ASIGURAREA CALITATII IN MICROBIOLOGIE

Conf. Dr. CARMEN PANZARU

REFERENTIAL:
Ghid pentru acreditarea laboratoarelor de microbiologie: EA -04/10 Accreditation for microbiological laboratories (European Co-operation for Accreditation) Standard romn SR EN ISO 15189 ISO OrganizaiaInternaionalde Standardizare(organismeinternaionale de standardizare din peste 140 ri).

ASRO(Asociaiadestandardizaredin Romnia) organismnaionalde standardizare recunoscut de Guvernul Romniei(persoanajuridicdedrept privat,apolitic,neguvernamental) RENAR(AsociaiadeAcreditaredin Romnia)- organism de drept privat, neguvernamental, avnd ca obiectiv acreditarea organismelor din infrastructura deevaluareaconformitii

Standardizarea ansambludeconvenii carefaciliteazschimbuldeproduse, serviciiiinformaiiutile,garantatecalitativ

Tratatdemicrobiologieclinic,,8002 D. Buiuc NCCLS 2009

Personal
persoancuexperiensicalificat Opinii si interpretari ale rezultatelor: MEDIC!!!! Competena:monitorizatcontinuu

Mediu
Acces restrictionat Construitpeprincipiulfrcalede intoarcere Separareaactivitilorintimpsispatiu

Mediu
Spaiiseparate/zonedeactivitateclar desemnate pentru:
Zone de receptie si depozitare probe Prelucrarea probelor Intretinereatulpinilordereferin Pregtireamediilor,inclusivsterilizarea Marimea spatiului: in conformitate cu reglementrilenationaleinvigoare

Mediu
Echipamentul laboratorului nu ar trebui in modobinuitmutatintrespatiipentrua evitacontaminareaincruciat(ex pipetele) Aerul conditionat: filtrele trebuie inspectate iintreinutecorespunzator

Mediu
Reducereacontaminrii:
Suprafeenetedealepereilor,podelelor,tavanelor imeselor.Faiananuesterecomandat Imbinriconcaveintrepodele,pereti,tavan

Jaluzele plasate la exterior

Dulapuri suspendate In laborator nu se afla altceva decat strictul necesar pentru activitate

Mediu
Tavane:
Suprafata neteda, cu spoturi
Daca nu este posibil: dovezidocumentatecsecontroleaz riscurilepoteniale Program de curatenie

Mediu
Monitorizareacondiiilordemediu:
Progamdocumentatdecurenie(carear trebuisatinacontderezultatelemonitorizrii condiiilordemediu):
Mobila Suprafete Echipamente Procedurapentrurezolvareacontaminrii accidentale

Mediu
Monitorizarea aeromicroflorei:
sptmnalinlaboratoruldemicrobiologie

Testedesanitaie
sptmnalinlaboratoruldemicrobiologie

ESTIMAREA INCERTITUDINII
REPETABILITATEA REPRODUCTIBILITATEA Componenete individuale ale incertitudinii:
Pipetarea,cntarirea,efecteledediluare:sse demonstrezecsuntinutesubcontrol Laboratoareleartrebuisfiecontientede incidenarezultatelorfalsnegativesaupozitive

Repetabilitate apropierea acordului dintre rezultatele unor masuratori succesive ale aceleasi marimi masurate in aceleasi conditii de masurare

Reproductibilitate apropierea acordului dintre rezultatele masuratorilor succesive ale aceleasi marimi masurate in aceleasi conditii de masurare

Echipament intreinere,etalonare siverificareaperformanei

Program documentat pentru:
Intreinerea Calibrarea Verificareafuncionariiechipamentelor

Ghid pentru Intretinerea laboratorului

Tipul echipamentului
a) b) c) Termostate Figidere Congelatoare

Cerine
Curtaiidezinfectai suprafeeleinterne

Frecvena sugerat
a) b) c) Lunar Cnd este necesar (ex la 3 luni) Atunci cnd este necesar (ex anual) Anual La fiecare utilizare Anual sau conform recomandarii producatorului Anual

Centrifugi

a) Service b)Curiresi dezinfectare a) Sevice complet b) Verificarea sigurantei vasului sub presiune

a) b) a)

Autoclave

b)

Tipul echipamentului

Cerine

Frecvena sugerat

Hotadesiguran

Service complet si verificrimecanice

a) Service b)Curirei dezinfectare Curareelectrod a) b) Curire Service

Anual sau conform recomandrii producatorului

a) b) Anual La fiecare utilizare

Microscoape

pH-metre Balane Jarpentruanaerobioz Echipament volumetric

La fiecare utilizare a) b) Fiecare utilizare Anual

Curire/dezinfectare

Dupfiecareutilizare

Decontaminare,curare La fiecare utilizare isterilizare

Laborator

a)Curatiidezinfectai a) suprafeeledelucru, b) b) Podelele c) c) Celelalte suprafete

Zilnic Saptamanal La fiecare 3 luni

Ghid pentru Intreinerealaboratorului

Evitareacontaminriiincruciatedatorit echipamentului
Ideal: 2 autoclave
1 singur:programdesterilizareicureniedocumentat

