CONTENIDOS

Tema 16: Cocos Gram positivo:

Familia Micrococcaceae Familia Enterococcaceae Familia Streptococcaceae Familia Staphylococcaceae

Tema 17: Cocos y cocobacilos Gram negativo:

Familia Neisseriaceae Familia Moraxellaceae

Tema 18: Bacilos y cocobacilos aerbicos Gram negativo:

Familia Pseudomonadaceae Familia Burkholderiaceae Familia Alcaligenaceae

TEMA 16. COCOS GRAM POSITIVOS

FAMILIA: Streptococcaceae Gneros: Streptococcus y Lactococcus Gnero: Streptococcus

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS Y DE CULTIVO:

Morfologa celular

Morfologa colonial
Caractersticas de cultivo

HBITAT
Existen especies patgenos potenciales para el hombre y animales. Pueden estar en piel, mucosas de vas genitales, digestivas y respiratorias superiores.

CLASIFICACIN:
1)

Propiedades hemolticas:

Hemlisis Beta

Hemlisis Alfa

Hemlisis Gamma

COCOS GRAMPOSITIVOS BETAHEMOLTICOS

Staphylococcus aureus

S. agalactiae

Otros

FENMENO DE CAMP (Cristie, Atkins y Munch-Peterson)

2) Caractersticas antignicas y serolgicas:

Lancefield (1933)

Carbohidratos de superficie Protena M Es el ms difundido No incluye algunas especies, Ej.: estreptococos viridans y S. pneumoniae

3) Basada en la capacidad de crecimiento a temperaturas de 10 y 45 C se

diferencia en los siguientes grupos:

a)

Estreptococos pigenos: crecen entre 10 y 45 C y se asocia a la formacin de pus; su habitad natural es la cavidad bucal y las vas respiratorias superiores de humanos y animales. Incluye las siguientes especies: S. agalactiae, S. canis, S. dysgalactiae, subespecies dysgalactiae y equisimilis, S. equi subsp. equi, S. equi

subsp. zooepidemicus, S. iniae, S. porcinus, S. pyogenes y S. suis.

b) Estreptococos orales: El hbitat natural es la cavidad bucal y las vas respiratorias superiores de humanos y animales, donde se encuentran las especies: S. downei, S. gordonii, S. mitis, S. mutans, S. oralis, S. pnemoniae, S. salivarius.

c) Estreptococos anaerobios: S. hansenii, S. morbillorum, S. parvulus

y S. pleomorfus.

d) Otros estreptococos: no crecen a 10 C pero si a 45 C. S. bovis, S. equinus, S. hyointestinalis, S. thermophilus, S. uberis.

MODO DE INFECCIN Y TRANSMISIN: Las infecciones pueden ser endgenas o exgenas (inhalacin o ingestin). La afeccin puede propagarse por aerosol, contacto directo o fmites.

FACTOR ES DE VIRULENCIA: Cpsula (S. equi, S. suis, y S. pyogenes); estructuras de adhesin (fimbrias), protenas de la pared celular (M, T y R de S. pyogenes). Los estreptococos de los grupos A, C y G liberan las siguientes sustancias, enzimas y productos txicos, que favorecen la invasin de los tejidos del hospedador:

estreptoquinasa (actividad fibrinoltica);

hemolisinas (estreptolisina S y O);

lipasas, esterasas, lisozimas y neuraminidasas.

ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATGENO:

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A: Streptococcus pyogenes :

Presenta antgeno de pared celular del grupo A esta formado por ramnosa
y -N-acetilglucosamida y antgenos especficos de tipo: M, T y R.

La capsula esta formada por acido hialurnico. Solo tiene importancia en medicina humana, asociado a septicemias, faringoamigdalitis, imptigo, glomerulonefritis y fiebre reumtica.

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO B:

Presenta antgeno del grupo B, un carbohidrato compuesto de L- ramnosa, Nacetilglucosamida, galactosa y glucitol, oligosacaridos unidos mediante enlaces fosfato.

Son m.o. capsulados.

Streptococcus agalactiae:

Es uno de los principales agentes productos de mastitis bovina, junto con S.

dysgalactiae y S. uberis.

Tambin se asocia a procesos septicmicos, pielonefritis y neumona en perros. A peritonitis, septicemia y placentitis en gato, siendo reservorios del m.o. el aparato urogenital de los animales sanos.

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C:

El antgeno especifico del grupo C esta compuesto por los olisacaridos ramnosa y -N-acetilglucosamida.

Presentan una cpsula de cido hialurnico, no inmungena. Streptococcus dysgalactiae:

Subespecies dysgalactiae y equisimilis

Mastitis bovina.

