3. Endotoxina Structura antigenic: Ag O i K cu specificitate de gen, specie, subspecie, variant antigenic: Rezistena n mediul extern: extern: S.dysenteriae - foarte sensibil (1-2 ore) S.dysenteriae S.flexneri persist 1-3 sptmni n ap, 2 luni n lactate S.sonnei persist i se multiplic n lactate PATOGENEZA DIZENTERIEI BACTERIENE Sursa de infecie: bolnav, purttor infecie: Transmiterea fecal-oral: Contact direct (mini murdare) Alimentar (alimente, ap) Doza infectant: 10-100 bacterii Bacteriile se multiplic n intestin, colonizeaz epiteliul colonului, penetreaz intracelular intr (prin fagocitoz dirijat). Bacteriile se propag intra- i entercelular graie actinei depuse intrape suprafaa celular (caracter determinat plasmidic). Urmeaz multiplicarea local intracelular cu inflamaie fibrinoasa intens a colonului, micro-abcese i ulcere. Perioada de incubaie 2 - 4 zile Semne clinice febr, dureri abdominale, tenesme (spasme rectale), scaune lichide mucosanguinolente frecvente. Vindecarea n 2-5 zile (clinic, apoi microbiologic) Forme cronice sau portaj sunt posibile DIAGNOSTICUL DE LABORATOR AL DIZENTERIEI Prelevate: probe de scaun (elementele mucopurulente), apa, alimente, lavaje de pe Prelevate: suprafee Metode de diagnostic Examenul microscopic RIF Examenul bacteriologic - Izolarea culturii pure pe medii DD (Endo, Levin, Ploskirev) sau mbogirea 2. Coloniile L- sunt repicate pe mediile Olkeniki, Kligler pentru acumularea culturii pure/diferen. pure/diferen. (lactoza/zaharoza -, glucoza A, ureea -, H2S -) 3. Identificarea culturii pure - Caractere morfotinctoriale Caractere de cultur Caractere biochimice (teste primare, secundare) Caractere antigenice (seroidentificarea prin RA pe lam cu seruri imune antiShigella poli- i monovalente) Fagoidentificarea Virulena Antibiograma

4. Analiza rezultatelor i formularea rspunsului 3. Diagnosticul serologic (din a 5-7 zi de boal) - RA, RHAI (aduli 1:400 (S.flexneri) (S.flexneri) 1:200 (S.sonnei) (S.sonnei) copii 1:100 coproanticorpi (Ig A 1:80) ELISA RIFI Imunitate: specific de tip, 1-2 ani, umoral (IgA) Imunitate: Profilaxie: vaccinuri ribosomale, inactivate, atenuate (imunitate de scurt durat) Profilaxie: Tratament: antibiotice, eubiotice, bacteriofagi, vaccin inactivat (dizenteria cronic) Genul Escherichia. Diagnosticul de laborator al escherichiozelor. Genul Escherichia Spp.: E.coli, E.blattae, E.fergusonii, E.vulneris, E.hermanii Habitat: intestinul omului i animalelor (80% din flora aerob intestinal), 107-109 Habitat: bacterii/gram fecale. Contamineaz solul i apele de suprafa. Prezena E.coli - indicator de poluare fecal CARACTERE MORFOBIOLOGICE E.coli enterobacterie tipic, mobil, lactoza+, fermenteaz glucidele AG (teste primare MR+, mobilitate+) Structura antigenic Ag O 180 tipuri (O1, O2, O3......O180) Ag H 60 tipuri (H1, H2, etc) Ag K 100 tipuri (K1 prezent la sue virulente) Din combinaii rezult serovariante: O55:H2:K1

Factori de patogenitate Capsula (antifagocitar, K1 camuflaj imunologic datorit epitopilor comuni cu poliosialozilglicopeptide cerebrale la nou-nscui) proteine din ME i LPZ (anti-complement, protecie de factorii bactericizi ai sngelui) Adezine (fimbrii) Toxine (endotoxina, enterotoxine TS i TL, citotoxine (SLT-1, SLT-2) Hemolizina Siderofori (sisteme de captare a Fe) Bacteriocine (colicine)
-

FENOTIPURI DIAREIGENE Tulpini enteropatogene: EPEC (O26, O55, O111, O125, O142, etc). Responsabile de gastro-enterite infantile (infecii salmoneliforme). Ader la mucoasa int. subire fr a penetra intracelular. Tulpini enteroinvazive: EIEC (O28, O124, O143, etc). Responsabile de sindrom dizenteric cu invazia mucoasei colonului, penetrare intracelular, ulceraii. Tulpini enterotoxigene: ETEC (O6, O8, O20, O25, O115, etc). Responsabile de enterotoxigene: diareea cltorului, sindrom holeriform
-

Tulpini enterohemoragice: EHEC (O157:H7; O26, O111). Responsabile de colite hemoragice cu sindrom uremic-hemolitic (anemie hemolitic+trombocitopenie+insuficien renal) Tulpini enteroagregative: EAggEC (O111:H12). Posed adezine i SLT. Provoac diaree persistent (peste 14 zile) la copii. Tulpini enteroadezive: EAEC. Ader difuz la celulele intestinale. Provoac EAEC. diaree.
-

FENOTIPURI UROPATOGENE (O1, O2,O4,O6). Posed afinitate pentru mucoasa uro-genital (adezine) FENOTIPURI BACTERIEMICE Alte forme clinice provocate de E.coli: oc endotoxinic Meningite la nou-nscui (preponderent tulpini cu Ag K1) Infecii ale plgilor (frecvent de origine nozocomial) Toxiinfecii alimentare DIAGNOSTIC DE LABORATOR Prelevate n funcie de forma clinic: mase efcale, urin, snge, LCR, puroi, etc Metode de diagnostic Examenul microscopic de orientare (frotiu Gram n infecii extraintestinale, RIF) Examenul bacteriologic (de baz, cantitativ) Examenul serologic (retrospectiv). - RA cu autotulpini (titru diag. 1:200)

Tratamentul escherichiozelor Antibiotice (conform antibiogramei) Eubiotice Profilaxia escherichiozelor - nespecific