Universidad de Crdoba Facultad ciencias de la salud Bacteriologa

Bacterias planctnicas, de libre flotacin 1%

Bacterias biofilm, en colonias de microorganismos. 99%

bacterias dos formas:

Koch bacterilogos y clnicos estudio de los grmenes planctnicos, libremente suspendidos, y descritos en base a sus caractersticas de desarrollo en medios de cultivos adecuados limitando la comprensin respecto a las interacciones entre bacterias y huspedes

Biofilms las bacterias perciben una superficie se adhieren elaboran seales qumicas: coordinar diferenciacin y formacin de estructura (cubierta polisacrida protectora.)

Los biofilms son ubicuos en la Naturaleza

Los biofilms antigua estrategia de supervivencia procaritica:

proteccin frente a fluctuaciones medioambientales

Registros en fsiles revelan que procariotas han estado viviendo en biofilms por ms de tres mil millones de aos

En 2002, Donlan "una comunidad microbiana, caracterizada por clulas que estn adheridas irreversiblemente a un substrato o interfase, o unas con otras, encerradas en una matriz de sustancias polimricas extracelulares que ellas han producido, y exhiben un fenotipo alterado en relacin con la tasa de crecimiento y trascripcin gnica"

Van Leeuwenhoek (microscopios de luz) siglo XVII placa dental

En los 70 Characklis Lgamo industrial

Costerton y col comunidades bacterianas en matriz de glicoprotenas unidas a superficies en contacto con el agua.

Microscopio electrnico ste permiti la fotomicroscopa de alta resolucin.

Microscopa electrnica de barrido tincin especfica, se logr demostrar que el material de la matriz que engloba a las bacterias en estos biofilms era polisacrido

grandes colonias de bacterias ssiles

una matriz polimrica extracelular o glicoclix

Los biofilms estn estructurados principalmente por:

Es muy hidratada debido a que incorpora grandes cantidades de agua dentro de su estructura (97%).

Est formada por exopolisacridos (EPS) componente fundamental producidos por los propios microorganismos integrantes.

En menor cantidad otras macromolculas: protenas, cidos nucleicos, y productos de la lisis bacteriana.

El conjunto de polisacridos, cidos nucleicos y protenas se conocen bajo el nombre de substancias polimricas extracelulares (SPE).

Tambin puede hallarse materiales no bacterianos: cristales de sales minerales, partculas de corrosin y/o sedimento, o componentes sanguneos.

un incremento en la concentracin de nutrientes est correlacionado con un aumento en el nmero de clulas bacterianas adheridas

una disponibilidad excesiva de carbono y/o limitacin de nitrgeno, potasio o fosfato promueve la sntesis de EPS

La produccin de EPS es influida por la calidad nutricional del medioambiente

La arquitectura de la matriz no es slida.

Las bacterias biofilm viven en torreones celulares que se extienden en forma tridimensional desde la superficie a la cual estn adheridas. Estos torreones compuestos por microcolonias de diferentes clulas bacterianas, tanto aerbicas como anaerbicas, englobadas por exopolisacridos.

El substrato (adecuado para la adsorcin reversible y, finalmente, la adhesin irreversible de la bacteria a la superficie) percibir una superficie forman unin activa va apndices (fimbrias, flagelos o pili).

La motilidad, otorgada por flagelos alcanzar la superficie de adhesin no parece ser un requisito esencial (Gram positivas inmviles) forman biofilm.

La adhesin de bacterias a una superficie ocurrir ms fcilmente en aqullas ms speras, ms hidrofbicas, y recubiertas por "films condicionantes (polmeros)

De crecimiento comienza a dividirse las clulas hijas se extienden alrededor del sitio de unin, formando una microcolonia comienzan a elaborar un exopolisacrido comienza a desplegarse en una formacin tridimensional, generando estructuras similares a setas. La composicin del exopolisacrido es diferente para cada bacteria: alginato, en P aeruginosa; celulosa, en S typhimurium; exopolisacrido rico en glucosa y galactosa en V. cholerae; poli-N-acetil-glucosamina, en S aureus, etc. (varios)

Madurez algunas clulas se liberan de la matriz para colonizar nuevas superficies El desprendimiento puede ser resultado de fuerzas externas al biofilm o de procesos activos inducidos por ste. Los tres principales mecanismos para generar el desprendimiento seran:

erosin o deslizamiento: remocin continua de pequeas partes del biofilm.

separacin: remocin rpida y masiva

abrasin: liberacin por colisin de partculas del lquido circundante con el biofilm.

1, adhesion inicial 2, adhesion irreversible 3, maduracin I 4, maduration II 5, dispercin. Pseudomonas aeruginosa biofilm.

Flujo de lquido: es el principal factor que afecta tanto al desplazamiento de los microorganismos mviles como a los inmviles. Motilidad de los microorganismos

Factores especie-especficos: hidrofobicidad (la carga de superficie tambin influye en la adhesin), temperatura, pH, salinidad y concentracin de oxgeno
Limitacin de nutrientes: necesarios para crecer y dividirse.

Microambientes del biofilm

Comensalismo y protocooperacion: son las interrelaciones mas comunes entre los componentes microbianos.

Comensalismo: como el consumo de oxgeno de un microorganismo aerbico facilita el crecimiento de microorganismos anaerobios o microaerfilos.

Protocooperacin: colaboracin en la formacin o en el consumo de los productos.

