ARTICULO #1 Las bajas concentraciones de zinc en la mucosa gstrica se asocia con una mayor gravedad de La inflamacin inducida por

Helicobacter pylori Resumen Antecedentes: La infeccin crnica por Helicobacter pylori es la causa ms comn de cncer gstrico. H. pylori induce el estrs oxidativo, mientras que los resultados de deficiencia de zinc en el aumento de la sensibilidad a la misma. En Ecuador, la prevalencia de cncer gstrico y la deficiencia de zinc son altos. La hiptesis de que la deficiencia de zinc en el pueblo ecuatoriano podra causar aumento de H. pylori inducida por la inflamacin de la mucosa gstrica asociada con menores concentraciones en los tejidos de zinc. Mtodos: Trescientos cincuenta y dos pacientes con dispepsia sometidos a endoscopia para obtener biopsias de la mucosa gstrica. El diagnstico de la infeccin por H. pylori y su gravedad, la histopatologa, la concentracin de zinc de la mucosa y la intensidad de la inflamacin se determinaron. Resultados: H. inSected pylori pacientes sin gastritis crnica atrfica tenan menores concentraciones de zinc en la mucosa gstrica de los pacientes no infectados con el mismo tipo de gastritis (25 1,3 225,3 vs 426,2 279,9 ng / mg de protena; ^ = 0,016). Teniendo en cuenta todos los pacientes, ms grave es la infeccin por H. pylori, el ms alto es el porcentaje de sujetos con infiltracin de polimorfonucleares (PMN) (p = 0,0001). Los pacientes con alta infiltracin de PMN tenan concentraciones ms bajas de zinc la mucosa que los pacientes con infiltracin de PMN baja (35,2 20,7 vs 242,9 191,8 ng / mg de protena, p = 0,021). Conclusiones: El grado de inflamacin en el H. pylori gastritis inducida parece ser modulada por la concentracin en los tejidos gstricos de zinc. Ms del 50% de la poblacin mundial est infectada por Helicobacter pylori [1]. La infeccin crnica por H. pylori se asocia con la gastritis y la lcera pptica [2], y es tambin la causa ms comn de cncer gstrico [3], el cncer gstrico es la segunda causa ms comn de mortalidad por cncer en todo el mundo [4 [; Sin embargo, existen importantes diferencias regionales en la prevalencia del cncer gstrico. Europa Occidental y Estados Unidos tienen una incidencia ms baja, mientras que Japn, China y Amrica del Sur tienen una mayor incidencia [3,4]. En Ecuador, el cncer gstrico es un problema grave de salud pblica que representa el 12,7% de los casos de cncer, con una prevalencia de 29 casos por cada 100.000 habitantes [5]. H. pylori tiene xito en sobrevivir a los efectos de los muchos componentes de la respuesta del husped inmune innata y adaptativa [2,6,7], por H. pylori tiene muchos factores de virulencia que le permiten sobrevivir en este ambiente hostil, como la ureasa, flagelos , cag sistema de secrecin tipo IV, y la protena activadora de neutrfilos (NAP) [2 [. El sistema permite CAG H. pylori para transferir a la clula husped citoplasma diferentes protenas bacterianas que modulan las funciones de la clula hospedadora [8 [. Una de las principales funciones de CAG es la activacin de la interleuquina-8 (IL-8) la expresin gnica. IL-8 es un potente neutrfilos (polimorfonucleares - PMN) factor quimiotctico en 19 a 1 |. Una vez atrados, estos PMN son activados por el PAN para llevar a cabo sus funciones inflamatorias [12]. PMN activados producen grandes cantidades de especies reactivas del oxgeno (ROS) que facilitan la eliminacin de bacterias. Se ha demostrado que el dao a la mucosa gstrica durante la infeccin por H. pylori es causada principalmente por el aumento de ROS y el estrs oxidativo como consecuencia [13-15], catalasa, superxido dismutasa (SOD), tiorredoxina y glutatin reductasa se ha demostrado para servir a importantes funciones en la defensa de la mucosa frente a la infeccin por H. pylori [I6-19 |. H. pylori gstrica inducida por la inflamacin mucosa se caracteriza por un aumento de SOD manganeso y la reduccin de la SOD cobre / zinc | I7 |. Tambin se ha demostrado que despus de erradicacin de H. pylori, el contenido gstrico mucosa de los rendimientos de SOD cobre / zinc a niveles normales [18). Adems ms, un estudio reciente demostr que la sobreexpresin-sin de la tiorredoxina enzima antioxidante, en un modelo murino de infeccin por H. pylori, no slo reduce el estrs oxidativo, pero tambin inhibe la quimiotaxis de PMN [20]. Todos estos hallazgos ponen de relieve el papel del estrs oxidativo en la patognesis de H. pylori inducida. El zinc es un micronutriente abundante intracelular que participa en una amplia variedad de procesos celulares [21]. Resultados de deficiencia de zinc en un aumento de la sensibilidad al estrs oxidativo [22-24]. Como el zinc participa en varias funciones celulares crticas, especialmente de reparacin del ADN, se ha sugerido que la deficiencia de zinc puede aumentar el riesgo de cncer [23,25,26 |. La deficiencia de zinc es un importante problema de salud pblica en el Ecuador [27,28 [. Hay evidencia de que la deficiencia de zinc en personas de Amrica Latina, en particular de las regiones andinas como Ecuador, se debe tanto a la falta de fuentes nutricionales de zinc en su dieta y el aumento de consumo de salvado de cereales que contienen fitatos, que son quelantes fuertes de los minerales y por lo tanto prevenir la absorcin de zinc [29], dado el riesgo de deficiencia de zinc en

