CONCEITO E CLASSIFICAO

Profa. Dra. Luciana Leomil

TAXONOMIA BACTERIANA

Definio:

a rea da Microbiologia que estuda: Nomenclatura; Classificao; Identificao bacteriana.

NOMENCLATURA

Conj de regras p/ designao correta de uma bact. Cdigo Internacional p/ nomenclatura de bacts estabelece o q deve ser feito p/ descrio de uma nova unidade de classificao

CLASSIFICAO

A classificao organizao das bactrias em grupos tendo por base as semelhanas existentes entre os diferentes grupos.

Na classificao bacteriolgica a Espcie o grupo fundamental:

As espcies esto reunidas em gneros; Os gneros em famlias; As famlias em ordens; As ordens em classes.

CARACTERSTICAS USADAS NA CLASSIFICAO

1) Genotpicas:

Tem o objetivo de determinar o grau de parentesco entre as molculas de DNA das amostras em classificao.

So estudos da proporo citosina-guanina na molcula de DNA e o grau de homologia atravs do teste de hibridizao.

CARACTERSTICAS USADAS NA CLASSIFICAO

2) Fenotpicas: Inclui caractersticas:

Morfolgicas (externa e interna), Colorao; Estruturais; Nutritivas; Metablicas; Sensibilidade a antibiticos.

CLASSIFICAO

Linnaeus (sc. XVIII): reinos Animal e Vegetal Haeckel (1866): introduo do reino Protista Whittaker (1969): 5 reinos, divididos

principalmente pelas caractersticas morfolgicas (eucarioto / procarioto; presena ou ausncia da PC); fisiolgicas (fotossntese, absoro e ingesto)

CLASSIFICAO

Reino Monera: seres procariotos, parede celular peptidoglicano - todas as bactrias; Reino Protista: eucariotos, unicelulares, diverso com relao ao modo de nutrio , sem parede celular (Protozorios, algas vermelhas e marrons, fungos limosos); Reino Plantae: eucariotos, fotossntese, parede cel. celulsica (Plantas e algas filamentosas verdes); Reino Animalia: eucariotos, ingesto, sem parede - Animais; Reino Fungi: eucariotos, absoro, com parede celular de quitina e beta-glucana Fungos verdadeiros

CLASSIFICAO
1) Monera: Procariotos 2) Protista: Eucariotos unicelulares Protozorios (sem parede celular) e Algas (com parede celular) 3) Fungi: Eucariotos aclorofilados 4) Plantae: Vegetais 5) Animalia: Animais

Whittaker (1969)

CLASSIFICAO

O Sistema de Classificao de Whittaker sofreu profundas transformaes com as descobertas de Carl Woese Woese Os procariotos e eucariotos evoluram por vias completamente diferentes a partir de um ancestral

Baseia-se principalmente na comparao da seqncia dos genes ribossomais

CLASSIFICAO
Woese desenvolveu a idia que o gene 16S rRNA - est presente em todos os seres vivos - essencial para a vida - conservado do ponto de vista evolutivo

CLASSIFICAO
Seqncias de rRNA: 3 domnios e 5 reinos Archaea: Procariotos Bacteria: Procariotos Eukarya: Eucariotos

Woese (1977)

CLASSIFICAO

Divises seriam categorias hierrquicas equivalentes aos filos da taxonomia de animais e plantas.

Proteobacteria o maior grupo, com mais

de 1.500 espcies, divididas em 5 classes: alpha, beta, gamma, delta e epsilon.

Eubacteria

Haeckel (1894) Trs reinos

Whittaker (1959) Cinco reinos Monera Protista

Woese (1977) Seis reinos Eubacteria

Woese (1990) Trs domnios Bacteria Archaea

Protista

Archaebacteria Protista Fungi Plantae Animalia

Plantae Animalia

Fungi Plantae Animalia

Eukarya

IMPORTNCIA

Bsica: estudos fisiolgicos, bioqumicos e moleculares (modelo comparativo para seres superiores) => Microbiologia Molecular Aplicada: processos industriais, controle de doenas, de pragas, produo de alimentos, etc.

REAS DE ESTUDO:

Odontologia: Microrg. associados placa dental, crie dental e doenas periodontais. Estudos com abordagem preventiva. Medicina e Enfermagem: Doenas infecciosas e infeces hospitalares. Nutrio: Doenas transmitidas por alimentos, Controle de qualidade de alimentos, Produo de alimentos (queijos, bebidas). Biologia: Aspectos bsicos e biotecnolgicos. Produo de antibiticos, hormnios (insulina, GH), enzimas (lipases, celulases), insumos (cidos, lcool), Despoluio (Herbicidas - Pseudomonas, Petrleo), Biofilme (Acinetobacter), etc. Biotecnologia: Uso de microrg. com finalidades industriais, como agentes de biodegradao, de limpeza ambiental, etc.

