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Ingenieria Genetica
MEDICINA AGRICULTURA
INDUSTRIA FARMACEUTICA
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SECUENCIA DE ADN
que se desea amplificar y expresar
VECTORES
de clonacion y expresion.
Enzimas de restriccion: Se usan para degradar de forma reproducible la moelcula del ADN es unas secuencias determinadas.
Ligasa de ADN, une los fragmentos al vector de clonacion
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Extremos cohesivos
Extremos romos
Los extremos cohesivos son generados cuando la enzima corta las dos hebras asimtricamente, dejando los extremos de cada hebra, de simple cadena complementarios entre si.
Los extremos romos son generados cuando la enzima corta las dos hebras por si mismo lugar, generando dos extremos de doble cadena
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Extremos cohesivos
Extremos cohesivos Extremos cohesivos Extremos cohesivos Extremos romos Extremos cohesivos
Extremos romos
Extremos cohesivos Extremos cohesivos
ADN LIGASA
Argument B
Argument B
Argument A
Argument A
Vectores
" Vector
Clonacin
"es un agente que puede llevar a un fragmento de ADN en una clula husped
Estos deben permitir que el ADN exgeno se inserte en su interior, pero conservando su capacidad de replicacin normal en el clula anfitriona bacteria o eucariota. Expresin
Vector
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Vectores
Un vector debe presentar las siguientes caractersticas:
Caracteristicas
Contener distintos puntos de ataque a enzimas de restriccin y que sean conocidos. Poder ser incluido en la clula anfitriona con facilidad.
Vectores de clonacin
En ingeniera gentica se entiende por clonacin la obtencin de mltiples copias de un gen especfico o de un fragmento de ADN en el interior de un organismo hospedador.
Plasmidios (Bacterias)
Bacteriofagos (Virus)
Vectores de Clonacin
Los plsmidos son molculas de ADN extra cromosmico circular o lineal que se replican y transcriben independientes del ADN cromosmico bacteriano.
Plasmidios Estn presentes normalmente en bacterias, y en algunas ocasiones en organismos eucariotas como las levaduras. Su tamao vara desde : 1 a 250 kb (kilobase) par de ADN O ARn
pUC18
-
Puede transportar fragmentos de ADN relativamente grandes (de unos 10.000 pares de bases).
Puede producir hasta 500 copias de los fragmentos de ADN insertado por clula.
Marcadores genticos
Origen de replicacin
PLSMIDOS
VIDEO 1
Bacteriofoagos
El tamao de los fagos oscila entre 20 y 200 nm aproximadamente. los fagos estn constituidos por una cubierta proteica o cpside en cuyo interior est contenido su material gentico, que puede ser ADN o ARN de simple o doble cadena, circular o lineal (en el 95% de los fagos conocidos es ADN de doble cadena), de 5.000 a 500.000 pares de bases.
BACTERIOGRAFO
VIDEO 2
El fago o bacterifago lambda que infecta a la E. coli. Sus extremos de su material gentico son cohesivos Los vectores pueden transportar fragmentos de hasta 20 kb ( kilobases).
Celulas Procariotas
Echerichia coli
Bacillus subtilis
Celulas Eucariontes
levadura Saccharomyces cerevisae
Vectores de expresin
El promotor es la secuencia que seala el comienzo de la transcripcin del ADN a ARN, y es por ello el lugar de enlace de la ARN polimerasa
El origen de Replicacion
Marcador
La ARN polimerasa es la enzima encargada de la transcripcin. Realiza una copia de ADN a ARN, de ah que sea dependiente de ADN
Vectores de expresin
El promotor es la secuencia que seala el comienzo de la transcripcin del ADN a ARN, y es por ello el lugar de enlace de la ARN polimerasa
Sitio de clonacion multiple
En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los genes de ciertas protenas humanas en microrganismos adecuados para su fabricacin comercial.
TERAPIA GNICA
VIDEO 3