las poblaciones andinas y el papel del zinc en la respuesta al estrs oxidativo, la hiptesis de que la poblacin pobre que vive en una regin andina del Ecuador han aumentado H. py/or/- inducida por el dao inflamatorio en la mucosa gstrica asociada con menores concentraciones de zinc mucosas. Sujetos y mtodos Diseo y poblacin El estudio se realiz en el Hospital Pablo Arturo Surez, en la ciudad de Quito, Ecuador. Este hospital atiende a una poblacin de bajos ingresos que es principalmente de espaoles e indgenas (mestizos) de fondo. Sin perjuicio de inscripcin se llev a cabo desde 2000 hasta 2003. El diseo del estudio y el protocolo fue aprobado por los comits de biotica de la Corporacin Ecuatoriana de Biotecnologa y el de la Organizacin Panamericana de la Salud (OPS). Los pacientes de la atencin de la bsqueda de sexo, bien sea en el hospital de entre 35-69 aos de edad con diagnstico de dispepsia y que estaban dispuestos a dar su consentimiento informado por escrito eran elegibles para participar. Los criterios de exclusin incluyeron tratamiento previo para H. pylori en los ltimos 6 meses, el uso regular de agentes antimicrobianos locales o sistmicas (por ejemplo, antibiticos y bismuto), y la presencia de otras enfermedades graves (cncer, insuficiencia cardiaca, renal o respiratoria). Despus de la inscripcin, los participantes del estudio se sometieron endo examen microscpico para obtener biopsias de la mucosa gstrica. A partir de estas biopsias el diagnstico de la infeccin por H. pylori y su gravedad, los cambios histopatolgicos, la concentracin de zinc, y la intensidad de la inflamacin se determinaron. Definiciones Dispepsia La dispepsia se define como la presencia de dolor epigstrico poco despus de comer o dolor epigstrico continuo acompaado de nuseas y / o vmitos y / o malestar abdominal. La gastritis histolgica Las observaciones histolgicas se clasificaron de acuerdo con el Taller Internacional que evalu y revis el Sistema de Sydney para la presentacin de informes de la gastritis con ligeras variaciones [30]. La gastritis crnica se determin por la presencia de clulas mononucleares (linfocitos, clulas plasmticas y macrfagos). Diagnsticos histolgicos fueron clasificados como: normal, no la gastritis atrfica crnica, gastritis crnica atrfica, metaplasia intestinal o displasia. Si las clulas PMN estuvieron presentes, la gastritis se define como la gastritis crnica activa. Infiltracin de PMN fue calificada como leve, moderada y severa de acuerdo con el Sistema de Sydney. H. pylori colonizacin La colonizacin por H. pylori se determin por la presencia de OI bacilos cortos caracterstica como se evidencia por tincin de Giemsa, ya sea en las criptas de la mucosa o unido al epitelio. Tres categoras de infeccin por H. pylori se determin | 30 |: I, leve, ii un bajo nmero de bacterias presentes, 2, moderada, si un mayor nmero de bacterias dispersas estaba presente, y 3, grave, si las colonias pequeas o bacterias agregadas estaban presentes. Procedimientos endoscpicos y evaluaciones de laboratorio Durante la gastroscopia nueve biopsias se obtuvieron: tres de la incisureantrum (1, 2 y 3), tres de la curva mayor del antro (4, 5, y 6), y tres del corpus (7, 8 y 9) . Las biopsias 1, 2, 3, 4, 7, 9 y se utiliza para identificar H. pylori y para histopatologa. Las biopsias 5, 6, 8 y se utilizaron para medir las concentraciones tisulares de zinc. Histopatologa Un total de 12 diapositivas por sujetos fueron estudiados. Seis lminas fueron teidas con Giemsa para identificar a H. pylori. Las otras seis lminas fueron teidas con hematoxilina-eosina para el estudio histopatolgico. Para el control de calidad, un observador experimentado que desconoca a la primera lectura a cabo una segunda lectura de las diapositivas. En el caso de desacuerdo entre ambas observaciones, los criterios diagnsticos del segundo observador (MD) prevaleci. Determinacin de la concentracin de zinc en tejido gstrico