INTRODUO

Mikros (pequeno) + Bio (vida) + logos (cincia) Procariotos (bactrias, archaeas) Eucariotos inferiores (algas, protozorios, fungos) Vrus

MORFOLOGIA BACTERIANA

ESTRUTURAS EXTERNAS

MORFOLOGIA

H vrios tamanhos e formas As menores com 0,3 m (ex: Mycoplasma) Nanobactrias ou ultramicrobactrias com 0,2 a 0,05 m de dimetro Maioria com 2 a 6 m de comprimento, por 1 a 2 m de largura Mas temos bacts at 500 ou 800 m, como no caso de Epulopiscium ou Thiomargarita. Em relao s formas: 3 tipos morfolgicos cocos, bacilos e espiralados.

COCOS

So clulas arredondadas, podem se dividir sem um plano de orientao definido, o que leva a um grande nmero de arranjos diferentes. Assim temos os cocos isolados, diplococos (Neisseria, pneumococos), tetracocos, sarcinas (cubos contendo 8 clulas), estreptococos (cocos em cadeia) e estafilococos (cocos formando massas irregulares).

COCOS

MO, mtodo de Gram, cocos-estafilococos

MO, mtodo de Gram, de cocos-estreptococos

ME varredura

ME varredura

BACILOS

Forma de bastonetes Pode ter extremidades retas (Bacillus anthracis), arredondadas (Salmonella, E. coli), ou afiladas (Fusobacterium) Pouca variedade: diplobacilos ou estreptobacilos. em paliada (letras chinesas): gnero

Corynebacterium

pequenas vrgulas (Vibrio cholerae) meia lua (Selenomonas)

BACILOS

ESPIRALADOS

Nomenclatura mto controvertida. 2 grupos: Espiroquetas (espiral flexvel c/ flagelos periplasmticos) Espirilos (espiral incompleta e rgidos) Espiralados so afilados, de difcil observao por microscopia de campo claro, sendo analisados por microscopia de campo escuro, ou de tcnicas de colorao com impregnao por sais de prata.
Treponema pallidum - sfilis

MO fluoresc

ESTRUTURAS EXTERNAS

Parede Celular

Presente nas bactrias, menos micoplasmas e Archaea no a possuem + importantes; esto na poro mais externa Responsvel pela manuteno da forma do microrganismo; atua como barreira de proteo contra determinados agentes fsicos e qumicos externos (choque osmtico) Microrg. Patognicos: antgenos ou molculas envolvidas na patogenicidade 1884, Christian Gram: mtodo de colorao; 2 grupos distintos: Gram positivas e negativas

COMPOSIO DA PC

Peptideoglicano (murena ou mucopeptdeo): exclusivo no domnio Bacteria, responsvel pela

rigidez da parede. sua presena confere > resistncia mtas peptidases. confere rigidez parede, embora exiba certo grau de elasticidade e tambm porosidade.

cidos Teicicos:

+ peptideoglicano, compem a PC das Gram-positivas. Devido sua carga negativa, os cidos teicicos contribuem com o carter negativo da superfcie celular de Gram-positivas. Funo desconhecida, mas pode participar nos processos de passagem de ons pela parede, ou ligarse a prtons, mantendo um pH celular relativamente baixo.

PAREDE CELULAR

GRAM-POSITIVA
cido lipoteicico cido Peptideoglicano-teicoico

Membrana citoplasmtica

Citoplasma

GRAM-NEGATIVA
Porina

Lipopolissacarideo

Membrana Externa

Braun lipoprotein

Membrana Interna (citoplasmtica)

Citoplasma

Gram +: parede espessa (20-80 nm), aspecto homogneo e c/ superfcie mais lisa e homognea. 90% peptideoglicano (20 camadas) e resto de cido teicico. Gram -: parede mais delgada (9-20 nm) e aspecto bastante complexo. 10% peptideoglicano (camada nica ou dupla).

GRAM NEGATIVOS

Membrana Externa (ME):

Presente apenas nas bactrias Gram negativas. a segunda bicamada lipdica; fosfolipdeos, lipoprotenas, protenas e tambm lipopolissacardeos. Maior permeabilidade a pequenas molculas, tais como glicose ou outros monossacardeos. Contato em algumas discretas regies celulares da ME e a MC - stios de adeso ou junes de Bayer Esta juno pode conferir maior rigidez parede celular das Gram negativas, alm de fixar a membrana externa, no deixando-a frouxa.