Indrumri privind etalonarea

Tipul echipamentului Cerinte Frecventa sugerata
La fiecare 5 ani Anual Anual Termometredereferin Re-etalonaretrasabil (lichid) complet Punct unic Termometre de lucru Verificate pe baza termometrelor de referin Etalonaretrasabil complet Etalonaretrasabil complet

Balane Greutidecalibrare Greutideverificare

Anual 5 ani

Verificare pe baza Anual greutatii de calibrate sau verificate, imediat dupa etalonarea trasabila Etalonaregravimetric Anual

Sticlavolumetric

Tipul echipamentului Cerinte

Microscoape

Frecventa sugerata

Etalonaretrasabilla Initial micrometru (unde este cazul) Etalonaretrasabil

Centrifugi

Etalonare set de operatii care stabileste, in anumite conditii, relatiile dintre valorile cantitatilor indicate de instrumentul de masurare sau sistemul de masurare sau valorile reprezentate printr-o masurare amaterialului sau un material de referinta si valorile corespondente obtinute din standarde

Indrumari privind validarea echipamentului si verificarea performantei

Tipul echipamentului Echipamente cu temperaturacontrolat (termostat, frigider, congelator) Etuva Cerinte a. Obtineistabilitatea si uniformitatea temperaturii Monitorizai temperatura Frecventa sugerata a. initial, la fiecare 2 aniidupreparaie Zilnic

b.

a.

a. Obtineti stabilitatea si uniformitatea temperaturii b. Monitorizati temperatura a. Stabilii caracterisiticile pentru incarcari/cicluri Monitorizati temperatura/timpul

a. initial, la fiecare 2 ani sidupreparaie a. Zilnic/la fiecare utilizare a. initial, la fiecare 2 aniidupreparaie

Autoclav

b.

b. Zilnic/la fiecare utilizare

Tipul echipamentului Hotadesiguran microbiologic

Cerinte a. b. c. Stabilii performana Monitorizare microbiologic Monitorizarea fluxului de aer

Frecventa sugerata a. b. c. Iniial,idup reparaie Sptmnal La fiecare utilizare

Cronometre

Verificaiinbazain baza semnalului de timp national Verificaialinierea Ajustati utilizand cel putin 2 soluii tampon de calitate adecvat

Anual

Microscoape pH-metre

Anual Zilnic/la fiecare utilizare

Balante

verificailazeroicitind Zilnic/la fiecare utilizare in baza greutatilor de verificare

Tipul echipamentului Pipete

Cerinte Verificatiacurateeai precizia volumului eliminat

Frecventa sugerata Inmodregulat(sfieluat incalculfrecvenasi naturautilizrii)

Numrtordecolonii

Verificaiinbaza Anual numarului obtinut manual Verificati viteza in baza Anual unui tahometru independent calibrat Verificati cu indicator anaerobic Testedeaeromicroflor isanitaie Fiecare utilizare Sptmnal

Centrifugi

Jar anaerob Mediul laboratorului

Reactiviimediidecultur
Trebuieverificatconformitateafiecruilotdereactivi critici,iniialipeparcursulperioadeidevalabilitate,cu tulpinidereferinta(excoloraiaGram) Mediidecultur(preparateinlaborator/gatapreparate)
pH, sterilitate, volum Proprietinutritive,selectiveidifereniale Inregistrricuprivirelaspecificatiilefabricantului:numele mediului, suplimente, termen de valabilitate, conditii de depozitare, certificat de calitate Loturiledemediiartrebuisfieidentificabile Etichetareadecvat

Materiale de referinta si culturi de referinta

Certificatdecalitate:furnizeaztrasabilitatea masuratorilor Utilizarea tulpinilor de referinta Tuplini de referinta recunoacute de catre organismul de acreditare Sub-cultivate o data Stocuri de referinta (congelator: 6 luni)

Repicaje Culturi de lucru: pe panta de geloza simpla, la 4 grd C (1 2 luni) Utilizarea de rutina verificarea puritatii culturii si testari biochimice

!!! Subcultivarea o data !!!

Prelevarea
Conformmanualuluiderecoltaprobelor Transportulidepozitarea:incondiiicare smeninintegritateaeantionului Durataeantionriiartrebuiinregistrat Procedura cu privire la calitatea si cantitateapodusuluipatologicicriteriide respingere a probei Procedurapentrupstrareaieliminarea probelor

Eliminareadeeurilorcontaminate
Conformcureglementrilenaionale
Autoclavarea materialului contaminat: zilnic Predareadeeurilorfirmelorspecializate:max la 48 ore

Asigurareacalitiirezultatelor/controlul calitiiperformantei
Controlul intern al calitii
Proceduriledesfurateinlaboratorinscop diagnostic Utilizareadeeantioanemartor Utilizareadematerialedereferin(tulpinile de referinta) Contraprobe

Asigurareacalitiirezultatelor/controlul calitiiperformanei
Controlul extern al calitii
Programe de control extern

Exprimarea rezultatelor
Rezultat calitativ
absentpentruounitatedefinit

Rezultat cantitativ
maiputindecatlimitadedeteciepentruunitatea definit prezent/absentincantitateasauvolumuldefinit