Universidad Rafael Landivar

Facultad: Ciencias Ambientales y Agrcolas Sede: Escuintla Curso: Fitopatologa II Ing. Emerson Herrera.

Control Biolgico de Enfermedades

Ramrez Contreras, Andrs Omar 2274608 Seccin: 01

Escuintla, 15 de Octubre del 2,011

ndice

Introduccin
1. Introduccin .. 2. Objetivo ... 3. Control biolgico . 4. Desarrollo tecnolgico y comercializacin de agentes de control biolgico de fitopatgenos 5. Flujograma aislamiento del agente biolgico. 6. Mecanismo de antagonismo del agente de control biolgico 7. Mecanismos mediante los cuales los antagonistas ejercen su accin.. 8. Principales microorganismos antagnicos 9. Conclusiones .... 10. Bibliografia .. 3 4 5 6 8 9 13 1 5 21 22

La agricultura actual demanda la reduccin de plaguicidas qumicos y la introduccin de sistemas sostenibles con el uso de agentes de manejo biolgico. La alternativa de usar hongos, bacterias y nematodos para el manejo de los microorganismos fitoparsitos puede ser una opcin biolgica muy importante de actualidad. El manejo biolgico de nematodos fitoparsitos es posible si se logra fomentar e investigar la utilizacin de hongos y bacterias que pueden estar en el suelo o, de lo contrario, reproducirse en laboratorios para uso comercial. En revisin de literatura se encontr varios organismos (hongos y bacterias) que pueden ser utilizados por agricultores, y en algunos casos, ya estn siendo aplicados. Entre los organismos encontrados, tenemos las bacterias Pasteuria penetrans, Pseudomonas (Burlkoldelia) cepacia tipo Wisconsin. Algunos hongos como: Verticillium chlamydosporium. Arthtrobotrys y Monacrosporium, Catenaria spp, Drechmeria coniospora, Pleurotus ostreatus, Pleurotus spp. Fusarium solani, Cylindrocarpon cylindroides y Paecilomyces lilacinus, Verticillium lecanii Arthrobotrys conoides, A. musiformis, A. robusta, Monoacrosporium ellipsosporum, Dactylaria thaumasia, Cylindrocarpon sp., Trichoderma harzianum, Dactylella brochophaga, Arthrobotrys oligospora y Arthrobotrys botryospora y Myrothecium verrucaria. Con este tipo de informacin, planteada desde el punto de vista en investigaciones agropecuarias, se podra tener posibilidades de utilizar nematicidas biolgicos en el manejo de nematodos fitoparsitos, donde se tendra la posibilidad de no usar de productos qumicos en un futuro, o por lo menos reducir sustancialmente su uso en nuestra agricultura y as mejorar la relacin con el medio ambiente y el ser humano.

Objetivos
General:

Describir el control biolgico utilizado para el manejo de microorganismos fitopatogenos.

Especficos:

Determinar los mtodos para la inoculacin de microorganismos benficos para el control de microorganismos fitopatogenos.

Describir las fases previas para la comercializacin de un producto a base de microorganismos antagnicos. Definir los principales mecanismos mediante los cuales los microorganismos antagonicos ejercen su accin.

Definir los principales microorganismos antagonicos, que se utilizan para el manejo de microorganismos fitopatogenos.

