Sinteza masnih kiselina

Uloga masnih kiselina:

Gradivni blokovi za fosfolipide i glikolipide Za izgradnju plazma membrana Izvor energije Za sintezu hormona i intracelularnih glasnika

U jetri i u manjem procentu u mlenim lezdama, masnom tkivu i bubrezima

ATP NADPH Acetil KoA (poetak) Malonil KoA (nastavak sinteze)

Mitohondrije

Citoplazma

Prevoenje acetil-KoA, karboksilacijom do malonil-KoA.

O H 3C C S CoA

acetil -KoA
O

OOC

CH 2

S CoA

malonil -KoA

ATP- zavisna karboksilacija. Tokom kondenzacije dolazi do gubitka CO2 (spontana dekarboksilacija)

Enzim-biotin HCO3 + ATP Acetil-KoA 1 Karboksilaza ADP + Pi katalizuje Enzim-biotin-CO 2 dvostepenu O ll reakciju u kojoj 2 se acetil-KoA CH3-C-SCoA Enzim-biotin karboksilie do acetil-KoA O malonil-KoA. ll O2C-CH2-C-SKoA malonil -KoA

Enzim sadri prostetinu grupu biotin. ATP- zavisna karboksilacija biotina ostvaruje se preko aktivnog mesta 1, a transfer karboksilne grupe na acetil-Ko ostvaruje se preko aktivnog mesta 2.

O O

C C N NH CH CH H2C S CH O ( C 2)4 C H NH O C

( C 2)4 CH H

Karboksibiotin

lizinskaNH rezidua

Biotin je vezan za enzim amidskom vezom. Terminalna karboksilna grupa (na biotinu) i -amino grupa na lizinskom ostatku (na enzimu). Veza se ponaa kao duga fleksibilna ruka koja omoguava biotinskom prstenu da se pomera izmeu dva aktiva mesta.

Enzim-biotin

ADP + Pi Enzim-biotin-CO 2 O CH3-C-SCoA acetil-KoA

-

HCO3 + ATP

ll

2
Enzim-biotin O
ll

O2C-CH2-C-SKoA malonil -KoA

HCO3 + ATP + acetil-KoA

ADP + Pi + malonil-KoA

Acetil KoA dobija se u rekcijama

sa piruvat dehidrogenazom beta oksidacije masnih kiselina

iz mitohondrija prelazi u citoplazmu trikarboksilat citrat atl sistemom

citrat-sintaza

ATP citrat-liaza malat-dehidrogenaza NADPmalat-dehidrogenaza

Sinteza masnih kiselina

Malonil KoA i Acetil KoA prenose se na acil prenosni protein (ACP)
nosilac acil-ostataka u biosintezi masnih kiselna

Malonil ACP i Acetil ACP se preko 6 enzimski katalizovanih reakcija prevode u butiril ACP. U sedmoj reakciji se sintetie palmitinska kiselina (16 C). Multienzimski kompleks sintaza masnih kiselina.
7 razliitih enzima
12

Sinteza masnih kiselina

Malonil KoA i Acetil KoA prenose se na acil prenosni protein (ACP)
nosilac acil-ostataka u biosintezi masnih kiselna

Malonil ACP i Acetil ACP se preko 6 enzimski katalizovanih reakcija prevode u butiril ACP. U sedmoj reakciji se sintetie palmitinska kiselina (16 C). Multienzimski kompleks sintaza masnih kiselina.
7 razliitih enzima
13

Acil Prenosni Protein --ACP Acil Prenosni Protein ACP

Fosfopantoteonska grupa O HS-CH2-CH2-N-C-CH2-CH2-N-C-C-C-CH2-O-P-O-CH2-SerO OH H O Cisteamin
H

H HO CH3

ACP 10 kDa

O O HS-CH2-CH2-N-C-CH2-CH2-N-C-C-C-CH2-O-P-O-P-O-CH2 O O OH H O O O O-P-O OH

H HO CH3

Adenine
H

Koenzim A

OH

Sintaza masnih kiselina I i II enzim

Sintaza masnih kiselina

Malonil KoA i Acetil KoA prenose se na acil prenosni protein (ACP)
nosilac acil-ostataka u biosintezi masnih kiselna

Malonil ACP i Acetil ACP se preko 6 enzimski katalizovanih reakcija prevode u butiril ACP. U sedmoj reakciji se sintetie palmitinska kiselina (16 C). Multienzimski kompleks sintaza masnih kiselina.
7 razliitih enzima
16

 ketoacil-ACPsintaza (enzim kondenzacije)

17

Sledee tri reakcije su obrnute u odnosu na degradaciju masnih kiselina, sa izuzetkom:

NADPH se koristi umesto NADH i FADH2 Stvara se Denantiomer hidroksibutirata umesto Lenantiomera

Novi krug kondenzacije sa malonil-KoA (6x) do palmitoil -ACP

, trans-butenolil-ACP

18

Enzim sintaza masnih kiselina

Dimer
svaki monomer 7 domena sa razliitim enzimima VIII domen vezuje ACP

aceti l-S-KoA HS-KoA Pant SH Ci s SH

maloni l-S-KoA HS-KoA Ci s S C CH 3 O Pant Ci s S O C CH3

CO2 Pant Ci s SH O

Pant

SH

S C CH2

3
O

S C CH2 C CH3 O

1 Malonil /acetil -KoA-ACP Transacilaza COO 2 Malonil /acetil -KoA-ACP Transacilaza 3 Enzim kondenzacije ( -Ketoacil Sintaza)

Reakcija kondezacije (korak 3) ukljuuje dekarboksilaciju malonil grupe.

