BACTERIAS

Las bacterias son microorganismos unicelulares que presentan un tamao de algunos micrmetros de largo (entre 0,5 y 5 m, por lo general) y diversas formas incluyendo esferas, barras y hlices. Las bacterias son procariotas y, por lo tanto, a diferencia de las clulas eucariotas (de animales, plantas, etc.), no tienen ncleo ni orgnulos internos. Generalmente poseen una pared celular compuesta de peptidoglicano. Muchas bacterias disponen de flagelos o de otros sistemas de desplazamiento y son mviles. Del estudio de las bacterias se encarga la bacteriologa, una rama de la microbiologa.

CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS

Se realiza una clasificacin de los organismos para denominarlos y relacionarlos correctamente

Linneo fue el primero que impulso la clasificacin y nomenclatura

Es la ordenacin de los organismos en grupos taxonmicos - orden familia genero

GRACILICUTES
Corresponde a bacterias con pared celular rgida, semi rgida, con pptido glicano, se tien como Gram Negativas

FIRMACUTES Corresponde a bacterias con pared celular rgida, con pptido glicano mas grueso y mas fuerte y se tien como Gram Positivos

CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS SEGN SU PARED CELULAR

TERNECUTES Bacterias que no tienen pared celular

MENDOSICUTES Corresponde a las arqueo bacterias, cuyas paredes celulares son de composicin diversa, pero nunca con pptido glicano

CLASIFICACIN DE LAS BACTERIAS POR FORMA Y TAMAO

Son de diferentes tamaos como:

ESPIROQUETA 250 m

MICOPLASMA 0.15 m

Son de diferentes formas como: BASTONCILLOS (BACILOS) ESFERAS (COCOS) ESPIROQUETAS (ESPIRALES)

Son de diferentes formas como:

COMA O ELISES TRUNCAS (VIBRIUM) BACILOS EN FORMA DE CADENAS (ESTREPTOBACILOS )

BASTONCILLOS CORTOS Y GRUESOS (COCO BACILOS)

Son de diferentes formas como:

GRUPOS DE COCOS (STAFILOCOCOS)

COCOS EN FORMA DE CADENAS (STREPTOCOCOS)

PARES DE COCOS (DIPLOCOCOS )

Son de diferentes formas como:

COCOS EN FORMA DE TETRADA (SARCINAS) BASTONES DE LONGITUD DIVERSA (BACILOS PLEOMORFICOS) PROTUBERANCIA SIMILAR A UN TALLO ESTREMO (CAULOBACTER)

Son de diferentes formas como:

BASTONCILLOS ELONGADOS CON ASPECTO DE HIFA (ACTINOMIC ES)

Predecir el curso de la enfermedad Cada bacteria se nombra por su genero y especie Proceso de la enfermedad

clasificacin

por genero
y especie
Se usa taxonoma para identificacin de microorganismos (bacterias)

Disear estrategias adecuadas de tratamiento

CLASIFICACION POR CARACTERISTICAS DE TINCIN

La mayor parte de las bacterias que se obtienen de muestras clnicas se identifica en forma inicial haciendo C en cultivo puro o en medio artificial.

* Examina forma y color mediante la tincin. * Tamao de clulas bacterianas, es tal que resulta difcil. * En casi todos los casos el procedimiento inicial clave es la tincin de Gram.

Los mtodos de Tincin son de gran utilidad, pero debe usarse siempre con precaucin ya que puede conducir a errores.

Las molculas de colorante forman precipitados o agregados que parecen estructuras autenticas

Mtodos De

Esas estructuras se denominan artefactos

Tincin

La dificultad es la falta de contraste entre la clula y el medio que la rodea, y el medio de aumentar el contraste, estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de clulas o para revelar presencia de determinados constituyentes celulares:

* Flagelos * Esporas * Capsulas

* paredes celulares,
* centros de actividad respectiva

FIJACION
Las clulas generalmente son tratados para coagular el protoplasma antes de teirlas
Para bacterias la fijacin de calor seco es lo ms corriente, aunque tambin puede fijarse con sustancias qumicas como:
* Formaldehido * Acido actico * Etanol

* Cloruro de mercurio
* Glutaraldehido.

Bacterilogos fijan con calor los frotices bacterianos. Este mtodo conserva adecuada la morfologa general, pero no las estructuras internas de las clulas.

Hay que utilizar la Fijacin Qumica para que proteja la sub estructura fina y la morfologa de microorganismos delicados de mayor tamao penetran las clulas y reaccionan con componentes celulares, normalmente con protenas y lpidos para inactivarlos y convertirlos en insolubles e inmviles

COLORANTES

La mayora de los colorantes son compuestos orgnicos que tiene afinidad especifica por los materiales celulares

Dos caractersticas empleadas para teir microorganismos

Todos poseen grupos cromoforos, grupos con enlaces dobles conjugados que dan color a la bacteria.