Control Biolgico

El control biolgico es el uso de organismos (o de sus metabolitos o subproductos) que son enemigos naturales de una plaga o patgeno, con el fin de reducir o eliminar sus efectos dainos en las plantas o sus productos. La razn principal por la cual muchos productos agrcolas no son destruidos completamente por las plagas y las enfermedades es la presencia natural de agentes de control biolgico: organismos capaces de antagonizar con las plagas o patgenos, reduciendo sus efectos nocivos. El desarrollo y aplicacin de este potencial de la naturaleza cobra cada vez mayor importancia, y seguramente tendr un gran impacto en la agricultura en el futuro cercano. Recientemente, la aplicacin de la ingeniera gentica (la introduccin artificial de genes de una especie en otra) para mejorar la resistencia de cultivos a plagas o patgenos ha abierto un sinfn de posibilidades para el control biolgico. A pesar de la gran cantidad de esfuerzos acadmicos invertidos en el estudio y desarrollo de estos agentes de control biolgico, es paradjico que el uso comercial y a gran escala de este tipo de productos ha sido muy limitado. Una de las limitantes ms importantes para alcanzar el uso a nivel comercial de los agentes de control biolgico es que, a diferencia de los pesticidas o antimicrobianos qumicos, que generalmente hacen disminuir rpidamente la densidad de la plaga o la severidad de la enfermedad, la eficacia de los productos biolgicos en el campo depende sensiblemente de factores ambientales difciles de controlar (temperatura, humedad, acidez, exposicin a luz ultravioleta, etctera). Adems, su espectro de accin contra diferentes plagas o patgenos es menor que el de los plaguicidas o antimicrobianos qumicos. Por otra parte, la comercializacin de los agentes de control biolgico se ha visto limitada por la falta de mtodos rigurosos de evaluacin que permitan anticipar de manera racional las complejas interacciones entre planta, la plaga o agente patgeno, el agente de control biolgico, el suelo y el ambiente, presentes todos en el campo. Finalmente, el uso de agentes de control biolgico en el control de plagas o enfermedades requiere de un manejo y aplicacin ms complejos que los requeridos para el uso de pesticidas o antimicrobianos qumicos. Ello conduce a una mayor variabilidad y mayor tiempo de respuesta para poder observar los resultados en el campo. Esto, a su vez, es uno de los mayores problemas para su comercializacin y uso extensivo. En consecuencia, el desarrollo de productos exitosos para el control biolgico de plagas o patgenos requiere de la participacin de un grupo multidisciplinario conformado por especialistas en fitopatologa, entomologa, agronoma, microbiologa, biologa molecular e ingeniera de bioprocesos. Antes de que un agente de control biolgico sea introducido con xito en el mercado es indispensable llevar a cabo una serie de evaluaciones. Despus de la seleccin inicial en laboratorio de un aislado microbiano que sea eficaz, es importante estudiar su ecologa, fisiologa y
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modo de accin. Paralelamente, debe desarrollarse un sistema de produccin y formulacin del agente de control biolgico para obtener un producto con una vida de anaquel suficientemente alta y que otorgue al producto ventajas competitivas en el ambiente en el cual ser aplicado. Posteriormente, se debe escalar el proceso a nivel piloto para la obtencin de cantidades de producto suficientes para llevar a cabo su evaluacin en invernadero y campo. Finalmente, si el producto presenta atributos suficientes y su produccin es viable tanto tcnica como econmicamente, se lleva a cabo el registro y se inicia la comercializacin del producto. El caso de los plaguicidas biolgicos es el ms estudiado: se comercializan varios productos de este tipo desde la dcada de los setenta. Destacan los ejemplos de Bacillus thuringiensis y de hongos que atacan insectos (entomopatgenos). En el caso de agentes biolgicos para el control de enfermedades (principalmente producidos por hongos), los xitos comerciales son todava limitados y estn basados principalmente en hongos de los gneros Trichoderma, Gliocladium, Streptomyces, Coniothyrium y Candida, y bacterias de los gneros Pseudomonas, Bacillus y Agrobacterium. Las cepas de Trichoderma son consideradas como de los ms efectivos biofungicidas ya que pueden antagonizar un amplio espectro de hongos fitopatgenos gracias a la produccin de enzimas lticas que degradan las pare-des celulares del patgeno provocando su muerte. La fotos muestran: a) el ataque de Trichoderma harzianum (naranja) contra el fitopatgeno Pythium ultimum (verde), el cual se observa invadido; b) aspecto de la superficie perforada de Rhizoctonia solani despus de remover las hifas de Trichoderma. Fotos cortesa de: a) J.P. Hubbard; American Phytopathological Society; b) I. Chet, Hebrew University of Jerusalem. En vista que las prdidas de productos agrcolas pueden llegar hasta un 50 por ciento slo a causa de las enfermedades postcosecha, y debido a la importancia crucial que tiene la agricultura dedicada a productos de exportacin en nuestro pas, es importante desarrollar tecnologas de produccin de agentes para el control biolgico de los organismos que ocasionan plagas en los vegetales (organismos fitopatgenos). A continuacin se expone un panorama general del reto cientfico y tecnolgico que implica el desarrollo y la eventual comercializacin de este tipo de productos. Los microorganismos (hongos o bacterias) empleados en el biocontrol de fitopatgenos son generalmente aislados a partir del suelo o de la planta

Retos para el desarrollo tecnolgico y comercializacin de agentes de control biolgico de fitopatgenos

Aislamiento y seleccin del agente de control biolgico: Los microorganismos (hongos o bacterias) empleados en el biocontrol de fitopatgenos son generalmente aislados a partir del suelo o de la planta. Sin embargo, no todos los aislamientos presentan caractersticas ptimas para ser usados en biocontrol. De manera general, la estrategia utilizada para el aislamiento de cepas con potencial como entomopatgenos es la recoleccin de muestras de plantas sanas (races, tallo u hojas) provenientes de campos infectados con el fitopatgeno que se desea controlar. La lgica de esta estrategia reside en que aquellas plantas que resisten en cierta medida el ataque de la enfermedad en un campo donde la productividad se vio sensiblemente disminuida pueden deber su resistencia a la presencia de microorganismos antagonistas de la misma. Una vez que el fitopatlogo ha aislado en el laboratorio los microorganismos recuperados de las muestras, lo que implica el uso de medios de cultivo selectivos (substratos nutritivos artificiales) que permitan el crecimiento de la mayora de los microorganismos presentes en la muestra original, es necesario evaluar su eficacia como antagonistas del patgeno por medio de bioensayos in vitro. Estos bioensayos consisten en confrontar al patgeno con el posible antagonista con el fin de evaluar su potencial para inhibir el crecimiento o inclusive causar la muerte del patgeno. Posteriormente, aquellos aislamientos con capacidad antagonista evidente deben ser evaluados nuevamente a nivel laboratorio, invernadero y campo, considerando varios criterios para conocer su potencial tecnolgico.

Fig. No. 1 Flujograma aislamiento del agente biolgico.