Zinc mucosas se determinaron las concentraciones en el Departamento de Agricultura de EE.UU., Grand Forks de Investigacin de Nutricin Humana del Centro en Dakota del Norte. Las biopsias fueron conservados a -20 C hasta su anlisis. Tres muestras de mucosa para cada individuo se reunieron y se solubilizan en hidrxido de sodio / sodio solucin de sulfato de dodecil durante 24 horas a temperatura ambiente. Quinientos microlitros de clulas solubilizadas se aadi a 2 ml de cido ntrico. La mezcla se procesa en el digestor AIM500 bloque (Ai Cientfico, Saxonburg, PA, EE.UU.) como sigue: 100 C durante 35 minutos, 120 C durante 120 minutos, 130 minutos CFOR 90, y 145 C durante 140 minutos. Este ciclo se repiti una vez. Cuando las muestras fueron seco y fresco, ml de perxido de hidrgeno se aadi. Las muestras se procesaron de nuevo en el digestor bloque AIM bajo las mismas condiciones que anteriormente. Antes del anlisis, 2 ml de 5% de cido ntrico y se incub a temperatura ambiente durante I hora. Cada muestra fue analizada en el PerkinElmer Optima 3300 DV de acoplamiento inductivo con plasma de argn Espectrmetro de Emisin Atmica (Perkin Elmer, Wellesley, MA, EE.UU.). Las biopsias fueron codificados, y el investigador de realizar determinaciones de zinc desconoca el diagnstico histopatolgico. La concentracin de la mucosa zinc se expresaron en ng / mg de protena. La concentracin de protena se determin en las muestras solubilizadas por el mtodo del cido bicinconnico de Smith et al. [31]. Anlisis estadstico La entrada de datos y la gestin se realiz utilizando el software Epi-Info versin 6.04d (Centros para el Control y Prevencin de Enfermedades, Atlanta, GA, EE.UU.). Los anlisis estadsticos se realizaron utilizando el programa SPSS versin 11.5 (SPSS Inc., Chicago, IL, EE.UU.). Las estadsticas descriptivas de la evidencia histolgica de infeccin por H. pylori, el diagnstico histopatolgico, la presencia de PMN en las biopsias y la concentracin de zinc en la mucosa gstrica, se calcularon. La concentracin de zinc en promedio en la mucosa gstrica se compar entre H. pylori positivos y negativos biopsias, entre los pacientes infectados por H. pylori con gastritis no atrfica y los pacientes no infectados con gastritis nonatrophic, y entre los grados de infiltracin de PMN en la mucosa gstrica. Adems, la relacin entre la gravedad de la infeccin por H. pylori y la infiltracin gstrica por PMN se evalu. Las diferencias de medias y porcentajes fueron evaluados por el / la prueba de chi cuadrado y la prueba de Student, respectivamente. Un nivel de significacin de <0,05 fue aceptada. Los datos de concentracin de zinc en la mucosa gstrica no se distribuyen normalmente. El anlisis no paramtrico producido los mismos resultados que los de la paramtrica. Resultados Trescientos cincuenta y dos pacientes fueron incluidos. Aunque se obtuvieron biopsias de 352 pacientes para histopatologa, colonizacin de H. pylori y para la determinacin de la concentracin de zinc en la mucosa, a slo 338 determinaciones de la concentracin de zinc se incluyen en el anlisis debido a que el intento inicial para procesar 14 muestras a nivel local no. De todos los pacientes, el 70% eran mujeres (245/352) y el 93,2% de los pacientes (328/352) tenan evidencia histolgica de infeccin por H. pylori. El diagnstico histolgico Veinte y cuatro de cada 352 pacientes fueron infectados por H. pylori. De los pacientes infectados, casi la mitad (48,5%) no tenan gastritis crnica atrfica. La gastritis atrfica crnica y metaplasia fueron vistos en casi una cuarta parte de los pacientes. En contraste, la displasia se encuentran raramente (Tabla I). La concentracin de zinc en biopsias gstricas Infectados con H. pylori pacientes con chronicgastritis no atrfica (n = 1 54) tenan concentraciones ms bajas de zinc en la mucosa gstrica de los pacientes no infectados con similares hallazgos histolgicos (n = I 1) (251,3 225,3 vs 426,2 279,9 ng / mg de protenas, p = 0,016). Cuando todos los temas fueron analizados (n = 338), aquellos pacientes con presencia de H. pylori en su mucosa gstrica tenan concentraciones relativamente ms bajos de zinc en la mucosa gstrica en comparacin con los pacientes sin infeccin por H. pylori. Esta diferencia no fue estadsticamente significativa (256,4 214,7 vs 321,2 269,8 ng / mg de protena;. P = 179). La presencia de polimorfonucleares en infectados por H. pylori pacientes La correlacin entre la severidad de la infeccin por H. pylori y la infiltracin gstrica por las clulas PMN fue evaluada en todos los pacientes. Se encontr que el ms grave es la infeccin por H. pylori, mayor es el porcentaje de sujetos con infiltracin de PMN (p = 0,0001) (Tabla 2).

