UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE GROHMAN

VIERNES CLINICO MOLECULAR - 2009

Disfunción Endotelial

Dr. Héctor Apaza Coronel

MD Cardiólogo - EsSalud
 I. Endotelio
Pared Arterial Normal

Nature. 1993; 362: 801-809

 I. Endotelio

• Órgano eminentemente vascular,

es el más grande del organismo,

• Extensión: 1570 m2 (6 canchas de

tenis)

• Un trillón (1 x 10 12
) de células
endoteliales

• Peso 1.8 kgs

 I. Endotelio
• Las células endoteliales (CE), ejercen un papel dual como sensor y transmisor
de señales.
• Las CE son capaces de detectar cambios a nivel vascular tanto de tipo físico (pe
estrés mecánico producido por el flujo sanguíneo, la presión arterial o la
distensión de la pared), como de tipo químico (pe liberación de sustancias por
parte de las células sanguíneas o de los tejidos).

ESTIMULO MECANICO ESTIMULO HORMONAL

•Presión •Sustancias vasoactivas
•Shear Stress

RESPUESTA ENDOTELIAL
 I. Endotelio
Respuesta Endotelial
Moléculas vasoactivas Fuerzas físicas
•Trombina, plasmina Células circulantes •Flujo sanguíneo
•Metabolitos del AA •Plaquetas •Presión arterial
•BK, 5HT, ADP •Leucocitos •Distensión

Adhesión de leucocitos Coagulación

•NO, PG I2, TX A2, O2.OH
•MCP-1, IL-1ß, TGF- ß
Barrera selectiva Agregación de plaquetas
•PDGF, FGF, VEGF
•VCAM-1, ICAM-1, E y P Selectina
Transducción de
fuerzas mecánicas •t-PA, PAI-1, Trombomodulina Fibrinolisis

Tono vascular Proliferación CML

 I. Endotelio
Funciones
• Antitrombótica:
– Inhibe adhesión plaquetaria
– Inhibe coagulación
– Regula fibrinolisis
– Mantiene tono vascular
• Controla actividad de células musculares
lisas (CML):
– Tono vascular
– Antiproliferativa
• Permeabilidad vascular: Modula tránsito de
macromoléculas (lipoproteinas)
• Antiadhesiva: Modula adhesión de leucocitos
(monocitos, linfocitos) a la pared arterial
Luscher T. N Engl J Med 1994
 I. Endotelio
Sustancias Vasoactivas

ENDOTELIO

VASOCONSTRICCION VASODILATACION

ENDOTELINA – 1 PROSTACICLINA
ANGIOTENSINA II ÓXIDO NÍTRICO
PROSTAGLANDINAS OTRAS SUSTANCIAS
ESPECIES REACTIVAS DE O2 SIMILARES A FRDE.

TONO VASCULAR
 I. Endotelio
Respuesta Endotelial
Sustancias Vasoactivas
Vasoconstrictores intrínsecos Vasodilatadores intrínsecos
•Endotelina-1 (ET-1) •Oxido Nítrico (NO)
•Otros factores derivadosa del endotelio: •Prostaciclina (PG I2)
Tromboxano A2, Prostaglandinas D2, E2, •Factor Hiperpolarizante Derivado del Endotelio
H2, Especies Reactivas de O2 (ROS) •Otros: H2O2, Factor Activador de Plaquetas (PAF),
Factor de Crecimiento Transformante β (TGF- β ),
Vasoconstrictores extrínsecos Citoquinas (IL-1, Il-6, Il-8)
•Angiotensina II (AGT-II) •Fuerzas de rozamiento vascular (shear stress)
• Adrenalina y noradrenalina •Sistema dopaminérgico
• Vasopresina Vasodilatadores extrínsecos
• Neurotransmisores no colinérgicos no •Bradikinina, acetilcolina
adrenérgicos •Adrenomedulina, Péptido natriurético tipo C
Moduladores Inflamatorios
•ICAM-1 •NO
•VCAM-1 •Factor Nuclear – Kappa Beta (NF - κβ )
•E-Selectina
 I. Endotelio
Respuesta Endotelial
Moduladores de Hemostasia
Antitrombóticos Protrombóticos
•NO •ET-1
•PG I2 •Radicales de O2
•Activador del plasminógeno •PAI-1
•Proteína C •TX A2
•Inhibidor del FT •Factor tisular
•WFv •Fibrinógeno
Moduladores del Crecimiento (Mitogénesis / Angiogénesis)
Promotores Inhibidores
•Endotelina 1 •Oxido Nítrico
•Angiotensina II •Prostaciclina
•Radicales superoxido ∀β -TGF
•PDGF •Heparina sulfato
•FGF •Peptido natriuretico tipo C
•ILGF
 I. Endotelio
Producción del Oxido Nítrico
(1)