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Estudios de los mecanismos de antagonismo del agente de control biolgico: En contraste con lo que ocurre con la mayora de los compuestos utilizados como antimicrobianos qumicos (cuyo mecanismo de accin se conoce), no se comprenden por completo los complejos modos de accin de los microorganismos que directamente o indirectamente afectan a las plantas, incluyendo a la mayora de los agentes de control biolgico. Son, regularmente, ms difciles de manejar y aplicar que los antimicrobianos qumicos comunes, especialmente cuando es necesaria la conjuncin de varios factores para que sean eficaces o ecolgicamente competentes. Sin embargo, la complejidad de los modos de accin de muchos agentes de control biolgico representa una ventaja sobre los productos qumicos, pues el patgeno tendr mayor dificultad para desarrollar resistencia hacia ellos. Aunque en algunos casos (como los mecanismos de antagonismo de especies del gnero Trichoderma contra hongos fitopatgenos) se cuenta con un conocimiento amplio del modo de accin, no es as para la mayora de los agentes de control biolgico. Esto es debido, en parte, a que es raro que slo un mecanismo antagonista sea responsable del control o supresin del patgeno. Un agente de control biolgico eficaz cuenta, generalmente, con varios mecanismos antagonistas que actan de manera conjunta para controlar al patgeno. Entre los mecanismos antagonistas de los agentes de control biolgico se encuentran, principalmente, la colonizacin rpida del hbitat (competencia por espacio y nutrientes), el parasitismo sobre la plaga o patgeno, la produccin de enzimas capaces de perforar y destruir literalmente al patgeno (enzimas lticas); produccin de antibiticos (ya sea solubles en agua o voltiles) y la habilidad para inducir la resistencia de la planta contra el patgeno mediante la estimulacin de los mecanismos de defensa de la planta. Establecer los mecanismos de antagonismo de manera detallada constituye todo un reto. Esta tarea corresponde, generalmente, al microbilogo, al fitopatlogo y, frecuentemente, al bilogo molecular. En cuanto a los aspectos de comercializacin del producto, o desde el punto de vista de los agricultores, la complejidad de los mecanismos de antagonismo de los agentes de control biolgico significa que la eficacia del producto en el campo depende sensiblemente de la tecnologa de produccin, formulacin, empaque y aplicacin. Esto es evidentemente contrario a lo que sucede con los antimicrobianos qumicos. As, los agentes de control biolgico pudieran, y en la mayora de los casos debieran, no ser considerados como verdaderos sustitutos o anlogos de los frecuentemente simples y estables antimicrobianos qumicos. En su lugar, los agentes de control biolgico representan un concepto totalmente nuevo en el control de fitopatgenos.

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Desarrollo de tecnologa de produccin y formulacin: Dentro de las etapas del desarrollo de tecnologa para la produccin de un agente de control biolgico, y desde el punto de vista tcnico, el mayor cuello de botella es la produccin y formulacin del agente de control biolgico para la obtencin de un producto con una vida de anaquel suficientemente amplia. Es importante considerar que la tecnologa de produccin y formulacin debe ofrecer un producto que rena las cualidades necesarias para potenciar los mecanismos de antagonismo del agente de control biolgico en su aplicacin en el campo. De manera general, la tecnologa de produccin y formulacin de un agente de control biolgico debe reunir las siguientes caractersticas: Proceso de produccin masiva del agente de control biolgico (microorganismo o antibitico) con una calidad constante entre lotes de produccin. Obtencin de un formulado con vida de anaquel prolongada, preferentemente a temperatura ambiente, que ofrezca ventajas competitivas (nutrientes, proteccin contra luz ultravioleta) al agente de control biolgico en el ecosistema donde ser aplicado y que sea compatible con la tecnologa de aplicacin disponible en el campo. Obtencin de una formulacin de alta concentracin del agente de control biolgico, ya que mientras ms diluido se encuentre el agente de control biolgico en la formulacin, mayor ser el volumen o cantidad a aplicar, lo que dificulta su comercializacin y almacenamiento.

