MEMBRANAS BIOLOGICAS Y TRANSPORTE

Las membranas son elementos esenciales en la estructura y funcin de todas las clulas
procariticas y eucariticas animales y vegetales

Bsicamente las membranas definen compartimientos delimitando exterior e interior, y establecen una barrera de permeabilidad cuyo origen radica en su estructura lipdica, que siendo hidrofbica en su centro, impide el paso de molculas cargadas elctricamente

Sin embargo su funcin no termina ah, estn presentes en ella una gran variedad de protenas, poros y sistemas de transporte que determinan la naturaleza de todas las comunicaciones entre interior y exterior

Que puede ser en la forma de pasaje de iones y molculas o de informacin transmitida a travs de cambios conformacionales inducidos en las protenas de la membrana

La membrana plasmtica de una clula viviente, adems de definir sus lmites, presenta una morfologa que en muchos casos est de acuerdo con el rol fisiolgico que desempea

Una clula puede presentar una membrana plasmtica con reas morfolgica y funcionalmente diferentes:

Por ejemplo, el dominio apical de la membrana plasmtica de una clula epitelial intestinal se caracteriza por tener en su superficie estructuras cilndricas llamadas microvellosidades que aumentan el rea de la superficie celular y por consiguiente la absorcin

FASE ACUOSA

FASE ACUOSA

El concepto actual que se tiene de las membranas biolgicas est basado en el modelo del mosaico propuesto por Lenard y Singer en 1966 y por Wallach y Zahler en el mismo ao

FASE ACUOSA

FASE ACUOSA

El modelo supone la existencia de protenas globulares embebidas en la bicapa lipdica

FASE ACUOSA

FASE ACUOSA

Las porciones salientes de las protenas poseen una secuencia primaria rica en aminocidos polares que interactan con la fase acuosa en la membrana intacta

FASE ACUOSA

FASE ACUOSA

Mientras que las regiones internas en la bicapa tienen un carcter apolar

A comienzos de la dcada de los aos 7O haba evidencia directa que algunas protenas podan moverse en el plano de la membrana.

Una importante contribucin a este concepto surgi de los experimentos de Frye y Edidin (197O) quienes investigaban las propiedades de membrana durante el proceso de fusin celular

En estos experimentos, se induca la fusin de clulas humanas y de ratn, en presencia de virus Sendai como agente fusionante

Y posteriormente se estudiaba la distribucin de los componentes antignicos de las membranas

Mediante el uso de anticuerpos marcados con fluorescena y rodamina dirigidos contra los componentes antignicos de la membrana de las clulas humanas y de ratn respectivamente

Poco despus de iniciada la fusin y obtenido el hbrido, se observaba que los anticuerpos marcados, unidos a las protenas de la membrana, estaban separados en dos mitades, sin embargo al incubar por 4O minutos a 37oC la clula hbrida presentaba los anticuerpos distribuidos homogneamente en toda la superficie de la membrana.

Inhibidores de sntesis de protenas, y de la formacin de adenosn trifosfato (ATP) agregados al medio antes o durante la fusin no tenan efecto en la distribucin de las protenas, pero al bajar la temperatura a 15oC el proceso se detena bruscamente.

Frye y Edidin explicaron estas observaciones sugiriendo que los componentes se entremezclaban debido a la difusin de ellos en el plano de la membrana ms bien que a una remocin y posterior reinsercin o a sntesis de nuevas copias de protenas en la membrana

Composicin y arquitectura de las membranas

Una aproximacin para entender como funcionan las membranas es estudiar su composicin, es decir determinar los componentes comunes a todas las membranas

protenas

Las membranas biolgicas estn compuestas

lpidos carbohidratos

En proporciones relativamente variables

iones agua

Las proporciones relativas de lpidos y protenas varan con el tipo de membrana, lo que refleja la diversidad de sus funciones Por ejemplo, algunas neuronas tienen una cubierta de mielina que es una extensin de la membrana plasmtica la cual acta como una aislante elctrico La cubierta de mielina consiste fundamentalmente de lpidos La razn en protenas lpido para la mielina en nervios perifricos es de 0,2/1

Mientras que la membrana interna de la mitocondria, el sitio de muchos procesos catalizados por enzimas, la razn protena lpido es 3,2/1 La mayora de las membranas biolgicas presentan variaciones de protena lpido entre estos dos extremos

Los carbohidratos generalmente constituyen el 1-10 % del total del peso seco y se encuentran unidos covalentemente a lpidos y protenas El agua es un importante constituyente de las membranas, las molculas de agua unida a la superficie de la membrana estabilizan la estructura bilipdica

LOS CONSTITUYENTES MOLECULARES DE LAS MEMBRANAS

Lpidos estructurales de las membranas biolgicas

Los lpidos biolgicos consiste en un diverso grupo de compuestos cuya caracterstica principal es su insolubilidad en agua Las funciones de los lpidos biolgicos es tan variada como lo es su qumica Las grasas y los aceites son las principales formas de almacenar energa en la mayora de los organismos Los fosfolpidos y esteroles son los elementos estructurales de las membranas biolgicas

Las grasas y aceites que se usan como formas de almacenar energa son derivados de los cidos grasos

Los cidos grasos son cidos carboxlicos con cadenas hidrocarbonadas de 4 a 36 tomos de carbono, que pueden ser saturadas o insaturadas

Las propiedades fsicas de los cidos grasos, y de los compuestos que los contienen dependen del largo de la cadena y de y el grado de insaturacin

Los triglicridos se componen de tres cidos grasos unidos por una unin ster a una molcula de glicerol

La caracterstica arquitectnica de las membranas biolgicas es una doble capa de lpidos que actan como una barrera al paso de iones y molculas polares

Los lpidos de membrana son anfipticos: un extremo de la molcula es hidrofbica y el otro extremo es hidroflica.