10

NADPH NADP Pant S C CH2 C CH3 O O Ci s SH

H2O Ci s SH O Pant

NADPH NADP+ Ci s SH O Pant Ci s SH O

Pant

S C CH2 HC CH3

S C CH

S C CH2 CH2 CH3

OH

HC CH3

4 -Ketoacil -ACP Reduktaza 5 -Hidroksiacil -ACP Dehidrataza 6 Enol -ACP Reduktaza

4.

5. 6.

-keton je redukovan do alkohola (trnsfer e sa NADPH). Dehidratacija nastaje trans dvoguba veza. Redukcija sa NADPH nastaje zasien lanac.

Maloni l-S-KoA HS-KoA Pant S C CH2 CH2 CH3 O Ci s SH Pant Ci s S C CH2 CH2 CH3 O Pant Ci s S O C CH2

SH

S C CH2 COO

CH2 CH3

7 Enzim kondenzacije 2 Malonil/acetil -CoA-ACP Transacilaze

11

Oslobaanje proizvoda: Kada se nagradi masna kiselina od 16 C atoma, Tioesteraza katalizuje hidrolizu tioestarske veze i oslobaa se masna kiselina od C16 - palmitat 16-C zasiena masna kiselina je krajnji produkt sintaze masnih kiselina.

1. a. Koliko se acetil-KoA koristi u reakciji sa sintazom masnih kiselina? _____ 1 b. Kliko se acetil-KoA koristi za sintezu malonil KoA? ____ 1 c. Koliko se potroi malonil KoA u sintezi palmitata 16-C? ________ 7 d. Ukupna koliina acetil-CoA za sintezu palmitata, a + b(c): ________ 8 1 2. a. Koliko se ATP koristi za sintezu malonil KoA? ________ b. Ukupna koliina ATP za sintezu 16-C palmitata, 7 2a(1c): ________ 2 3. a. Koliko se NADPH potroi po jednom ciklusu? __________ b. Ukupna koliina NADPH za sintezu 16-C palmitata, 3a(1c): _________ 14

12

Energetika sinteze masnih kiselina

Sinteza palmitata: Sinteza malonil KoA iz Acetil KoA

Zbirna reakcija
8

25

-oksidacija & Sinteza masnih kiselina

oksidacija Lokalizacija Acil nosai (tioli ) e akceptori/donori -OH intermedijeri 2-C produkti/donori

Sinteza MK citoplazma (ACP) i cistein NADPH D malonil -KoA (i acetil -KoA)

mitohondrije Koenzim -A FAD i NAD L acetil -KoA

+

13

Regulacija sinteze masnih kiselina:

Acetil KoA karboksilaze

Alosterna regulacija
stimulisana citratom inhibirana palmitoil KoA, malonil KoA
B-oksidacija (gladovanje)

Hormonska regulacija
Stimulisana insulinom Inhibirana glukagonom

Regulacija sinteze masnih kiselina: Acetil KoA karboksilaze

Regulacija
Dugorona
+ insulin - glukagon - adrenalin

protomer

polimer

Lokalna, kratkorona
+ Citrate - PalmitoilCoA -Malonil CoA
28

14

Regulacija sinteze masnih kiselina: Acetil KoA karboksilaze

Elongacija i desaturacija
Palmitinska kiselina se konvertuje u palmitolil KoA Pod dejstvom enzimskih sistema (mitohondrije i endoplazmatini retikulumu) Enzimski sistem - elongaze Dodatak 2-C sa malonil KoA Nezasiene masne kiseline se stvaraju pod dejstvom enzima - KoA desaturaze One su specifine za odreena mesta dvogubih veza

15

10 9

O C OH

oleate 18:1 cis 9

Desaturacija stvaranje dvogubih veza na odreenom mestu u lancu masne kiseline. elije sisara nisu sposobne da stvaraju dvogubu vezu na odreenim mestima npr 12 i 15. Zato su neke polinezasiene kiseline esencijalne i unose se samo putem hrane.

10 9

O C OH

oleate 18:1 cis 9

Ukljueni su membranski proteini endoplazmatskog retikuluma : NADH-cyt b5 Reduktaza, a flavoprotein sa FAD prostetinom grupom. Citohrom b5 Desaturaze, sadri dva atoma Fe u kompleksu sa histidinom

16

Desaturacioni enzimi Desaturacioni enzimi

C18-stearoly-CoA C18 9-oleyl-CoA + 2H2O + O2 + 2H+ Desaturaza Desaturaza 2 cit b5 Fe2+ 2 cit b5 Fe3+ Cit b5 2H+ + cit b5 reduktaza FAD

cit b5 reduktaza FADH2

Cyt b5 reduktaza

NADH + H+

NAD+

stearat + NADH + 3H+ + O2

oleat + NAD+ + 2H2O

17