La presencia de clulas polimorfonucleares y de concentracin de zinc mucosa gstrica en pacientes con infeccin por H. pylori Las concentraciones ms bajas de zinc se observa en pacientes con PMN en su mucosa gstrica (n = 169) que en pacientes sin infiltracin de PMN (n = 147) (232,45 192,36 vs 283,84 235,48 ng / mg de protena, p = 0,034). Adems, los pacientes con infiltracin de PMN moderada (n = 8) tenan concentraciones ms bajas de zinc en comparacin con los pacientes con infiltracin de PMN baja (n = 161) (35,2 20,7 vs 242,9 191,82 ng / mg de protena, p = 0,021) ( fig. 1). Discusin Hemos encontrado que las concentraciones relativamente bajas de zinc mucosas gstricas en todos los H. pylori infectadas pacientes se correlaciona con la infiltracin de aumento por las clulas PMN y, en consecuencia, aumento de la inflamacin. Adems, la infeccin por H. pylori se correlaciona con una reduccin significativa en la concentracin de cinc en la mucosa gstrica de los pacientes infectados con esta bacteria y habiendo no atrfica gastritis crnica. H. pylori asociada a la inflamacin es reconocida como una caracterstica importante de la carcinognesis gstrica [32], Por otra parte, la virulencia de la infeccin por H. pylori y el ambiente del estmago tambin juegan un papel determinante en el resultado de esta infeccin. Uno de los mecanismos por los cuales H. pylori induce la inflamacin es por la generacin de ROS por la infiltracin de clulas polimorfonucleares [18]. La deficiencia de zinc induce el estrs oxidativo en clulas de mamfero con el consiguiente dao oxidativo del ADN [23,25,26], estos mecanismos de sugerir una explicacin de nuestros hallazgos. La infeccin por H. pylori junto con la concentracin de zinc ms bajos en la mucosa gstrica inducira un aumento del estrs oxidativo, que se asocia con aumento de la inflamacin. Esto explicara nuestro hallazgo de bajas concentraciones significativas de zinc en la mucosa gstrica en pacientes con gastritis no atrfica crnica e infeccin por H. pylori, en comparacin con aquellos sin infeccin. En respuesta a la infeccin por H. pylori, las clulas epiteliales gstricas producen la quimioquina IL-8 [33], lo que induce la quimiotaxis y la migracin transepitelial de clulas PMN. Los neutrfilos recryited al sitio de la inflamacin generan ROS. Nuestros resultados demuestran una correlacin directa entre la severidad de la infeccin por H. pylori y el grado de infiltracin de PMN. Adems, hemos encontrado que el grado de infiltracin de clulas PMN se correlaciona inversamente con la concentracin de zinc en la mucosa gstrica. Esto sugiere que los pacientes con concentraciones bajas de zinc mucosa gstrica han aumentado la inflamacin causada por la infiltracin aumentada de las clulas PMN. Nuestra hiptesis era que la poblacin ecuatoriana, con una alta prevalencia de deficiencia de zinc que se caracteriza por concentraciones plasmticas de zinc [29,34], puede tener un mayor riesgo de dao inflamatorio aumenta con la infeccin por H. pylori. Nuestro estudio es el primero en informar de las concentraciones de zinc en la mucosa gstrica. Como el zinc es esencial para la funcin de numerosos enzimas intracelulares, la concentracin de cinc en la mucosa gstrica puede ser un buen indicador del estado de zinc. Sin embargo, un problema potencial es la ausencia de determinacin de zinc en plasma en nuestro estudio. Aunque todava es controvertido o no la concentracin plasmtica de cinc es el mejor marcador para evaluar el estado de zinc; concentracin plasmtica de zinc es sin embargo ampliamente utilizar como una medida del estado de cinc. Determinacin de las concentraciones plasmticas de zinc en nuestro estudio nos ha permitido correlacionar con la de la mucosa gstrica para tener una mejor idea sobre el estado de zinc. Una limitacin adicional de nuestro estudio es la falta de cultivo bacteriano o test de la ureasa para confirmar la infeccin por H. pylori. Sin embargo, la coloracin de Giemsa tiene una sensibilidad del 91%, una especificidad del 100% y una exactitud del 95% [35], Otra limitacin fue el escaso nmero de sujetos no infectados. Este es un problema difcil de resolver debido a la abrumadora cantidad de infectados con H. pylori entre los sujetos con dispepsia en el Ecuador [5], La observacin de que la infeccin por H. pylori en la presencia de las concentraciones de zinc de baja en los resultados de la infiltracin de la mucosa gstrica en el aumento de clulas PMN y la inflamacin aumentada sugiere una posible explicacin para el aumento de la incidencia de cncer gstrico en los pases en desarrollo, como Ecuador, donde la deficiencia de zinc y H . pylori son importantes problemas de salud pblica. Se ha demostrado que la suplementacin de zinc inhibe H. py / en 'inducida por inflamacin de la mucosa gstrica oxidativo en jerbos [36,37], Por otra parte, en un pequeo ensayo clnico aleatorio, un compuesto de zinc en combinacin con la terapia triple (el lansoprazol, amoxicilina, claritromicina) mejor significativamente la tasa de curacin para H. pylori [38], Sin embargo, este estudio no evalu los cambios histopatolgicos relacionados con la infeccin por H. pylori o erradicacin. Tomados en conjunto, proponemos que la deficiencia de zinc se asocia con infiltracin de PMN mayor en la mucosa gstrica y la inflamacin consecuente. Como la inflamacin es el principal mecanismo de infeccin por H. pylori asociada a la carcinognesis gstrica, se sugiere que los suplementos de zinc tenerse en cuenta para futuros estudios como un mtodo complementario para el tratamiento y la erradicacin de H. pylori.

