Professional Documents
Culture Documents
: L U C I A N A C S S I A
REVISO
PROTENAS PLASMTICAS
Albumina: A
Protenas sricas
PROTENAS PLASMTICAS
A maioria das protenas efetoras da imunidade com funo de anticorpo pertencem a frao -globulina, sendo por isso referida como gamaglobulina. Entretanto, um grupo menor dessas protenas efetoras encontram-se entre a frao -globulina e uma quantidade ainda menor na frao -2 globulina.
IMUNOGLOBULINAS
Imunoglobulinas so protenas com funo de anticorpo e diversas atividades biolgicas. Uma das maiores caractersticas das imunoglobulinas que se combinam com a substncia que induziu a sua formao.
ANTICORPOS
Anticorpos so protenas que se ligam de forma especfica a molculas conhecidas como antgenos. So sintetizadas exclusivamente pelos linfcitos B. Tambm esto presentes na superfcie destes linfcitos.
ANTICORPOS
Estrutura geral:
ANTICORPOS
Funes fundamentais: Ligar a antgenos estranhos encontrados pelo hospedeiro; Mediar as funes efetoras para neutralizar ou eliminar invasores.
ANTICORPOS
Qual a diferena entre imunoglobulinas e anticorpo?
ANTICORPOS
Cada molcula de anticorpo possui uma cadeia varivel nica, o partopo, que permite com que ela se ligue especificamente a um eptopo do antgeno.
ANTGENOS
Tem capacidade de provocar uma resposta imunolgica, normalmente substncias estranhas ao organismo, em geral exgenas; Eptopos ou determinantes antignicos so a parte ativa da molcula ou microorganismo; Quanto ao nmero de eptopos, pode ser multivalente, multideterminado ou univalente e unideterminado.
Ao direta dos anticorpos sobre os agentes invasores: aglutinao, precipitao, neutralizao, lise (Ativao do Complemento).
M TO D O S DIAGNSTICOS
MTODOS DIAGNSTICOS
Nos ensaios imunolgicos a principal amostra biolgica ainda o soro, mas pode-se utilizar outras amostras como: Sangue completo; Plasma; Soro; Outros.
MTODOS DIAGNSTICOS
Todas as tcnicas utilizadas em imunologia visam determinar antgeno (Ag) e anticorpo (Ac) ou o imunocomplexo formado por sua interao. As reaes Ag-Ac dependem de vrios fatores, entre eles destacam-se a fora de interaes no-covalentes e o elevado grau de complementaridade entre eles;
MTODOS DIAGNSTICOS
Afinidade: fora da interao entre um nico ptopo e o anticorpo. Ligao fraca: rpida dissociao; Ligao forte: tempo maior de ligao. Especificidade: caracterstica que indica que o teste em questo identificar somente o antgeno ou o anticorpo desejado.
MTODOS DIAGNSTICOS
Sensibilidade: diz respeito a quantidade mnima de antgeno para reao com anticorpo, depende da afinidade e da distribuio dos eptopos no antgeno.
Ensaio Reaes de precipitao em fludos Sensibilidade (g anticorpo/mL) 20-200
Reao de precipitao em gis Imunodifuso radial Imunodifuso dupla imunoeletroforese 10-50 20-200 20-200 Reaes de aglutinao Direta Aglutinao passiva 0,3 0,006-0,06
Radioimunoensaio (RIA)
Enzimaimunoensaio (Elisa) Imunofluorescncia
0.0006-0,006
0,0001-0,01 1,0
MTODOS DIAGNSTICOS
A maior parte das preparaes de anticorpos
policlonal.
MTODOS DIAGNSTICOS
Entre os mtodos para anlise imunolgica destacam-se as reaes de precipitao, de aglutinao, imunodifuso, radioimunoensaios, reaes imunoenzimticas, imunofluorescncia.
