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Disciplina: Engenharia Bioqumica II A Programa de Aperfeioamento de Ensino (PAE): Livia Carneiro Prof Arnaldo Mrcio
Etapa do processo
Operaes unitrias
Filtrao convencional Centrifugao Filtrao tangencial (membranas) Floculao H omegeneizao Ultra-som Moagem em moinho de bolas Rompimento qumico ou enzimtico Precipitao
Princpio
Tamanho de partculas Tamanho e densidade de partculas Tamanho de partculas Hidrofobicidade de partculas Cisalhamento Cisalhamento Cisalhamento Hidrlise, solubilizao ou desidratao de molculas que compem a parede ou a membrana celular Solubilidade Massa molar e raio hidrodinmico de molculas
Clarificao
Rompimento de clulas
U Itrafiltrao (membranas)
Extrao em sistemas de duas fases lquidas Solubilidade, massa molar Cromatografia de troca-inica Cromatografia de afinidade (biolgica ou qumica) Cromatografia de imunoafinidade
Tipo e densidade de carga na superfcie da biomolcula Stios especficos da superfcie de uma protena (adsoro) Stios especficos da superfcie de uma protena (adsoro antgeno/anticorpo) Hidrofobicidade
Massa molar Massa molar e caractersticas para adsoro ou stios especficos da superfcie de uma protena Solubilidade e caractersticas de equilbrio lquido-slido Caractersticas de equilbrio lquido-slido Caractersticas de equilbrio lquido-slido
Tratamentos finais
Rompimento Celular
Rompimento Celular Clarificao
Suspenso Celular
Produtos Intracelulares
Produtos intracelulares tornam o processo de purificao de biomolculas mais difcil
Parede Celular
Lize enzimtica
velocidades de alimentao da ordem de 180 a 280 m/s e concentraes celulares de 450 a 750 g/L (massa mida).
Presso de operao; Velocidade de alimentao; Temperatura; Estado fisiolgico do microrganismo; Condies de cultivo; Tipo de clula e sua concentrao.
dimento)
Existe um modelo matemtico para avaliar o rompimento, que neste caso de 1a ordem em relao ao nmero de passagens e de potncia em relao presso de trabalho:
log onde:
Rm = (Rm R)
k . N . Pa
Rm a concentrao mxima de protena disponvel para ser liberada (g/L) R a concentrao de proteina liberada (g/L) k a constante de velocidade que depende de T, X e do tipo de clula N o nmero de passagens P a presso a constante que depende do tipo de microrganismo e das condies de crescimento (varia de 0,86 a 2,9) (tabela)
cmara de triturao (vertical ou horizontal) provida de um eixo com discos de agitao e preenchida com esferas de vidro.
O rompimento ocorre devido fora de cisalhamento
Mecnico Ultra-som
O rompimento ocorre quando ondas sonoras
Mecnico - Ultrassom
Rompimentos Mecnicos
Desvantagens:
As elevadas foras de cisalhamento provocadas pelos
intracelular, incluindo cidos nuclicos, organelas e fragmentos celulares liberado junto com a molcula-alvo, sendo que o homogeneizado celular pode conter grande quantidade de contaminantes e elevada viscosidade.