MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS Morfologia : Bacilo de extremo redondeado.

Suelen verse aislados, aunque pueden aparecer agrupados en pequeos grupos de 2 o 3 bacilos

Se colorean como Gram + aunque la coloracin tpica de esta bacteria es la de ZiehlNeelsel. Esta tcnica aprovecha la acidoalcoholresistencia del M. Tuberculosis. Mycobacterium tuberculosis perfinges es una bacteria responsable de la mayor cantidad de casos de tuberculosis en el mundo. Fue descrito por primera vez el 24 de marzo de 1882 por Robert Koch, de ah su sobrenombre de Bacilo de Koch, quien posteriormente recibira el premio Nobel de Fisiologa o Medicina en 1905. Su genoma est secuenciado, lo que permitir aclarar su relacin con las otras especies del complejo Mycobacterium Tuberculosis. Es una Bacteria Alcohol-cido resistente frecuentemente incolora, aerbica estricta. Su crecimiento est subordinado a la presencia de oxgeno y al valor del pH circundante. Es muy resistente al fro, la congelacin y la desecacin; por el contrario muy sensible al calor, la luz solar y la luz ultravioleta. Su multiplicacin es muy lenta (se divide cada 16 a 20 horas) y ante circunstancias adversas puede entrar en estado latente, pudiendo retrasar su multiplicacin desde algunos das hasta varios aos. El reservorio natural del M. tuberculosis es el hombre, tanto el sano infectado como el enfermo. Puede causar enfermedad en cualquier rgano del cuerpo, siendo lo ms frecuente la infeccin en los pulmones, desde donde se disemina a otros rganos por va sangunea o linftica. Los sntomas aparecen cuando las lesiones son ya muy extensas, de forma que el diagnstico se establece cuando la enfermedad est muy avanzada. Los sntomas que la delatan son: fiebre, sudoracin, adelgazamiento, expectoracin purulenta y tos. Provocan lesiones tisulares (tubrculos). Generan una respuesta inmune en donde participan los linfocitos CD4+ y los linfocitos citotoxicos, por su parte las clulas NK (natural killer) se encargan de eliminar macrofagos y linfocitos infectados. In vitro se destruye mediante pasteurizacin a 80 C. El medio de cultivo ms usado y ms adecuado es el de Lowenstein Jensen . Tambin se est utilizando el medio Ogawa. La bacteria requiere por lo menos de 15 dis para presentar un desarrollo visible macroscpicamente sobre el medio de cultivo y necesita hasta 8 semanas de incubacin debindose incubar un promedio de 30 das; sus colonias son de color blanco cremoso, son esfricas, secas, rugosas, opacas, polimorfas y de dimensiones variables. Los laboratorios especializados, realizan pruebas de

susceptibilidad antibitica (antibiograma) de las cepas aisladas y que ofrecen resistencia al tratamiento convencional. Tcnica de coloracin de Ziehl-Neelsel La coloracin tiene 3 componentes: Solucin madre de Ziehl-fucsina bsica fenicada. Solucin de colorante-alcoholacido (etanol 95%) Coloracin de contraste-azulmetileno de Loeffler.

1) Se fija el preparado. 2) Se cubre la solucin de madre de Ziehl, que hemos filtrado primero. Se calienta con un hisopo encendido por debajo del preparado hasta que haga vapor. Esto se repite 3 veces, cada 3 a 5 minutos. 3) La fucsina no debe hervir, pues el bacilo pierde su acidoalcoholresistencia. 4) Se enfra el porta y se lava con agua. 5) Se cubre con solucin decolorante: alcohol acido, que no se deja mas de 2 minutos. 6) Se lava con agua corriente. 7) Se cubre el porta con el colorante de contraste, no menos de 30 segundos. 8) Se lava con agua y se deja secar a temperatura ambiente. 9) Se observa con el objetivo de inmersin. Resultados Las bacterias acidoalcoholresistentes se ven rojas, brillantes sobre u fondo azul. Fundamento de la coloracin: Al calentar el preparado se disminuye la tensin superficial de las bacterias. Esto favorece la penetracin de la fucsina fenicada al interior de la bacteria. Una vez en el protoplasma, la fucsina se coordina con los lpidos (sobre todo con los cidos micliticos). La unin fucsina lpidos esta dada por los distintos grados de solubilidad en lpidos y agua de ambas sustancias. Esta unin es tan estable que el colorante no la puede romper.