Existen dos mtodos de produccin de agentes de control biolgico: cultivo en medio slido y cultivo en medio lquido En general, existen dos mtodos de produccin de agentes de control biolgico: cultivo en medio slido y cultivo en medio lquido. La produccin de agentes de control biolgico en medio slido es frecuentemente la primera opcin cuando se trata de producir hongos, ya que es su hbitat natural. Adems, a nivel laboratorio, la produccin de esporas del hongo en medio slido se alcanza de manera relativamente sencilla y presenta la ventaja de que las esporas as producidas tienden a ser ms tolerantes a los procesos de secado que las esporas producidas en medio lquido. Sin embargo, el escalamiento del sistema de produccin es complejo debido a problemas asociados con la esterilizacin del medio de cultivo, la transferencia de oxgeno, el control de temperatura, de contaminantes y la recuperacin del producto del medio slido. En general, el cultivo en medio lquido es el mtodo ms econmico y
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confiable para la produccin masiva de agentes de control biolgico antagonistas de fitopatgenos (hongos, levaduras y bacterias), ya que en l es posible cultivar todo tipo de agentes de control biolgico. La fermentacin sumergida se emplea industrialmente para obtener diversos productos (antibiticos, aminocidos, etanol, cidos orgnicos, etctera) y ha generado un vasto conocimiento de base sobre el cual se pueden optimizar procesos y disear fermentadores para la produccin, en una misma instalacin, de agentes de control biolgico antagonistas de fitopatgenos. El desarrollo del proceso de produccin del agente de control biolgico se inicia, a nivel laboratorio, con la optimizacin de un medio de cultivo y el estudio de variables de proceso como agitacin, temperatura, acidez y oxgeno disuelto. En esta etapa es importante que el microbilogo y el ingeniero de procesos optimicen el cultivo. Generalmente, se pretende minimizar el tiempo de fermentacin y maximizar la concentracin de biomasa viable producida, y para el caso de formulaciones slidas, maximizar la resistencia de la biomasa a la desecacin. Posteriormente, es necesario que el ingeniero de bioprocesos escale el proceso desarrollado en biorreactores de planta piloto (10-500 litros) a sistemas de produccin semicomercial o comercial (mayores de 1 000 litros, dependiendo de la productividad y del mercado) manteniendo, en la medida de lo posible, la productividad y la calidad del producto final. El escalamiento del proceso de produccin no es una tarea trivial, pues los procesos que requieren alcanzar altas concentraciones celulares, como ocurre en la produccin de agentes de control biolgico, frecuentemente presentan una disminucin de la viabilidad (capacidad de reproduccin) del microorganismo asociada a la biosntesis de metabolitos secundarios. Esto implica un conocimiento profundo de la fisiologa del microorganismo por parte del microbilogo y del ingeniero de procesos. Por otra parte, contar con una planta piloto provista de equipos de fermentacin, recuperacin y acondicionamiento del agente de control biolgico es tambin una de las limitantes para el desarrollo tecnolgico del proceso. En el caso particular de Mxico son muy pocas las instituciones que cuentan con tales facilidades. Contar con una planta piloto provista de equipos de fermentacin, recuperacin y acondicionamiento del agente de control biolgico es tambin una de las limitantes para el desarrollo tecnolgico del proceso Una vez lograda la tecnologa de produccin, es necesario que el bioingeniero desarrolle los procesos de recuperacin y formulacin del agentes de control biolgico. La recuperacin del microorganismo no representa, generalmente, un problema cuando se trata de un sistema de cultivo en medio lquido. Sin embargo, el desarrollar la formulacin de un agente de control biolgico no es un problema sencillo. Una limitante para
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el desarrollo de estas formulaciones es que la mayor parte de la informacin generada en esta rea no est disponible en la literatura cientfica, pues forma parte del acervo tecnolgico privado de las empresas productoras. Existen dos clases generales de formulaciones de agentes de control biolgico: lquidas, o bien en forma de polvos humectables. En ambos casos es necesario reducir la actividad metablica del microorganismo para prolongar la estabilidad y la vida de anaquel del producto. En las formulaciones lquidas, la estrategia general es disminuir la actividad de agua (parmetro termodinmico que refleja, en este caso, la biodisponibilidad de este elemento) mediante el uso de electrolitos (sales minerales, azcares, polioles, etctera) o aceites para generar suspensiones altamente concentradas del agente de control biolgico. Para las formulaciones en forma de polvos humectables, se lleva a cabo una deshidratacin (disminuyendo as la actividad de agua) del agente de control biolgico, generalmente de manera conjunta con un soporte complejo (mezcla de diferentes materiales inertes) que permitir reducir los daos asociados al proceso de secado (debidos a muerte trmica, deshidratacin y oxidacin de la pared celular). El proceso de formulacin es uno de los puntos ms crticos, desde el punto de vista tcnico, en el desarrollo tecnolgico de un producto de control biolgico. Debido a la compleja interaccin entre el agente de control biolgico, la planta, el patgeno y el medio ambiente, el xito del primero, aparte de su eficacia biolgica, depende en gran medida de que la formulacin provea un microambiente favorable al agente de control biolgico para colonizar la planta o fruto; esto sin estimular, a su vez, el crecimiento del patgeno. En este punto, el conocimiento detallado de los requerimientos nutricionales, nivel de acidez y humedad que favorezcan un crecimiento rpido del agente de control biolgico en el campo permitir el diseo de formulaciones eficientes. Es necesario evaluar el comportamiento de la poblacin del agente de control biolgico y del patgeno en el ecosistema, as como la gravedad del dao econmico provocado por ste Pruebas de campo: Una vez que se han desarrollado varios prototipos de formulados, es necesario evaluarlos en campo. Sin embargo, existen escasos estudios acerca del comportamiento de estos agentes en diferentes tipos de suelo, en rizoplanos y rizsferas (los microambientes que existen en torno a la raz) distintas y con comunidades microbianas diversas. Esto representa un problema desde el punto de vista del desarrollo de la tecnologa de aplicacin del agente de control biolgico en el campo. Por esta razn, las pruebas de campo deben llevarse a cabo en cultivos que presenten diferentes caractersticas (tipo y acidez del
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suelo, concentracin del patgeno, clima temperatura y humedad, manejo conjunto de productos qumicos, etctera). Asimismo, es importante estudiar las dosis y la frecuencia de aplicacin del agente de control biolgico durante las etapas de pre o post-cosecha. Es necesario evaluar el comportamiento de la poblacin del agente de control biolgico y del patgeno en el ecosistema de manejo integrado de plagas. Por otra parte, es importante evaluar el potencial del producto formulado comparndolo con los resultados obtenidos mediante el control qumico convencional del patgeno y otras medidas de control, como las fsicas y genticas. Al final, el agente de control biolgico se podr recomendar slo si se demuestra que tiene una efectividad suficiente para suprimir el dao por debajo de un umbral econmico, o combinado con otras medidas en un sistema de manejo integrado de plagas que en conjunto garanticen la sustentabilidad del cultivo. Sobre la base de los resultados de la evaluacin del producto en campo, es posible tomar la decisin de pasar al registro del producto o, en su caso, realizar modificaciones al proceso de produccin o formulacin. En funcin del tipo de cultivo, este proceso puede llevar varios aos de trabajo y debe llevarse en estrecha colaboracin entre el fitopatlogo, el agrnomo, el agricultor y la potencial empresa productora del agente de control biolgico. Registro y comercializacin: Despus de desarrollar la tecnologa de produccin, formulacin y aplicacin experimental, el producto ser susceptible de comercializarse. Adems de los requerimientos de viabilidad econmica, eficiencia demostrada, reproducibilidad bajo diferentes condiciones ambientales, larga vida de anaquel y tecnologa de aplicacin viable, los requerimientos para el registro del producto estn asociados con su distribucin y venta. Aun cuando en la mayor parte de los pases occidentales el proceso de registro de un agente de control biolgico requiere de evaluaciones del producto menos intensivas que las necesarias para un pesticida o antimicrobiano qumico, los tiempos para llevar a cabo las evaluaciones del producto y los costos de registro son generalmente altos. Estos tiempos y costos hacen necesaria la proteccin de la tecnologa (por ejemplo, mediante patentes). Sin embargo, patentar microorganismos nativos puede llegar a ser ms difcil que, por ejemplo, patentar una molcula especfica. Esto se debe a que algunas especies microbianas con capacidades como agentes de control biolgico ya han sido descritas de manera extensiva, y sus mecanismos de antagonismo frecuentemente no son completamente nuevos o nicos. Por otra parte, aunque un agente de control biolgico sea ms efectivo que un producto qumico para el control de un patgeno, su comercializacin puede verse limitada si el mercado no es lo suficientemente grande para justificar los altos costos derivados de su
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registro. Para asegurar un retorno rpido de la inversin, el industrial debe tratar de desarrollar y proteger productos con un amplio espectro de actividad contra diferentes patgenos y bajo diferentes condiciones ambientales. ste no es necesariamente el caso de la mayora de los agentes de control biolgico.

