VECTORMUNE FP - LT

Laringotraquetis Infecciosa
Enfermedad respiratoria aguda, causada por un herpes virus, caracterizada por dificultad respiratoria, estertores, quejido largo, conjuntivitis y lagrimeo.

19/03/2013

Laringotraquetis Infecciosa
LT es una enfermedad viral incluida en la Lista E de la Oficina Internacional de Epizootias (OIE, 1999).

No existe evidencia que LT sea transmitida al ser humano u otros mamferos.

CARACTERSTICAS GENERALES
1. Los herpes virus se caracterizan por su alta sensibilidad a los desinfectantes y por no sobrevivir fuera del hospedador. Estos virus pueden sobrevivir en un individuo y pasar de una generacin a la siguiente porque tienen la capacidad de establecer infecciones latentes. Peridicamente el virus puede reactivarse y ser diseminado.

2.

3.

ETIOLOGIA
FAMILIA: HERPESVIRIDAE SUBFAMILIA: ALPHAHERPESVIRINAE BETAHERPESVIRINAE GAMMAHERPESVIRINAE ALPHAHERPESVIRINAE (LARINGOTRAQUEITIS) CICLO DE REPLICACION CORTO (24 Hr. max.) LATENCIA EN CELULAS NERVIOSAS DE GANGLIOS NO SON ESPECIFICOS EN CUANTO A LAS ESPECIES HOSPEDADORAS EFECTO CITOPATICO: CITOLISIS O FORMA SINCITIOS

Laringotraquetis
La trquea y el ganglio trigmino (TGR) son los principales sitios de latencia de este virus.

Latencia y Persistencia de laringotraquetis aviar en el campo

Latencia. Despus de una infeccin con LTA, el
virus emigra al cerebro (ganglio trigmino) donde permanece latente hasta una reactivacin.

Despus de varios pases ave-ave, se ha observado un incremento de la virulencia del virus vacunal con origen en embrin de pollo (CEO) pero no para virus de origen en cultivo celular (TCO). Guy et al. Avian Dis. 35:348-355. 1991.

Persistencia de Laringotraquetis aviar en el campo

Basado en PCR-RFLP de la glicoproteina E muchas cepas virales involucradas en brotes muestran ser subpoblaciones derivadas de CEO. Garcia. Avian Dis. 45:558-566. 2001. Usando la prueba de PCR-RFLP, se ha identificado una infeccin crnica latente de LT en el 29% de los casos (LT silenciosa). Garca. AAAP. 2001.

Historia.
Fue reportada por vez primera en Rhode Island por May y Tittsler en Octubre de 1923. Su trabajo fue reportado hasta 1925. Beach reporto los primeros brotes en California en 1924. El Herpes virus fue aislado "como agente filtrable" en 1930 por Beaudette. En Mxico los primeros brotes ocurrieron en la zona avcola alrededor del Valle de Mxico: Tulyehualco, Texcoco, Chalco, etc. en 1960.

Situacin de la enfermedad

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Control
Indicaciones
Cooperacin de la industria Confirmar Diagnostico Reporte transparente de los casos + Rpida comunicacin de los casos + Control del movimiento de aves entre granjas Bioseguridad

Vacunacin Tipos de vacunas

OFICINA INTERNACIONAL DE EPIZOOTIAS

Organizacin Mundial de la Salud Animal SECCION 2.7.Captulo 2.7.7.
B. REQUERIMIENTOS PARA VACUNAS Y BIOLGICOS PARA EL DIAGNOSTICO
La LTA es usualmente controlada con vacunas vivas, aunque se han usado vacunas inactivadas por razones de seguridad. Las vacunas de virus vivo son cepas atenuadas o avirulentas por naturaleza. Las vacunas pueden ser administradas por va ocular, aspersin o en el agua de bebida. Aves jvenes pueden requerir la vacunacin en reas endmicas, pero mostrarn reacciones mas severas a la vacuna Se pueden requerir dosis repetidas para adquirir una buena proteccin. El nivel de virulencia del virus vacunal es crtico. Cepas de

baja patogenicidad pueden ser no efectivas, y aquellas altamente virulentas pueden causar una enfermedad severa. La va de administracin por aspersin
requiere de tener cuidado sobre el tamao de la gota y uniformidad de la aplicacin. Puede ser mas efectiva con cepas de baja virulencia, pero puede ser mas daina con cepas de alta virulencia. Actualmente, las vacunas disponibles tienden ha estar

comprometidas entre una prdida de eficacia y poca seguridad.