Pueden unirse a las clulas mediante enlaces inicos, covalentes o hidrfobos

Colorantes son molculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargadas negativamente. Tales como los cidos nucledos y los polisacridos cidos

Ejemplo
Colorantes cationicos bsicos Colorantes aniones cargados negativa (protenas) * Eosina

* Azul de metileno
* Cristal de violeta * Safranina

* Fuccina cida
* Rojo de Congo

Colorantes liposolubles, colorantes de este grupo se combinan con material lipdico de la clula, esto es para revelar la localizacin de las goticulas o depsitos de grasa, NEGRO DE SUDAN.

Algunos colorantes teirn mejor solo despus que la bacteria haya sido tratada con otra sustancia qumica que no es un colorante, esta sustancia se llama MORDIENTE

Mordiente (cido tnico), el mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo si podr atacar el colorante.

TINCION O COLORANTE SIMPLE

Si se desea simplemente el contraste de las clulas para la microscopia son suficientes los procedimientos simples , para tincin usamos solo un colorante

Azul de metileno acta sobre todas las clulas bacterianas rpidamente y no produce un color intenso que oscurezca los detalles celulares, til para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales

TINCION DIFERENCIAL

TINCION DE GRAM

Fundamento: La morfologa celular bacteriana son los cocos, bacilos, positivos o negativos, se basan estos en la tincin de Gram. Las Bacterias G + y G tien de diferente forma debido a las interferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la clula bacteriana sirve para dar su tamao y forma al organismo as como para prevenir la lisis osmtica.

Las Bacterias pueden dividirse en dos grupos:

* Gram positivas * Gram negativas

El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano.

TINCION DE GRAM

CELULAS GRAM NEGATIVAS

CELULAS GRAM POSITIVAS

* Pared es gruesa, varias capas interconectadas de peptidoglicano y algo de cido teicoico. * As como el 80% a 90% de la pared celular del Gram + es pptido glicano. * Pared contiene menos aminocidos, menos contenido graso,

* Las pared contiene una capa delgada de pptido glicano y rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolipidos, lipopolisacaridos y lipoprotenas. * Solo el 10 al 20% de la pared de la clula Gram contiene pptido glicano. * Paredes contienen mas aminocidos * Contenido graso es elevado.

CLASIFICACION DE LAS BACTERIAS

La tincin de Gram es un tipo de tincin empleado en microbiologa para la visualizacin de las bacterias. Por mas de una centuria las bacterias han sido clasificadas a la reaccin de Gram, la habilidad de

retener un complejo de iodo violeta cuando se trata con un solvente orgnico tal como el alcohol o
la acetona.

las bacterias Gram positivas retienen la tintura y aparecen de color violeta.

las Gram negativas no lo pueden retener y se tien de color rojo para ser vistas con el microscopio, como se muestra a continuacin.

COLORACION GRAM PROCEDIMIENTO

Preparacin de extendido en portaobjeto Agregar solucin de yodo Fijacin al calor Enjuagar a chorro de agua Enjuagar a chorro de agua Decolorar con solucin alcohol acetona Agregar solucin de contraste Safranina Enjuagar a chorro de agua

Colorear con Cristal de Violeta

Enjuagar a chorro de agua

Dejar secar y observar en microscopio

TINCIN CIDO ALCOHOL RESISTENTE

La pared celular de ciertas bacterias contienen cidos grasos (cidos micolicos ) de cadena larga, que les da la propiedad de resistir la decoloracin con alcohol cido despus de la tincin con colorantes bsicos Las bacterias no resistente se decoloran con solucin cido alcohlico por lo que se tien de color azul (colorante de contraste) La coloracin clsica de Zielh Nilsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.

PROCEDIMIENTO
Realizar el extendido Lavar con agua

Cubrir con solucin de Fuccina Fenicada

Cubrir con azul de metileno de Lofer

Lavar con agua

Lavar con agua

Dejar caer gota a gota la solucin alcohol cida (decolorante)

Dejar secar y observar en microscopio

CAPSULA Alrededor de las clulas bacterianas.

Para evidenciar presencia de cpsula se emplea el mtodo de Hiss

La capsula es un polisacrido y mucopolisacarido extracelular

TINCION DE ESTRUCTURAS ESPECIFICAS

Las clula capsuladas estn protegidas contra la fagocitosis

Debido a su elevado contenido de agua se tien dbilmente por el colorantes

FLAGELOS
Orgnulos de locomocin muy finos en forma de hilo delgado Formado por una sub unidad proteica llamada flagelina, la agregacin de estas forman una estructura cilndrica hueca

El flagelo se inserta a la clula bacteriana mediante un gancho o cuerpo basal

Los flagelos no son necesarios para la viabilidad, varan en numero.