ARTICULO #2 El efecto de la infeccin por Helicobacter pylori en la velocidad de crecimiento en los nios pequeos de las comunidades urbanas pobres en Ecuador Andrey I. Egorova, 'b, Semperteguib Fernando, c, d, Bertha Estrella b, c, d, Egasc Josefina, e, Elena N. Naumovab'f, Jeffrey K. Griffiths bf INFORMACIN DEL ARTCULO Objetivo: caracterizar los efectos potenciales de las infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento en nios con bajo nivel socioeconmico jvenes en un pas en desarrollo. Mtodos: Los nios fueron reclutados en los suburbios pobres de Quito, Ecuador. Normalmente nutridos, moderadamente y sustancialmente los nios desnutridos (que se define utilizando el peso para la edad de las puntuaciones Z en la contratacin) forman capas iguales. Seis medidas de altura y peso fueron recogidos durante un ao. Inscripcin y salir de las muestras de suero fueron analizadas para IgG anti-Helicobacter y salir de las heces diarreicas no la prueba del antgeno de Helicobacter. Resultados: De los 124 participantes (edad de matricularse de 19 9 meses), 76 (61%) de antgeno fecal excretada en la salida (estaba infectado). De stos, 44 eran seropositivos al menos una vez (infecciones crnicas) y 32 seronegativos probado dos veces (las infecciones nuevas o en fase aguda). La velocidad de crecimiento lineal ajustado durante el seguimiento en los nios con las nuevas infecciones se redujo en un 9,7 (3,8, 15,6) mm / ao en comparacin con los controles no infectados y 6,4 (0,0, 12,9) mm / ao en comparacin con los nios con infecciones crnicas. Los efectos de las infecciones por Helicobacter en el crecimiento ponderal no fueron significativas. Conclusin: Estos resultados sugieren que la velocidad de crecimiento lineal se reduce en los nios pequeos durante la fase inicial de la infeccin por Helicobacter. 1. Introduccin Helicobacter pylori es un importante patgeno que puede causar gastritis, lceras gstricas y duodenales, gstricas y cncer.1 Esta bacteria est adaptada exclusivamente a la infeccin crnica por el estmago humano. Se provoca una respuesta de tipo Th1 predominantemente inmunolgico, que puede ser responsable de la gastritis sntomas.2, 3 infecciones suelen propagarse a travs de contactos de persona a persona, pero el agua 2 transmitidas por la transmisin tambin puede occur.4 En los pases en desarrollo, adquirir la mayora de la gente la infeccin a principios de childhood.2, 5 La adquisicin de la infeccin es a menudo seguida de sntomas transitorios gastritis aguda y el cido gstrico secretion.2 deprimida, 6,7 Helicobacter se ha demostrado que altera la absorcin de nutrientes y vitaminas, 8,9 y retardar el crecimiento en los nios en el desarrollo de pases6 ,10-13 Las personas infectadas por Helicobacter excretan antgeno de Helicobacter. Las pruebas de antgenos en heces tiene una excelente sensibilidad y especificidad en comparacin con otras pruebas invasivas de diagnstico en nios.14-18 tambin induce la infeccin por Helicobacter fuertes anticuerpos responses.19 Los experimentos con animales han demostrado que el desarrollo de una respuesta de anticuerpos reduce symptoms.20 gastritis en los seres humanos, IgG seroconversin ocurre varios meses despus de la infection.21, 22 Este lapso de tiempo entre la infeccin y la seroconversin de IgG se ha utilizado para definir las fases agudas (antes de la seroconversin) y crnica (despus de la seroconversin) de infeccin.23-25 Los anticuerpos tambin persisten tras la erradicacin espontnea de Helicobacter, que algunas veces se produce en children.26 El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de las infecciones pylori tanto crnicos como agudos H. en el crecimiento lineal y ponderal en los nios pequeos ecuatorianos. 2. Mtodos Este estudio prospectivo se est dentro de un estudio ms amplio de los efectos de micronutrientes (vitamina A y / o zinc) la suplementacin en los nios pequeos (manuscrito en revisin). El estudio de los padres se registr en www.ClinicalTrials.gov (NCT00228254). Para que el estudio de los padres, los nios de 6 a 36 meses fueron reclutados en los suburbios pobres de Quito, Ecuador, en las sesiones de reclutamiento de la comunidad en abril-mayo de 2002 y 2003. Peso para la edad y talla para la edad de las puntuaciones de desviacin estndar o Z-score (WAZ y HAZ) se estimaron utilizando los EE.UU. los datos del Centro Nacional de Estadsticas de Salud de referencia. Los nios desnutridos fueron intencionalmente ms de muestra: sustancialmente desnutridos (WAZ <-2), ligeramente mal alimentado (-2 <WAZ <-1), y los nios normalmente criadas (WAZ> 1) forman una tercera parte cada uno de la poblacin de estudio . Nios con desnutricin severa (peso <60% del valor normal ajustado por edad) fueron excluidos del estudio y se refiri a los centros de rehabilitacin nutricional. Despus de la