(2)
NO Sintetasa (eNOS)

(4) (5)
(3) OONO

Los estímulos fisiológicos para la producción basal de NO en cualquier vaso sanguíneo son
el flujo pulsátil de los vasos y la fuerza de rozamiento vascular (shear stress)
 I. Endotelio
Oxido Nítrico y e NOS: Activación dependiente del calcio

eNOS
 I. Endotelio
Oxido Nítrico y e NOS: Activación dependiente del calcio
 I. Endotelio
Oxido Nítrico y e NOS
Activación de la eNOS vía independiente del calcio

IRS-1: Sustrato del receptor

de insulina
PI 3-kinasa: Fosfatidil
inositol 3-kinasa
MAP-kinasa: proteina
kinasa asociada al AMP

Mecanismo por el cual la insulina activa por medio de la PI 3-kinasa la estimulación de la eNOS
 II. Disfunción Endotelial

Desequilibrio en la biodisponibilidad de sustancias

activas de origen endotelial
Predispone a la inflamación, vasoconstricción e
incremento de permeabilidad vascular
 II. Disfunción Endotelial

Alteración de la Permeabilidad Vascular

• Unión intercelular a través de sistema microvesicular:

caveolas y glucocálix (rico en glucosaminoglicanos
sulfatados): Absorción Selectiva

• Pérdida de la capacidad de controlar el tráfico permite

el depósito de moléculas circulantes: fibrinógeno, LDL
 II. Disfunción Endotelial
Alteración de la Permeabilidad Vascular

• Mecanismos: contracción celular mediado por calcio y

desorganización del citoesqueleto celular

• Consecuencias:
– Ingreso de lípidos
– Retención de LDL en subendotelio, por interacción con
proteoglicanos de la matriz: ↓ heparán sulfato (síntesis ↓ ,
degradación ↑ )
– Modificación LDL: oxidación, proteolisis, agregación
 II. Disfunción Endotelial
Alteración de la Permeabilidad Vascular

• Oxidación inicial de LDL genera LDL mínimamente

oxidado, el cual activa al NF-KB

• Quién oxida al LDL?: 12/15 lipoxigenasa y mieloperoxidasa

• Oxidación adicional de LDL genera LDL-Ox que interactua

con la matriz → retención y agregación lipídica
Reclutamiento del Monocito
 II. Disfunción Endotelial
Inflamación

• LDL mínimamente oxidado, activa NF-KB

• NF-KB es un factor de transcripción , responsable de la

expresión coordinada de genes a través del enlace
específico a promotores de genes y sitios reforzadores

• TNF- α e IL-1 activan NF-KB

Vías de activación
NF-kB
 II. Disfunción Endotelial
Inflamación

• Adherencia del Monocito:

– Selectinas (enlaces de baja afinidad)

• P-Selectina: rodamiento leucocitario fase temprano
• E-Selectina: migración transendotelial y rodamiento tardío

– Inmunoglobulinas (unión firme monocito – CE)

• ICAM-1, unión a LFA-1 y Mac-1 (ligandos)
• VCAM-1, unión a VLA-4
 II. Disfunción Endotelial
Inflamación

• Transmigración del Monocito:

– Chemokinas (enlaces de baja afinidad)
• MCP-1: potente quimioatrayente del monocito, a través de unión a CCR-2
• Reclutamiento de monocitos

• Diferenciación Monocito – Macrófago

– M-CSF: unión a través de receptores: scavenger A (internaliza
colesterol) y CD36
– Macrófago produce TNF-α e IL-1, que activan + NF-KB
– Especies reactivas : > oxidación del LDL
Interacciones Celulares
Formación de Célula Espumosa
 II. Disfunción Endotelial
Disregulación del Tono Vascular