Mecanismos mediante los cuales los antagonistas ejercen su accin. No es fcil determinar con precisin los mecanismos que intervienen en las interacciones entre los antagonistas y los patgenos sobre la planta o en las heridas. En general los antagonistas no tienen un nico modo de accin y la multiplicidad de modos de accin es una caracterstica a seleccionar en un antagonista. Se han descrito varios mecanismos de accin de los antagonistas para controlar el desarrollo de patgenos sobre fruta. Ellos son: antibiosis, competencia por espacio o por nutrientes, interacciones directas con el patgeno (micoparasitismo, lisis enzimtica), e induccin de resistencia (Cook and Baker 1983). Antibiosis Se refiere a la produccin por parte de un microorganismo de sustancias txicas para otros microorganismos, las cuales actan en bajas concentraciones (menores a 10 ppm.). La antibiosis es el mecanismo de antagonismo entre microorganismos ms estudiado. Competencia Se puede definir competencia como el desigual comportamiento de dos o ms organismos ante un mismo requerimiento, siempre y cuando la utilizacin del mismo por uno de los organismos reduzca la cantidad disponible para los dems. Un factor esencial para que exista competencia es que haya "escasez" de un elemento, si hay exceso no hay competencia. La competencia ms comn es por nutrientes, oxgeno o espacio. Interaccin directa con el patgeno Existen dos tipos de interacciones directas entre los antagonistas y los patgenos. Ellas son el parasitismo y la predacin. Parasitismo El trmino parasitismo se refiere al hecho de que un microorganismo parasite a otro. Puede ser definido como una simbiosis antagnica entre organismos. El parasitismo consiste en la utilizacin del patgeno como alimento por su antagonista. Generalmente se ven implicadas enzimas extracelulares tales como quitinasas, celulasas, b-1-3-glucanasas y
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proteasas que lisan o digieren las paredes de los hongos. (Melgarejo 1989, Ulhoa 1996). Predacin En el caso de la predacin el antagonista se alimenta de materia orgnica entre la cual ocasionalmente se encuentra el patgeno. No ha sido un mecanismo de accin muy importante en el desarrollo de agentes de biocontrol. Los reportes ms conocidos citan la presencia de amoebas en suelos supresores de enfermedades las cuales se alimentan de las hifas (cuerpos) de hongos patgenos entre otras fuentes de alimento (Campbell 1989). Induccin de resistencia Las plantas como otros seres vivos del planeta han pasado por un proceso evolutivo desde su aparicin sobre la tierra lo que les llev a desarrollar mecanismos de defensa muy poderosos contra sus invasores. De esta forma se acostumbra a postular que la resistencia es la regla mientras que la susceptibilidad es la excepcin. Si elegimos una planta cualquiera y comparamos el inmenso nmero de microorganismos que existe en su entorno sobre la tierra con el limitado nmero de microorganismos patgenos de ella debemos concluir que esto es as. Las plantas presentan entonces mecanismos bioqumicos y fsicos o estructurales de resistencia. Todos ellos gobernados genticamente. Se puede inducir resistencia en productos cosechados mediante el uso de diferentes inductores como bajas dosis de luz ultravioleta, compuestos naturales de las plantas como quitosano (producto de la deacetilacin de la quitina), y tambin mediante el uso de microorganismos antagonistas.