Intercambio de informacin gentica -Permite la transferencia de plsmidos o fragmentos cromosomales. -Entre los genes transferidos se encuentran genes de resistencia a antibiticos y enzimas de degradacin de materia orgnica. -Considerado como una estrategia eficaz de adaptacin. -Una frecuencia ms alta de transferencia horizontal de genes respecto a cultivos planctnicos

En su forma mas simple, el quorum sensing, es un mecanismo de comunicacin entre clulas. Las bacterias son capaces de saber cuantas son, mediante la produccin y deteccin de la acumulacin de una molcula de sealizacin que exportan en su entorno

La unin de los microorganismos a una superficie y ulterior formacin de un biofilm necesita que las bacterias se cercioren que han efectuado contacto. Para lograrlo requieren de seales qumicas coordinadas que les permitan comunicarse entre ellas.

El desarrollo de interacciones clula-a-clula estrecha proximidad

El proceso quorum-sensing funciona debido a que cada bacteria que se une a una superficie produce una molcula seal "yo estoy aqu Su objetivo es coordinar determinados comportamientos o acciones entre microorganismos del mismo gnero, de acuerdo a su nmero.

Los grmenes que utilizan quorum sensing elaboran y secretan molculas sealizadoras (auto-inductores) Las principales molculas empleadas para comunicarse con las dems bacterias son: Acil-homoserina-lactonas predominan en bacterias Gram negativas. Oligopptidos modificados prevalecen en grmenes Gram positivos. Las bacterias tambin poseen un receptor que puede detectar especficamente el auto-inductor respectivo.

Los primeros m.o especies de Myxobacterias y Streptomyces.

El ejemplo ms conocido la regulacin de la produccin de luz en Vibrio fischeri (una bacteria bioluminiscente que vive como un simbionte en el rgano generador de luz del calamar hawaiano)

Para que una molcula sea clasificada como una seal de quorum sensing, hay una serie de criterios importantes que se deben cumplir:

1. La produccin de la seal de quorum sensing debe llevarse a cabo durante etapas especificas de crecimiento, o en respuesta particular a cambios ambientales.

2. La seal de quorum sensing debe poder acumularse en el ambiente extracelular y ser reconocida por las bacterias receptoras.

3. La acumulacin de la seal de quorum sensing a un umbral crtico de concentracin, debe estimular una respuesta.

4. La respuesta celular debe extenderse mas all de los cambios fisiolgicos necesarios para metabolizar o desintoxicar la molcula.

La habilidad de las Procariotas de adoptar diferentes estructuras de Bioflms dependiendo del medio ambiente se debe a su capacidad de regulacin gentica, selectividad y de localizacin de patrones de crecimiento determinados por la cantidad de nutrientes.

Formando filamentos en cintas alongados en serpentinas

Formando mezcla compleja de algas, cianobacterias, microorganismos hetertrofos y detritos (Pheriphyton)

Formando un tapete microbiano (Estromatolitos)

Catteres urinarios, endovenosos y arteriales, prtesis de vlvulas de corazn, marcapasos, prtesis ortopdicas, tubos endotraqueales, entre otros, pueden portar Biofilms provocando infecciones.

Los microorganismos frecuentemente asociados con las infecciones de dispositivos mdicos son el Staphyloccus seguido de Pseudomonas aeruginosa.

Es una infeccin del revestimiento de las cmaras y vlvulas del corazn, causada por bacterias, hongos u otras sustancias infecciosas y el consecutivo depsito de plaquetas y fibrina; all se implantan luego los microbios aglutinados por los anticuerpos.
Las endocarditis relacionadas con el implante usualmente surgen en la unin de los tejidos naturales y la prtesis, originadas en su mayora, por estreptococos y estafilococos

Las clulas endoteliales secretan fibronectina, que es utilizada como receptor por adhesinas especificas de la superficie de las bacterias que se multiplican en la lesin y forman el Biofilm.

Infeccin o enfermedad

Especie bacteriana formadora de biofilm

Caries dental Periodonditis

Otitis media Infecciones del msculo-esqueleto Fascitis necrotizante Osteomelitis Prostatitis bacteriana Endocarditis de la vlvula nativa Neumona por fibrosis qustica Meloidosis Infecciones nosocomiales: Neumona (cuidados intensivos) Suturas Orificios de salida Vas arteriovenosas

Cocos gram-positivos acidognicos (ej. Streptococcus) Bacterias anaerbicas orales gram-negativas

Cepas no tipables de Haemophilus influenzae Cocos gram-positivos (ej. Staphylococcus) Streptococos Grupo A Varias especies bacterianas y fngicas, generalmente mezcladas Escherichia coli y otras bacterias gram-negativas Streptococcus del grupo viridans Pseudomonas aeruginosa y Burkholderia cepacia Pseudomonas pseudomallei Bacilos gram-negativos Staphylococcus epidermidis y Staphylococcus aureus S. epidermidis y S. aureus S. epidermidis y S. aureus

Infeccin o enfermedad Bucles esclerales Lentes de contacto Cistitis por catteres urinarios Peritonitis por dilisis peritoneal DIU Tubos endotraqueales Catteres hickman

Especie bacteriana formadora de biofilm Cocos gram-positivos P. aeruginosa y cocos gram-positivos E. coli y otros bacilos gram-negativos Una variedad de bacterias y hongos Actinomyces israelli y muchos otros microorganismos Una variedad de bacterias y hongos S. epidermidis y Candida albicans

Catteres centrales venosos

Vlvulas mecnicas del corazn Injertos vasculares Bloqueo del conducto biliar Dispositivos ortopdicos Prtesis del pene

S. epidermidis y otros
S. epidermidis y S. aureus Cocos gram-positivos Una variedad de bacterias entricas y hongos S. epidermidis y S. aureus S. epidermidis y S. aureus

 Bacillus. Enterobacteriaceae Pseudomonas aeruginosa y pseudomallei Streptococcus Bacterias anaerbicas orales Gram-negativas Cepas no tipables de Haemophilus influenzae Escherichia coli

Burkholderia cepacia Actinomyces israelli Candida albicans Vibrio Proteus Acynetobacter Aspergillus