Streptococcus equi subsp. equi:

En quidos es responsable de la papera, adenitis, gurma o moquillo

equino.

Streptococcus equi subsp. zooepidemicus:

Implicados en distintos cuadros clnicos en las especies domesticas.

Equinos: infecciones neonatales, formacin de abscesos, endometritis y

mastitis.

Porcinos:

procesos

septicmicos

artrticos

(animales

jvenes),

endocarditis (cerdos de engorde), infertilidad y abortos en hembras gestantes.

Perros: neumona purulenta y septicemias.

CUADRO

1. PRINCIPALES DIFERENCIAS ENTRE ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO C.

Especies S. dysgalactiae

Hemlisis

Lactosa

Trehalosa

Sorbitol

S. dysgalactiae subsp. equisimilis S. equi subsp. equi

S. equi subsp. zooepidemicus

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO D:

El antgeno especifico esta compuesto de cido teicoico.

Entre los estreptococos que forman este grupo se pueden citar: S. bovis, S. equinus y S. suis. Streptococcus suis: Meningitis Abscesos

Muy importante en medicina veterinaria. Son m.o capsulados.

Artritis En porcinos produce: endocarditis, neumona, septicemias y trastornos de la reproduccin.

En humanos: septicemia, meningitis, endocarditis, se considera una enfermedad laboral.

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO E:

Causan fundamentalmente septicemias, infecciones del tracto respiratorio y otros procesos clnicos en humanos y animales.

En porcinos se consideran los causantes de la linfadenitis estreptoccica. Streptococcus uberis:

Puede o no ser alfa-hemlitico. Esta implicado en mastitis subclnicas.

Streptococcus porcinus:

Son beta-hemliticos. En cerdos se asocia a la produccin de abscesos mandibulares, farngeos (linfadenitis maxilar).

DIAGNOSTICO BACTERIOLGICO

1.

Muestras: varan con la enfermedad; pus (paperas), liquido articular (artritis), leche (mastitis), rganos-sangre (septicemias) o exudados menngeos (infecciones por S. suis).

2.

Examen directo: frotis teidos de Gram. Aislamiento y cultivo: tomar en cuenta las caractersticas de crecimiento y cultivo del m. o en estudio.

3.

4.

Identificacin (ver cuadro).

Historia clnica

Naturaleza de la muestra (tejido, leche, orina, etc.)

Patgeno sospechoso

Examen directo en frasco, frotis teido

1. Seleccin e inoculacin de medios primarios

Tincin de anticuerpo

fluorescente
Incubacin
aerobio, microaerfilo o anaerobio

2. Estudio de la morfologa colonial en los medios y morfologa celular por frotis teidos por Gram de colonias seleccionadas.

3. Iniciacin de cultivos puros en medios slidos o en caldo

prueba de suscetibilidad a antimicrobianos

urge) 4. Estudios de tinciones de Gram en agar inclinado; pruebas de catalasa, oxidasa, etc. 5. Seleccin e inoculacin de medios diferenciales

(si

Incubacin

Pruebas de susceptibilidad a antimicrobianos

6. Lecturas de pruebas diferenciales: pruebas serolgicas si esta indicado

7. Identificacin final del microorganismo (s)

Figura 1. Pasos seguidos en general en el aislamiento e identificacin de bacterias de muestras biolgicas.

Agar sangre cordero 35 - C x 18 24 hrs. Aerobiosis y/o CO

Muestras clnicas Abscesos Hemocultivos L.C.R. OTROS

Frotis directo coloreado con Gram: cocos Gram - positivos

Colonias aisladas observar hemlisis Coloracin de Gram: Cocos Gram positivos en cadenas

Prueba de Catalasa NEGATIVA

Tipo de hemlisis

ALFA GAMMA
S.pneumoniae Optoquina sensible Grupo D (enterococo) Crece en NaCl

Beta
Grupo A Sensible a - bacitracina Grupon B Prueba CAMP Positiva Grupo D (enterococo) Crece en NaCl

Grupo D (enterococo) crece en NaCl

Grupo Viridans Identificacin por reacciones bioqumicas

Grupo Viridans Identificacin por reacciones bioqumicas

CUADRO

9 1. CARACTERSTICAS DIFERENCIALES DE ESTREPTOCOCOS IMPORTANTES EN LOS ANIMALES.