Por lo tanto puede ser muy difcil descontinuar la vacunacin ya iniciada en un lugar debido a la persistencia de un virus vacunal. En aves vacunadas pueden ocurrir

Infecciones subclnicas simultneas de virus vacunales y virus de campo y pueden causar brotes severos en aves no vacunadas que entren en contacto con estas aves
http://www.oie.int/eng/normes/MMANUAL/A_00093.htm

OFICINA INTERNACIONAL DE EPIZOOTIAS

Organizacin Mundial de la Salud Animal SECCION 2.7.Captulo 2.7.7.

Actualmente, las vacunas disponibles tienden ha estar comprometidas entre una prdida de eficacia y poca seguridad. En aves vacunadas pueden ocurrir Infecciones subclnicas simultneas de virus vacunales y virus de campo y pueden causar brotes severos en aves no vacunadas que entren en contacto con estas aves
http://www.oie.int/eng/normes/MMANUAL/A_00093.htm

Vacunas disponibles
CEO
Aplicacin: gota ocular, aspercin o agua. Tendencia a ser reactiva. Puede aumentar su virulencia bajo condiciones de campo. Fuente del virus de campo?

TCO

VECTORIZADAS

VECTORMUNE Aplicacin: gota FP-LT ocular solamente. HVT-LT No es reactiva. No aumenta su virulencia.

VACUNAS : VIVAS ATENUADAS

ORIGINADAS EN TEJIDO (TCO):
Seguras Eficaces Aplicacin por va ocular No son efectivas en agua o spray Se pueden usar en broiler ( laboriosas), reproductoras y ponedoras Mnima tasa o ausencia tasa de transmisin

VACUNAS : VIVAS ATENUADAS

EMBRION DE POLLO (CEO)
Efectivas para controlar brotes Revierten a la virulencia Producen infecciones latentes Altamente transmisibles Usadas en broiler ( 12-14 das) Se pueden usar va agua de bebida

VECTORMUNE FP+LT
LT (Donante) Virus que dona un gen, el cual produce un antgeno protector. FP (Vector) Virus atenuado de FP conteniendo una region no esencial de ADN, en la cual puede hacerse la insercin de genes.
DNA
ADN

Expresa antgenos claves en la proteccin contra LT

ADN DNA

VIRUS DE LA LARINGOTRAQUETIS

VIRUS DE VIRUELA AVIAR

VECTORMUNE FP-LT

Construccin Recombinante Insercin de genes en el genoma del virus de viruela aviar

LTV Virus patrn (Cepa de campo)

2 genes de LTV

Recombinante rFPV/LT
FPV Virus patrn (Virus vacunal)

FPV Recombinante con insercin de genes de LTV

UL

IRS

US

TRS

Genoma LTV
gene gB
gene UL-32

Genoma de FPV vacunal

gene gB gene UL-32

Tipos de expresin de la respuesta inmune

Eleccin del gene y del vector con base en la respuesta inmune deseada.
Humoral/Anticuerpos (Clulas B)
ENC = Clulas B IA= Clulas B

Respuesta celular ( Clulas T)

VA = Clulas T LT = Clulas T

Pre-requisitos Fara Una Exitosa Vacunacin

No exposicionjprevia a FP
Desafio de campo Vacuna

Edad Recomendada
Approved Label: 8 weeks old to 4 weeks previous to egg production Out of label: 4 Wks old caged birds commercial layers One-day old Broilers SQ Hatchery or In-ovo (18 days)

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Handling the birds:

Wing web vaccination Correct exposure

Respuesta inmune
Esta respuesta inmunitaria es sistmica, mediada por clulas, protege la piel, orofaringe, conjuntiva y traquea contra la viruela tanto hmeda como seca

Respuesta inmune
Este mismo mecanismo es el responsable de la proteccin contra la laringotraquetis al utilizar la recombinante FP- LT

Respuesta inmune - VA Sistmica/Celular

Prendimientos [llamadas tambin viruelas] son reacciones locales mediadas por clulas Indican que el virus de la viruela aviar ha entrado en el ave Al replicarse inicia y estimula una respuesta generalizada mediada por clulas la cual proveer proteccin contra viruela aviar y laringotraquetis aviar.