FUNDAMENTOS TERICOS DEL USO DE MICROORGANISMOS EN LA AGRICULTURA. LOS MICROORGANISMOS. Hongos. Trichoderma Trichoderma contribuye al crecimiento en cuanto a profundidad de las races de las plantas, haciendo que estos cultivos sean ms resistentes a la sequa. Las races de colonizadas por Trichoderma requieren un 40% menos de fertilizantes nitrogenados con relacin a las races que no se encuentran colonizadas (Montero et al.,----) .
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El Hongo Trichoderma ejerce un efecto favorable en la primera fase de desarrollo de la caa de azcar, ya que es capaz de inhibir la accin de otros hongos, adems, Se pudo comprobar que la aplicacin de Trichoderma fue eficiente debido a que en todas las combinaciones donde se aplic este producto, se logr un mayor nmero de posturas germinadas que en la variante donde no se aplic el mismo (Montero et al.,----). Dentro de los organismos utilizados en bioremediacin se ha estudiado el genero Trichoderma. El cual puede degradar organoclorados, clorofenoles, y otros insecticidas coma DDT, endosulfn, pentacloronitrobenceno, aldrin y dieldrin, herbicidas como trifluralin y glifosato. (Esposito y Da Silva, 1998). Este hongo posee enzimas tales como celulasas, hemicelulasas y xylanasas que ayudan a la degradacin inicial del material vegetal y por ltimo enzimas de mayor especializacin que contribuyen a la simplificacin de molculas complejas como son las de biopesticidas (Kaytama y Marsumara, 1993) . Trichoderma spp toma nutrientes de los hongos (a los cuales degrada) y de materiales orgnicos ayudando a su descomposicin, por lo cual las incorporaciones de materia orgnica y compostaje lo favorecen. La velocidad de crecimiento de este organismo es bastante alta, por esto es capaz establecerse en el suelo y controlar enfermedades (Esposita y DaSilva, 1998; Papavisas, 1985) . La aplicacin de Trichoderma para el control de enfermedades tiene varias ventajas:

1. Trichoderma ofrece un control eficaz de enfermedades de plantas. 2. Posee un amplio rango de accin. 3. Este hongo est propagndose en el suelo, aumentando sus poblaciones y ejerciendo control duradero en el tiempo sobre hongos fitopatgenos. 4. Este hongo ayuda a descomponer materia orgnica, haciendo que los nutrientes se conviertan en formas disponibles para la planta, por lo tanto tiene un efecto indirecto en la nutricin del cultivo. 5. Trichoderma estimula el crecimiento de los cultivos porque posee metabolitos que promueven los procesos de desarrollo en las plantas. 6. Puede ser aplicado en compostaje o materia orgnica en descomposicin para acelerar el proceso de maduracin de estos
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materiales, los cuales a su vez contendrn el hongo cumpliendo tambin funcin de biofungicida. 7. Favorece la proliferacin de organismos benficos en el suelo, como otros hongos antagnicos. 8. No necesita plazo de seguridad para recoleccin de la cosecha. 9. Preservacin del medio ambiente al disminuir el uso de fungicidas. 10. Economa en los costos de produccin de cultivos (Chet and Inbar, 1994). 11. Ataca patgenos de la raz (Pythium, Fusarium, Rhizoctonia) y del follaje (Botriys y Mildew) antes que puedan ser los detectados y evita el ataque de (Phytophtora). 12. Previene enfermedades dando proteccin a la raz y al follaje. 13. Promueve el crecimiento de pelos absorbentes y races alimenticias. 14. Mejorando la nutricin y la absorcin de agua. 15. Disminuye o elimina la dependencia de fumigantes qumicos. 16. No se ha registrado ningn efecto fitotxico. Paecilomyces Solubilizador de fsforo y regulador de nematodos. En el ciclo del fsforo hay unos microorganismos, principalmente hongos y bacterias, que son capaces de solubilizar compuestos insolubles en P con Fe (estrenuita), con Al (variscita) o con Ca (fosfato triclcico o fosfato ortoclcico), segn Brady y Weil, citados por cabrera (2000) , estos microorganismos capaces de solubilizar este fsforo, lo hacen mediante la acidificacin del medio liberando a l protones y/o cidos orgnicos como ctrico, oxlico o succinico. Cabrera (2000) encontr especies de hongos Penicillium, Aspergillus, Scytalidium y Paecilomyces presentando una alta actividad solubilizadora de fsforos. La facultad que posee para parasitar huevos de nematodos, tambin se ve algunas veces o se expresa sobre nematodos en estados libres o mviles, o sobre hembras sedentarias, pero es mas agresivo sobre los huevos. (Cabanillas et al., 1989). Las toxinas producidas por parte del Paecilomyces afectan el sistema nervioso y causan deformacin en el estilete de los nematodos que sobreviven, lo que permite reducir el dao y sus poblaciones. Al controlar las poblaciones de nematodos, se reducen las posibilidades de enfermedades a nivel de la raz, pues los sitios de penetracin o entrada de estas son los mismos por donde el nematodo se ha fijado o adherido a succionar nutrientes y a desarrollar su ciclo de vida, sumado a esto, se reducen el numero de races no funcionales que se traduce en una mejor
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nutricin y en un mayor anclaje, que para el caso de la caa significa una reduccin en los ndices de volcamiento y dems efectos que esto acarrea. Saccharomyces (C.U.M, 1997) Las levaduras sintetizan sustancias antimicrobiales y otras substancias tiles para el crecimiento de las plantas, a partir de aminocidos y azcares secretados por las bacterias fotosintticas, la materia orgnica y las races de las plantas. Las sustancias bioactivas producidas por las levaduras como hormonas y enzimas, promueven la divisin activa de clulas y races. Estas secreciones tambin son sustratos tiles para los Microorganismos como las bacterias cido lcticas y los actinomicetos. Las diferentes especies de Microorganismos (bacterias fotosintticas y cido lcticas y levaduras) tienen sus funciones respectivas. Sin embargo, las bacterias fotosintticas son consideradas el eje central de la actividad de estos microorganismos. Las bacterias fotosintticas dan sostn a las actividades de los dems microorganismos, sin embargo, las bacterias fotosintticas tambin utilizan substancias producidas por otros microorganismos. Este fenmeno se conoce como Coexistencia y Coprosperidad. El incremento de las poblaciones de Microorganismos en el suelo a travs de su aplicacin, promueve el desarrollo de microorganismos benficos ya existentes en el suelo. Debido a esto, la microflora del suelo se vuelve abundante, y as el suelo desarrolla un sistema microbiano balanceado. En este proceso, algunos microbios especficos del suelo (especialmente los nocivos) son suprimidos, reduciendo as la incidencia de enfermedades causadas por patgenos del suelo. En estos suelos desarrollados, los Microorganismos Eficaces mantienen un proceso simbitico con las races de las plantas en la rizosfera. Las races de las plantas tambin secretan sustancias como carbohidratos, aminocidos, cidos orgnicos, y enzimas activas. Los Microorganismos Eficaces utilizan estas sustancias para su crecimiento. Durante este proceso, tambin secretan y proveen aminocidos, cidos nucleicos y una variedad de vitaminas y hormonas a las plantas. Los Microorganismos Eficaces coexisten en la rizosfera con las plantas. Por esta razn, las plantas crecen excepcionalmente bien en suelos dominados por estos agentes. Paecilomyces lilacinus Forma de accin: Este hongo parasita los huevos y hembras de los nematodos con la participacin de enzimas lticos causando deformaciones, destruccin de ovarios y reduccin de la eclosin. Produce
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toxinas que afectan el sistema nervioso y causan deformacin en el estilete de los nematodos que sobreviven, lo que permite reducir el dao y sus poblaciones. A valores de pH ligeramente cidos, se producen toxinas que afectan el sistema nervioso de los nematodos. Aplicacin: Aplicable va terrestre y area, se recomiendan aguas con pH entre 5.5-7.0 y dureza inferiores a 130 ppm expresada en carbonatos de calcio. Perodos de aplicacin: Antes de la siembra se aplica incorporndolo al suelo o bien alrededor de las plntulas luego del trasplante y en cualquier momento de su desarrollo, introducindolo al menos 5 cm de profundidad en el perfil del suelo. Perodo aplicacin cosecha: No hay restriccin. Fitotoxicidad: No es fitotxico.