Modificacin de Cooper: como primer colorante usa fucsina bsica fenicada con CIN al 10%. El decolorante es el mismo, pero como colorante de contraste usa verde de malaquita. Estructura del M. tuberculosis. No tiene ni esposas ni cpsula. No se mueve. Su pared celular es muy compleja, algo diferente a la de los microorganismos Gram + o Gram -. Tiene un alto porcentaje de lpidos (casi el 60% de su pared son lpidos). La pared celular es un Glucopptido basal unido covalentemente a un resto arabino micolatogalactano. Grnulos de Munch: Son granulos Gram + que se ven como cortas cadenas de disposicin irregular. A diferencia del resto del bacilo no son acidoalcoholresistentes. Al microscopio ptico parecen ser Stafilococos o Streptococos. La composicin qumica del m. tuberculosis es compleja. Casi un 40% del total son lpidos, entre los cuales destacan: Acido Flico: Estimula la formacin de las clulas de Langans y , sobre todo, de las clulas epiteloides. . . Acido micolico: se relaciona con la acidoalcoholresistencia. Tubrculo estrerico: estimula la formacin de cl. de Langans. . . METABOLISMO: Son aerobios estrictos. Son acidoalcoholresistentes. Utilizan el glicerol como fuente de carbono. Son resistentes a los cidos y a los lcalis debido a su alto contenido de lpidos. Sobreviven unas 36 hs. Expuestos al sol, y en un esputo desecado puede vivir hasta 6 meses. Pero son poco resistentes al calor y a la luz ultravioleta. Los desinfectantes no son efectivos en este caso.

Estructura antignica del bacilo de koch. Muchos constituyen de la clula bacteriana son antignicos. Se ha visto que los polisacridos y pptidos de la pared celular tienen funciones antignicas, asi como muchas protenas del protoplasma. Se han identificados 11 Ag. En total. El mejor identificado de todos es una protena tubrculo reactiva. Tambin se han aislado los polisacridos I y II, de poder antignico.

Clasificacin de la tuberculosis:
Mycobacterium tuberculosis tiene tres variantes o subespecies:

Gnero
Mycobacterium Mycobacterium Mycobacterium

Especie
Tuberculosis Tuberculosis Tuberculosis

Subespecie
Hominis Bovis Africanum

M. Tuberculosis subespecies homminis TBC humana. M. Tuberculosis subespecie bovis: TBC del ganado vacuno, que se puede transmitir al hombre por la leche contaminada. M. tuberculosis subespecie africanum: solo en Africa y Europa. Requerimientos nutricionales: Los bacilos de la tuberculosis son prototrficos para todos los aminocidos, purina y pirimidina y vitaminas del complejo B. Luego del aislamiento primario, se adaptan fcilmente a las soluciones con sales simples con ion amonio con fuente de nitrgeno y glucosa como fuente de carbono. La fuente mas importante de carbono es el glicerol y la asparagina es la fuente preferida de nitrgeno. Velocidad de crecimiento: En muchas condiciones de cultivo, el tiempo de duplicacin de los bacilos es de 15 a 20 hs. Este tambin es el tiempo de generacin in vivo calculado a partir de los animales experimentalmente infectados. No se cuenta con una explicacin satisfactoria de la lenta tasa de crecimiento del bacilo de la tuberculosis. Sin embargo, hallazgos recientes proporcionan evidencia de que la velocidad esta limitada por la ARN polimerasa ADN dependiente del bacilo y que el efecto en la enzima puede ser una funcin de reconocimiento limitado de sitios de iniciacin en el ADN bacteriano.