Vacunas por Vectores Puntos a favor y en contra

Puntos a favor
Inocuidad No hay reversin a la virulencia No hay diseminacin del virus No hay reaccin vacunal Se replican en el husped (bajas dosis) Protenas son procesadas en el husped, por lo tanto las protenas estn en la forma correcta para ser protectoras Eficacia y proteccin contra los agentes en la vacuna Adecuada duracin de la inmunidad

Puntos en contra
Anticuerpos maternos a los genes insertados o a los vectores pueden inhibir el crecimiento del vector Pruebas de inocuidad toman mas tiempo (USDA) Pruebas disponibles actualmente para evaluar la respuesta inmune pueden no detectar anticuerpos a la vacuna

Porqu Vacunas de Ingeniera Gentica?

Inocuidad
No hay infeccin directa del virus de ILT ni ocurren portadores crnicos del virus No hay reversin a la virulencia No hay transmisin de microorganismos virulentos (horizontal o vertical) Reduccin de reacciones a la vacunacin

Eficacia de Vacunas Multivalentes Insercin de mltiples genes de varios patgenos en una sola vacuna Diferente respuesta inmunolgica, la cual es dependiente de cada tipo de vacuna

INOCUIDAD DE LA VACUNA RECOMBINANTE

Inocuidad
Inocua en aves No reversin a la forma virulenta despus de realizar pasajes en aves
No se disemina a aves no vacunadas que co-habitan con las aves vacunadas Inocua a 100X dosis (USDA requiere 10X) La vacuna vectorizada tiene el mismo tropismo que el virus patrn de viruela del cual se origin

Inocua en otras especies de aves y mamferos a 100X dosis (USDA requiere 10X)

V.- Tcnicas de la Vacunacin, su evaluacin y proteccin

Mtodo de aplicacin y evaluacin

Ponedoras y Reproductoras va intra-alar. (Recomendacin de estile con 4 agujas) Pollo de engorde va in ovo o subcutnea al da de edad. Evaluacin prendimiento de 7 das de edad (Granuloma en el pliegue alar)

Consideraciones generales para vacunacin contra viruela

Vacunas suaves de viruela administradas al da de edad interfieren con la inmunidad de vacunaciones de viruela administradas posteriormente Para asegurar la inmunidad contra LT, la vacuna recombinante de (rFPV/LT) debe ser la primera vacuna contra viruela que reciban esas aves.

Consideraciones generales para vacunacin contra viruela

Los prendimientos sirven para corroborar la correcta aplicacin de la vacuna Dosis nica. (2 o 3 vacunas en una sola aplicacin).

VACUNACION

Cuidados en la aplicacin
Uso adecuado de las lancetas

Aplicacin correcta en el sitio apropiado

Ajuste del volumen de Vacuna + diluyente, en el caso de usar doble lanceta.

Cuidados en la aplicacin
Debe realizarse un vacunacin de Calidad, no
de cantidad.

El objetivo es vacunar correctamente el mayor

numero de aves.