G r u p o H e m l i s i s C, , y c, , y Tr e h a l o s a S o r b i t o l M a n i t o l S a l i c i n a L a c t o s a R a f i n o s a I n u l i n a E s c u l i n a H i p u r a t o s o d i c o N a c l al 6,5 % C a t e g r i a

S. pyogenes S. agalactiae

A B

+ + + +

_ _ _ _

V _ _ _

+ (+) _ (+)

+ + + V

_ _ _ _

_ + _ _

_ _ _ _

Pigeno Pigeno SIS

S. dysgalactiae S. dysgalactiae subesp. equisimilis S. equi subesp. equi S. equi subesp. equi zooepidermicus S. bovis

C C

SIS Pigeno

C D

_ V

+ _

_ V

+ +

+ + + +

_ +

_ _

_ _

Pigeno Otros

G r u p o

H e m l i s i s

T r e h a l o s a V +

S o r b i t o l

M a n i t o l

S a l i c i n a

L a c t o s a

R I a n f u i l n i o n s a a

E s c u l i n a

H i P U R A T o

S o d i c o

N a c l al 6,5 %

C a t e g o r i A Otros

S. equinus S. uberis

D C,D,E P,V D,R,S x, y

Otros

S. suis S. pnumoniae S. porcinus

+ + + +

SIS Pigeno SIS

RESISTENCIA: Sensibles a los desinfectantes comunes y a la desecacin. Todas las especies se destruyen a 60 C 30 60 minutos. Muchas especies sobreviven por semanas en el suelo, ropa de cama, alimentos, corrales, equipos para ordear y en recipientes para leche.

IMPORTANCIA EN SALUD PBLICA: Los estreptococos pigenos de animales pueden infectar al hombre.

ENTEROCOCOS (I)

Catalasa

Oxidasa

Crec. 1045C

Crec. NaCl 6,5%

Crec. 40% sales biliares

Crec. pH 9,6

ENTEROCOCOS (II)
Colonias

Medio ambiente Flora comensal en mucosas de varias especies e intestinos

Especies de importancia clnica

Hbitat

Factores de virulencia

Resistencia a antimicrobianos Capacidades de intercambio de material gentico

Importancia en ciencias veterinarias

Salud pblica: indicadores de contaminacin fecal de alimentos Patgenos secundarios e inmunosuprimidos

ENTEROCOCOS (IV)
Clasificacin de los enterococos (Tomado y modificado de Hardie y Whiley, 1997) Grupo Especies incluidas E. faecalis E. faecalis E. faecium E. durans E. faecium E. hirae Importancia clnica E. mundtii E. avium E. avium E. pseudoavium E. malodoratus Importancia en E. raffinosus salud pblica: E. gallinarium E. gallinarium comensales en E. casseliflavus animales E. flavescens domsticos, E. cecorum E. cecorum pueden E. columbae transmitir sus Especies miscelneas E. saccharolyticus E. sulfureus genes de E. dispar resistencia a Situacin taxonmica indefinida E. solitarius especies E. seriolicida patgenas

FAMILIA: Staphylococcacea GNERO: Staphylococcus CARACTERISTICAS MORFOLGICAS Y DE CULTIVO:

Morfologa Celular:

Morfologa Colonial:

Caractersticas de cultivo Doble hemlisis

Una caracterstica especial es la zona doble de hemolisis. Para el aislamiento de cepas patgenas en alimentos o heces se usan medios de cultivos diferentes, como el Chapman Stone. Doble hemlisis

HBITAT: Piel y glndulas, mucosas (vas digestivas y respiratorias superiores) del hombre y animales. Tambin se encuentran contaminando alimentos, aguas, plantas y suelo.

CARACTERSTICAS DIFERENCIALES:

El gnero Staphylococcus se divide en varias especies segn una

clasificacin basada en:

La estructura de la pared celular (composicin de peptidoglucano, acido

teicoico, presencia de protena A).

Propiedades

fisiolgicas y bioqumicas (ver cuadro). serolgicas -------Antgenos superficiales (no

Caractersticas

veterinaria).

FACTORES DE VIRULENCIA: 1. Factores que interfieren la fagocitosis:

Capsula, Protena A, Clumping factor, Coagulasa y leucocidina.

2. Hemolisinas. 3. Enzimas. Adems de la coagulasa y la leucocidina, son de importancia las siguientes

enzimas:

Estafilocinasa (fibrinolisina), Hialuronidasa, Nucleasas (termonucleares o Dnasaa), otras enzimas (gelatinasa, fosfatasa, lecitinasa, proteasa, lisozima, dehidrogenasa y catalasa).

4. Exotoxinas:

Enterotoxinas, Exotoxina tipo C (hasta ahora no demostrada en los animales).

ESPECIES IMPORTANTES Y PODER PATGENO:

Estafilococos coagulasa positivo (ECP) S. aureus S. intermedius S. hyicus Estafilococos coagulasa negativo (ECN) S. caprae S. lugdunensis S. haemolyticus S. schleiferi

Staphylococcus aureus

Botriomicosis: lesiones granulomatosas crnicas poco comunes que afectan la ubre de yeguas, vacas, marranas y el cordn espermtico de los caballos.