Bacterias. Azotobacter y Azospirillum. Hapase et al, 1984 , encontr que al inocular con azotobacter las yemas de caa de azcar al momento del transplante y la inmersin de las races al momento de la siembra, originaba un incremento en la velocidad de germinacin, en el establecimiento del material trasplantado, en el desarrollo de las races, el macollamiento, la altura y numero de tallos movibles, lo cual incremento la produccin por unidad de rea. En el congreso internacional de la caa de azcar realizado en Australia en 1997, se demostr que con la aplicacin de Azotobacter y Azospirillum se pueden reducir la perdidas de Nitrgeno (NO3) por lavado, permitiendo la aplicacin hasta de 400kg de N sin que se presenten riesgos ambientales, pues los niveles de perdidas estn entre los valores permitidos y se estima que es posible hacer una reduccin de al menos el 20% de fertilizante nitrogenado sin afectar la produccin (Hussigi et al, 2001) . En Rio de Janeiro Brasil, Dobereiner J. 1992 , mostr que con la inoculacin de bacterias diazotroficas (diazo= N2, trofic = Nutricin) en caa de azcar se pueden fijar hasta 150kg de nitrgeno por hectrea ao. En experimentos de campo para evaluar la respuesta de la caa de
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azcar a la aplicacin de un biofertilizante elaborado con la cepa INICA-8 de Azospirillum sp, debido a su alta potencialidad dinitrofijadora; Realizados en la Red Geogrfica Experimental del INICA, en diferentes condiciones edafo-climticas y de manejo fito-tcnico. Los resultados indican que los retoos responden con diferentes magnitudes y altos niveles de sustitucin de fertilizantes minerales desde y por encima de 50% del nitrgeno total necesario para el ciclo de la plantacin, cuando se realizan inoculaciones de Azospirillum en la rizosfera en concentraciones de 109 cel/ml de bioproductos puros, frescos y bien conservados. Los incrementos medios por producciones adicionales estn en orden aproximado a 20% cuando se inocularon dosis en el rango 80 a 100 L/ha del biopreparado, observndose un alto ndice de frecuencia positiva de las respuestas obtenidas (76%) de los experimentos cosechados. (INICA, 2000) La Asociacin Surafricana de Tecnologa de la Caa de Azcar, menciona que el cultivo de la caa de Azcar deriva unos 25kg por hectrea ao, resultados encontrados en su estacin experimental (Purchase, 1980) . Lactobacillus (C.U.M, 1997) Las bacterias cido lcticas producen cido lctico a partir de azcares y otros carbohidratos desarrollados por bacterias fotosintticas y levaduras. Desde tiempos antiguos, muchos alimentos y bebidas como el yogurt y los pepinillos son producidos usando bacterias cido lctico. Sin embargo, el cido lctico es un compuesto altamente esterilizante que suprime microorganismos nocivos y mejora la descomposicin de la materia orgnica. Adems las bacterias cido lcticas promueven la fermentacin y descomposicin de materiales como lignina y celulosa, eliminando as los efectos indeseables de la materia orgnica no descompuesta. Las bacterias cido lcticas tienen la habilidad de suprimir microorganismos causantes de enfermedades como Fusarium, los cuales aparecen en sistemas de produccin continua. Bajo circunstancias normales, las especies como Fusarium debilitan las plantas cultivadas, exponindolas a enfermedades y a poblaciones crecientes de plagas como los nemtodos. El uso de bacterias cido lcticas reduce las poblaciones de nemtodos y controla la propagacin y diseminacin de Fusarium, mejorando as el medio ambiente para el crecimiento de cultivos. Burlkholderia. De entre las PGPR s usadas en biocontrol, las bacterias del genero Pseodomonas (gram negativa) son de las mas conocidas, produciendo una amplia gama de metabolitos con capacidad antimicrobiana. Su mecanismo de accin es conocido y puede ser bien por competencia
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nutricional a travs de la produccin de sideroforos que secuestran hierro y que no pueden ser usados por organismos patgenos, bien por la induccin de resistencia sistmica inducida, restringiendo la penetracin del patgeno en la planta, optimizando su defensa, o bien por la produccin de antibiticos, fenazinas, pioluteorina, cido cianhidrico, etc. efectivos contra enfermedades fngicas, como la podredumbre negra de la raz (Antn, 2000) . Las rizobacterias Bacillus y Pseudomonas han demostrado en condiciones de invernadero su capacidad para desencadenar una aceleracin en el reciclado de nutrientes al mismo tiempo que estimulan el desarrollo de un sistema radical ms eficaz para la absorcin de nutrientes. Adems del efecto favorable sobre la fisiologa de la planta, estas bacterias han demostrado su capacidad para evitar la entrada de patgenos, probablemente por un proceso de ocupacin de nicho, tambin se ha comprobado su capacidad para producir sideroforos, as como la capacidad de inhibicin de hongos fngicos "in-vitro" (Antn, 2000)