Lectura de reaccin (Area de inflamacin y

formacin de granuloma)

TECNICA DE VACUNACION
Almacenamiento adecuado de la vacuna Seleccin de aplicador membrana alar:
Sistema abierto: Individual / Doble / Cuatro lanzetas Sistema cerrado: Jeringa (en evaluacin)
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TECNICA DE VACUNACION
Reconstitucin:
Especficas diluyente: 10 ml y 5 ml (0,01 ml / dosis) Adicin de otras vacunas: AE & CAV

Posicion de la lanzeta:
Centro de la membrana alar Evitar los grandes vasos / hueso / msculo
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TECNICA DE VACUNACION

Nmero de aves vacunadas: 800 a 1,100 aves por viales de 10 ml Reduccin de la eficacia ms de 1.200 aves por vial Uso de plantilla de evaluacin para la calificar la administracin de la vacuna en la membrana del ala.
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Puncion con 1 Lanzeta

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Vacunacion Vectormune FP+LT con doble aplicador (4 punzones)

Para un mejor prendimiento de la vacuna se puede realizar la aplicacin de la misma usando dos lancetas. Para ello debemos pegar dos lancetas y proceder a realizar el trabajo de aplicacin de la vacuna al ala.

Se debe tambin aumentar la cantidad de diluyente para tener un mejor prendimiento de la vacuna.
Para un frasco de 1000 dosis, normalmente se usa 10 ml de diluyente, pero al realizar la aplicacin con dos lancetas se debe incrementar la cantidad de diluyente en un 50%, es decir se debe colocar 15 ml para vacunar 1000 aves. A veces puede sobrar una cantidad de diluyente en el frasco ( alrededor de 0,5 ml), por lo que se recomienda que el trabajo de vacunacin sea realizado por gente con experiencia.

Puncion con 2 Lanzetas

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48

Puncin con doble lanzeta

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Lectura de la Reaccion
Evaluacin de ndulos y areas de inflamacin

Evaluacin
Evaluacin 6 das post-Vacunacin, en el area de aplicacin: 0=Sin nodulo detectable 1=Nodulo muy pequeo (<2 mm) 2=Nodulo pequeo (2-5 mm) 3=Nodulo normal (5-10 mm) 4=(Nodulo grande (>10 mm) Perdido o no vacunado=Sin nodulo % de evaluacion de 90%=Aceptable % de evaluacion de 95%=Deseable.

Mal prendimiento

Fowl Pox Good Take

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BIOMUNE Co.

 Evaluacin e interpretacin:
El tamao mximo de la protuberancia aparece entre los 5-7 das ( 6 das )

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HISTORIA LTI EN ECUADOR

PRIMER MUESTREO
Fecha: Diciembre 2008 Aves: Broilers Zonas: Noroccidente de Pichincha y Guayas

SEGUNDO MUESTREO Fecha: MAYO 2010 Aves: Broilers Zonas: Pichincha, St, Dg, Guayas

TERCER MUESTREO Fecha: Octubre 2010 Aves: Broilers Zonas: Pichincha

CUARTO MUESTREO Fecha: MARZO 2011 Aves: PONEDORA Zonas: PICHINCHA

Conclusiones
VACUNA VECTORIZADA No revierte a virulenta Inocua Evita la diseminacin y latencia en el ave del virus de campo y vacunal Adecuada duracin de inmunidad

Conclusiones
Inmunidad es demostrada por mas de 37 semanas post-vacunacin (Modelo USDA). Proteccin por mas de 60 semanas. Provee proteccin y previene la transmisin del virus de LT de campo y vacunales. Una dosis proteje contra laringotraqueitis y Desafi Virus LT Viruela aviar.
X

Vacunada con Recombinante y desafiada con LT

Aves Contacto - no vacunadas

Conclusiones
Es imprescindible un nivel estricto de BIOSEGURIDAD. Hay muchos cuadros clnicos semejantes a LTI Es necesario un diagnstico por histopatologa, AV, PCR o RRT-PCR para confirmar LTI.

Conclusiones
La respuesta inmediata a un diagnstico de LTI varia segn factores como:

Severidad del cuadro clnico, mortalidad, lesiones macro y microscpicas Vida productiva de las aves. Densidad del rea avcola Vientos dominantes etc.
No siempre se debe de responder con vacunacin al primer brote.

Las vacunas tradicionales no son suficientes para prevenir y erradicar LTI.

Conclusiones
CAUSAS DE RESULTADOS NO ESPERADOS

Mala tcnica de vacunacin Aves no vacunadas Sobre exposicin de virus de campo Descontinuar la vacunacin recombinate en forma indebida y anticipada.

MUCHAS GRACIAS