contratacin, los nios fueron asignados al azar a la intervencin o de los grupos de placebo, y fueron seguidos durante aproximadamente un ao a partir de junio. Este manuscrito presenta los datos recogidos en el grupo placebo. Una encuesta de hogares se llev a cabo en la inscripcin para evaluar demogrficos, socioeconmicos y de higiene. Las enfermeras del estudio visitaron a todos los nios durante el seguimiento cuatro veces por semana para buscar los sntomas respiratorias y diarreicas. Los parmetros de crecimiento se midieron en reclutamiento y aproximadamente cada 10 semanas a partir de entonces, para un total de seis mediciones por nio. Tomaron muestras de sangre de cada nio despus de un ayuno durante la noche a la inscripcin y la salida para medir los niveles de micronutrientes. Todos los aspectos de este estudio anidado fueron aprobados por los comits de tica de la Tufts University School of Medicine de Boston y la Corporacin Ecuatoriana de Biotecnologa en Quito. Separe los consentimientos informados se obtuvieron de los padres o tutores de cada nio participante para el estudio de los padres y el estudio anidado. Restos de las muestras de suero fueron analizadas para anti-Helicobacter respuestas de IgG utilizando kits comerciales de la prueba ELISA obtenidas a partir de IBL Inmuno-laboratorios biolgicos (Hamburgo, Alemania). Estos kits incluyen una microplaca recubierta con una mezcla de protenas purificadas bacterianos que contienen antgenos CagA y VacA, secundaria horserad ISH conjugado con peroxidasa anti-humano solucin de anticuerpo, y un conjunto de normas. Los valores de densidad ptica para anti-Helicobacter respuestas de IgG fueron convertidas en concentraciones unidad arbitraria (U / ml) y dichotomized utilizando una microplaca especfico valores de corte. Al final del seguimiento (salida del estudio), los participantes de este estudio anidado tambin proporcion una diarrea no muestra fecal, que se analiz para antgeno de Helicobacter excreta con un sndwich de anticuerpos monoclonales basados en ELISA (Hp StAR , Dako A / S, Glostrup, Dinamarca). Los resultados Helicobacter fecales de ensayo se clasific en el valor de densidad ptica de 0,15 segn las instrucciones del fabricante. Todas las pruebas de laboratorio se llevaron a cabo en la Universidad Catlica del Ecuador (Pontificia Universidad Catlica del Ecuador) en Quito. Se recogieron muestras de los hogares por enfermeras del estudio, entregado al laboratorio en contenedores refrigerados, y se almacen a -20 C hasta su anlisis. Los nios fueron clasificados como infectados o no infectados sobre la base de los resultados de su prueba de antgeno de heces. Los nios infectados fueron clasificadas en base a su serologa como tener (1) infecciones crnicas (dieron un resultado positivo en la inscripcin y / o salida) o (2) nuevos o infecciones agudas de las fases (seronegativos y probado dos veces). Los datos fueron analizados con el programa SAS v 9.2 (SAS Institute, Cary, NC, EE.UU.). Factores de riesgo demogrficos y socioeconmicos de la infeccin Helicobacter-ter se analizaron mediante regresin logstica. Los datos sobre el crecimiento durante el seguimiento se analizaron mediante modelos de regresin mixtos de efectos mediante procedimiento de SAS GLIMMIX. 3. Resultados Slo los nios del grupo placebo que presentaron sus no-diarreicas muestras fecales a la salida del estudio se incluyeron en este anlisis (N = 124). De ellos, 26 nios representaron en el 2002 2003 cohorte de este estudio los padres y 98 nios representaron la cohorte 2003-2004 (20% y 71%, respectivamente, del brazo de placebo de cada cohorte). El desglose de la poblacin estudiada por gnero, los estratos del estado nutricional y el estado de la infeccin por Helicobacter se presentan en la Tabla 1. La edad al momento del reclutamiento vari de 4,6 a 35,7 meses, la media desviacin estndar de 19,0 8,5 meses. La duracin media cin de seguimiento (intervalo entre la primera y la ltima medicin antropo-mtrica) fue de 388 das, la desviacin estndar de 26 das, rango de 277-413 das. La edad media a la salida de estudio fue de 31,8 meses. Normalmente los nios desnutridos fueron, en promedio, ms joven que los nios desnutridos considerablemente, mientras que los nios que no estaban infectados y los nios que tenan infecciones de fase aguda fueron, en promedio, ms joven que los nios con infecciones en fase crnica (Tabla 1). Setenta y seis (61%) participantes en el estudio estaban infectados con H. pylori (antgeno excretado) en