Se usan para la coloracin el mtodo de Leifson, y de Gray

CLASIFICACION BACTERIANA

COCOS GRAM POSITIVOS

Segn diferentes pruebas bioqumicas los dividimos en: Catalasa positivos: Bacitracina Resistente: Staphilococcus: Coagulasa positivo: Staphilococcus aureus Coagulasa negativos: Novobiovina sensible: Staphilococcus epidermidis. Staphilococcus hominis. Staphilococcus haemoliticum. Staphilococcus lugdunensis. Novobiovina resistente: Staphilococcus saprophyticus. Bacitracina Sensibles: Cloruro de Na+ 6,5 % positivo: Micrococcus. Cloruro de Na+ 6.5 % negativo: Stomatococcus.

Catalasa negativos: Cocos del grupo Streptococcus: Beta-Hemolticos (hemolisis completa de hemates): PYR positivo: Grupo A (Streptococcus pyogenes). PYR negativos: Hipurato positivo: Grupo B (Streptococcus agalactiae). Hipurato negativo: Grupo C. Grupo F. Grupo G. Alfa-Hemolticos (hemolisis parcial de hemates): Optoquina sensible: Streptococcus pneumoniae. Optoquina resistente: Streptococcus del grupo viridans: S. mutans. S. sanguis. S. mitis. S. salivarius. S. anginosus. Gamma-Hemoliticos (no hemolticos): Streptococcus bovis. Streptococcus milleri. Streptococcus anaerobios. Algunos Streptococcus del grupo viridans y Streptococcus agalactiae.

Cocos no Streptococcus: Optoquina resistentes: Enterococcus. Telurito positivo: E. faecalis. Telurito negativos: E. faecium. E. gallinarum. E. raffinosus. E. casseliflavus. Pediococcus. Leuconostoc. Stomatoccus. Gemella. Aerococcus. Lactococcus.

CLASIFICACION BACTERIANA

BACILOS GRAM POSITIVOS Aerobios Formador de esporas: Bacillus: B. anthracis. B. cereus. No formadores de esporas: Corynebacterium (catalasa positivo). C. diphtheriae. C. ulcerans. C. pseudotuberculosis. C. jeikeium. C. ureolyticum. C. striatum: flora habital de la piel, rara vez patogeno. C. amycolatum: idem al anterior. Arcanobacterium (catalasa negativo). A. haemolyticum. A. pyogenes. A. bernardiae.

Nocardia: N. del complejo asteroides. N. brasiliensis. N. otitidis caviarum. Rhodococcus. R. equi. Gordona. Tsukamurella. Actinomadura. Streptomyces somaliensis. Tropheryma whippelii. Listeria monocytogenes. Lactobacillus. Erysipelothrix rhusiopathiae.

Anaerobios Clostridium. Actinomyces (ramificado

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

COCOS GRAM NEGATIVOS

En pareja (diplococos) y oxidasa positiva: Neisseria. N. gonorrhoeae. N. meningitidis. Moraxella. M. catarrhalis.

BACILOS GRAM NEGATIVOS

Fermentadores (en TSI): Oxidasa positivos: Escherichia coli. Klebsiella. Salmonella: S. typhi. S. paratyphi A y B. S. choleraesuis. S. typhimurium. S. enteritidis. Shigella. Proteus mirabilis. Serratia marcescens. Citrobacter. Enterobacter. Providencia. Morganella. Yersinia. Edwarsella. Oxidasa negativos: Vibrio: V. cholerae. V. mimicus. V. damsela. Otros. Plesiomonas shigelloides. Aeromonas.

No fermentadores (en TSI):

Oxidasa positivos: Pseudomonas: P. aeruginosa. P. fluorescens. P. putida. Burkholderia: B. cepacia. B. pseudomallei. Oxidasa negativos: Stenotrophomonas maltophilia. Acinetobacter baumanii.

Otros bacilos gram negativos:

Otros bacilos gram negativos: Legionella pneumophila. Francisella tularensis. Gardnerella vaginalis. Pasteurella. P. multocida. Otros. Capnocytophaga: C. canimorsus (DF-2). Otros. Helicobacter: H. pylory. Otros. Campylobacter: C. jujuni. C. coli. C. lari. Otros. Bartonella. Bordetella B. pertussis. B. parapertussis. B. bronchiseptica.

Brucella: B. melitensis. B. abortus. B. suis. B. canis. Haemophilus: H. influenzae. H. parainfluenzae. H. aegyoticus. H. haemolyticus. H. parahaemolyticus. H. ducreyi. Grupo HACEK: Actinobacillus actinomycetemcomitans. Cardiobacterium hominis. Kingella kingae. Eikenella corrodens. Haemophillus aphrophilus. Streptobacillus moniliformis. Calymmatobacterium granulomatis.

Otros bacilos gram negativos:

Anaerobios: Fusobacterium. Bacteroides

ORGANISMOS QUE SE TIEN POCO O NADA CON LA COLORACION DE GRAM

Micobacterium (bacilos acidoalcoholresistentes o BAAR). Treponemas (espirales). Leptospira (espirales) Borrellia (espirales) Micoplasma (sin pared celular) Rickettsia (bacterias intracelulares). Coxiella (bacterias intracelulares). Chlamydia (bacterias intracelulares).