MTODOS DIAGNSTICOS
Importncia da pesquisa de anticorpos no diagnstico imunolgico: Elucidar processos patolgicos; Diferenciar a fase da doena; Selecionar doadores de sangue; Selecionar doadores e receptores de rgos; Fazer triagens para certas doenas; Avaliar a imunidade naturalmente adquirida ou artificialmente induzida
ANLISE SOROLGICA
Existem muitas doenas cujo diagnstico no feito pela presena do "micro-organismo" em si, mas pela pesquisa da presena ou ausncia das clulas que o corpo produz, responsveis pelo combate e reconhecimento dessa doena.
ANLISE SOROLGICA
Qualitativa Resultado: Positivo e Negativo; reagente e noreagente.
ANLISE SOROLGICA
Semi-quantitativa: depende da titulao ou da absorbncia. Faz-se diluies do soro do paciente em salina (NaCl a 0,9%) 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 e mais se necessrio.
Quantitativa: fornece resultados precisos, com valores absolutos, expressos em massa por volume (por exemplo, mg/ml; mg/dL) ou em unidades internacionais tambm por volume (por exemplo, UI/ml, g/mL).
ANLISE SOROLGICA
Quanto MAIOR a sensibilidade, MENOR a ocorrncia de resultados falsos-negativos, MAIOR a possibilidade de deteco precoce de doenas.
ALTA SENSIBILIDADE OBRIGATRIA EM TESTES DE TRIAGEM
Quanto MAIOR a especificidade, MENOR a ocorrncia de resultados falsos-positivos, MENOR a ocorrncia de reaes cruzadas.
OBRIGATRIA ALTA ESPECIFICIDADE EM TESTES CONFIRMATRIOS
M E TO D O L O G I A S PA R A O E S T U D O DA IMUNIDADE HUMORAL
TESTES SOROLGICOS
Tambm chamados de imunoensaios, so tcnicas utilizadas para a deteco e quantificao de antgenos e anticorpos e outras substancias que desempenham o papel de antgeno (drogas, hormnios, cidos nuclicos, citocinas, receptores de clulas, etc.)
TESTES SOROLGICOS
Precipitao: imunodifuso radial simples e dupla; Aglutinao: hemaglutinao, PCR, ASLO, ABO, FR; Teste de imunofluorescncia; Tcnicas imunoenzimticas: Elisa; Testes rpidos: Dengue, HIV, -HCG; Tcnicas empregadas na automao: nefelometria.
TESTES SOROLGICOS
Tcnicas imunoenzimticas: Elisa. Vantagens: Mtodo altamente sensvel e especfico, com alto grau de confiabilidade como ensaio quantitativo, custo baixo a mdio. Desvantagens: pequenas variaes de pipetagem e tempo de incubao podem ocasionar resultados alterados.
TESTES SOROLGICOS
Elisa indireto
TESTES SOROLGICOS
Aglutinao: PCR, ASLO, ABO, FR. Vantagens: resultado rpido, fcil manipulao. Desvantagens: baixa especificidade.
TESTES SOROLGICOS
Precipitao: imunodifuso radial simples e dupla;
Vantagens: Mtodo simples, de fcil execuo, baixo custo, rpido; Desvantagens: Baixa sensibilidade e especificidade, devido a mal armazenamento das hemcias, pode-se obter resultados falso-negativos.
TESTES SOROLGICOS
Teste de imunofluorescncia;
Vantagens: Alta especificidade e sensibilidade; possibilidade de deteco de protenas intracelulares e de sua localizao, bem como do trfico intracelular. Desvantagens: variao individual na leitura de resultados de IFA; alto custo de microscpio de fluorescncia;
TESTES SOROLGICOS
Tcnicas empregadas na automao: nefelometria.
Vantagens: rpida, precisa, fcil de realizar, totalmente automatizado; Desvantagens: alto custo, reaes inespecficas devido a soros lipmicos e hemolisados, necessidade de vrias diluies para antgenos concentrados.
SOROLOGIAS IGM/IGG
IgM no reagente + IgG reagente = IMUNE
Ou seja, o paciente j entrou em contato com o patgeno pesquisado, e j criou defesa contra ele.
Nvel elevado pode no significar doena alrgica; IgE pode estar elevada em outras condies, como: parasitoses intestinais;
Vantagens: uso de anti-histamnicos, pacientes com problemas dermatolgicos, risco de reaes sistmicas.
CONTINUA...