• Oxido Nítrico disminuido mediado por LDL:

– Alteración de la producción: ↓ actividad neta de eNOS
↑ fracción de eNOS unida a caveolina-1 (insensible a la regulación
calcio - calmodulina)
↑ degradación de NO
↑ (-) competitiva de NO mediado por ADMA (dimetilarginina
Asimétrica)
Producción NO
 II. Disfunción Endotelial
Disregulación del Tono Vascular
Dimetilarginina Asimétrica (ADMA)

SHEAR STRESS
Hypertension 42: 985–990, 2003

Proteinas metiltransferasas de arginina

HIPERCOLESTEROLEMIA
Atherosclerosis 161: 375–380, 2002

Argininas metiladas
PMTA-1

ADMA ↑
HTA en ANCIANOS
Circulation 107: 1891–1895, 2003
 II. Disfunción Endotelial

Disregulación del Tono Vascular

• Especies Reactivas de O2 (ROS)

– Atenúan NO, y forman Peroxinitrito:
• Oxidación de LDL
• Degradación del cofactor de eNOS: Tetrahidropterina
(BH4) → desacople de eNOS
• FP15: descompone peroxinitrito, y previene dfx endotelial

Mol Med 2002;8: 571–580

Balance Trombótico
 II. Disfunción Endotelial
Hemodinámica Local

• Regiones vasculares con flujo laminar: protegidas

• Regiones con flujo lento u oscilatorio (bifurcaciones,

curvaturas): Stress mecánico: Modificación en el patrón génico

• Los cambios se deben a elementos de respuesta al flujo (SSRE)

• El flujo modula activación de múltiples factores de transcripción:

NK-KB, Egr-1, c-jun, c-fos
 II. Disfunción Endotelial

Angiotensina II

• ↑ ROS por estimular NADPH oxidasa

• Promueve inflamación vascular

• Administración de IECA en humanos HTA

Circulation 101: 1653–1659, 2000

J Hypertens 20: 71–78, 2002
J Cardiovasc Pharmacol 27[Suppl 2]: S13–S18, 1996
 II. Disfunción Endotelial

Hiperhomocisteinemia
• Derivado de desmetilación de metionina
• Elevaciones leves a moderadas por
– Deficiente ingesta de ac fólico
– Uso de metorexate, carbamazepina
– IRC, hipotiroidismo
• Suplemento de ac fólico ↓ niveles de homocisteína y mejoró DE en niños con IRC
Circulation 105: 1810–1815, 2002
• Reduce biodisponibilidad de NO por exceso oxidativo
• Acumulación de ADMA por inhibición de DDAH
• Pctes con IRC muestran niveles ↑ de homocisteina
 II. Disfunción Endotelial
Diabetes
• Señalización alterada
– Via para fosforilación y activación de eNOS es infrarregulada
– Vía para actividad mitogénica y proliferativa no afectada

• Hiperglicemia → productos finales de glicación avanzada (AGE):

– Atenuan NO y producen DE
– Induce ROS
– Promueve inflamación vascular: expresión ↑
• IL-6
• VCAM-1
• MCP-1
– Depuración de AGE retardada

• Hiperglicemia aguda reduce NO y atenúa vasodilatación dependiente del endotelio

 II. Disfunción Endotelial
Efectos
• DE es evento temprano en la ateroesclerosis

∀ ↓ biodisponibilidad de NO, regulación creciente de:

– VCAM-1 vía NF-KB

• ROS, PCR, CD4O ligando y receptor de LDL-oxidado similar a lecitina

(LOX-1) regulan crecientemente la expresión de moléculas de adhesión

• VCAM-1, ICAM-1 y E-Selectina: rol en el inicio del proceso inflamatorio

 II. Disfunción Endotelial
• Marcadores de DE e Inflamación
– Formas solubles:
• ICAM-1
• VCAM-1
• E-Selectina
– Nuevos marcadores
• LOX-1
• CD40-Ligando
• PCR
• ADMA
– Otros
• Microalbuminuria
• ET-1
Célula Endotelial
Respuesta
Interacción Leucocitaria
Ateroinflamación
Historia