LPS

A face externa da membrana externa rica em lipopolissacardeos (LPS), inexistentes na membrana citoplasmtica. Estes componentes so tambm denominados de endotoxina, uma vez que provocam febre, choque e eventualmente morte, quando injetados em animais. LPS uma molcula complexa, composta por 3 regies distintas: lipdeo A, polissacardeo central e cadeia polissacardica lateral O, ou Antgeno O.

Colorao de Gram

OUTROS

Cpsula e Glicoclix:
Cpsula - camada externa parede celular, como um material viscoso, de natureza polissacardica e raramente protica. Vantagens s bactrias, pois suas principais funes incluem: ligao s clulas do hospedeiro, fator de virulncia por dificultar a fagocitose e proteo (resistncia ao dessecamento, uma vez que armazena grandes quantidades de gua, fonte de nutrientes e proteo contra a infeco por bacterifagos, ou interao com anticorpos). Exs: S. mutans, S. pneumoniae e B. anthracis

FMBRIAS E PILI

Fmbrias: apndices finos em Gram negativas (3-10 nm),

retos e curtos; visualizadas pela microscopia eletrnica. Muito numerosas (1000 ou mais por clula). So de natureza protica, com subunidades repetitivas de uma protena (pilina) e protenas distintas em sua extremidade ou ao longo da estrutura (adesinas). Pilus F ou fmbria sexual: semelhanas estruturais com as fmbrias; em menor nmero nas clulas (1 a 10). estrutura bastante longa e menos rgida estando envolvido no processo de transferncia de genes denominado conjugao. diferentes fmbrias descritas esto relacionadas adeso, ou virulncia. Gram positivas podem ter estruturas diferentes de fmbrias em sua superfcie - envolvidas na adeso.

ESPOROS

Endsporos (esporos): Estruturas de latncia com

altssima resistncia, a agentes fsicos e qumicos. Gram positivos: Clostridium, Bacillus e Sporosarcina. Resistncia ao calor, s radiaes, aos desinfetantes e desidratao. Ambientes c/ condies inadequadas p/ manter seu material gentico.

Estrutura em ME:

exosporium - fina e delicada, mais externa. capa do esporo - abaixo do exosporium, 1 ou + camadas proticas. crtex - camadas de peptideoglicano ligadas frouxamente entre si, mais interna.

Cpsula

Fimbria sexual (pilus F)

Fmbrias

FLAGELOS

Estruturas longas, delgadas e relativamente rgidas, apresentando cerca de 20 nm de espessura e 15 a 20 m de comprimento Responsveis pela locomoo das bactrias. Podem ser visualizados por meio de coloraes especficas, microscopia de campo escuro, ou por microscopia eletrnica. Podem ser classificadas como: atrquias (sem flagelos), entre outras.

Bactria Monotrquia
(um nico flagelo)

Bactria Anfitrquia

(um flagelo em cada extremidade)

Bactria Lofotrquia

Bactria Lofotrquia

(um tufo de flagelos em uma, ou ambas as extremidades)

Bactria Peritrquia
(apresentando flagelos ao longo de todo o corpo bacteriano)

Bactria Peritrquia

MOVIMENTO

Tipos de movimentao de clulas monotrquias

Esquema ilustrando a movimentao de bactrias peritrquias

Esporos C. tetani, aumento de 3.000 X. Alfred Pasieka, Peter Arnold, Inc.

Figura 4-18. Endsporos. (a) Esporognese, processo de formao de endsporos. (b) Fotografa de ME de um endsporo de Bacillus sp. (c) Esq.: Endsporo central de B. megaterum (40.500x); Centro: endsporos subterminal de B. antrhacis (38.000x); Dir: endsporo terminal, redondo, extremo de uma clula de C. tetani (14.000x aproximadamente).

ESTRUTURAS INTERNAS

Periplasma (gel periplasmtico): um espao

situado entre a ME e MC em Gram negativas. Consistncia de gel, provavelmente devido ao grande nmero de protenas presentes nesta regio. Pode corresponder at 40% do volume total da clula. Em Gram negativas, tem grande importncia, pois vrias enzimas e outras protenas esto localizadas, incluindo hidrolases, protenas de ligao envolvidas no transporte e quimiorreceptores. Bactrias quimiolitotrficas e denitrifcantes apresentam muitas vezes protenas transportadoras de eltrons no periplasma, outras apresentam enzimas envolvidas na sntese de peptideoglicano.

Membrana Citoplasmtica: Estrutura delgada,

composta por uma bicamada fosfolipdica, entremeada de protenas Atua como importante barreira osmtica, altamente seletiva. As membranas de procariotos tm maiores concentraes de protenas que as membranas eucariticas, devido a ausncia de organelas citoplasmticas.