la salida del estudio (infecciones agudas y crnicas combinados). Un desglose detallado de la poblacin de estudio por el estado de la infeccin y la serologa se presentan en la Tabla 2. Entre los 44 nios que fueron clasificados como una infeccin crnica, 41 (93%) eran seropositivos en la salida. Entre los 48 nios que no estaban infectadas con Helicobacter, slo cuatro (8%) eran seropositivos en la salida. Las tasas de prevalencia de la infeccin por Helicobacter en la salida de estudio fue de 73% en sustancial desnutricin, el 47% de desnutricin leve, y el 67% de los nios normalmente nutridos. Aunque las probabilidades de infeccin en los nios desnutridos moderadamente fueron significativamente menores que en los controles que normalmente nutridos (p = 0,03), el patrn incompatible con una mayor probabilidad de infeccin en nios desnutridos sustancial sugiere que esta asociacin observada se debi a un efecto aleatorio. Condiciones de hacinamiento (tres o ms personas por habitacin) era el nico indicador socio-

econmico asociado con la infeccin por Helicobacter (examen de heces positivo) en el anlisis de regresin logstica: odds ratio 2,67 (IC del 95% intervalo de confianza (IC) del 1,04, 6,91, p = 0,04), el ajuste para los estratos del estado nutricional y la edad. Anlisis preliminar de regresin mixta efecto en la etapa de desarrollo del modelo ha demostrado que las velocidades de crecimiento ajustados durante el seguimiento fueron similares en los tres estratos del estado nutricional. Por lo tanto, los trminos de interaccin entre el estado nutricional y el tiempo no se incluyeron en el modelo final. Los episodios de diarrea o enfermedades respiratorias durante el seguimiento, as como las condiciones de hacinamiento, no se asociaron significativamente con el crecimiento de velocidad. Por lo tanto, estas variables tampoco se incluyeron en el modelo final. Altura a la inscripcin y la velocidad de crecimiento en los nios que dieron positivo, al menos una vez, pero tuvo resultado negativo de antgeno fecal en la salida (erradicar la infeccin por Helicobacter) no difiri significativamente o sustancialmente de las de los nios que tenan todas las pruebas de heces y serolgica negativa (p> 0,5 para ambas pruebas). Esto confirm que la inclusin de todas las pruebas fecales negativos-los nios en el grupo de control, independientemente de su estado serolgico era apropiado. El modelo final de efectos mixtos para el crecimiento lineal incluy los efectos aleatorios para intercepcin, la edad y edad al cuadrado. Los efectos principales se presentan en la Tabla 3. El efecto no lineal de la edad en el crecimiento lineal se model utilizando un polinomio cbico. Las variables de indicador de gnero y los estratos del estado nutricional se utiliza para modelar los efectos de estos parmetros en la altura a la inscripcin. Las nias fueron significativamente ms corto y ms ligero que los nios, los nios desnutridos sustancialmente empobrecidas y desnutridas leve fue significativamente ms corto y ms ligero que los nios normalmente nutridos. Las previsiones de la velocidad media de crecimiento lineal en nios que tenan 19 meses de edad al ingreso (promedio de edad de los participantes) y se mantuvo libre de infecciones por Helicobacter (todas las pruebas negativo) fue de 96 mm / ao. Para modelar los efectos de las infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento, el modelo de regresin contiene dos trminos de interaccin entre variables indicadoras para los nuevos y crnicas Helicobacter Bacter las infecciones y las variables continuas de tiempo de inscribirse cin. Ajustada por edad, la velocidad de crecimiento durante el seguimiento se redujo en los nios con nuevas infecciones por Helicobacter un 9,7 (IC 95% 3,8, 15,6) mm / ao, en comparacin con los controles, mientras que el efecto de las infecciones crnicas era dbil y no significativa (Tabla 3) . Un anlisis ms detallado (no se muestra en la Tabla 3) demostraron que la edad ajustada a la velocidad de crecimiento en los nios seronegativos infectados (nuevas infecciones) se redujo en un 6,4 (IC 95% 0,0, 12,9) mm / ao (p = 0,05) en comparacin con los nios infectados (seropositivos infecciones crnicas). En el anlisis de regresin estratificada, los efectos perjudiciales ajustados de nuevas infecciones por Helicobacter en la velocidad de crecimiento fue muy similar en nios y nias, 10.5 (IC 95%: -0,9; 21,9) mm / ao y 9,0 (IC 95%: 2,2, 20,1) mm / ao, respectivamente. Los efectos sobre el crecimiento de Helicobacter ponderal se analizaron mediante modelos mixtos de regresin similares efectos (excepto el efecto de la edad se model utilizando un polinomio de segundo grado). Los efectos perjudiciales de la ajustados en funcin de las nuevas infecciones por Helicobacter y crnicos en la velocidad de crecimiento ponderal eran pequeas y no significativas, 53 (IC del 95% -147, 253) g / ao (p = 0,6) y 10 (IC del 95% -173, 193) g / ao (p = 0,9), respectivamente. 