S. AUREUS
Poder patgeno.

Sndrome del shock txico

Sndrome de la piel escaldada

Mastitis en varias especies

Intoxicaciones alimentarias

Pioderma profunda

Pioderma superficial

S. aureus

Infecciones supurativas de heridas y septicemia en todos los animales.

Pioderma, en especial en perros (mas comn S. intermedius) y caballos.

Piemia en corderos. Mastitis en porcino y ovino, las hembras de ganado vacuno, caprino, porcino y ovino.

Varias infecciones pigenas de la piel de numerosos animales.

S. aureus
Abscesos

subcutneos y celulitis en caballos y diversas infecciones pigenas

en conejos.
Artritis

y septicemia en pavos. urinarias en hombres y animales. que se observan principalmente en el hombre despus de

Infecciones

Enterocolitis,

teraputica antibitica prolongada; por ejemplo, despus de ciruga intestinal.

En

el hombre: osteomielitis, sinusitis, mastitis, furnculos, carbunco,

endocarditis, sndrome de choque toxico, neumona, amigdalitis. Infecciones

hospitalarias. Envenenamiento alimentario.

Staphylococcus intermedius

Causa pioderma, otitis externa, mastitis, infecciones oculares y de vas urinarias, foliculitis y furunculosis en perros.

Mastitis en vacas.

Staphylococcus hyicus

Es un patgeno porcino importante, causando epidermitis exudativa o

eczema hmedo y artritis sptica.

Dermatitis seborreica en caprinos, asnos, caballos. Infecciones en piel y ubre de bovino.

Staphylococcus gallinarum

Se ha aislado de las cavidades nasales y de la piel de la gallina. Nueva especie. Poder patgeno incierto y el m.o se haya emparentado con S. epidermidis.

Resistentes a concentraciones salinas. Staphylococcus caprae

Se ha encontrado en la leche de cabra; poder patgeno desconocido.

Staphylococcus epidermidis

Comensal piel y mucosa del hombre y los animales, por lo general no es patgeno, pero en ocasiones causa mastitis, abscesos e infecciones cutneas en animales.

Staphylococcus saprophyticus

Existe libre en la naturaleza y en general no es patgeno para los animales y el hombre.

Causa infecciones de vas urinaria y de heridas en el hombre.

DIAGNOSTICO BACTERIOLGICO:
1.

Muestra.
Examen directo (frotis y coloracin de Gram). Aislamiento y cultivo. Caractersticas de crecimiento y cultivos. Identificacin. Propiedades bioqumicas.

2.

3.

4.

RESISTENCIA:

Son sensibles a los desinfectantes comunes. El pus los protege y pueden conservarse en pus desecado por semanas.

Algunos estafilococos pueden sobrevivir a temperaturas de 60 por 30 min.

IDENTIFICACIN DE COCOS GRAM POSITIVOS GRAM STAIN (+) OF GLUCOSE OXIDATIVE FERMENTATIVE

Micrococcus (-)

CATALASE
(+)

Streptococcus

Staphylococcus

Cuadro 10 1. Caractersticas diferenciales de Estafilococos y Micrococos

S. aureus S. epidermidis S. intermedius S. hycus S. saprophyticus Micrococci

Oxidasa Coagulasa Hemlisis (Beta)

_ + +

_ _ _

_ + + _

_ V _ _ _

+
_ _ _ _ V V _ + A _ _ A + V + + V _ _ + NT NT V NT _ A

Pigmento Maltosa Produccin de acido(PAB) Manitol DNA asa.

A _ _

Novobiosina Glucosa (O F)

+ S F

S S F S F S F R6

O
_

MICROCOCCUS (I)
Hbitat: suelo, agua, productos lcteos y derivados animales, residente comensal de superficie corporal y mucosas de diversas especies. Caractersticas morfolgicas y de cultivo.

Tetradas

Morfologa microscpica

Morfologa macroscpica

MICROCOCCUS (II)

Catalasa

Oxidasa

Metabolismo oxidativo

Potencial patgeno: solo como oportunista y cuando se han descartado otros agentes infecciosos.
3

FAMILIA: Micrococcae

GNEROS: Micrococcus

IMPORTANCIA EN SALUD PUBLICA: GENERO: Micrococcus

Existen

nueve

especies,

morfolgicamente

parecidos

los

Staphylococcus pero bioqumicamente diferentes.

Son cocos Grampositivos a Gram variables. Oxidasa positivos e inmviles.