La produccin de sustancias estimuladoras del crecimiento es otra de las propiedades detectadas por las bacterias del gnero Pseudomonas y sus principales ventajas son inducir la iniciacin radicular e incrementar la formacin de races y pelos radiculares como as tambin el desarrollo vegetal general del cultivo de trigo. Las principales sustancias estimuladoras producidas son de tipo hormonal como auxinas, giberelinas y citoquininas pero tambin producen sustancias de otro tipo como aminocidos y promotores especficos del crecimiento. (Rizobacter, 2001) Burkholderia cepacia se describe como una bacteria muy atractiva y de considerable atencin por su versatilidad gentica, apareciendo como patgeno de plantas, saproftico, biorremediador y agente de biocontrol en cultivos de inters agrcola. Entre sus mecanismos de accin se destacan el aumento de la toma de agua y nutrientes por la planta, la produccin de fitohormonas y el biocontrol de patgenos (Sanchez et al., ----). Por lo que trabajar con productos a partir de los metabolitos activos de B. cepacia, en ausencia o no de la clula como tal, brinda magnificas posibilidades para su utilizacin como agente del biocontrol, adems constituyen una alternativa eficaz a quimiotxicos, altamente contaminantes y peligrosos para la salud (Sanchez et al., ----).

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Conclusiones

El control biolgico de enfermedades va a continuar en el futuro siendo una de las principales estrategias de manejo contra estos agentes perjudiciales. El control biolgico clsico ser, sin lugar a dudas, una herramienta fundamental a utilizar tras la introduccin accidental de nuevas enfermedades. Sin embargo, es de esperar que con la experiencia acumulada en el ultimo siglo y con una adecuada legislacin, la introduccin de enemigos naturales se lleve a cabo siguiendo todos los pasos necesarios para minimizar la probabilidad de que ocurra efectos secundarios perjudicial. Es previsible que el control biolgico inundativo e inoculativo estacional siga en aumento en los prximos aos. En este apartada es necesario profundizar en las posibilidades de la fauna y los microorganismos autctonos, por lo que los procesos de seleccin de especies candidatas

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debera verse obligatoriamente incrementado. Tambin los mtodos y tcnicas de produccin deberan mejorar la relacin calidad/precio. Mientras que la actividad alrededor de los tipos de control biolgicos anteriormente citados es de prever que se mantenga, o incluso aumente, en el futuro sin necesidad de dedicar un esfuerzo especial a ello, pensamos que el control biolgico de conservacin necesita una especial atencin desde el mundo cientfico. Son an muchas las necesidades de conocimiento dentro de este campo. Por ello, pensamos que la investigacin en el control biolgico de conservacin debera priorizarse en los prximos aos. No se debe de olvidar tampoco que la apuesta por la investigacin tanto bsica como aplicada es la nica forma de avanzar en ste, como en cualquier otro campo del saber. Esta investigacin adems, no slo debera provenir de fondos pblicos (especialmente en control biolgico clsico y conservacin) sino que las empresas del sector, desde multinacionales hasta pequeas asociaciones de agricultores, deberan invertir cada dia mas en la investigacin, desarrollo e innovacin de estas y otras estrategias de control de enfermedades.

Bibliografa
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Alicante, U. d. (01 de Enero de 2009). Control biolgico de plagas y enfermedades vegetales. Recuperado el 12 de Octubre de 2011, de http://www.ua.es/otri/es/areas/ttot/docs/Control_biologico_plagas_definitiva.pdf Arias, I. J. (1 de Enero de 2009). Agricultura Orgnica. Recuperado el 12 de Octubre de 2011, de http://www.controlbiologico.com/propuesta_cana.htm

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