Las interacciones hidroflicas e hidrofbicas dirigen la formacin de la bicapa lipdica

Los fosfolpidos son virtualmente insolubles en agua Cuando se mezclan con agua forman espontneamente agregados microscpicos que los separa del rededor acuoso

Cmo y por qu ocurre la formacin de una bicapa lipdica?

La clave es el agua

El agua es la sustancia ms abundante en los sistemas vivientes, el 70% o ms del peso de la mayora de los organismos es agua

Las uniones puente hidrgeno entre las molculas de agua proveen las fuerzas cohesivas que hacen al agua lquida, a temperatura ambiente, y favorecen el extremo ordenamiento en el agua como cristal cuando se encuentra en la forma de hielo Las molculas polares se disuelven fcilmente en el agua porque pueden reemplazar las interacciones agua-agua con interacciones soluto-agua energticamente ms favorables En contraste, las molculas apolares interfieren con las interacciones agua-agua pero no son capaces de formar interacciones agua-soluto, en consecuencia, las molculas apolares son poco o insolubles en agua y tienden a formar agregados

Son idnticas las dos monocapas de fosfolpidos?

NO

La asociacin estable entre lpidos y protenas es esencial para la integridad y funcin de las membranas biolgicas Los enfoques tericos son importantes para entender por qu los lpidos se agregan para formar micelas o bicapas y que fuerzas subyacen a las interacciones lpido-protena

Varios tipos de interacciones y fuerzas son importantes en la estructura de las membranas

Protenas

Las protenas confieren a las membranas biolgicas su funcionalidad, son en muchos casos mediadoras de la transferencia de informacin desde el espacio extracelular (por ejemplo: receptores), del transporte de iones y molculas (por ejemplo: canales, bombas) y de actividad metablica (por ejemplo: produccin de energa en membranas de mitocondria y cloroplastos

Los mayores avances en el entendimiento de estas funciones son relativamente recientes, la causa es que por muchos aos se enfoc la atencin en los componentes lipdicos de las membranas biolgicas, fundamentalmente debido a la relativa facilidad en la extraccin, purificacin y anlisis de ellos y a la posibilidad de hacer membranas artificiales y estudiar sus propiedades. El estudio de las protenas de membranas biolgicas ha sido ms difcil, debido en muchos casos a la ausencia de tcnicas adecuadas para solubilizarlas

Integrales
Las protenas de membrana se pueden dividir operacionalmente en dos grupos

Perifricas

Las protenas integrales de membrana se encuentran firmemente asociadas con la membrana

Slo se pueden remover con agentes que interfieren con las interacciones hidrofbicas

Las protenas perifricas se asocian con la membrana a travs de interacciones electrostticas y puentes hidrgeno con los dominios hidroflicos de las protenas integrales y con las cabezas polares de los lpidos de membrana Pueden liberarse fcilmente con tratamientos suaves que interfieren con las interacciones electrostticas, tales como agentes quelantes, cambios en el pH

Dinmica de las membranas biolgicas

La flexibilidad de la bicapa lipdica depende de la temperatura y del tipo de fosfolpido del cual est hecha la bicapa

Movimientos de lpidos y protenas en membranas biolgicas

DIFUSIN, PERMEABILIDAD Y TRANSPORTE

Sin embargo, para una sustancia polar, o con carga elctrica, o un in, para que ingrese a su interior requiere de una protena de membrana para facilitar el transporte de esa sustancia

DIFUSION SIMPLE

LA LEY DE FICK

C V = -DA X

APLICACIN DE LA LEY DE FICK AL PASO DE UN SOLUTO A TRAVS DE LA BICAPA

A (cm2) V: mole/s C1
C1: concentracin de soluto en la zona de mayor concentracin C1m: concentracin de soluto en la zona de mayor concentracin, dentro de la membrana

C1m

C2: concentracin de soluto en la zona de menor concentracin

C2m: concentracin de soluto en la zona de menor concentracin, dentro de la membrana

C2m

C2 SOLUCION

SOLUCION

V: mole/s C1 C1m
Experimentalmente solo se conoce la concentracin de soluto en la solucin

C2m SOLUCION

C2 SOLUCION

V: mole/s C1 C1m DmA V=Cm d DmA (C2m C1m) V=d DmA (C1m C2m) V= d C2m SOLUCION C2 SOLUCION

Cm aceite
agua Cagua

MEDICION EXPERIMENTAL DE LA PERMEABILIDAD