Mesossomos: extensas invaginaes da membrana

citoplasmtica, em forma de vesculas, lamelas ou tbulos. So encontrados com maior abundncia em Gram +, mas podem estar presentes em Gram -. Ainda no se sabe as funes, mas podem: Participar na segregao dos cromossomos durante a diviso, papel respiratrio, papel na esporulao, ou at mesmo como sendo um mero artefato decorrente dos procedimentos utilizados para a preparao microscpica dos espcimes.

Matriz Citoplasmtica: composta por cerca de

70% de gua, alm dos demais compostos celulares, tais como o DNA, incluses e plasmdeos. O citoplasma celular apresenta grande concentrao de ribossomos e protenas.

Nucleide: Os procariotos so organismos haplides,

com 1 nico cromossomo no envolto por carioteca. Algumas podem apresentar 2 ou 3 cromossomos. O cromossomo circular e enovelado, em uma regio celular denominada nucleide. DNA cromossomal uma molcula mto grande (1000 vezes maior que a prpria clula). E. coli - DNA com 4,7 Mb (1 mm de comprimento qdo linearizado). so circulares, contendo muitas vezes genes que conferem caractersticas adaptativas vantajosas ao microrganismo. Seu nmero e dimenses so bastante variveis.

Plasmdeos: molculas de DNA extracromossomal,

Corpsculos de incluso: So grnulos de

armazenagem, de diferentes naturezas Podem ser utilizados como fonte de material de reserva ou energia, muitas vezes insolveis. Estes podem apresentar-se sem qualquer envoltrio ou envoltos por uma nica camada lipdica delgada (diferente de uma membrana), ou por protenas. Dentre os compostos orgnicos armazenados temos o glicognio, o amido e polihidroxibutirato. J dentre os inorgnicos temos polifosfatos (volutina ou metacromticos) e enxofre.

Ribossomos: Estes so extremamente abundantes,

encontrando-se livres no citoplasma ou associados face interna da membrana citoplasmtica. So partculas compostas por protenas e rRNA. Embora sua composio seja similar a dos ribossomos eucariticos, exibem vrias diferenas: apresentam coeficiente de sedimentao 70 S (50 e 30 S). A subunidade 30 S constituda por 21 protenas e por um rRNA 16 S (1542 nt), enquanto a 50 S, apresenta 32 protenas e os rRNAs 23 S (2904 nt) e 5 S (120 nt). J nos eucariotos, na 40 S temos 33 protenas e o 18 S (1874 nt) e na 60 S, 49 protenas e os 28 S, 5.85 S (4718 + 160 nt) e o 5 S (120 nt).

MICROBIOTA NORMAL HUMANA

Conj. microrg. eucariotos e procariotos associados ao nosso organismo ( 100 trilhes) Bem especfica, variando o local, idade e condies fsicas do hospedeiro. Localizados nos locais mais quentes e midos: pele, conjuntiva, mucosa nasal, mucosa oral, intestino grosso, vagina, reto, uretra. Locais livres: fluido cerebrospinal, sangue, bexiga, tero, trompas de falpio, ouvido mdio, seios paranasais e rins. Pode ser dividida em: residente inofensiva e benfica ao hospedeiro. transitria composta por microrg. inofensivos ou potencialmente patognicos. Gram-positivas Lactobacillus, Staphylococcus aureus,

Enterococcus faecalis, Actinomyces, Eubacterium, Streptococcus agalactiae Gam-negativas Bacteriides, Escherichia coli, Enterobacter, Pseudomonas,Neisseria

PELE:

Staphylococcus epidermidis (90%) Staphylococcus aureus (10-40%) Neisserias Propionibacterium acnes Corynebacterium xerosis, Pityrosporum spp (fungo) Candida spp. (levedura)

BOCA:

OLHOS - CONJUNTIVA:
Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus Corynebacterium sp

Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus Streptococcus Corynebacterium sp Lactobacillus Actinomyces Treponema sp Candida sp

NASOFARINGE:

Semelhante a boca, mas pode ter ainda

NARIZ:

Staphylococcus epidermidis Staphylococcus aureus Corynebacterium sp Neisserias

Haemophylus sp Neisserias Streptococcus pneumoniae

BOCA DENTES:

Streptococcus mutans Streptococcus salivarius

INTESTINO:
Duodeno-jejuno (103 bact/ml)

Pseudomonas Candida
Bacterioides coliformes

Staphylococcus sp Lactobacillus sp

Jejuno inferior e leo (106 108bact/ml) Clon e ceco (108 a 1011bact/g fezes)

UROGENITAL:

Streptococcus Peptostreptococcus Peptococcus Staphylococcus Lactobacillus Bifidobacterium Proteus

Corynebactyerium Staphylococcus epidermidis Enterococcus Lactobacillus

Bacterioides Neisserias no patognicas

Ureaplasma urealyticum Gardnerella vaginalis Candida albicans