4. Discusin El principal hallazgo de este estudio fue que las nuevas infecciones por Helicobacter definido como positivo de la prueba del antgeno fecal y serologa negativa se asocia con la reduccin del crecimiento lineal en nios pequeos. El dficit estimado en la velocidad de crecimiento promedio durante un ao de seguimiento en nios con infecciones nuevas en comparacin con los controles no infectados era casi de 10 mm / ao, que se traduce en aproximadamente un 10% ms lento el crecimiento lineal. No hubo evidencia de la recuperacin del crecimiento en nios con infeccin crnica por Helicobacter. Estos resultados muestran que las infecciones por Helicobacter contribuido sustancialmente al dficit de crecimiento pronunciado en los jvenes nios y nias ecuatorianas de vecinos pobres de las ciudades campanas. El hallazgo de este estudio est de acuerdo con investigaciones anteriores en Colombia, que tambin ha demostrado el efecto perjudicial de la infeccin por Helicobacter en el crecimiento de tener la razn ms pronunciada despus de la infeccin.13 Se podra especular que la infeccin crnica se asocia con un patrn diferente de la inflamacin gstrica que se no causa un efecto perjudicial sobre el crecimiento en nios. Seroconversin de la IgG, que se produce varios meses despus de la infeccin en los nios, puede servir como un biomarcador de la transicin a la fase crnica de la infeccin. Akhiani et al.20 demostraron que el desarrollo de una respuesta de anticuerpos anti-Helicobacter se asocia con disminucin de la inflamacin gstrica, pero la colonizacin mejorada en modelos animales y especul que el anti-Helicobacter bacteriemia anticuerpos puede facilitar la persistencia de este patgeno. El efecto perjudicial de la nueva infeccin por Helicobacter en la velocidad de crecimiento lineal en estos nios ecuatorianos fue casi el doble de 5 mm / ao efecto observado previamente en Colombia nios.11 Esta discrepancia puede explicarse por diferentes poblaciones de origen y, al menos en parte, un muestreo aleatorio efecto. El efecto sobre el crecimiento de

Helicobacter ponderal en estos nios ecuatorianos era pequea y no significativa, lo cual es consistente con los resultados de investigaciones previas en Colombia.11, 13 Este estudio utiliz un anticuerpo monoclonal del antgeno fecal prueba de ELISA para la deteccin de infecciones por Helicobacter y pruebas serolgicas de ELISA IgG de clasificar las infecciones como la nueva (serologa negativa) o crnica (serologa positiva), utilizando una clasificacin de la infeccin previamente desarrollado scheme.22-24 Se ha demostrado previamente que la Hp StAR anticuerpo monoclonal prueba de ELISA para antgeno de Helicobacter fecal puede ser utilizado como un indicador fiable de la infeccin por Helicobacter en los nios, ya que se compara muy bien con pruebas diagnsticas invasivas, as como el test del aliento con urea-13C, con una sensibilidad que va desde el 94,4% al 98,2% y una especificidad del 94,7% a 98,1%, segn La tasa de prevalencia del 61% de las infecciones por Helicobacter en estos nios y nias ecuatorianas segn lo determine la StAR Hp prueba del antgeno fecal es similar a la tasa de prevalencia del 53% en nios colombianos de 2 aos de edad, segn lo determinado por la prueba del aliento con urea-13C, 5, pero superiores a la tasa de prevalencia del 23% reportado en otro grupo de nios colombianos que se encontraban, en promedio, de aproximadamente 4 aos de age.11 Una limitacin de este estudio fue la falta de pruebas de antgenos en heces Helicobacter momento de la inscripcin. Esto no permite una evaluacin ms precisa del tiempo de la infeccin por Helicobacter y la duracin de sus efectos sobre el crecimiento. Por otra parte, los episodios graves de diarrea en los participantes del estudio fueron tratados con antibiticos, alterando la historia natural del episodio. Por lo tanto, la falta de asociacin entre los episodios de diarrea y el crecimiento no pueden ser generalizables a la poblacin de origen de bajo nivel socioeconmico los nios ecuatorianos. Las fortalezas de este estudio incluyen la recopilacin de datos detallados del crecimiento y el empleo de una poblacin de origen socioeconmico homogneo. Los resultados de este estudio proporcionan una evidencia ms de perjudiciales efectos sobre el desarrollo de Helicobacter en los nios pequeos que viven en malas condiciones econmicas.